目的比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异。方法应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱。GeneSpringGX10.0.2数据分析挑选差异表达基因。应用软件对筛选...目的比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异。方法应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱。GeneSpringGX10.0.2数据分析挑选差异表达基因。应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的潜在靶基因进行预测并验证。结果与亲本细胞相比,KYSE.150R中上调超过2倍的miRNA有10个,为hsa-miR-1539、hsa—miR-1237、hsa—miR-92b等;表达下调超过2倍的有miRNA有25个,为hsa—miR-185、hsa—miR-18b、hsa—miR-17等。软件预测发现其中18个miRNA有潜在的靶基因,10个miRNAs的靶基因多达200个。显著差异表达的miRNA(如hsa.1et-Ta、hsa—miR-185、hsa-miR-141、hsa—miR-92b、hsa—miR-22和hsa-miR-301a)与放射抵抗密切相关。结论筛选出的miRNAs可能通过调控其靶基因而参与食管癌放射抵抗,为临床上放射抵抗的逆转提供全新的靶标和策略。展开更多
目的探讨NF-κB与放射线诱导的人食管癌细胞上皮间质转化(EMT)间的关系。方法累积照射食管癌Eca109细胞60 Gy,得到Eca109R60细胞,克隆形成实验检测其放射抵抗性,显微镜下观察细胞形态学变化。Real-time PCR和免疫细胞化学检测Eca109和Ec...目的探讨NF-κB与放射线诱导的人食管癌细胞上皮间质转化(EMT)间的关系。方法累积照射食管癌Eca109细胞60 Gy,得到Eca109R60细胞,克隆形成实验检测其放射抵抗性,显微镜下观察细胞形态学变化。Real-time PCR和免疫细胞化学检测Eca109和Eca109R60细胞NF-κB、E-cadherin和Vimentin的表达情况。结果 Eca109R60细胞具备了EMT样表型且放射抵抗性更强。Eca109R60细胞中E-cadherin m RNA表达明显下调(P=0.003),Vimentin、NF-κB m RNA表达升高(P=0.004,P=0.004)。相关性分析显示NF-κB与E-cadherin m RNA表达呈负相关,与Vimentin未见有明显相关性,但已显示出正相关的趋势。免疫细胞化学法检测Eca109R60细胞E-cadherin阳性染色程度明显减弱,Vimentin、NF-κB p65阳性染色程度明显增强。结论 Eca109R60细胞放射抗性可能由EMT与NF-κB信号通路相互作用调控。展开更多
文摘目的比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异。方法应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱。GeneSpringGX10.0.2数据分析挑选差异表达基因。应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的潜在靶基因进行预测并验证。结果与亲本细胞相比,KYSE.150R中上调超过2倍的miRNA有10个,为hsa-miR-1539、hsa—miR-1237、hsa—miR-92b等;表达下调超过2倍的有miRNA有25个,为hsa—miR-185、hsa—miR-18b、hsa—miR-17等。软件预测发现其中18个miRNA有潜在的靶基因,10个miRNAs的靶基因多达200个。显著差异表达的miRNA(如hsa.1et-Ta、hsa—miR-185、hsa-miR-141、hsa—miR-92b、hsa—miR-22和hsa-miR-301a)与放射抵抗密切相关。结论筛选出的miRNAs可能通过调控其靶基因而参与食管癌放射抵抗,为临床上放射抵抗的逆转提供全新的靶标和策略。
文摘目的探讨NF-κB与放射线诱导的人食管癌细胞上皮间质转化(EMT)间的关系。方法累积照射食管癌Eca109细胞60 Gy,得到Eca109R60细胞,克隆形成实验检测其放射抵抗性,显微镜下观察细胞形态学变化。Real-time PCR和免疫细胞化学检测Eca109和Eca109R60细胞NF-κB、E-cadherin和Vimentin的表达情况。结果 Eca109R60细胞具备了EMT样表型且放射抵抗性更强。Eca109R60细胞中E-cadherin m RNA表达明显下调(P=0.003),Vimentin、NF-κB m RNA表达升高(P=0.004,P=0.004)。相关性分析显示NF-κB与E-cadherin m RNA表达呈负相关,与Vimentin未见有明显相关性,但已显示出正相关的趋势。免疫细胞化学法检测Eca109R60细胞E-cadherin阳性染色程度明显减弱,Vimentin、NF-κB p65阳性染色程度明显增强。结论 Eca109R60细胞放射抗性可能由EMT与NF-κB信号通路相互作用调控。