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壳聚糖-海藻酸钠微囊对干扰素-tau的控释作用 被引量：6
1
作者 付加雷 宋长征 张更林 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2006年第5期28-30,共3页
目的用壳聚糖和海藻酸钠为原料,制备干扰素-tau微囊,希望开发成为一种口服干扰素制剂。方法使用注射器手工滴制的方法,在滴加过程中,速度和距离是影响囊形的主要因素。结果壳聚糖-海藻酸钠微囊法应用于干扰素-tau药物的包封,其制备简单... 目的用壳聚糖和海藻酸钠为原料,制备干扰素-tau微囊,希望开发成为一种口服干扰素制剂。方法使用注射器手工滴制的方法,在滴加过程中,速度和距离是影响囊形的主要因素。结果壳聚糖-海藻酸钠微囊法应用于干扰素-tau药物的包封,其制备简单快速,干扰素-tau包封率很高,并且具有肠溶缓释作用。结论壳聚糖-海藻酸钠微囊有望用作干扰素-tau或其它肽类药物的口服制剂。 展开更多
关键词 干扰素-tau 壳聚糖 海藻酸钠 包封率 微囊
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干扰素-tau微囊的制备工艺优化 被引量：8
2
作者 付加雷 宋长征 张更林 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2007年第6期378-381,共4页
目的用壳聚糖和海藻酸钠为原料,制备干扰素-tau微囊。方法采用凝聚法制备了干扰素-tau壳聚糖-海藻酸钠微囊,以包封率、微囊强度为指标,设立总的评估指数,用L9(34)表进行正交实验优化制备工艺。结果最终的优化方案为:2.0%海藻酸钠、0.4%... 目的用壳聚糖和海藻酸钠为原料,制备干扰素-tau微囊。方法采用凝聚法制备了干扰素-tau壳聚糖-海藻酸钠微囊,以包封率、微囊强度为指标,设立总的评估指数,用L9(34)表进行正交实验优化制备工艺。结果最终的优化方案为:2.0%海藻酸钠、0.4%壳聚糖、0.3%干扰素-tau以及1.0%氯化钙溶液。结论该工艺简便、稳定,壳聚糖-海藻酸钠微囊有望用作干扰素-tau或其它蛋白质药物的口服制剂技术。 展开更多
关键词 干扰素-tau 壳聚糖 海藻酸钠 包封率 微囊
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干扰素-tau的原核表达、纯化和活性测定 被引量：6
3
作者 付加雷 宋长征 张更林 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期6-11,共6页
干扰素-tau(IFN-tau)是一种新发现的I型干扰素,为了更清楚地研究它的生物学功能,在已克隆IFN-tau cDNA的基础上,PCR扩增出IFN-tau ORF,与原核表达载体pBV220重组后,成功地构建了IFN-tau的原核表达质粒pBV220/IFN-tau。重组质粒转化大肠... 干扰素-tau(IFN-tau)是一种新发现的I型干扰素,为了更清楚地研究它的生物学功能,在已克隆IFN-tau cDNA的基础上,PCR扩增出IFN-tau ORF,与原核表达载体pBV220重组后,成功地构建了IFN-tau的原核表达质粒pBV220/IFN-tau。重组质粒转化大肠杆菌BL21,该菌经过诱导,用凝胶过滤色谱层析的方法获得了纯化的目的蛋白,该蛋白经过氨基酸序列分析证实是IFN-tau;用细胞病变抑制法测定IFN-tau经过透析复性后的活性为2.09×106IU/ml,比活性为2.35×106IU/mg。 展开更多
关键词 干扰素-tau 原核表达 纯化
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重组干扰素-tau在大肠杆菌中的高效表达 被引量：2
4
作者 付加雷 宋长征 张更林 《食品与药品》 CAS 2006年第11A期35-38,共4页
目的研究重组干扰素-tau的纯化和复性。方法将构建好的重组质粒pBV220转化E.coli BL21,发酵培养后迅速升温至42℃诱导干扰素-tau以包涵体的形式高效表达。裂菌后利用8mol/L尿素溶解目的蛋白质,经凝胶过滤色谱层析纯化后,再透析复性。结... 目的研究重组干扰素-tau的纯化和复性。方法将构建好的重组质粒pBV220转化E.coli BL21,发酵培养后迅速升温至42℃诱导干扰素-tau以包涵体的形式高效表达。裂菌后利用8mol/L尿素溶解目的蛋白质,经凝胶过滤色谱层析纯化后,再透析复性。结果干扰素-tau的表达量占菌体总蛋白质量的20%以上,纯化后纯度可达9 6%以上,活性得到有效恢复。结论建立了干扰素-tau纯化及复性的方法,获得了高表达、高纯度、有活性的干扰素-tau。 展开更多
关键词 干扰素-tau 高效表达 活性
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精氨酸对干扰素-tau处理牛子宫内膜上皮细胞基因表达的影响
5
作者 余婕 胡修忠 +6 位作者 向敏 王定发 陶弼菲 夏瑜 陶虎 熊琪 程蕾 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第7期2495-2503,共9页
试验旨在研究精氨酸(Arg)对干扰素-tau(interferon-tau,IFNT)处理的牛子宫内膜上皮细胞的调控作用及其可能的机制。将牛子宫内膜上皮细胞接种至6孔细胞培养板中,当达到70%~80%融合度时,向细胞培养基中加入不同浓度的IFNT(0、100 ng/mL),... 试验旨在研究精氨酸(Arg)对干扰素-tau(interferon-tau,IFNT)处理的牛子宫内膜上皮细胞的调控作用及其可能的机制。将牛子宫内膜上皮细胞接种至6孔细胞培养板中,当达到70%~80%融合度时,向细胞培养基中加入不同浓度的IFNT(0、100 ng/mL),12 h后收集细胞检测未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)通路相关基因的表达情况;用不同浓度(0、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2 mmol/L)Arg处理牛子宫内膜上皮细胞,24 h后用CCK8法检测其对增殖率的影响,筛选出Arg的最佳作用浓度;将子宫内膜上皮细胞随机分为Arg饥饿组、Arg饥饿+IFNT处理组、Arg添加+IFNT处理组,在Arg饥饿或添加处理6 h后加入100 ng/mL IFNT,IFNT处理12 h后检测UPR通路(BiP、PERK、CHOP、ATF6)、凋亡(BAX、Caspase9)和容受性(HOXA10)相关基因表达情况。结果显示,IFNT刺激可诱导牛子宫内膜上皮细胞UPR通路相关基因BiP、PERK、CHOP、ATF6的表达显著上调;0.5 mmol/L Arg可显著提高牛子宫内膜上皮细胞的增殖率(P<0.05);Arg缺失可显著上调IFNT诱导下牛子宫内膜上皮细胞中BiP、PERK、CHOP、ATF6和BAX基因mRNA的表达(P<0.05),并显著下调HOXA10基因mRNA的表达(P<0.05),但对Caspase9基因mRNA表达无显著影响(P>0.05)。结果表明,Arg缺失可导致牛子宫内膜上皮细胞发生内质网应激,并影响子宫内膜宫受性的建立,可为进一步揭示Arg对牛子宫内膜的调控机制及制定减少妊娠早期胚胎丢失的营养调控策略提供参考。 展开更多
关键词 精氨酸(Arg) 干扰素-tau 牛子宫内膜上皮细胞 未折叠蛋白反应
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干扰素-Tau的生物活性及研究进展 被引量：1
6
作者 霍畅媛 刘宝山 何剑斌 《畜禽业》 2010年第4期24-25,共2页
干扰素-Tau(IFN-τ)作为从反刍动物体内发现的一种新型干扰素,具有抗黄体溶解、免疫调节、低细胞毒性等生物学功能,特别是对反转录病毒抑制的高度特异性。IFN-τ在胚胎滋养层细胞中表达,无需病毒诱导;该文对IFN—τ的结构、生物功能及... 干扰素-Tau(IFN-τ)作为从反刍动物体内发现的一种新型干扰素,具有抗黄体溶解、免疫调节、低细胞毒性等生物学功能,特别是对反转录病毒抑制的高度特异性。IFN-τ在胚胎滋养层细胞中表达,无需病毒诱导;该文对IFN—τ的结构、生物功能及研究进展一一作了描述。 展开更多
关键词 干扰素-tau(IFN—τ) 生物学活性 研究进展
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荷斯坦奶牛干扰素tau基因的克隆表达及生物活性分析
7
作者 张灿 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第9期11-14,共4页
为了研究荷斯坦奶牛干扰素tau(IFN-tau)的生物学活性,从外周血淋巴细胞克隆得到BoIFNtau基因,并进行进化分析。诱导重组质粒pET/BoIFN-tau在大肠埃希菌BL21中进行表达,获得分子质量为23ku的重组蛋白BoIFN-tau。纯化后的重组蛋白BoIFN-ta... 为了研究荷斯坦奶牛干扰素tau(IFN-tau)的生物学活性,从外周血淋巴细胞克隆得到BoIFNtau基因,并进行进化分析。诱导重组质粒pET/BoIFN-tau在大肠埃希菌BL21中进行表达,获得分子质量为23ku的重组蛋白BoIFN-tau。纯化后的重组蛋白BoIFN-tau用MDBK/VSV系统检测其抗病毒活性为1.09×105 IU/mL;半定量PCR法检测发现BoIFN-tau诱导产生的Mx-1和OAS表达量增加。结果表明获得了具有抗病毒活性的重组BoIFN-tau蛋白。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 干扰素tau 原核表达 生物活性
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羊干扰素Tau基因克隆与序列分析
8
作者 王晓佳 刘成 +2 位作者 柏亚铎 夏春 汪明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第8期3-5,共3页
本文应用 PCR扩增技术 ,以国外已发表羊干扰素 Tau(IFN- τ)基因序列为基础设计引物 ,在国内首次从北京绵羊、南江黄羊这两种国产羊的血液中分别扩增出 IFN- τ基因 ,并将 IFN- τ基因插入 PQE- 30载体构建重组质粒 ,经 PCR鉴定及 Sph ... 本文应用 PCR扩增技术 ,以国外已发表羊干扰素 Tau(IFN- τ)基因序列为基础设计引物 ,在国内首次从北京绵羊、南江黄羊这两种国产羊的血液中分别扩增出 IFN- τ基因 ,并将 IFN- τ基因插入 PQE- 30载体构建重组质粒 ,经 PCR鉴定及 Sph 、H ind 双酶切鉴定证实为羊 IFN- τ基因的重组质粒。重组表达质粒测序结果表明 IFN- τ(p3)基因全长 5 16 bp,编码 172个氨基酸。实验发现 ,从北京绵羊、南江黄羊扩增出来的 IFN- τ基因序列与已发表的序列相比 ,其碱基同源性分别为 96 .3%、99.0 4 % ,氨基酸同源性分别为 :92 .4 %、97.1%。 展开更多
关键词 羊干扰素tau基因 基因克隆 序列分析 PCR
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