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As_2O_3联合Ad-pml体外抗肝癌细胞作用的实验研究
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作者 张士德 张雷 吴长君 《现代肿瘤医学》 CAS 2007年第11期1539-1541,共3页
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合腺病毒介导的早幼粒细胞性白血病基因(promyelocytic leukemia-adenovirus,Ad-pml)体外抗肝癌细胞作用。方法:同时设Ad-pml组、As2O3组、As2O3联合Ad-pml组以及正常细胞对照组,运用分子生物学和细胞生物... 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合腺病毒介导的早幼粒细胞性白血病基因(promyelocytic leukemia-adenovirus,Ad-pml)体外抗肝癌细胞作用。方法:同时设Ad-pml组、As2O3组、As2O3联合Ad-pml组以及正常细胞对照组,运用分子生物学和细胞生物学技术,观察联合应用As2O3和Ad-pml在体外治疗肝癌的效果,并进一步探讨其作用机制及特点。结果:Ad-pml与As2O3对肝癌细胞体外生长的影响:两因素析因设计分析结果表明,单用Ad-pml处理肝癌细胞,其抑制作用随Ad-pml MOI值的增加而增加(P<0.05),单独应用As2O3在浓度小于5μmol/L时,未发现有明显的肿瘤抑制作用(P>0.05);As2O3和Ad-pml联合应用具有协同抗肿瘤作用,二者之间存在着交互作用(P<0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡结果:用Ad-pml和As2O3共同作用肝癌细胞24小时后,早期细胞凋亡率明显增高。RT-PCR结果表明,联合治疗组p53表达最高,而Bcl-2表达最低,相反,肝癌细胞对照组p53表达最低,而Bcl-2表达最高。结论:As2O3和Ad-pml联合应用有协同抗肝癌细胞作用,其机制与增强肝癌细胞凋亡及控制凋亡相关基因的表达有关。 展开更多
关键词 AS2O3 Ad-pml 癌细胞 协同作用 体外试验
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鼠源REG3α二聚体蛋白的体外表达及抗肝癌细胞功能
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作者 陶佳丽 郭夏斐 +4 位作者 范阔海 张亮 段马魁 王志瑞 姜俊兵 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第5期112-117,共6页
利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统对鼠源胰岛再生源蛋白(regenerating islet-derived protein,REG)REG3α二聚体进行表达,并对其体外抗肝癌细胞作用进行初步研究。通过DNA重组技术构建密码子优化的重组质粒pwPICZalpha-REG... 利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统对鼠源胰岛再生源蛋白(regenerating islet-derived protein,REG)REG3α二聚体进行表达,并对其体外抗肝癌细胞作用进行初步研究。通过DNA重组技术构建密码子优化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体,用电转化的方法将线性化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体导入毕赤酵母,经甲醇诱导表达重组蛋白,并用Ni-NTA Resin柱和阴离子交换柱对其进行纯化,用纯化后的蛋白进行体外抗肝癌细胞试验,通过MTT法测REG3α二聚体蛋白对肝癌细胞的半数有效浓度。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示在29.6 ku处有特异性条带,并且以剂量和时间依赖的方式抑制人肝癌细胞SMMC-7721的活性。研究表明获得了具有生物活性的鼠源重组REG3α二聚体蛋白,为进一步研究REG3α二聚体蛋白功能提供理论依据。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 REG3α二聚体 表达 纯化 癌细胞
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配位-有机溶剂法去除银杏叶初提物中银杏酚酸的研究 被引量:3
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作者 杨世龙 黄春丽 +6 位作者 唐颖 徐莉 蒋国斌 曹福亮 雷萌 陈泳 王燕芹 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期7-13,共7页
银杏叶提取物(Extracts of Ginkgo biloba,EGb)具有诸多生物活性,但银杏酚酸的存在限制了EGb的应用。目前,去除EGb中银杏酚酸的方法主要有有机溶剂法和柱层析法,笔者在有机溶剂法的基础上提出配位-有机溶剂法,即在有机溶剂法最佳工艺条... 银杏叶提取物(Extracts of Ginkgo biloba,EGb)具有诸多生物活性,但银杏酚酸的存在限制了EGb的应用。目前,去除EGb中银杏酚酸的方法主要有有机溶剂法和柱层析法,笔者在有机溶剂法的基础上提出配位-有机溶剂法,即在有机溶剂法最佳工艺条件的基础上引入金属离子配位以增加去除银杏酚酸的效果。结果表明:利用配位-有机溶剂法可以有效去除银杏酚酸,并有效减少有机溶剂洗涤次数,且不影响总银杏黄酮苷和总银杏内酯的含量;同时,EGb中的部分黄酮与锌离子形成配合物,可以提高EGb的抗肝癌细胞(HepG2)的活性。 展开更多
关键词 配位-有机溶剂法 银杏叶提取物 银杏酚酸 氯化锌 癌细胞(HepG2)活性
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