系统结构状态对微小芯片贴片精度的影响 被引量：5

1

作者 侯一雪 王敏 《电子工艺技术》 2020年第3期146-149,共4页

芯片贴片技术是微电子元器件封装工艺流程中的第一道工序,是后道封装工艺的基础。随着微电子芯片设计技术及元器件设计技术的发展,芯片尺寸已经微型化,对贴片工艺提出了更高要求。全自动贴片设备是解决此工艺问题的主要工艺设备。高精... 芯片贴片技术是微电子元器件封装工艺流程中的第一道工序,是后道封装工艺的基础。随着微电子芯片设计技术及元器件设计技术的发展,芯片尺寸已经微型化,对贴片工艺提出了更高要求。全自动贴片设备是解决此工艺问题的主要工艺设备。高精度自动拾放技术是全自动贴片设备的核心技术,从全自动贴片设备系统结构状态的角度分析了影响微小芯片贴片精度的几个要点。 展开更多

关键词 微小芯片 拾放技术 贴片精度 全自动贴片设备

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miRNA在HBV从感染经由肝硬化到肝癌进程中表达谱的变化 被引量：26

2

作者 马兆龙 杨炼 +3 位作者 陈立波 黄金明 王冬冬 王国斌 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第20期2112-2116,共5页

目的:分析微小RNA(microRNA,miRNA)在HBV感染到肝硬化再到肝癌进程中表达谱的变化.方法:利用miRNA芯片技术检测人正常肝脏、乙型肝炎肝硬化、HBV相关性肝癌组织中miRNA表达谱的差异.实时定量PCR检测上述3种肝脏组织中芯片结果差异性表达... 目的:分析微小RNA(microRNA,miRNA)在HBV感染到肝硬化再到肝癌进程中表达谱的变化.方法:利用miRNA芯片技术检测人正常肝脏、乙型肝炎肝硬化、HBV相关性肝癌组织中miRNA表达谱的差异.实时定量PCR检测上述3种肝脏组织中芯片结果差异性表达的miRNA,验证芯片结果的可信性.结果:与正常肝脏组织相比,乙型肝炎肝硬化和HBV相关性肝癌组织中表达上调超过2倍的microRNA有6个,分别为:hsa-miR-602、hsa-miR-129-5p、has-miR-210、hsa-miR-671-5p、hsa-miR-30b*及hsa-miR-572;表达下调超过2倍的miRNA有8个:hsa-miR-143、hsa-miR-199a-5p、has-miR-195、hsa-miR-27a、hsa-miR-99a、hsa-miR-519e、has-miR-130a及hsa-miR-597.这些正常肝脏组织相比有差异表达的miRNA,在乙型肝炎肝硬化和HBV相关性肝癌组织中表达量无明显差别.结论:从HBV感染到肝硬化再到肝癌进程中伴有microRNA表达谱的变化,且变化主要发生在进程早期. 展开更多

关键词 微小RNA芯片 微小RNA 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒相关性肝癌

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肺癌、癌旁组织及正常组织中微小RNA表达谱的检测 被引量：12

3

作者 李丽琴 许丽敏 +7 位作者 李静 沈琦斌 李鸿伟 平金良 马志红 钟婧 黄惠莲 戴利成 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期409-410,共2页

目的 探讨肺癌、癌旁及正常组织中微小RNA（miRNAs,miR）表达谱差异及其与TNM病理分期的关系.方法 采用Agilent miRNA芯片检测9例非小细胞肺癌患者的同体癌、癌旁和正常组织的miRNA表达谱,比较不同TNM分期间的表达差异.结果 筛选出36个... 目的 探讨肺癌、癌旁及正常组织中微小RNA（miRNAs,miR）表达谱差异及其与TNM病理分期的关系.方法 采用Agilent miRNA芯片检测9例非小细胞肺癌患者的同体癌、癌旁和正常组织的miRNA表达谱,比较不同TNM分期间的表达差异.结果 筛选出36个在癌组织和癌旁组织之间差异表达的miRNAs和55个在癌组织和正常组织间差异表达的miRNAs;与早期患者比较,Ⅲa期的正常组织有hsa-miR-205、hsa-miR-34b等11个差异表达的miRNAs;而癌旁组织则从Ⅱa期开始就出现了9个差异表达的miRNAs;不同TNM分期的癌组织之间仅有hsv2-miR-H7-3p和hsa-miR-23a＊表达差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 随着肺癌病理分级的发展,癌旁组织甚至远端组织也会出现特定mircoRNA表达量的变化,该特定mircoRNA的表达可能提示肿瘤的浸润能力. 展开更多

关键词 肺癌 微小RNA芯片 TNM病理分期

原文传递

淫羊藿苷对激素诱导损伤骨微血管内皮细胞微小RNA表达的影响 被引量：9

4

作者 赵丁岩 郭万首 +2 位作者 俞庆声 程立明 王佰亮 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第15期2140-2147,共8页

背景:近年来研究证实微小RNA广泛参与调控人体发育、细胞增殖分化及凋亡、血管生成、脂质代谢等生理过程,同样微小RNA在股骨头坏死的病理过程中也具有重要的调控作用。作者所在实验室前期研究证实淫羊藿苷具有抑制激素诱导骨微血管内皮... 背景:近年来研究证实微小RNA广泛参与调控人体发育、细胞增殖分化及凋亡、血管生成、脂质代谢等生理过程,同样微小RNA在股骨头坏死的病理过程中也具有重要的调控作用。作者所在实验室前期研究证实淫羊藿苷具有抑制激素诱导骨微血管内皮细胞凋亡的作用,并且可以显著提高骨微血管内皮细胞促血管生成蛋白粒细胞集落刺激因子的表达。但目前关于淫羊藿苷对骨微血管内皮细胞微小RNA的研究仍处于探索阶段,其具体作用靶点、可能的调节机制及信号通路尚不明确。目的:探索淫羊藿苷对激素诱导人股骨头骨微血管内皮细胞微小RNA表达的影响及其可能的机制。方法:采用作者所在实验室建立的方法分离、培养及鉴定人股骨头骨微血管内皮细胞,取第3代骨微血管内皮细胞,建立激素诱导损伤模型及淫羊藿苷预处理模型,采用微小RNA基因芯片对激素组和正常组进行差异性转录,运用实时定量PCR法对明显表达差异mi R-339及mi R-23b进行验证,同时探讨淫羊藿苷对mi R-339及mi R-23b表达的影响。结果与结论:(1)对微小RNA基因芯片结果进行差异性分析,与正常组相比较,激素组中差异倍数﹥2的微小RNA共有5个,其中1个表达上调,4个表达下调;(2)实时定量PCR检测结果显示:与正常组相比,激素组中mi R-339及mi R-23b出现明显变化,与基因芯片结果一致。与激素组相比,淫羊藿苷预处理可以显著提高mi R-23b的表达;(3)结果表明:淫羊藿苷可以有效预防激素诱导骨微血管内皮细胞损伤引起的mi R-23b表达失衡,推测淫羊藿苷可能通过介导骨微血管内皮细胞mi R-23b的表达参与激素性股骨头坏死病理过程的调控。 展开更多

关键词 微血管 内皮细胞 芯片分析技术 组织工程 组织构建 血管内皮细胞 淫羊藿苷 激素性股骨头坏死 骨微血管内皮细胞 微小RNA基因芯片 微小RNA miR-23b miR-339 国家自然科学基金

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HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)对L02细胞microRNA表达谱的影响 被引量：5

5

作者 胡志亮 谭德明 +5 位作者 侯周华 刘国珍 谢萍 欧阳奕 刘菲 刘洪波 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期2561-2566,2569,共7页

目的研究转染HBx基因(hepatitis Bvirus Xgene)及其缺失突变体(HBx-d382)后L02细胞Mi-croRNA表达谱的变化。方法通过脂质体转染和G418筛选获得L02/HBx、L02/HBx-d382阳性克隆,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和western blot鉴定目的基因表... 目的研究转染HBx基因(hepatitis Bvirus Xgene)及其缺失突变体(HBx-d382)后L02细胞Mi-croRNA表达谱的变化。方法通过脂质体转染和G418筛选获得L02/HBx、L02/HBx-d382阳性克隆,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和western blot鉴定目的基因表达,利用MicroRNA芯片技术检测其对L02细胞MicroRNA表达的影响。结果 RT-PCR及Western blot表明在L02/HBx和L02/HBx-d382细胞株中存在目的基因表达。MicroRNA芯片发现与L02细胞相比,L02/HBx-d382细胞有7个MicroRNA表达上调,5个MicroRNA表达下调,L02/HBx细胞有4个MicroRNA表达上调,12个MicroRNA表达下调。结论成功构建HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)的真核表达模型,该类病毒基因会影响L02肝细胞的MicroRNA表达谱。 展开更多

关键词 HBX 突变 微小RNA 微小RNA芯片

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膝关节骨性关节炎患者关节液miRNAs表达变化及意义 被引量：6

6

作者 穆尚强 孙爽 +1 位作者 王宇 梅继文 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第48期5-7,共3页

目的探讨膝关节骨性关节炎(KOA)患者关节液中差异表达的微小RNA(miRNAs)及其临床意义。方法选择KOA患者和体检健康者各33例,均为女性。采集受试者关节液标本,随机从中各选择3例份,采用miRNA芯片技术检测差异表达的miRNAs(差异表达的标... 目的探讨膝关节骨性关节炎(KOA)患者关节液中差异表达的微小RNA(miRNAs)及其临床意义。方法选择KOA患者和体检健康者各33例,均为女性。采集受试者关节液标本,随机从中各选择3例份,采用miRNA芯片技术检测差异表达的miRNAs(差异表达的标准定义为上调或下调≥2倍)。采用Real-time PCR法检测剩余KOA患者和体检健康者关节液(各30例份)中差异表达miRNAs的相对表达量,对芯片检测结果进行验证。结果与体检健康者比较,KOA患者关节液中上调≥2倍的miRNAs有3个(miR-9、miR-155、miR-98),下调≥2倍的miRNAs有4个(miR-140、miR-27a、miR-146a、miR-138)。KOA患者关节液miR-9、miR-155、miR-98相对表达量均高于体检健康者,miR-140、miR-27a、miR-146a和miR-138相对表达量均低于体检健康者(P均<0.05)。结论 KOA患者关节液miR-9、miR-155、miR-98表达升高,miR-140、miR-27a、miR-146a和miR-138表达降低;上述miRNAs表达变化可能与KOA的发病有关。 展开更多

关键词 骨性关节炎 膝关节 关节液 微小RNA芯片

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慢性乙型肝炎肝硬化合并肝癌患者不同组织微小RNA的差异表达 被引量：5

7

作者 范晓棠 张建庆 +3 位作者 马海林 石绣江 冯娟 何方平 《中国医药》 2017年第8期1180-1184,共5页

目的 筛选乙型肝炎肝硬化合并肝癌患者肝癌组织与肝硬化组织微小RNA（miRNA）差异表达谱，为研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用提供基础。方法 选取2013年1—4月于新疆医科大学第一附属医院行肝癌根治治疗的慢性乙型肝炎肝硬化... 目的 筛选乙型肝炎肝硬化合并肝癌患者肝癌组织与肝硬化组织微小RNA（miRNA）差异表达谱，为研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用提供基础。方法 选取2013年1—4月于新疆医科大学第一附属医院行肝癌根治治疗的慢性乙型肝炎肝硬化合并肝癌患者9例。利用Trizol法提取肝癌组织和配对的肝硬化组织细胞中的总RNA，分光光度计NanoDropND-1000 进行定量，变性凝胶电泳分析提取总RNA质量。利用芯片技术对提取的RNA经miRNA芯片进行杂交，结果经扫描读数，Significance Analysis of Microarrays 3.02软件挑选差异表达基因，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（PCR）验证芯片的结果。结果 肝癌组和肝硬化组中共筛选出15个差异表达的miRNA，其中有7个基因在肝癌中上调表达，分别为hsa-miR-1269，hsa-miR-18a，hsa-miR-1180，hsa-miR-1301，hsa-miR-182，hsa-miR-222，hsa-miR-362-5p；8个基因在肝癌中表达下调，分别为hsa-miR-99a，hsa-miR-10a，hsa-miR-30a，hsa-miR-30e，hsa-miR-139-5p，hsa-miR-422a，hsa-miR-199a-3p，hsa-miR-199b-3p。实时荧光定量逆转录PCR验证结果显示，上调表达基因miR-1269在肝癌组和肝硬化组中的平均表达丰度分别为12.1±4.0和16.7±2.4，差异有统计学意义（P=0.010）。下调表达基因miR-199b-3p在肝癌组和肝硬化组中的平均表达丰度分别为5.4±1.6和3.0±0.8，差异有统计学意义（P=0.003）。验证结果与miRNA微阵列芯片结果一致。结论 肝癌组织与肝硬化组织存在差异表达的miRNA；试验筛选出的差异表达基因与国内外文献报道有不同；这些上调和下调表达的miRNA可能参与了肝癌的发生。 展开更多

关键词 肝细胞癌 肝硬化 微小RNA芯片 基因表达

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人结直肠癌微小核糖核酸的差异表达及其临床意义 被引量：3

8

作者 陈卫昌 林茂松 +4 位作者 黄俊星 叶玉兰 郜恒骏 宋振云 沈晓莹 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第30期3187-3194,共8页

目的:研究人结直肠癌、腺瘤和癌旁正常组织中微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)的差异表达谱,并初步探讨其临床意义.方法:选取2008-01/07苏州大学附属第一医院和泰州市人民医院结直肠癌、对应癌旁正常组织以及结直肠腺瘤标本,提取组织总R... 目的:研究人结直肠癌、腺瘤和癌旁正常组织中微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)的差异表达谱,并初步探讨其临床意义.方法:选取2008-01/07苏州大学附属第一医院和泰州市人民医院结直肠癌、对应癌旁正常组织以及结直肠腺瘤标本,提取组织总RNA,采用illumina microRNA芯片技术检测3种不同类型组织中miRNAs的表达,采用实时定量PCR技术对芯片检测结果进行验证.将结直肠癌组织中异常表达的miRNAs与结直肠癌患者的临床病理资料进行分析.结果:3种不同类型结直肠组织中miRNAs表达有明显差异,结直肠癌与癌旁正常组织相比,有65个miRNAs表达异常(P<0.001),其中35个上调,30个下调,而腺瘤与正常结直肠组织相比,有55个miRNAs表达差异(P<0.001),其中上调29个,下调26个.有25个miRNAs相对于正常组织同时在结直肠癌和腺瘤中异常表达,其中高表达12个,低表达有13个.与腺瘤相比,结直肠癌中有25个miRNAs表达异常(P<0.01),其中13个上调,12个下调.进一步定量PCR验证结果显示与正常结直肠黏膜组织相比,在癌组织中miR-552,miR-142-3p上调(2.97±2.72vs0.98±0.48;3.64±3.41vs1.31±0.61,均P<0.05),miR-139-3p和miR-133b下调(0.10±0.26vs0.82±0.70,0.81±0.67vs1.71±1.29,均P<0.05),与芯片结果相吻合.miR-552和miR-139-3p与结直肠癌患者年龄、性别、组织学、肿瘤大小和浸润深度无关(P>0.05),而miR-552与TNM分期、淋巴结和肝转移相关(P<0.05),miR-139-3p与TNM分期和肝转移相关(P<0.05),miR-142-3p除与组织学有关外,与其他临床病理参数无关,miR-133b与年龄相关,而与其他临床病理参数无关.结论:miRNAs参与了结直肠的癌变过程,特异的miRNAs的表达可能成为结直肠癌潜在的早期诊断和治疗新靶点. 展开更多

关键词 结直肠癌 微小核糖核酸芯片 微阵列 实时定量聚合酶链式反应

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microRNA在两种不同来源的肝卵圆细胞中的差异表达 被引量：2

9

作者 许荣华 何冬雷 +2 位作者 孟津 夏立平 王健 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期4879-4882,共4页

目的分离纯化两种不同模型来源的卵圆细胞(HOCs)并初步筛选差异表达的microRNA。方法采用2-乙酰氨基芴(2-AAF)和2/3肝切除(PH)建立SD大鼠HOCs增殖模型,用化学致癌剂3'-甲基-4-二甲基偶氮苯(3'-Me-DAB)诱发SD大鼠肝卵圆细胞增生... 目的分离纯化两种不同模型来源的卵圆细胞(HOCs)并初步筛选差异表达的microRNA。方法采用2-乙酰氨基芴(2-AAF)和2/3肝切除(PH)建立SD大鼠HOCs增殖模型,用化学致癌剂3'-甲基-4-二甲基偶氮苯(3'-Me-DAB)诱发SD大鼠肝卵圆细胞增生模型;分离纯化并鉴定两种不同模型来源的大鼠肝卵圆细胞;用microRNA芯片技术检测HOCs/AAF与HOCs/DAB中microRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA进行验证。结果 1激光扫描共聚焦显微镜显示,两种肝卵圆细胞胞质和胞膜均表达干细胞标志Thy-1及C-kit。2microRNA芯片的结果显示,HOCs/DAB与HOCs/AAF比较,有10个microRNA表达上调,8个microRNA表达下调。3实时荧光定量PCR结果进一步证实mir-210、mir92b、mir-1281在HOCs/DAB中显著上调,而mir-181、mir-1228显著下调。结论两种不同模型来源的肝卵圆细胞存在着显著差异表达的microRNA,为研究肝癌细胞可能来源于肝卵圆细胞HOCs/DAB提供线索。 展开更多

关键词 肝卵圆细胞 分化 MICRORNA 微小RNA芯片

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大鼠成骨细胞微小RNAs的筛选研究 被引量：2

10

作者 潘欣 曾思良 +6 位作者 梁兴伦 嵇承栋 周文博 周文锐 李琛 朱敏洁 沈琪 《转化医学杂志》 2017年第2期68-73,共6页

目的应用微小RNAs(microRNAs,miRNAs)芯片技术筛选补肾方含药血清干预大鼠成骨细胞后差异表达的miRNAs,与前期获得的软骨细胞差异miRNAs比较,筛选出共有差异miRNAs,以探讨补肾方通过共有miRNAs调控靶基因表达发挥治疗效应的机制。方法... 目的应用微小RNAs(microRNAs,miRNAs)芯片技术筛选补肾方含药血清干预大鼠成骨细胞后差异表达的miRNAs,与前期获得的软骨细胞差异miRNAs比较,筛选出共有差异miRNAs,以探讨补肾方通过共有miRNAs调控靶基因表达发挥治疗效应的机制。方法原代培养的大鼠成骨细胞经碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色和矿化结节染色鉴定后,用补肾方含药血清干预成骨细胞,在给定时间点收获细胞,抽提纯化总RNAs行miRNAs芯片检测,并挑选差异表达4倍以上的miRNAs行实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应验证。结果所培养的原代细胞具有典型的成骨细胞形态和功能,碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色和矿化结节染色均为阳性。与补肾方含药血清干预成骨细胞1 d相比,干预6 d的共有229个2倍以上表达差异的miRNAs,其中上调的52个、下调的177个。差异表达4倍以上的miRNAs实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应结果与芯片数据一致。与前期软骨细胞差异miRNAs芯片数据比较,miRNAs均上调2倍以上的有8个、下调4倍以上的2个。结论补肾方含药血清干预成骨细胞获得了一套较为特异的miRNAs,初步预测上调的miRNAs可能通过靶向Runx2、Wnt、Notch、Axin2等基因在骨发育、骨形态发生、骨吸收以及软骨内成骨形成等相关的信号通路中发挥作用。 展开更多

关键词 补肾方 成骨细胞 微小RNAs芯片 差异表达 大鼠

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大鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中微小RNA表达谱变化 被引量：2

11

作者 周亚星 杨晓俊 +1 位作者 徐泽宽 吴文溪 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期703-706,共4页

目的观察树突状细胞（Dc）成熟过程中微小RNA（miRNA）表达谱的变化。方法将大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC）用脂多糖（LPS）刺激，分别于O、12、24h后提取总RNA，进行miRNA芯片杂交，应用生物信息学方法进行miRNA表达谱数据分... 目的观察树突状细胞（Dc）成熟过程中微小RNA（miRNA）表达谱的变化。方法将大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC）用脂多糖（LPS）刺激，分别于O、12、24h后提取总RNA，进行miRNA芯片杂交，应用生物信息学方法进行miRNA表达谱数据分析。结果与未受LPS刺激的imDC比较，刺激12h之后的DC有54种miRNA的表达出现显著改变，其中44种miRNA表达下调2倍以上，10种表达上调2倍以上；与未刺激的imDC比较，刺激24h之后的DC有92种miRNA的表达出现显著改变，其中52种miRNA表达下调2倍以上，40种表达上调2倍以上。挑选不同时相表达变化显著的19个miRNA做靶基因预测，发现同时被3个miRNA作用的靶基因有4个（WEEl、CHKA、CDC37L1、RGDl359108）。结论DC的成熟过程中，miRNA表达谱出现显著变化，推测其中某些miRNA在DC成熟过程中扮演重要角色。 展开更多

关键词 微小RNA芯片 骨髓 树突状细胞 成熟

原文传递

肺腺癌相关微小RNA的筛选及其功能研究 被引量：2

12

作者 银瑞 董新伟 王铮 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期115-117,共3页

目的筛选肺腺癌密切相关的微小RNA（miRNA，miR），为进一步研究其在肺腺癌发病机制中的作用奠定基础。方法收集肺腺癌及相应癌旁组织各4例，抽取总RNA，利用miRNA芯片技术，检测4例肺腺癌及其相应癌旁组织中miRNA的表达；采用实时定量... 目的筛选肺腺癌密切相关的微小RNA（miRNA，miR），为进一步研究其在肺腺癌发病机制中的作用奠定基础。方法收集肺腺癌及相应癌旁组织各4例，抽取总RNA，利用miRNA芯片技术，检测4例肺腺癌及其相应癌旁组织中miRNA的表达；采用实时定量反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法验证miRNA芯片结果的可靠性；利用靶基因预测软件预测肺腺癌相关miRNA可能调控的靶基因，并初步分析其生物学功能。结果相对于癌旁组织，肺腺癌标本中有hsa—miR-155、hsa—miR-21、hsa—miR-550、hsa．miR-939、hsa—miR-30c-1、hsa-miR-146b-3p、hsa-miR-223和hsa—miR-194等8个miRNAs表达显著上调，差异倍数分别为82．72、38．51、16．06、9．69、3．27、3．14、2．65、2．18。hsa-miR-145、hsa-miR-339-5p、hsa-miR-203和hsa—miR-205等4个miRNAs表达显著下调，差异倍数分别为15．12、10．28、5．17、3．78。结论筛选得到的与肺腺癌关系密切的miRNA，可能在肺腺癌发生发展过程起重要的调控作用。 展开更多

关键词 肺腺癌 微小RNA芯片

原文传递

原发性IgA肾病中微小RNA的差异表达研究

13

作者 眭维国 蓝慧娟 +6 位作者 晏强 邹贵勉 李飞 郑艺花 黄河 陈洁晶 戴勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期265-268,共4页

目的借助微小RNA(microRNA,miRNA)芯片研究IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)中miRNA的差异表达。方法收集11例IgAN患者肾穿标本作为IgAN组,3例镜下病理检查正常的肾皮质作为对照组。使用Trizol试剂提取每组总RNA,分离miRNA,采用miRNA芯片... 目的借助微小RNA(microRNA,miRNA)芯片研究IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)中miRNA的差异表达。方法收集11例IgAN患者肾穿标本作为IgAN组,3例镜下病理检查正常的肾皮质作为对照组。使用Trizol试剂提取每组总RNA,分离miRNA,采用miRNA芯片筛选出差异表达显著的miRNA,荧光实时定量PCR(Real-timePCR)技术验证芯片结果的可靠性。结果IgAN组中miRNA表达出现显著差异的有66个,其中表达显著上调35个,显著下调31个。挑选hsa-miR-637、hsa-miR-492进行Real-timePCR相对定量检测,结果显示2个miRNA的表达趋势与芯片结果相符,证明了芯片结果的可靠性。结论IgAN是一种经典的多因素、多基因病,本实验通过芯片技术表明miRNA在IgAN中出现显著差异表达。 展开更多

关键词 微小RNA表达 微小RNA芯片 IGA肾病

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大鼠肝卵圆细胞向肝癌细胞分化过程中microRNA的变化 被引量：1

14

作者 许荣华 何冬雷 +2 位作者 孟津 夏立平 王健 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1-6,共6页

目的利用生物芯片技术分析大鼠肝卵圆细胞分化为肝癌细胞过程中微小RNA(microRNA,miRNA)的表达变化,筛选调控分化的microRNAs,探讨肝癌发生的起源机制。方法用化学致癌剂3’-Me-DAB诱发SD大鼠肝卵圆细胞增生,采用密度梯度离心法分离、... 目的利用生物芯片技术分析大鼠肝卵圆细胞分化为肝癌细胞过程中微小RNA(microRNA,miRNA)的表达变化,筛选调控分化的microRNAs,探讨肝癌发生的起源机制。方法用化学致癌剂3’-Me-DAB诱发SD大鼠肝卵圆细胞增生,采用密度梯度离心法分离、纯化肝卵圆细胞,行体外培养使其恶性分化并进行鉴定。提取分化过程中的microRNA进行microRNA基因芯片杂交,获得卵原细胞恶性分化过程中microRNA表达谱。同时利用种植模型及大鼠Y染色体特异性PCR技术,验证卵圆细胞可恶性分化为肝癌细胞。结果①激光扫描共聚焦显微镜显示,肝卵圆细胞胞浆和胞膜表达干细胞标志Thy-1及C-kit;②通过基因微阵列分析,卵原细胞恶性分化过程中有22个miRNA的改变显著,其中19个表达上调,3个表达下调;③卵原细胞种植模型的大鼠肝癌组织具有SRY基因的电泳条带。结论特定microRNA可能对大鼠肝卵圆细胞分化为肝癌细胞过程起到关键作用。 展开更多

关键词 肝卵圆细胞 分化 MICRORNA 微小RNA芯片

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参苈加颗粒对慢性心力衰竭大鼠心肌巨噬细胞衍生趋化因子表达的影响 被引量：1

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作者 孙许涛 解颖 +2 位作者 陈飞 姜德友 韩洁茹 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期2516-2518,2528,共4页

目的筛选并分析参苈加颗粒调控慢性心力衰竭大鼠心肌巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)相关的微小RNA(micRNA)的作用。方法 Wistar大鼠腹腔注射阿霉素(按1. 5 mg·kg^(-1)腹腔注射,6周)复制心力衰竭大鼠模型。按照体重将成模大鼠随机分为... 目的筛选并分析参苈加颗粒调控慢性心力衰竭大鼠心肌巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)相关的微小RNA(micRNA)的作用。方法 Wistar大鼠腹腔注射阿霉素(按1. 5 mg·kg^(-1)腹腔注射,6周)复制心力衰竭大鼠模型。按照体重将成模大鼠随机分为实验组(给予参苈加颗粒,2. 1 g·kg^(-1)d,4周)和模型组(给予等体积0. 9%NaCl)。用基因芯片分析MDC相关micRNA。以荧光定量-聚合酶链反应测定相关micRNA表达水平。结果参苈加颗粒能够显著良性调控2组共相关的MDC差异表达micRNA共4个:miRNA-3593-3p、miRNA-6332、miRNA-1199-5p和miRNA-328-5p。4个micRNA差异表达真实存在,实验组、模型组与正常组的miRNA-3593-3p表达值分别为2. 15±0. 29,3. 66±0. 90,1. 00±0. 30;这3组的miRNA-6332表达值分别为2. 54±1. 34,3. 64±0. 90,1. 00±0. 35;这3组的miRNA-1199-5p表达值分别为1. 16±0. 24,2. 72±1. 05,1. 00±0. 30;这3组的miRNA-328-5p表达值分别为3. 76±0. 84,7. 16±1. 60,1. 00±0. 24,模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论参苈加颗粒可能通过调节MDC相关micRNA的表达,对心力衰竭大鼠心脏起保护作用。 展开更多

关键词 微小RNA芯片 参苈加颗粒 心力衰竭大鼠 巨噬细胞衍生趋化因子

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基于微小RNA表达谱的甲状腺髓样癌关键调节微小RNA筛选 被引量：1

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作者 李国庆 丁超 +2 位作者 孙文聪 张济 苏自杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1133-1136,共4页

目的通过生物信息学分析观察40例甲状腺髓样癌患者的癌组织与癌旁组织的微小RNA（miRNAs，miR）表达谱变化，从而寻找疾病相关的重点miRNAs及其靶基因。方法从Gene Expression Omnibus（GEO）中下载甲状腺髓样癌患者的基因表达数据表达... 目的通过生物信息学分析观察40例甲状腺髓样癌患者的癌组织与癌旁组织的微小RNA（miRNAs，miR）表达谱变化，从而寻找疾病相关的重点miRNAs及其靶基因。方法从Gene Expression Omnibus（GEO）中下载甲状腺髓样癌患者的基因表达数据表达芯片原始数据GSE40807。首先比较了两种样本的差异表达miRNA，利用数据库预测出差异表达miRNA的靶基因，随后分析了这些靶基因的功能及参与的代谢通路，并构建了靶基因之间的互作网络及靶基因与转录因子的调控网络。结果与正常甲状腺比较，在甲状腺髓样癌中，有21个miRNAs表达发生了显著变化，其中18个miRNAs表达上调和3个miRNAs下调。利用11个预测靶基因数据库得到336个miRNA-靶基因关系对，对这些靶基因进行STRING蛋白互作网络分析，得到230个节点和491个关系对。此外对这些靶基因进行TF预测和调控网络构建，得到7个转录因子、156个节点和300个关系树。结论通过生物信息方法系统分析了甲状腺髓样癌相关miRNA表达谱及相关靶基因，筛选到miR-124、miR-7和miR-129-5作为甲状腺髓样癌的相关调节因子。 展开更多

关键词 甲状腺髓样癌 靶基因 微小RNA芯片

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