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恶性疟原虫FCC-1/HN株环子孢子蛋白基因片段的亚克隆及表达
被引量：
4
1
作者
郑春福
吴少庭
+3 位作者
陈雅棠
高世同
林敏
占国清
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期81-83,共3页
目的 构建恶性疟原虫FCC 1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒 pBK CSP ,在大肠杆菌中进行表达 ,并进行鉴定。方法 采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌 分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 .6 /CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段 ,将其亚克隆于...
目的 构建恶性疟原虫FCC 1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒 pBK CSP ,在大肠杆菌中进行表达 ,并进行鉴定。方法 采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌 分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 .6 /CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段 ,将其亚克隆于 pBK CMV真核表达载体 ,构建重组真核表达质粒 pBK CSP。经IPTG诱导 ,重组质粒在大肠杆菌DH5α中进行表达 ,并进行SDS PAGE及免疫印迹分析。结果 从 pBCG5 .6 /CSP中分离出CSP基因片段 ,成功构建 pBK CSP重组质粒 ;SDS PAGE及免疫印迹分析结果显示特异性蛋白条带的相对分子质量约为 42 0 0 0。结论 从pBCG5 .6 /CSP中成功分离出CSP基因片段 ,并成功构建 pBK CSP重组质粒 ,诱导表达CSP非融合蛋白 。
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关键词
恶
生
疟原虫
环子孢子蛋白
严克隆
基因表达
FCC-1/HN株
原文传递
恶性疟原虫多价重组疫苗的研制及其免疫活性的初步鉴定
被引量：
2
2
作者
李全贞
李英杰
+3 位作者
谢毅
任大明
毕惠样
徐秉锟
《中华医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1995年第6期325-328,共4页
为了探讨含Ｔ、Ｂ淋巴细胞双重激活表位的重组复合症疾抗原的免疫原性和保护作用，作者设计合成了编码恶性疟原虫红内期３个保护性抗原位点和２个外源性Ｔ细胞激活位点的复合基因ＨＧＦＣ，并构建了多连体复合基因ＨＧＦＣＡＣ。两种复...
为了探讨含Ｔ、Ｂ淋巴细胞双重激活表位的重组复合症疾抗原的免疫原性和保护作用，作者设计合成了编码恶性疟原虫红内期３个保护性抗原位点和２个外源性Ｔ细胞激活位点的复合基因ＨＧＦＣ，并构建了多连体复合基因ＨＧＦＣＡＣ。两种复合基因分别与表达载体ｐＷＲ４５０－１重组，并在大肠杆菌中表达出含外源蛋白和β－半乳糖苷酶部分氨基酸的融合蛋白（分子量分别为６５０００和７７０００），表达量为３５％。表达产物可与小鼠及兔抗恶性疟原虫抗体发生特异性免疫反应。用纯化的融合蛋白免疫家兔制备的免疫血清可特异地识别恶性疟原虫抗原，并对疟原虫体外生长有显著抑制作用。抑制程度与免疫血清浓度及作用时间呈正相关，在２０％浓度下作用７２小时，抑制率可达８２％，并引起疟原虫发育不良和死亡。研究结果说明，制备的恶性疟原虫重组复合抗原具有免疫原性和一定的免疫保护作用，可作为恶性疟疫苗候选物。
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关键词
恶
生
疟原虫
疟原虫
重组蛋白类
疫苗
免疫活性
原文传递
BCG/恶性疟MSP-2、CSP多价疫苗免疫小鼠应答类型研究
被引量：
2
3
作者
张仁利
吴少庭
+4 位作者
高世同
林敏
郑春福
陈雅棠
李富荣
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期291-294,共4页
目的 探讨恶性疟原虫FCC 1/HN株裂殖子表面蛋白 2 (MSP 2 )和环子孢子蛋白 (CSP)与BCG多价疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法 将重组pBCG/MSP 2和pBCG/CSP多价疫苗经皮下注射BALB/c小鼠 ,小鼠经多...
目的 探讨恶性疟原虫FCC 1/HN株裂殖子表面蛋白 2 (MSP 2 )和环子孢子蛋白 (CSP)与BCG多价疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法 将重组pBCG/MSP 2和pBCG/CSP多价疫苗经皮下注射BALB/c小鼠 ,小鼠经多价疫苗免疫 8周后 ,用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化 ,并体外培养脾脏细胞 ,用夹心ELISA法测定IFN γ和IL 2的产生 ;用血清学方法测定免疫鼠IgG抗体的动态变化 ,在体外测定抗体介导的抑制实验。结果 与对照组相比 ,疫苗组CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞有显著性的增高 ,体外培养的脾脏细胞IFN γ有高浓度的分泌。同时 ,免疫鼠血清对疟原虫抗原都表现了较高水平的IgG类抗体反应 ,抗体对原虫的增殖产生明显抑制。结论 恶性疟原虫FCC 1/HNpBCG/MSP
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关键词
恶
生
疟原虫
裂殖子表面蛋白-2
环子孢子蛋白
BCG多价疫苗
免疫应答
疟
疾
原文传递
题名
恶性疟原虫FCC-1/HN株环子孢子蛋白基因片段的亚克隆及表达
被引量：
4
1
作者
郑春福
吴少庭
陈雅棠
高世同
林敏
占国清
机构
广东省深圳市卫生防疫站分子生物学实验室
重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所
同济医科大学
出处
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期81-83,共3页
文摘
目的 构建恶性疟原虫FCC 1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒 pBK CSP ,在大肠杆菌中进行表达 ,并进行鉴定。方法 采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌 分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 .6 /CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段 ,将其亚克隆于 pBK CMV真核表达载体 ,构建重组真核表达质粒 pBK CSP。经IPTG诱导 ,重组质粒在大肠杆菌DH5α中进行表达 ,并进行SDS PAGE及免疫印迹分析。结果 从 pBCG5 .6 /CSP中分离出CSP基因片段 ,成功构建 pBK CSP重组质粒 ;SDS PAGE及免疫印迹分析结果显示特异性蛋白条带的相对分子质量约为 42 0 0 0。结论 从pBCG5 .6 /CSP中成功分离出CSP基因片段 ,并成功构建 pBK CSP重组质粒 ,诱导表达CSP非融合蛋白 。
关键词
恶
生
疟原虫
环子孢子蛋白
严克隆
基因表达
FCC-1/HN株
Keywords
Plasmodium falciparum
Circumsporozoite protein
Clone
Expression
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
恶性疟原虫多价重组疫苗的研制及其免疫活性的初步鉴定
被引量：
2
2
作者
李全贞
李英杰
谢毅
任大明
毕惠样
徐秉锟
机构
广州第一军医大学热带医学研究所
出处
《中华医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1995年第6期325-328,共4页
文摘
为了探讨含Ｔ、Ｂ淋巴细胞双重激活表位的重组复合症疾抗原的免疫原性和保护作用，作者设计合成了编码恶性疟原虫红内期３个保护性抗原位点和２个外源性Ｔ细胞激活位点的复合基因ＨＧＦＣ，并构建了多连体复合基因ＨＧＦＣＡＣ。两种复合基因分别与表达载体ｐＷＲ４５０－１重组，并在大肠杆菌中表达出含外源蛋白和β－半乳糖苷酶部分氨基酸的融合蛋白（分子量分别为６５０００和７７０００），表达量为３５％。表达产物可与小鼠及兔抗恶性疟原虫抗体发生特异性免疫反应。用纯化的融合蛋白免疫家兔制备的免疫血清可特异地识别恶性疟原虫抗原，并对疟原虫体外生长有显著抑制作用。抑制程度与免疫血清浓度及作用时间呈正相关，在２０％浓度下作用７２小时，抑制率可达８２％，并引起疟原虫发育不良和死亡。研究结果说明，制备的恶性疟原虫重组复合抗原具有免疫原性和一定的免疫保护作用，可作为恶性疟疫苗候选物。
关键词
恶
生
疟原虫
疟原虫
重组蛋白类
疫苗
免疫活性
Keywords
Plasmodium falciparum Recombi-nant proteins Vaccine Genes lmmune activity
分类号
R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
BCG/恶性疟MSP-2、CSP多价疫苗免疫小鼠应答类型研究
被引量：
2
3
作者
张仁利
吴少庭
高世同
林敏
郑春福
陈雅棠
李富荣
机构
深圳市卫生防疫站
重庆医科大学流行病学研究室
深圳市第一人民医院
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期291-294,共4页
文摘
目的 探讨恶性疟原虫FCC 1/HN株裂殖子表面蛋白 2 (MSP 2 )和环子孢子蛋白 (CSP)与BCG多价疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法 将重组pBCG/MSP 2和pBCG/CSP多价疫苗经皮下注射BALB/c小鼠 ,小鼠经多价疫苗免疫 8周后 ,用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化 ,并体外培养脾脏细胞 ,用夹心ELISA法测定IFN γ和IL 2的产生 ;用血清学方法测定免疫鼠IgG抗体的动态变化 ,在体外测定抗体介导的抑制实验。结果 与对照组相比 ,疫苗组CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞有显著性的增高 ,体外培养的脾脏细胞IFN γ有高浓度的分泌。同时 ,免疫鼠血清对疟原虫抗原都表现了较高水平的IgG类抗体反应 ,抗体对原虫的增殖产生明显抑制。结论 恶性疟原虫FCC 1/HNpBCG/MSP
关键词
恶
生
疟原虫
裂殖子表面蛋白-2
环子孢子蛋白
BCG多价疫苗
免疫应答
疟
疾
Keywords
Plasmodium falciparum
Merozoite surface protein 2
Cirumsporozoite protein
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
恶性疟原虫FCC-1/HN株环子孢子蛋白基因片段的亚克隆及表达
郑春福
吴少庭
陈雅棠
高世同
林敏
占国清
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
4
原文传递
2
恶性疟原虫多价重组疫苗的研制及其免疫活性的初步鉴定
李全贞
李英杰
谢毅
任大明
毕惠样
徐秉锟
《中华医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1995
2
原文传递
3
BCG/恶性疟MSP-2、CSP多价疫苗免疫小鼠应答类型研究
张仁利
吴少庭
高世同
林敏
郑春福
陈雅棠
李富荣
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
2
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