通过胚胎干细胞途径获得的嵌合体小鼠中neo基因在各组织中的分布 被引量：2

1

作者 姚玉成 熊俊 +2 位作者 王新民 李建秀 胡以平 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1116-1119,T001,共5页

为探讨小鼠胚胎干细胞参与早期胚胎发育的潜能 ,以neo基因作为目的基因进行了胚胎干细胞的转染 ,经G41 8的筛选 ,获得表达neo基因的单克隆细胞 ,挑取部分克隆扩大 ,进行小鼠囊胚腔注射 ,再重新植入小鼠子宫 ,共注射了 60个囊胚 ,分别回... 为探讨小鼠胚胎干细胞参与早期胚胎发育的潜能 ,以neo基因作为目的基因进行了胚胎干细胞的转染 ,经G41 8的筛选 ,获得表达neo基因的单克隆细胞 ,挑取部分克隆扩大 ,进行小鼠囊胚腔注射 ,再重新植入小鼠子宫 ,共注射了 60个囊胚 ,分别回输到 5只假孕小鼠 ,在子代中得到了携带有neo基因的嵌合体小鼠。通过对嵌合体小鼠各组织PCR分析发现 ,neo基因可以在皮肤、肝脏。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 neo基因 嵌合体小鼠 组织分布

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c-Myc对诱导性多能干细胞的诱导效率及全能性影响的研究 被引量：3

2

作者 魏小元 徐雍羽 +1 位作者 王敏 张儒 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期430-437,共8页

该研究探讨转录因子c-Myc对多能诱导干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)诱导效率及形成的iPS克隆全能性的影响。将Yamanaka四因子(Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc,OSKM)和不含c-Myc的三因子(OSK)病毒分别感染OG2小鼠成纤维细胞(mouse... 该研究探讨转录因子c-Myc对多能诱导干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)诱导效率及形成的iPS克隆全能性的影响。将Yamanaka四因子(Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc,OSKM)和不含c-Myc的三因子(OSK)病毒分别感染OG2小鼠成纤维细胞(mouse embryo fi broblast,MEF),诱导成为iPS细胞,通过计数iPS克隆形成数目和流式细胞仪分析iPS克隆的绿色荧光蛋白(GFP)阳性比例,比较OSKM和OSK诱导iPS的效率。分别挑取三株OSK和OSKM诱导的iPS克隆,采用荧光定量PCR法、碱性磷酸酶(AP)染色法和免疫荧光法检测iPS克隆的干性相关蛋白的表达;采用畸胎瘤实验、嵌合体形成实验和四倍体补偿实验检测iPS克隆的全能性。结果显示:在该实验室诱导体系里,OSK病毒感染MEF后形成的iPS克隆数目明显增多,GFP阳性克隆的比例增加。OSK和OSKM诱导iPS克隆的干细胞基本特征,包括形态、AP染色、干细胞特异性基因表达、三胚层形成均没有明显差异。然而,OSK诱导iPS克隆在形成嵌合体小鼠的全能性评估实验中的阳性比例高于OSKM克隆,且只有OSK克隆株能够获得生殖系传递小鼠和四倍体补偿小鼠。该研究表明,在实验诱导体系里去除c-Myc的三因子OSK诱导iPS的效率显著高于OSKM四因子,且三因子诱导iPS克隆具有更好的全能性。 展开更多

关键词 诱导多能干细胞 c—Myc 嵌合体小鼠 四倍体补偿小鼠

原文传递

囊胚注射转基因ES细胞制作嵌合体的研究 被引量：2

3

作者 付志新 刘宗平 +2 位作者 梁建兰 李善刚 陈学进 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期149-154,共6页

在小鼠胚胎成纤维细胞制作的饲养层上培养并成功的维持了携带LacZ基因的胚胎干细胞系（S8），在此基础上，以S8为供体细胞，以远交系昆明白小鼠3．5d胚胎为受体，通过显微注射法将供体细胞转移到受体的囊胚腔内，经过恢复培养，移植到... 在小鼠胚胎成纤维细胞制作的饲养层上培养并成功的维持了携带LacZ基因的胚胎干细胞系（S8），在此基础上，以S8为供体细胞，以远交系昆明白小鼠3．5d胚胎为受体，通过显微注射法将供体细胞转移到受体的囊胚腔内，经过恢复培养，移植到代孕鼠昆明白雌鼠的子宫中；后代在嵌合体出生一周后进行判定。本试验用8～13代的S8细胞共注射胚胎597枚，经1～3h恢复培养，有585枚胚胎重新具有膨大的囊胚腔，细胞轮廓分明，滋养层细胞间连接也清晰可见，胚胎成活率为97％；胚胎移植后，代孕母鼠共移植胚胎228枚，经17～19d的妊娠期后，产仔37只（2只死胎），产仔率为16％；有35只仔鼠（雄鼠18只，雌鼠17只）存活到可以判断毛色，共获得8只S8细胞毛色嵌合体小鼠，嵌合体的产生率为21．6％。结果表明用S8细胞经囊胚注射后能够获得嵌合体，并且嵌合体明显发生了性偏离现象。本试验为国内利用囊胚注射携带LacZ基因的胚胎干细胞获得嵌合体小鼠的首例报道。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 囊胚注射 LACZ基因 胚胎移植 嵌合体小鼠

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制备嵌合体小鼠实验中ES细胞的处理方法 被引量：1

4

作者 王惟 于洋 +2 位作者 张梅英 王禄增 郑志红 《实验动物与比较医学》 CAS 2008年第6期404-405,415,共3页

目的介绍两种制备嵌合体小鼠实验中ES细胞的处理方法。方法一种为差速贴壁分离法即消化后的ES细胞接种在明胶包被的平皿中,利用饲养层细胞与ES细胞贴壁速度的不同来分离ES细胞;另一种方法为冰水浴自然沉淀分离法,即消化后的ES细胞移入1... 目的介绍两种制备嵌合体小鼠实验中ES细胞的处理方法。方法一种为差速贴壁分离法即消化后的ES细胞接种在明胶包被的平皿中,利用饲养层细胞与ES细胞贴壁速度的不同来分离ES细胞;另一种方法为冰水浴自然沉淀分离法,即消化后的ES细胞移入15ml离心管中冰水浴,利用细胞间自然沉淀的位置不同分离ES细胞。结果两种方法均可得到足够数量处于未分化状态的ES细胞。结论这两种方法都可以应用于制备嵌合体小鼠实验中的ES细胞处理。 展开更多

关键词 嵌合体小鼠 ES细胞 实验 差速贴壁分离法

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四倍体胚胎发育阶段对胚胎干细胞嵌合体小鼠制备的影响 被引量：2

5

作者 吴兴龙 张鹏 +3 位作者 赵虎 王鹏博 胡春超 李相运 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期690-694,共5页

目的探讨四倍体胚胎发育阶段对胚胎干细胞(ES)嵌合体小鼠制备的影响。方法通过2-细胞胚胎电融合法制备四倍体胚胎,采用显微注射方法将ES细胞分别注入1-细胞、4-细胞、囊胚3个发育阶段的四倍体胚胎中。所用ES细胞分别为杂交系B6D2F1×... 目的探讨四倍体胚胎发育阶段对胚胎干细胞(ES)嵌合体小鼠制备的影响。方法通过2-细胞胚胎电融合法制备四倍体胚胎,采用显微注射方法将ES细胞分别注入1-细胞、4-细胞、囊胚3个发育阶段的四倍体胚胎中。所用ES细胞分别为杂交系B6D2F1×129/Sv和近交系C57BL/6J,经胚胎移植和剖腹产以获得ES小鼠。结果实验表明,2-细胞胚胎电融合率为92.45%,4-细胞胚胎发育率为93.51%,囊胚发育率为90.42%。杂交ES细胞注射四倍体囊胚获得22只ES小鼠,效率显著高于近交系ES细胞以及其他发育阶段的四倍体胚胎,ES小鼠与B6D2F1×129/Sv杂交小鼠毛色一致且具有正常生殖能力。结论四倍体胚胎的发育阶段显著影响ES小鼠的制备。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 四倍体胚胎 电融合 显微注射 嵌合体小鼠

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乙型肝炎病毒感染动物模型研究进展 被引量：1

6

作者 李军 刘宏利 +4 位作者 韩超 熊传奇 曾兴光 韩俊峰 吴玉章 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期829-832,共4页

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染严重影响人类健康。稳定、可靠的HBV感染动物模型对于HBV感染致病机制的研究和干预措施的研发有重要意义。HBV有很强的宿主选择性,长期以来黑猩猩是唯一的HBV感染动物模型,但黑猩猩的使用受到... 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染严重影响人类健康。稳定、可靠的HBV感染动物模型对于HBV感染致病机制的研究和干预措施的研发有重要意义。HBV有很强的宿主选择性,长期以来黑猩猩是唯一的HBV感染动物模型,但黑猩猩的使用受到严格的伦理限制。人们尝试了很多方法以建立HBV感染的小型动物模型。树鼩是唯一可被HBV感染的非灵长类动物。与HBV相关的鸭肝炎病毒和土拨鼠肝炎病毒感染模型的应用推动了对HBV复制机制的认识和治疗方法的评价。近年来发展的人-鼠嵌合体模型则使得人们得以利用常规的实验动物开展HBV研究。这些模型存在各自的优缺点,在某些方面可以互补。本文就目前常用的HBV感染动物模型作一概述。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 动物模型 树鼩 嵌合体小鼠

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狩猎、野生动物驯养

7

《中国农业文摘（畜牧）》 2002年第6期48-54,共7页

S863 20022866黑龙江省湿地现状及保护对策/陶金,李明,里源//野生动物,-2002,23(1).-20～23土地及野生动物保护的对策:(1)加强组织领导,建立健全湿地保护管理机构。(2)增加资金投入,加强基础建设。(3)加强法制建设,执法力度。(4)尽快解... S863 20022866黑龙江省湿地现状及保护对策/陶金,李明,里源//野生动物,-2002,23(1).-20～23土地及野生动物保护的对策:(1)加强组织领导,建立健全湿地保护管理机构。(2)增加资金投入,加强基础建设。(3)加强法制建设,执法力度。(4)尽快解决乌裕尔河下游、扎龙湿地缺水问题。 展开更多

关键词 试验组 野生动物保护 雌二醇 成活率 小鼠胚胎 经济动物 中国农业科学 胚胎卵巢 嵌合体小鼠 体外培养

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来源于胚胎干细胞的嵌合体小鼠自发性肿瘤观察

8

作者 马芸 黄冰 +1 位作者 邓新燕 陈系古 《热带医学杂志》 CAS 2009年第3期269-271,F0004,共4页

目的观察胚胎干细胞(ES细胞)囊胚腔注射的方法构建嵌合体小鼠自发性肿瘤。方法连续80周每周观察嵌合体小鼠的肿瘤发生情况,选取同龄相关品系小鼠各10只作为对照组。处死发生肿瘤的小鼠并且病理学检查,提取肿瘤组织的基因组DNA,用PCR方... 目的观察胚胎干细胞(ES细胞)囊胚腔注射的方法构建嵌合体小鼠自发性肿瘤。方法连续80周每周观察嵌合体小鼠的肿瘤发生情况,选取同龄相关品系小鼠各10只作为对照组。处死发生肿瘤的小鼠并且病理学检查,提取肿瘤组织的基因组DNA,用PCR方法检测性别决定区(SRY)基因判断肿瘤的品系来源。结果13只嵌合体小鼠中有3只(全为雌性)发生自发性肿瘤,分别为腺癌、皮下恶性畸胎瘤、淋巴瘤。肿瘤细胞来源于注射的ES细胞而非受体囊胚。对照组野生型小鼠未见肿瘤发生。结论ES细胞囊胚腔注射的方法构建嵌合体小鼠具有较高的自发肿瘤发生率,可作为自发性肿瘤动物模型。 展开更多

关键词 嵌合体小鼠 自发性肿瘤 胚胎干细胞

原文传递

环孢素A对稳定EBV诱发淋巴瘤模型的作用和意义 被引量：3

9

作者 尹志华 刘腾飞 +2 位作者 唐运莲 王丽江 甘润良 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期760-763,共4页

目的 :观察环孢素A(CSA)对huPBL SCID嵌合体小鼠发生移植物和抗宿主反应 (GVHR)的抑制作用 ,建立稳定的EBV诱发淋巴瘤动物模型。方法 :从健康成人新鲜外周血中分离出淋巴细胞 ,将之移植到SCID小鼠腹腔中 ,实验感染EB病毒 ,腹腔注射CSA ... 目的 :观察环孢素A(CSA)对huPBL SCID嵌合体小鼠发生移植物和抗宿主反应 (GVHR)的抑制作用 ,建立稳定的EBV诱发淋巴瘤动物模型。方法 :从健康成人新鲜外周血中分离出淋巴细胞 ,将之移植到SCID小鼠腹腔中 ,实验感染EB病毒 ,腹腔注射CSA ,并采用ELISA检测小鼠血清中人sIL 2R水平。结果 :环孢素A组 (14只 )无 1只小鼠因GVHR而死亡 ,而其余 3组共 39只小鼠有 15只因GVHR而死亡 ,中位生存时间为 17d ,死亡率分别为 5 5 5 6 % (5 9例 )、30 4 3% (7 2 3例 )、4 2 86 %(3 7例 ) ,与环孢素A组比较差异有显著性意义。环孢素A组在不同时间sIL 2R含量较稳定 ,而实验感染组sIL 2R水平有逐渐升高趋势 ,环孢素A组与实验感染组同一时间比较 ,15d和 2 2d时sIL 2R水平有显著性差异 ,后者明显高于前者。渡过急性GVHR期而存活的 38只SCID小鼠中 ,共有 2 4只形成肿瘤。结论 :CSA可显著抑制hu PBL SCID嵌合体小鼠GVHR的发生 ,对稳定建立EBV诱发淋巴瘤动物模型具有重要的实际意义。 展开更多

关键词 环孢素A EBV 淋巴瘤 hu-PBL/SCID嵌合体小鼠 移植物抗宿主反应

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血源性巨噬细胞在小鼠视神经损伤中的作用 被引量：1

10

作者 郑晶晶 宋越 +2 位作者 李林 刁玉刚 鞠躬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期497-503,共7页

目的:探讨血源性巨噬细胞在小鼠视神经损伤中的作用。方法:首先用UBC-GFP小鼠(供体)和野生型小鼠(受体)制备骨髓嵌合体动物区分血源性巨噬细胞和小胶质细胞来源的巨噬细胞,免疫荧光组织化学染色观察视神经夹伤后血源性巨噬细胞在损伤区... 目的:探讨血源性巨噬细胞在小鼠视神经损伤中的作用。方法:首先用UBC-GFP小鼠(供体)和野生型小鼠(受体)制备骨髓嵌合体动物区分血源性巨噬细胞和小胶质细胞来源的巨噬细胞,免疫荧光组织化学染色观察视神经夹伤后血源性巨噬细胞在损伤区浸润及活化情况。其次利用CCR2 KO小鼠,上丘定位注射荧光金逆行标记视网膜节细胞(RGC),观察损伤区缺乏血液来源的巨噬细胞浸润时相应神经元胞体RGC的存活情况。结果:骨髓嵌合体小鼠显示视神经损伤区有大量的血源性巨噬细胞(Iba-1+GFP+)浸润、且此类细胞内多表达M2型巨噬细胞标记精氨酸酶1(arginase 1);CCR2 KO小鼠视神经夹伤后7 d同侧视网膜上存活RGC的数目明显少于野生型小鼠(P<0.01),其损伤区活化巨噬细胞(CD68+)的数目同野生型小鼠相比无明显差异(P>0.05),但CCR2 KO小鼠损伤区arginase 1的表达较野生型小鼠明显有所降低(P<0.001)。结论:视神经损伤后损伤区血液来源巨噬细胞不同于小胶质细胞,血液来源的巨噬细胞多向M2方向极化,表达arginase 1,对RGC存活具有保护作用。 展开更多

关键词 视神经夹伤 血源性单核巨噬细胞 精氨酸酶1 视网膜节细胞 骨髓嵌合体小鼠

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男子性机能障碍

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《国外科技资料目录（医药卫生）》 2000年第6期119-119,共1页

0021805 神经、雄生殖器系统突变种AMS(运动失调和雄性不育)小鼠:5.浦肯野氏细胞消失样式的嵌合体小鼠分析[日]/原田孝之//日病理会志.-1999,88(1).-W10～13

关键词 雄性不育 雄生殖器 浦肯野氏细胞 系统突变 运动失调 性机能障碍 嵌合体小鼠 神经 样式 男子

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