为探讨上调miR-30a-5p对LPS诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及其与人类runt相关转录因子2(human runt related transcription factor 2,RUNX2)的关系,首先选取肺泡上皮细胞株MRC-5,转染miR-30a-5p mimics、miR-NC,分别记为...为探讨上调miR-30a-5p对LPS诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及其与人类runt相关转录因子2(human runt related transcription factor 2,RUNX2)的关系,首先选取肺泡上皮细胞株MRC-5,转染miR-30a-5p mimics、miR-NC,分别记为miR-30a-5p组、miR-NC组,以无任何处理的细胞为Blank组,然后用1 mg/mL LPS处理,分为LPS+miR-30a-5p组、LPS+miR-NC组及LPS组。用LPS腹腔注射C57BL/6小鼠构建ALI模型,分为对照组、ALI组、ALI+miR-NC组及ALI+miR-30a-5p组。H-E染色观察肺组织病理改变并进行肺损伤评分,计算肺湿重/干重(wet weight/dry weight,W/D)比值。ELISA检测血清IL-1β、IL-6及TNF-α水平。qRT-PCR检测细胞、组织miR-30a-5p表达水平。Western blotting检测组织、细胞RUNX2表达水平。双荧光素酶报告基因试验分析miR-30a-5p与RUNX2的靶向关系。结果显示,与Blank组比较,LPS组细胞miR-30a-5p水平降低,RUNX2水平升高(P<0.01)。与miR-NC组、LPS+miR-NC组比较,miR-30a-5p组、LPS+miR-30a-5p组细胞miR-30a-5p水平升高,RUNX2水平降低(P<0.01)。与对照组比较,ALI组肺组织miR-30a-5p水平降低,RUNX2水平升高,肺损伤评分升高,W/D比值升高,TNF-α、IL-1β及IL-6水平升高(P<0.01)。与ALI+miR-NC组比较,ALI+miR-30a-5p组肺组织miR-30a-5p水平升高,RUNX2水平降低,肺损伤评分降低,W/D比值降低,TNF-α、IL-1β及IL-6水平降低(P<0.01)。miR-30a-5p与RUNX2 miR 3'-UTR存在一定的结合位点,miR-30a-5p+RUNX2-WT组细胞荧光素酶活性低于miR-NC+RUNX2-WT组(P<0.01)。该研究提示,miR-30a-5p在ALI小鼠肺组织中低表达,过表达miR-30a-5p通过调控RUNX2改善小鼠肺损伤。展开更多