β-榄香烯注射液对人肝癌HepG2细胞微管系统的影响 被引量：6

1

作者 毛雨秋 高山 +1 位作者 付海雁 崔晓楠 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第10期211-215,共5页

目的:探讨β-榄香烯对人肝癌细胞HepG2生长抑制作用及微管系统的影响。方法:将实验分为对照组(未加药物)与实验组(不同浓度β-榄香烯注射液0.02,0.04,0.08 g.L-1组);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定β-榄香烯对HepG2细胞增殖的影响,流式... 目的:探讨β-榄香烯对人肝癌细胞HepG2生长抑制作用及微管系统的影响。方法:将实验分为对照组(未加药物)与实验组(不同浓度β-榄香烯注射液0.02,0.04,0.08 g.L-1组);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定β-榄香烯对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞技术分析肿瘤细胞周期时相分布,激光共聚焦显微技术观察β-榄香烯处理的HepG2细胞内微管的表达、分布;逆转录-多聚酶连反应技术(RT-PCR)观察微管蛋白βmRNA水平表达;采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)分析微管蛋白β蛋白水平的表达、聚合和未聚合微管蛋白含量的变化。结果:0.1,0.08,0.06,0.04,0.02,0.01 g.L-1的β-榄香烯注射液对HepG2细胞增殖具有抑制作用,抑制效应呈时间和浓度依赖性;将细胞阻滞在S期。激光共聚焦分析表明,β-榄香烯不同浓度作用的HepG2细胞微管网络异常;β-榄香烯注射液抑制HepG2细胞β微管蛋白mRNA表达,呈浓度依赖性。蛋白免疫印迹显示β-榄香烯能抑制微管蛋白β的表达,同时抑制细胞内微管蛋白的聚合,呈浓度依赖性。结论:β-榄香烯注射液能够抑制人肝癌细胞HepG2增殖,下调微管蛋白β的表达,抑制HepG2细胞内微管的聚合可能是造成HepG2细胞生长抑制的因素之一。 展开更多

关键词 β-榄香烯 肝癌 微管 微管蛋白β 微管聚合

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微管蛋白和肝肠钙粘连蛋白在胃腺癌中的表达及相关性分析 被引量：1

2

作者 郭绪峰 雷晓斐 +1 位作者 吕晓光 董卫国 《临床内科杂志》 CAS 2013年第2期130-132,共3页

目的探讨微管蛋白（Tubulin β-2c）和肝肠钙粘连蛋白（LI-cadherin）在胃腺癌组织中表达的临床意义及两种蛋白的相关性。方法应用免疫组化S-P法，检测Tubulin β-2C及LI-cadherin在60例胃腺癌组织中的表达，并分析两种蛋白的相关性。结... 目的探讨微管蛋白（Tubulin β-2c）和肝肠钙粘连蛋白（LI-cadherin）在胃腺癌组织中表达的临床意义及两种蛋白的相关性。方法应用免疫组化S-P法，检测Tubulin β-2C及LI-cadherin在60例胃腺癌组织中的表达，并分析两种蛋白的相关性。结果Tubulin β2C及LI—cadherin在胃腺癌组织中的阳性表达率分别为73．33％和68．33％，在癌旁及正常组织中均不表达，两种蛋白的表达呈正相关（r=0．450，P〈0．05）。Tubulin β-2C与肿瘤分化程度有关，与年龄、性别以及淋巴结转移无关。LI—cadherin与肿瘤浸润程度及淋巴结转移有关（P〈0．05），与性别、年龄无关。结论Tubulin β-2c是胃腺癌发生发展过程中一种重要的蛋白分子，其表达强度与胃腺癌分化程度有关，且与LI—cadherin的表达呈正相关。 展开更多

关键词 胃腺癌 微管蛋白β 肝肠钙粘连蛋白

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外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡促进神经元轴突的伸长

3

作者 孙海涛 任春朋 +3 位作者 杨永涛 黄永辉 秦入结 李震 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第23期4924-4930,共7页

背景:神经元轴突损伤可致神经功能障碍,促进轴突伸长有望在神经系统疾病治疗中发挥重要作用。目的:探究外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡(ectomesenchymal stem cells-derived extracellular vesicles,EMSC-EVs)能否促进神经元轴突伸... 背景:神经元轴突损伤可致神经功能障碍,促进轴突伸长有望在神经系统疾病治疗中发挥重要作用。目的:探究外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡(ectomesenchymal stem cells-derived extracellular vesicles,EMSC-EVs)能否促进神经元轴突伸长。方法:(1)组织贴壁法获取鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞,免疫荧光鉴定特异性标志物;超速离心法获取EMSC-EVs并进行鉴定;(2)EMSC-EVs(0,0.5,1.0,1.5 mg/mL)与PC12细胞共孵育72 h,CCK-8分析EMSC-EVs对PC12细胞的细胞毒性及增殖作用;(3)EMSC-EVs(1.0 mg/mL)与PC12细胞或神经元共孵育72 h,显微镜下观察轴突长度变化,实时荧光定量PCR及Western blot分析轴突相关标志物微管蛋白β3(早期)、生长相关蛋白43(中期)和神经丝蛋白200(成熟)表达变化,以探究EMSC-EVs是否能够促进PC12细胞或神经元轴突伸长。结果与结论:(1)所获取外胚层间充质干细胞大部分呈长梭形,少数呈不规则形,高表达间充质干细胞特异性标记物Nestin、CD44及Vimentin;所获取EMSC-EVs符合细胞外囊泡的生物学标准;(2)在0.5-1.5 mg/mL质量浓度范围内,EMSC-EVs促进PC12细胞增殖,且随浓度增加而增强;(3)EMSC-EVs促进PC12细胞及神经元轴突长度增加,促进轴突相关标志物微管蛋白β3、生长相关蛋白43和神经丝蛋白200的表达。这些结果说明,EMSC-EVs能够促进神经元轴突伸长。 展开更多

关键词 间充质干细胞 神经元 PC12细胞 细胞外囊泡 轴突伸长 微管蛋白β3 生长相关蛋白43 神经丝蛋白200

人和小鼠神经干细胞的体外培养的分化研究 被引量：3

4

作者 吴益民 喻红 +3 位作者 林丽珠 何以丰 赵寿元 李昌本 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期57-62,共6页

首次克隆了小鼠神经元标志性微管蛋白 βⅢ基因 ,从核苷酸序列推导出小鼠与人两者之间在其羧基端有相同的EAQGPK六肽 ,进一步证实用抗人微管蛋白 βⅢ单抗可检测小鼠神经干细胞分化成的神经元细胞 .免疫组化鉴定显示小鼠神经干细胞在体... 首次克隆了小鼠神经元标志性微管蛋白 βⅢ基因 ,从核苷酸序列推导出小鼠与人两者之间在其羧基端有相同的EAQGPK六肽 ,进一步证实用抗人微管蛋白 βⅢ单抗可检测小鼠神经干细胞分化成的神经元细胞 .免疫组化鉴定显示小鼠神经干细胞在体积分数为 1%胎牛血清 (FBS)诱导下 ,可分化成神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞 .同时培养了 13周龄胎儿脑来源的人类神经干细胞 ,用特异性的抗人nestin抗体鉴定 ,全部为阳性细胞 ,但是它们经诱导分化产生较不同寻常的细胞分化结果和分化程度 ,在生长因子减半和 1%FBS诱导条件下可分化为神经元和星形胶质细胞 ,而无少突胶质细胞分化 。 展开更多

关键词 微管蛋白βⅢ 体外分化 神经干细胞

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食管鳞癌基因多态性表达与生存分析 被引量：5

5

作者 贾卓奇 周维茹 +4 位作者 贺海奇 李硕 游江涛 付军科 张勇 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第10期1673-1677,共5页

目的:探讨食管鳞癌肿瘤组织中ERCC1、TYMS、TUBB3基因表达与预后生存的关系。方法:选择2012年9月至2016年5月我科收治的68例食管鳞癌患者,术后病理分期II a-III a期;检测肿瘤组织ERCC1、TYMS、TUBB3 mRNA表达水平。术后患者分为个体化... 目的:探讨食管鳞癌肿瘤组织中ERCC1、TYMS、TUBB3基因表达与预后生存的关系。方法:选择2012年9月至2016年5月我科收治的68例食管鳞癌患者,术后病理分期II a-III a期;检测肿瘤组织ERCC1、TYMS、TUBB3 mRNA表达水平。术后患者分为个体化化疗组和标准化疗组,个体化组患者根据基因检测结果选择敏感药物化疗方案(CF/DCF/TC方案)进行化疗,标准组应用CF方案化疗,所有患者长期随访,统计化疗不良反应及生存数据。结果:肿瘤组织中ERCC1、TYMS、TUBB3阳性表达率分别为43%、47%、51%,无统计学差异(P>0.05)。所有患者总一年生存率、两年生存率及三年生存率为分别为90.57%,72.45%和59.77%。生存曲线分析提示:0项基因阳性组预后最佳(P<0.05),而1项、2项和3项基因阳性组间无统计学差异(P>0.05)。个体化化疗组的III/IV级化疗不良反应发生率明显低于标准化疗组(P<0.05)。结论:食管鳞癌患者中ERCC1、TYMS、TUBB3表达具有特定的临床特征,其高表达患者预后欠佳。根据基因检测结果进行个体化化疗可以获得更好的疗效和耐受性,不良反应更轻。 展开更多

关键词 食管鳞癌 修复交叉互补基因1(ERCC1) 胸腺嘧啶合酶(TYMS) 人微管蛋白β3基因(TUBB3) 化疗 生存率

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柔嫩艾美耳球虫微管蛋白β链基因EtTBC的克隆、表达及特性的初步分析

6

作者 谢馨锐 赵其平 +6 位作者 朱顺海 郭慧琳 王丽慧 于钰 董辉 韩红玉 刘伟 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期405-414,共10页

鸡球虫病是一种由艾美耳属原生动物寄生虫引起的肠道疾病,是影响家禽业的最重要疾病之一。目前,球虫病的控制主要依赖于抗球虫药物的使用,但由于药物的长期广泛使用导致了球虫的严重耐药性。为研究其耐药性机制,本实验室前期对柔嫩艾美... 鸡球虫病是一种由艾美耳属原生动物寄生虫引起的肠道疾病,是影响家禽业的最重要疾病之一。目前,球虫病的控制主要依赖于抗球虫药物的使用,但由于药物的长期广泛使用导致了球虫的严重耐药性。为研究其耐药性机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株、盐霉素耐药株进行了转录组测序分析,发现与敏感株相比,柔嫩艾美耳球虫微管蛋白β链(Et TBC)仅在地克珠利耐药株高表达。本研究在此基础上,克隆、表达了EtTBC,并初步分析了其功能及与地克珠利的关系;以柔嫩艾美耳球虫敏感株cDNA为模板成功克隆了EtTBC基因,构建了原核表达重组质粒pET28a-Et TBC,并成功诱导表达了重组蛋白r Et TBC;利用qPCR对柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段以及不同虫株(耐药株、敏感株和田间耐药株)的mRNA转录水平进行了分析,结果显示,该基因的转录水平在敏感株未孢子化卵囊阶段最高,且其mRNA转录水平仅在地克珠利耐药株上调;间接免疫荧光定位结果表明该蛋白主要分布在子孢子除折光体外的细胞质和表面,第二代裂殖子的细胞质和表面。 展开更多

关键词 柔嫩艾美耳球虫 微管蛋白β链 耐药性

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REST/TUBB3轴对卵巢癌紫杉醇化疗耐药性的影响及作用机制

7

作者 余婷玉 方珊珊 +2 位作者 朱言亮 刘波 李泉 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1129-1135,共7页

目的 探究PE1沉默转录因子(REST)/微管蛋白β(TUBB)3对卵巢癌紫杉醇耐药性影响及作用机制。方法 免疫组织化学法检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药肿瘤组织中REST、TUBB3表达,Western印迹检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药细胞中REST、TUBB3蛋白表达... 目的 探究PE1沉默转录因子(REST)/微管蛋白β(TUBB)3对卵巢癌紫杉醇耐药性影响及作用机制。方法 免疫组织化学法检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药肿瘤组织中REST、TUBB3表达,Western印迹检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药细胞中REST、TUBB3蛋白表达,定量聚合酶链反应(qPCR)检测卵巢癌组织中REST、TUBB3 mRNA表达。不同浓度紫杉醇作用于SKOV3、OVCAR3和SKOV3/tax、OVCAR3/tax细胞后,分析细胞凋亡与周期变化,CCK8检测细胞活力,Western印迹检测REST、TUBB3蛋白表达。过表达或敲低REST后,qPCR和Western印迹分别检测TUBB3 mRNA和蛋白表达,检测细胞凋亡水平和周期阻滞。染色质免疫沉淀法检测H3-ac、H4-ac、HADC1与TUBB3基因第2个CpG位点的结合。结果 REST在卵巢癌紫杉醇耐药肿瘤组织及细胞系中低表达,TUBB3异常高表达于卵巢癌紫杉醇化疗耐药肿瘤组织及细胞系,两者mRNA表达呈显著负相关(P<0.05)。不同浓度紫杉醇作用下,REST蛋白表达逐渐明显降低,TUBB3蛋白表达逐渐明显升高,SKOV3/tax、OVCAR3/tax细胞凋亡水平和细胞周期阻滞显著低于SKOV3、OVCAR3(P<0.05)。过表达REST后,TUBB3表达明显降低,细胞对紫杉醇敏感性明显提高,细胞凋亡水平和细胞周期阻滞显著提高(P<0.05)。敲低REST后H3-ac、H4-ac与TUBB3基因第2个CpG位点的结合增强,促进TUBB3基因转录。结论 在卵巢癌紫杉醇化疗耐药组织及细胞系中,REST低表达,而TUBB3异常高表达,REST和TUBB3的RE-1序列结合调控其转录,在紫杉醇化疗耐药中发挥负调控作用。 展开更多

关键词 卵巢癌 紫杉醇 耐药 RE1沉默转录因子(REST) 微管蛋白β(TUBB)3

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牛磺酸促进宫内生长受限胎鼠神经干细胞分化的研究 被引量：2

8

作者 刘方 付薇 +3 位作者 刘敬 彭海波 庄学玲 梁小琴 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期290-294,共5页

目的通过观察牛磺酸对宫内生长受限(IUGR)胎鼠神经干细胞(NSCs)分化的影响,探讨其脑保护机制。方法采用低蛋白饮食法建立IUGR胎鼠模型。取胎鼠室管膜下生发基质区(SVZ)脑组织进行NSCs培养。将传代培养所得NSCs分为3组:正常对照组、IUGR... 目的通过观察牛磺酸对宫内生长受限(IUGR)胎鼠神经干细胞(NSCs)分化的影响,探讨其脑保护机制。方法采用低蛋白饮食法建立IUGR胎鼠模型。取胎鼠室管膜下生发基质区(SVZ)脑组织进行NSCs培养。将传代培养所得NSCs分为3组:正常对照组、IUGR组和IUGR+牛磺酸组。分别对3组细胞进行诱导分化5d。采用免疫荧光法检测各组分化细胞的神经细胞特异性微管蛋白β3(βⅢ-tubulin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性细胞数,计算各种细胞所占比例;采用Westernblot法检测各组细胞βⅢ-tubulin及GFAP蛋白水平。结果1.正常对照组、IUGR及IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin阳性细胞计数比例分别为(18.50±0.64)%、(15.61±0.76)%、(18.42±0.82)%,GFAP阳性细胞计数比例分别为(72.19±0.82)%、(74.87±0.67)%、(71.68±0.92)%,组间比较差异均有统计学意义(F=49.103、44.643,均P<0.01)。与正常对照组比较,IUGR组βⅢ-tubulin阳性细胞计数比例显著减少(P<0.01),GFAP阳性细胞计数比例显著增加(P<0.01);与IUGR组相比,IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin阳性细胞计数比例显著增高(P<0.01),GFAP阳性细胞计数比例显著减少(P<0.01);正常对照组与IUGR+牛磺酸组二种细胞计数比例比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。2.正常对照组、IUGR及IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin蛋白相对表达量分别为0.44±0.02、0.33±0.03、0.42±0.02,GFAP蛋白相对表达分别为1.13±0.02、1.50±0.04、1.21±0.01,组间比较差异均有统计学意义(F=45.191、234.525,均P<0.01)。与正常对照组相比,IUGR组βⅢ-tubulin蛋白表达显著减少(P<0.01),GFAP蛋白水平显著增高(P<0.01);与IUGR组相比,IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin蛋白表达显著增高(P<0.01),GFAP蛋白水平显著减少(P<0.01);正常对照组与IUGR+牛磺酸组2种蛋白水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论牛磺酸可促进IUGR胎鼠NSCs向神经元方向分化,并保持各种分化细胞比例正常。 展开更多

关键词 牛磺酸 宫内生长受限 神经干细胞 分化 神经细胞特异性微管蛋白β3 胶质纤维酸性蛋白

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切除修复交叉互补基因1、乳腺癌易感基因1及微管蛋白β3检测在晚期肺鳞状细胞癌患者GP方案治疗中的指导意义

9

作者 李勇平 雷傲利 +1 位作者 李文革 李复红 《癌症进展》 2023年第21期2411-2414,共4页

目的 探讨切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)及微管蛋白β3(TUBB3)检测在晚期肺鳞状细胞癌患者吉西他滨+顺铂(GP)方案治疗中的指导意义。方法 选取74例行GP方案治疗的晚期肺鳞状细胞癌患者,采用免疫组化法检测ERCC1... 目的 探讨切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)及微管蛋白β3(TUBB3)检测在晚期肺鳞状细胞癌患者吉西他滨+顺铂(GP)方案治疗中的指导意义。方法 选取74例行GP方案治疗的晚期肺鳞状细胞癌患者,采用免疫组化法检测ERCC1、BRCA1及TUBB3表达情况。比较不同临床特征晚期肺鳞状细胞癌患者的ERCC1、BRCA1及TUBB3表达情况。根据免疫组化结果对患者进行分组,3阳性为A组(n=16),2阳性+1阴性为B组(n=18),1阳性+2阴性为C组(n=19),3阴性为D组(n=21),比较4组患者的临床特征、总有效率及疾病控制率。结果 74例晚期肺鳞状细胞癌患者肺鳞状细胞癌组织中ERCC1、BRCA1、TUBB3阳性表达率分别为45.95%、55.41%、47.30%。不同性别、临床分期、分化程度肺鳞状细胞癌患者肺鳞状细胞癌组织中ERCC1、BRCA1及TUBB3阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。4组患者的性别、年龄、吸烟时间比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);4组患者的临床分期、分化程度比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。4组患者的总有效率和疾病控制率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01),其中D组患者的总有效率和疾病控制率均最高,A组均最低。结论 ERCC1、BRCA1、TUBB3联合检测能够为GP方案治疗晚期肺鳞状细胞癌提供参考,有助于筛选有效治疗人群,提高GP方案治疗的有效性。 展开更多

关键词 切除修复交叉互补基因1 乳腺癌易感基因1 微管蛋白β3 晚期肺鳞状细胞癌 GP方案

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RRM1、β-Tubb3、ERCC1表达在Ⅲb/Ⅳ期非小细胞肺癌个体化治疗中的研究 被引量：1

10

作者 刘海涛 陈余清 +7 位作者 李殿明 李伟 王效静 黄礼年 闵生萍 张永 徐晓玲 孙耕耘 《蚌埠医学院学报》 CAS 2013年第12期1541-1544,1547,共5页

目的:探讨Ⅲb/Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)组织中核苷酸还原酶M1(RRM1)、人微管蛋白β3(β-Tubb3)和核苷酸切除修复互补基因1(ERCC1)表达与吉西他滨、紫杉类和铂类药物疗效之间的关系。方法:Ⅲb/Ⅳ期NSCLC患者480例,随机分为试验组和对照组... 目的:探讨Ⅲb/Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)组织中核苷酸还原酶M1(RRM1)、人微管蛋白β3(β-Tubb3)和核苷酸切除修复互补基因1(ERCC1)表达与吉西他滨、紫杉类和铂类药物疗效之间的关系。方法:Ⅲb/Ⅳ期NSCLC患者480例,随机分为试验组和对照组各240例,试验组采用实时荧光定量聚合酶链反应-高分辨溶解曲线法检测石蜡组织标本中RRM1、β-Tubb3、ERCC1 mRNA的表达,并根据RRM1、β-Tubb3表达结果,试验组选择铂类联合吉西他滨(GP方案)、长春瑞滨(NP方案)、紫杉醇(TP方案)或培美曲赛的两药化疗方案;对照组随机给予任何一种两药联合化疗。比较2组化疗疗效及总生存期。结果:试验组和对照组的客观缓解率分别为66.1%和31.7%,疾病控制率分别为79.7%和46.3%,差异均有统计学意义(P<0.01);总生存期分别为11.2个月和9.8个月,差异无统计学意义(P>0.05)。GP方案治疗后试验组患者客观缓解率为70.7%,较对照组32.6%显著增高(P<0.01)。NP、TP方案治疗后试验组患者客观缓解率为66.7%,较对照组29.5%显著增高(P<0.01)。试验组ERCC1低表达与高表达患者客观缓解率分别为78.7%和50.9%,差异有统计学意义(P<0.01),低表达与高表达生存期分别11.4个月和10.9个月,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:依据RRM1、β-Tubb3表达水平指导Ⅲb/Ⅳ期NSCLC个体化治疗较随机选用标准一线化疗方案可明显提高客观缓解率。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 人微管蛋白β3 核苷酸还原酶M1 核苷酸切除修复互补基因1

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姜黄素对鼻咽癌细胞迁移的影响及相关机制研究

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作者 熊晖 姚运红 +2 位作者 蔡琼珍 李飞虹 余建华 《宁夏医科大学学报》 2010年第5期559-563,571,共6页

目的研究姜黄素对鼻咽癌增殖和迁移的影响,探讨姜黄素抗鼻咽癌的可能机理。方法考马斯蓝染色和图像分析法检测不同浓度姜黄素(0、10、20、40μmol.L-1)对H5细胞骨架的影响;细胞刮痕实验观察不同浓度姜黄素对H5细胞迁移能力的影响;以免... 目的研究姜黄素对鼻咽癌增殖和迁移的影响,探讨姜黄素抗鼻咽癌的可能机理。方法考马斯蓝染色和图像分析法检测不同浓度姜黄素(0、10、20、40μmol.L-1)对H5细胞骨架的影响;细胞刮痕实验观察不同浓度姜黄素对H5细胞迁移能力的影响;以免疫细胞化学方法检测EGFR、PCNA、PI3K、Tubulin-β在各组细胞中的表达情况;RT-PCR方法检测不同浓度姜黄素对H5细胞EGER mRNA表达的影响;通过体内H5裸鼠移植瘤实验,观察姜黄素对移植瘤生长的影响,免疫组织化学方法检测不同浓度姜黄素作用H5裸鼠移植瘤组织中EGFR、PCNA、PI3K、Tubulin-β的表达。结果随着姜黄素浓度的增加,刮痕边缘的H5细胞向划痕外迁出减少(P<0.05);H5细胞骨架染色逐渐降低(P<0.01);不同浓度的姜黄素可抑制H5细胞中EGFR、PCNA、PI3K和Tubulin-β的表达,并使EGFR mRNA表达下调。姜黄素抑制H5裸鼠移植瘤生长,用药组的移植瘤组织坏死更为广泛(P<0.01);高剂量姜黄素处理组H5裸鼠移植瘤组织中的EGFR表达与对照组相比明显减弱(P<0.05)。Spearman相关分析显示EGFR、PCNA和Tubulin-β随姜黄素剂量的增高表达减弱,呈剂量效应关系(P<0.05或0.01);EGFR与PI3K、EGFR与Tubulin-β表达具有相关性(P<0.05);PCNA与PI3K表达具有相关性(P<0.05)。结论姜黄素可能通过下调EGFR影响细胞骨架,从而抑制鼻咽癌细胞H5的增殖及迁移。 展开更多

关键词 姜黄素 鼻咽癌 细胞骨架 表皮生长因子受体 微管蛋白-β

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蛋白质印迹法中免染技术和总蛋白定量方法的研究进展 被引量：1

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作者 韩欣霖 杨佳儒 +1 位作者 宝福凯 柳爱华 《生物技术通讯》 CAS 2017年第5期709-714,共6页

当含有蛋白质的SDS-PAGE胶浸泡在三氯乙酸或氯仿中时,经三氯化合物的作用,使得蛋白质中的色氨酸经紫外光照射会发出可见光,因而可在SDS-PAGE凝胶上实现对蛋白质条带的定位与定性。免染技术即是基于此原理而发明的。基于免染技术,我们可... 当含有蛋白质的SDS-PAGE胶浸泡在三氯乙酸或氯仿中时,经三氯化合物的作用,使得蛋白质中的色氨酸经紫外光照射会发出可见光,因而可在SDS-PAGE凝胶上实现对蛋白质条带的定位与定性。免染技术即是基于此原理而发明的。基于免染技术,我们可以检测到待测样品中的总蛋白条带的光密度,进而利用目的蛋白条带光密度与总蛋白条带光密度的比值对目的蛋白进行定量。本文就蛋白质印迹法技术中的免染技术和总蛋白定量方法的原理和优势进行简要综述。 展开更多

关键词 免染技术 β肌动蛋白(β-actin) β微管蛋白(β-tublin) 甘油醛3-磷酸脱氢酶(GAPDH) 总蛋白定量

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TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中的作用机制

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作者 孙晓彤 韩崇旭 +2 位作者 王婵 任传利 张明明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第17期2176-2182,共7页

目的探讨TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中的作用机制。方法为研究TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中如何调节自噬的表达,选用人肝胆管癌细胞RBE来进行研究。并用疏水性胆汁酸甘氨鹅脱氧胆酸(GCDC)处理人肝胆管癌细胞RBE分为3组:control组、... 目的探讨TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中的作用机制。方法为研究TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中如何调节自噬的表达,选用人肝胆管癌细胞RBE来进行研究。并用疏水性胆汁酸甘氨鹅脱氧胆酸(GCDC)处理人肝胆管癌细胞RBE分为3组:control组、500μmol/L组和1000μmol/L组。细胞计数试剂盒(CCK-8)、细胞克隆、细胞划痕和Hoechst染色实验检测细胞活力、增殖、伤口愈合率和凋亡。qPCR检测细胞中TMEM39A mRNA表达量;Western blot检测TMEM39A和LC3的蛋白表达量。结果与control组相比较,1000μmol/L组的细胞活力、增殖和伤口愈合率降低,细胞凋亡现象最明显。在构建的原发性胆汁性胆管炎的模型中,过表达TMEM39A会促进LC3的表达。结论TMEM39A的表达增高引起胆管细胞自噬增强使胆管受损,可能是引起原发性胆汁性胆管炎的机制之一。 展开更多

关键词 TMEM39A 原发性胆汁性胆管炎 人肝胆管癌细胞 微管相关蛋白3β 甘氨鹅脱氧胆酸

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