宏基因组技术在筛选未培养微生物中新型酶的研究进展 被引量：3

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作者 姜海琴 范彩云 +1 位作者 李吕木 程建波 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第18期3673-3677,共5页

介绍了宏基因组文库的构建及酶基因的筛选方法,对瘤胃、土壤及其他环境中微生物宏基因组文库的构建和酶基因的筛选研究进行了综述,同时就宏基因组技术在未培养微生物研究中的应用进行了展望。

关键词 宏基因组 新型酶 未培养微生物

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863课题“深海微生物活性物质的挖掘及其利用技术”2013年度进展

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作者 鞠建华 周雪峰 +2 位作者 朱伟明 漆淑华 徐刚明 《科技资讯》 2016年第9期171-172,共2页

2013年为863课题"深海微生物活性物质的挖掘及其利用技术"实施的第二年。该年度该课题进展顺利,完成了预期的研究计划。取得的研究进展主要分为以下5个方面:(1)在深海沉积环境样品中分离、纯化、保藏869株菌株,确定了729个菌... 2013年为863课题"深海微生物活性物质的挖掘及其利用技术"实施的第二年。该年度该课题进展顺利,完成了预期的研究计划。取得的研究进展主要分为以下5个方面:(1)在深海沉积环境样品中分离、纯化、保藏869株菌株,确定了729个菌株的系统进化地位,在深海海水样品中分离了海洋微生物237株,完成了其中168株的细菌测序工作;其中发现一个潜在的新属级类群。(2)对21株深海微生物进行次生代谢产物的分离和纯化,从中分离鉴定代谢产物186个,其中新结构化合物71个;其中1个对称的环四肽类新骨架化合物;发现具有较好药用活性的化合物25个;对Staurosporine的衍生物HDZ-115和Xanthocillin X进行深入的药理药效研究,确定为下一步成药性评价的先导化合物。(3)从深海来源微生物中发现对植物病原真菌具有良好抗性的脂肽类活性物质;筛选得到一系列抗污损活性的活性物质,其中1个单体化合物在海洋挂板实验中较好抗海洋污损生物活性,具有进一步开发价值。(4)完成了1株深海海洋放线菌SCSIO ZH66的全基因组扫描测序,克隆鉴定了Grincamycin,Lobophorin的生物合成基因簇,完成了Grincamycin,marinacarboline,lobophorin的生物合成途径。(5)从深海微生物中分离纯化两种具有重要经济价值的新蛋白酶,分离得到到新型高温α淀粉酶和生淀粉酶基因,成功实现异源表达,并对酶学性质进行了研究。 展开更多

关键词 深海微生物 活性物质 药用活性 生态效应 生物合成 新型酶

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新型酶洗灌流装置的研制与应用 被引量：1

3

作者 沈冬萍 林幼兰 +4 位作者 于美华 陈凤莉 黄斌斌 郭晓惠 李仙丽 《医疗卫生装备》 CAS 2019年第12期106-108,共3页

目的:研制一种新型的酶洗灌流装置,以解决内镜清洗消毒困难的问题。方法:该装置由多酶原液桶盖、Y型三通接头、单向止回阀、树脂医疗快速接头(SPC-06PHB、SPC-06SH)及医用内镜清洗直通接头组成。选择合适管径的硅胶管与Y型三通管连接形... 目的:研制一种新型的酶洗灌流装置,以解决内镜清洗消毒困难的问题。方法:该装置由多酶原液桶盖、Y型三通接头、单向止回阀、树脂医疗快速接头(SPC-06PHB、SPC-06SH)及医用内镜清洗直通接头组成。选择合适管径的硅胶管与Y型三通管连接形成2个通路,利用止回阀的单向导通性,一路设置为出液口,另一路设为进液口,分别安装于内镜清洗槽与原装酶洗桶内,再用注射器抽吸配比所需的酶液量,推注注射器,将酶液释放至清洗槽。结果:该装置缩短了初洗时间,防止了酶液的逆流,减少了多酶清洗剂的浪费,避免了酶液的污染,提高了工作人员的工作效率和满意度,达到了内镜的清洗消毒效果。结论:新型酶洗灌流装置取材方便、制作简单、成本低、操作简单,具有较好的清洗消毒效果,值得临床推广应用。 展开更多

关键词 新型酶洗灌流装置 内镜 清洗消毒 多酶清洗剂

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酶底物法快速测定食品中金黄色葡萄球菌 被引量：1

4

作者 贾景建 张新伟 马蒙 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第20期5360-5364,共5页

目的建立酶底物法快速测定食品中金黄色葡萄球菌含量的分析方法。方法参照GB 478910-2016将食品进行前处理后,放入加有新型酶底物的金黄色葡萄球菌培养基中,将培养基置入恒温箱或食源性致病菌快速检测仪中,进行8 h培养。当食品中含有金... 目的建立酶底物法快速测定食品中金黄色葡萄球菌含量的分析方法。方法参照GB 478910-2016将食品进行前处理后,放入加有新型酶底物的金黄色葡萄球菌培养基中,将培养基置入恒温箱或食源性致病菌快速检测仪中,进行8 h培养。当食品中含有金黄色葡萄球菌,会与新型酶底物反应过程中释放出绿色物质或者荧光基团。结果在市场上购买50份样品使用新型培养基进行培养检测,并与GB478910-2016检测结果对比。所使用的新型培养基与国标方法得出的检测结果符合率为99.4%,结果基本一致。结论新型酶底物培养基与食源性致病菌同步快速检测仪配合使用结果准确,并且检测时间相比传统方法也大幅度的缩短,为食品卫生质量监管提供技术手段。 展开更多

关键词 快速检测 金黄色葡萄球菌 新型酶底物

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优质食品酶的催化机制及在高端配料创制方面的应用基础

5

作者 李兆丰 陈福生 +3 位作者 江正强 王永华 路福平 黄和 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第5期75-88,共14页

优质食品酶是食品生物加工的核心,是食品制造产业的“芯片”。我国食品酶领域的应用基础研究薄弱,70%以上的酶制剂市场被国际公司垄断,优质食品酶长期受制于人,难以支撑目前食品行业提质升级的发展需求。在此背景下,本文聚焦新型食品酶... 优质食品酶是食品生物加工的核心,是食品制造产业的“芯片”。我国食品酶领域的应用基础研究薄弱,70%以上的酶制剂市场被国际公司垄断,优质食品酶长期受制于人,难以支撑目前食品行业提质升级的发展需求。在此背景下,本文聚焦新型食品酶高效筛选和分泌表达的生物学基础,高端高值食品酶的催化机制,食品酶催化性能改造的结构基础,食品酶创制高端配料的内在规律及作用机制等关键科学问题,综述优质食品酶的催化机制及在高端配料创制方面的应用基础,旨在为食品高端配料的酶法创制提供理论和实践指导。 展开更多

关键词 新型食品酶 催化机制 结构基础 高端配料

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疾病治疗及药物制备用酶的研究进展 被引量：2

6

作者 周蕊 刘欣 +2 位作者 曾波 江伟 张光亚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期2256-2271,共16页

生物技术的发展及对疾病机理的深入研究,使酶逐步应用于疾病治疗。与此同时,以酶作为催化剂制备非天然有机化合物具有反应条件温和、催化效率高、特异性高、选择性强、副反应少等优点。因而,酶也在药物制造方面展现了巨大潜力。此外,基... 生物技术的发展及对疾病机理的深入研究,使酶逐步应用于疾病治疗。与此同时,以酶作为催化剂制备非天然有机化合物具有反应条件温和、催化效率高、特异性高、选择性强、副反应少等优点。因而,酶也在药物制造方面展现了巨大潜力。此外,基因工程、酶化学修饰和固定化技术的应用进一步改善了酶的功能。基于此,文中结合本课题组的相关研究,综述了近年来酶作为药物用于疾病治疗及作为催化剂用于药物制造的研究进展,并对其存在的问题提出了相应的解决办法,最后对酶在医药领域的应用前景进行了展望。 展开更多

关键词 生物催化 药物酶法制备 新型治疗酶 医药用酶

原文传递

新型双相酶水解体系制备宝藿苷Ⅰ 被引量：3

7

作者 汪燕 张小溪 +6 位作者 邵建兵 王海艳 周怡莹 杨鸿 杨欢 沈玉萍 贾晓斌 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2775-2778,共4页

目的构建新型双相酶水解体系制备宝藿苷Ⅰ。方法单因素试验优化缓冲液pH值、酶与底物质量比、酶解时间、反应温度,并在淫羊藿苷处理量、酶重复使用、操作方便性方面上与传统酶水解法进行比较。结果在醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 4. 0)和乙酸... 目的构建新型双相酶水解体系制备宝藿苷Ⅰ。方法单因素试验优化缓冲液pH值、酶与底物质量比、酶解时间、反应温度,并在淫羊藿苷处理量、酶重复使用、操作方便性方面上与传统酶水解法进行比较。结果在醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 4. 0)和乙酸乙酯构建的双相酶水解体系中,当β-葡萄糖苷酶与淫羊藿苷的质量比为1∶1时,于55℃下反应6 h后水解率达到100%,双相水解法可将淫羊藿苷处理量提高到60 mg/mL,是传统酶水解法的2倍,并且制备步骤得以简化。此外,双相酶水解体系中酶液使用2次后,淫羊藿苷转化率仍能达到98. 58%。结论该方法可高效、便捷地水解淫羊藿苷以获取宝藿苷Ⅰ,并实现了酶的重复利用。 展开更多

关键词 宝藿苷Ⅰ 新型双相酶水解体系 制备

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新型混合酶分离海萝原生质体的研究 被引量：1

8

作者 陈菊琦 《集美大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 1995年第2期1-7,共7页

本文报道使用新型混合酶，首次成功分离海萝原生质体的实验结果与培养结果。海萝（Ｇｌｏｉｌｐｅｌｔｉｓｆｕｒｃａｔａ）酶解２．５～３ｈ，获得大量成活原生质体。并观察到原生质体的自融。原生质体产率为３×１０￣６／克鲜藻... 本文报道使用新型混合酶，首次成功分离海萝原生质体的实验结果与培养结果。海萝（Ｇｌｏｉｌｐｅｌｔｉｓｆｕｒｃａｔａ）酶解２．５～３ｈ，获得大量成活原生质体。并观察到原生质体的自融。原生质体产率为３×１０￣６／克鲜藻；成活率为６５％。原生质浓厚的细胞经培养，可形成多细胞团或愈伤组织状细胞团，这与小石花菜细胞的培养结果，基本类同。新型混合酶价格低廉、制作简便；在使用上，还有促进细胞分裂、细胞团较长时间存活的优点。新型混合酶的研制和应用，对促进海藻生物工程的研究和海藻资源的开发，对推进２１世纪海藻高新技术及其产业的发展，将有重大的现实意义和战略性意义。 展开更多

关键词 新型混合酶 海萝 原生质体 自融 海萝胶

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具有全新机理的DNA旋转酶抑制剂的筛选及抑菌活性 被引量：2

9

作者 黄振桂 林克江 +3 位作者 尹鸿萍 叶波平 翁幸鐾 尤启冬 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1887-1893,共7页

利用具有新机制的抗耐药菌DNA旋转酶抑制剂GSK299423与DNA旋转酶的晶体复合物(PDB code:2XCS)构建基于配体-受体复合物的药效团模型,诱骗集(Decoy set)验证结果表明该药效团模型具有较强的活性识别能力.将药效团模型与分子对接相结合用... 利用具有新机制的抗耐药菌DNA旋转酶抑制剂GSK299423与DNA旋转酶的晶体复合物(PDB code:2XCS)构建基于配体-受体复合物的药效团模型,诱骗集(Decoy set)验证结果表明该药效团模型具有较强的活性识别能力.将药效团模型与分子对接相结合用于筛选化合物库,通过抑菌活性测定,获得了具有抗多药耐药菌活性的DNA旋转酶抑制剂LTH02. 展开更多

关键词 新型DNA旋转酶抑制剂 药效团 虚拟筛选 抗耐药菌

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新型金属蛋白酶ADAMTS家族在缺血性脑血管疾病中的诊断价值 被引量：1

10

作者 张霞军 袁红萍 谭俊华 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第4期559-563,共5页

目的探究含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)家族在缺血性脑血管疾病(ICVD)中的诊断价值。方法选取本院ICVD患者104例为观察组[急性脑梗死(ACI)70例、短暂性脑缺血发作(TIA)34例],同期健康体检者52例为对照组。比... 目的探究含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)家族在缺血性脑血管疾病(ICVD)中的诊断价值。方法选取本院ICVD患者104例为观察组[急性脑梗死(ACI)70例、短暂性脑缺血发作(TIA)34例],同期健康体检者52例为对照组。比较两组血清ADAMTS家族指标(ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13)水平,对比观察组ACI与TIA患者ADAMTS家族指标水平,以及与美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分关系,分析其对ACI、TIA的鉴别诊断价值。结果观察组血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12水平高于对照组,与NIHSS评分呈正相关(r=0.872、0.870、0.754),ADAMTS-13水平低于对照组与NIHSS评分呈负相关(r=-0.807),差异有统计学意义(P<0.05);血清ADAMTS家族各指标对ICVD的诊断AUC分别为0.797、0.785、0.829、0.732,联合诊断敏感度为86.54%、特异度为80.77%;观察组ACI与TIA患者血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清ADAMTS家族各指标联合鉴别诊断ACI、TIA的AUC最大为0.901,高于任一指标单独诊断。结论新型金属蛋白酶ADAMTS家族可作为ICVD高危人群筛选标志,对TIA、ACI鉴别诊断有较高应用价值。 展开更多

关键词 新型金属蛋白酶 急性脑梗死 短暂性脑缺血发作

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重组大肠杆菌中NTA的发酵与表达优化

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作者 顾建雅 夏杰 +1 位作者 陆兵 徐殿胜 《宁波大学学报（理工版）》 CAS 2009年第3期343-347,共5页

研究诱导剂、诱导剂浓度、诱导时间、锌离子以及在发酵培养基中组合添加乳糖对提高重组新型溶栓酶外源蛋白的表达效率的作用，结果表明：IPTG诱导效果优于乳糖，IPTG诱导浓度选择1．5mmol·L^-1，诱导时机选择菌体OD600接近4．0时... 研究诱导剂、诱导剂浓度、诱导时间、锌离子以及在发酵培养基中组合添加乳糖对提高重组新型溶栓酶外源蛋白的表达效率的作用，结果表明：IPTG诱导效果优于乳糖，IPTG诱导浓度选择1．5mmol·L^-1，诱导时机选择菌体OD600接近4．0时，诱导后的最佳培养时间为6h，加入1．0g．L^-1的ZnCl2后，外源蛋白表达可提高40％，发酵结果提高29．8％．在培养基中组合加入微量的乳糖，可以使外源蛋白的表达效率提高10％~15％． 展开更多

关键词 重组新型溶栓酶 发酵 表达 优化

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