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NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态特征 被引量:8
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作者 陈鹏慧 蔡文琴 +1 位作者 王丽雁 吴喜贵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期31-34,共4页
目的研究NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态差异。方法应用免疫组化SABC法,观察成年大鼠大脑皮质、海马、齿状回、丘脑、下丘脑等区域NG2免疫反应阳性细胞。采用Image-Pro Plus5.0图像分析软件计数单位面积阳性细胞数量,并进行统... 目的研究NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态差异。方法应用免疫组化SABC法,观察成年大鼠大脑皮质、海马、齿状回、丘脑、下丘脑等区域NG2免疫反应阳性细胞。采用Image-Pro Plus5.0图像分析软件计数单位面积阳性细胞数量,并进行统计学分析。结果NG2胶质细胞在成年大鼠多个脑区均有表达,其中大脑皮质的灰质、白质,海马、齿状回,丘脑室下区、下丘脑室周区等区域表达比较集中。成年脑内NG2胶质细胞突起丰富、有较多分支,细胞体呈星形但是在各脑区形态不完全一致。结论NG2细胞是成年脑内另一类特殊胶质细胞,数量较多且一部分脑区集中表达。 展开更多
关键词 胶质细胞前体细胞 NG2胶质细胞 免疫组化 大鼠
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槲皮素促进CPZ诱导脱髓鞘模型小鼠髓鞘再生的作用机制研究 被引量:6
2
作者 于佳 孙雅琴 +2 位作者 赵晖 李康宁 王蕾 《国际中医中药杂志》 2020年第1期39-45,共7页
目的:观察槲皮素对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导脱髓鞘模型小鼠髓鞘再生的影响。方法:将50只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为正常组,模型组,槲皮素低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠给予0.2%CPZ饲料进行喂养... 目的:观察槲皮素对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导脱髓鞘模型小鼠髓鞘再生的影响。方法:将50只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为正常组,模型组,槲皮素低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠给予0.2%CPZ饲料进行喂养以诱导小鼠脱髓鞘模型。槲皮素低、中、高剂量组灌胃槲皮素溶液25、50、100 mg/kg,正常对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水,1次/d。连续灌胃5周,每周记录小鼠体重,并进行转棒实验。5周后取材,采用快蓝染色及透射电镜观察小鼠胼胝体髓鞘病理学改变,并计算G-ratios值;采用免疫荧光染色法测定小鼠胼胝体区髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和少突胶质细胞转录因子(oligodendrocyte transcription factor 2,Olig2)蛋白表达;采用Western blot法测定小鼠脑组织MBP与环核苷酸-3'磷酸水解酶(cyclic nucleotide-3'phosphate hydrolase,CNPase)蛋白表达。结果:第2~5周,与模型组比较,槲皮素中、高剂量组小鼠体重升高(P<0.01),转棒维持时间延长(P<0.01);与模型组比较,槲皮素低、中、高剂量组胼胝体脱髓鞘评分[(2.23±0.25)分、(1.50±0.15)分、(1.14±0.97)分比(2.83±0.18)分]降低(P<0.01)、G-ratio值[(0.75±0.05)、(0.75±0.08)、(0.73±0.08)比(0.87±0.05)]降低(P<0.01);槲皮素中、高剂量组小鼠胼胝体区MBP[(37.40±2.41)、(37.40±1.14)比(24.40±3.65)]、Olig2[(7.40±1.14)、(4.60±1.14)比(2.80±0.84)]阳性表达升高(P<0.05),脑组织MBP蛋白[(1.32±0.12)、(0.80±0.34)比(0.21±0.07)]、CNPase蛋白[(0.72±0.13)、(1.06±0.36)比(0.36±0.21)]表达升高(P<0.05)。结论:50、100 mg/kg剂量的槲皮素可减轻CPZ诱导的脱髓鞘模型小鼠的髓鞘损伤,促进髓鞘再生,有一定的神经保护作用。 展开更多
关键词 槲皮素 多发性硬化 脱髓鞘疾病 髓鞘再生 胶质细胞前体细胞 小鼠
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脑室旁白质软化 被引量:5
3
作者 高洁 侯新琳 《中国新生儿科杂志》 CAS 2013年第4期284-285,共2页
早产儿最常见的脑损伤为脑室旁白质局灶性坏死及神经胶质细胞增生,统称为脑室旁白质软化(periventricularleukomalacia,PVL)。PVL是造成早产儿脑性瘫痪的最主要因素。目前白质弥漫性改变被认为是更常见的损害表现形式。PVL主要发病... 早产儿最常见的脑损伤为脑室旁白质局灶性坏死及神经胶质细胞增生,统称为脑室旁白质软化(periventricularleukomalacia,PVL)。PVL是造成早产儿脑性瘫痪的最主要因素。目前白质弥漫性改变被认为是更常见的损害表现形式。PVL主要发病机制是少突胶质细胞前体细胞(premyelinatingoligodendrocyte,preOLs)的缺氧、缺血及感染。 展开更多
关键词 脑室旁白质软化 胶质细胞前体细胞 神经胶质细胞增生 灶性坏死 脑性瘫痪 发病机制 早产儿 PVL
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新生SD大鼠少突胶质细胞前体细胞的培养与分化 被引量:4
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作者 陈晓静 谢敏杰 《卒中与神经疾病》 2014年第1期11-13,22,共4页
目的 体外培养高纯度的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)以及分化成熟的少突胶质细胞(Oligodendrocytes,OLs).方法新生1 -2 d Sprague-Dawley(SD)大鼠的大脑皮层胶质细胞混合培养9d后采用恒温摇床振荡分... 目的 体外培养高纯度的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)以及分化成熟的少突胶质细胞(Oligodendrocytes,OLs).方法新生1 -2 d Sprague-Dawley(SD)大鼠的大脑皮层胶质细胞混合培养9d后采用恒温摇床振荡分离与差异贴壁方法并结合条件培养基纯化培养细胞.光学显微镜观察细胞形态;纯化培养3 d后免疫荧光染色鉴定细胞类型.结果 获得高纯度的少突胶质前体细胞以及成熟的少突胶质细胞,少突胶质前体细胞免疫荧光NG2+A2B5双标阳性,成熟少突胶质细胞免疫荧光MBP染色阳性.结论 采用恒温摇床振荡分离与差异贴壁法并结合条件培养基可以得到高纯度的少突胶质前体细胞以及成熟少突胶质细胞. 展开更多
关键词 胶质细胞前体细胞 胶质细胞 细胞培养 分化
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急性一氧化碳中毒对大鼠少突胶质细胞前体细胞活性及增殖能力的影响 被引量:5
5
作者 郭大志 冯园 潘树义 《中华航海医学与高气压医学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期337-341,共5页
目的探讨急性一氧化碳中毒(acute carbon monoxide poisoning,ACOP)对大鼠少突胶质细胞前体细胞( oligodendrocyte precursors, OPCs)活性及增殖能力的影响。方法选取实验用SD新生大鼠24只,取脑后,采用差速贴壁法体外纯化和培养大鼠OPC... 目的探讨急性一氧化碳中毒(acute carbon monoxide poisoning,ACOP)对大鼠少突胶质细胞前体细胞( oligodendrocyte precursors, OPCs)活性及增殖能力的影响。方法选取实验用SD新生大鼠24只,取脑后,采用差速贴壁法体外纯化和培养大鼠OPCs完成后,按照数字表法随机分成对照组和ACOP组,每组12只。ACOP组将OPCs放置于密闭容器内,根据体积比注入1%的CO,处理6、24和48 h后分别利用免疫荧光细胞化学法观察OPCs形态和数量,MTT法检测OPCs活性,Brdu染色检测OPCs增殖情况。结果与对照组相比,ACOP组OPCs胞体呈扁平状、皱缩,突起数目减少、变短,且数量减少;ACOP组6 h时OPCs活性无明显改变,24、48 h时细胞活性明显降低(P<0.05),其中48 h细胞活力降低最显著;ACOP组6 h时OPCs的Brdu阳性率明显升高(P<0.05),24 h时2组无明显差异(P>0.05),48 h时Brdu阳性率较对照组显著降低(P<0.05)。结论ACOP对OPCs造成不可逆性损伤,显著影响其活性和增殖能力,了解其作用机制对一氧化碳中毒迟发性脑病(delayed encephalopathy after acute carbon monoxide poisoning, DEACMP)及寻找其更有效的治疗方法具有重要意义。 展开更多
关键词 一氧化碳中毒 胶质细胞前体细胞 细胞活性 增殖
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神经胶质细胞在血管性认知障碍发病机制中的研究进展 被引量:3
6
作者 高昕 杜冰滢 +1 位作者 陈晶晶 毕晓莹 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期753-757,共5页
血管性认知障碍(vascular cognitive impairment,VCI)是由脑血管病变及相关危险因素引起的从轻度认知障碍到痴呆的一大类疾病。VCI的病理特征主要包括白质损伤、脱髓鞘与神经炎症。神经胶质细胞是大脑内数量最多的细胞,对于维持中枢神... 血管性认知障碍(vascular cognitive impairment,VCI)是由脑血管病变及相关危险因素引起的从轻度认知障碍到痴呆的一大类疾病。VCI的病理特征主要包括白质损伤、脱髓鞘与神经炎症。神经胶质细胞是大脑内数量最多的细胞,对于维持中枢神经系统正常功能具有重要作用。最近的研究发现神经胶质细胞在VCI的发病中扮演重要角色。探讨神经胶质细胞的作用有助于提高对VCI的认识,为疾病的防治提供新的思路。 展开更多
关键词 血管性认知障碍 神经炎症 白质损伤 胶质细胞 星形胶质细胞 胶质细胞 胶质细胞前体细胞
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少突胶质细胞前体细胞移植治疗中枢神经系统脱髓鞘疾病的研究进展 被引量:4
7
作者 张冠宇 孙平新 李文林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期7-14,共8页
脱髓鞘疾病是一类以髓鞘脱失为主要特征的神经系统疾病。脱髓鞘疾病可严重影响患者生活质量,并且目前鲜有令人满意的治疗方法。少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)是存在于中枢神经系统(central nervous syste... 脱髓鞘疾病是一类以髓鞘脱失为主要特征的神经系统疾病。脱髓鞘疾病可严重影响患者生活质量,并且目前鲜有令人满意的治疗方法。少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)是存在于中枢神经系统(central nervous system,CNS)中,具有迁移、增殖及分化为成熟少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)能力的前体细胞。OLs是CNS中的成髓鞘细胞,因此OPCs与CNS中髓鞘的发生和损伤后再生都密切相关。近些年对OPCs发育和分化分子基础研究的深入直接推动了利用多能干细胞定向分化以及体细胞谱系重编程等手段获得OPCs的进步,使OPCs移植成为可能治疗CNS脱髓鞘疾病的新方法。本文对近些年的相关研究进行了综述。 展开更多
关键词 中枢神经系统疾病 脱髓鞘疾病 胶质细胞前体细胞 细胞移植
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一氧化碳中毒对大鼠少突胶质细胞前体细胞迁移的影响 被引量:4
8
作者 郭大志 冯园 +3 位作者 沈晨 胡慧军 张禹 潘树义 《中国医药导报》 CAS 2016年第36期49-52,共4页
目的探讨急性一氧化碳中毒(ACOP)对大鼠少突胶质细胞前体细胞(OPCs)迁移的影响。方法采用差速贴壁法体外纯化培养大鼠OPCs,免疫荧光法鉴定OPCs纯度和形态,将其分为两组,ACOP组:将细胞放在密闭容器内,根据体积比例注入1%一氧化碳,建立ACO... 目的探讨急性一氧化碳中毒(ACOP)对大鼠少突胶质细胞前体细胞(OPCs)迁移的影响。方法采用差速贴壁法体外纯化培养大鼠OPCs,免疫荧光法鉴定OPCs纯度和形态,将其分为两组,ACOP组:将细胞放在密闭容器内,根据体积比例注入1%一氧化碳,建立ACOP的OPCs细胞模型,处理6、24 h和48 h;对照组:不进行任何处理,在5%CO2、37℃条件下培养6、24 h和48 h。两组均在6、24 h和48 h利用Transwell方法观察OPCs迁移情况。结果免疫荧光显示纯化培养的OPCs 95%以上表达NG2和PDGF-α,不表达GFAP和C-D11b;对照组迁移到小室穿透膜上的OPCs细胞数量自6 h到48 h逐渐增多,而ACOP组迁移的OPCs细胞数量逐渐减少;与对照组比较,ACOP组迁移到小室穿透膜上的OPCs细胞数量在6 h开始下降,但差异无统计学意义(P>0.05),在24 h及48 h时迁移到小室穿透膜上的OPCs细胞数量明显下降(P<0.05);其中,在ACOP后48 h迁移的OPCs细胞数量下降最显著(P<0.01)。结论 ACOP会抑制OPCs细胞迁移能力,且随着中毒时间的增加而加重,从而阻碍损伤CNS髓鞘的修复,进一步阐明该机制可能对认识一氧化碳中毒迟发性脑病及寻找更有效的治疗手段具有非常重要的意义。 展开更多
关键词 一氧化碳中毒 胶质细胞前体细胞 迁移
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梓醇通过抗氧化应激对少突胶质细胞前体细胞突起的影响 被引量:4
9
作者 李娜 杨涛 +5 位作者 李珊 仝延萍 关瑞熙 王昕 郭安臣 樊永平 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期3184-3187,共4页
目的:观察梓醇对AAPH损伤后少突胶质细胞前体细胞(OPC)突起的保护作用。方法:神经干细胞(NSC)诱导产生OPC,使用不同浓度时间AAPH损伤OPC,选取合适损伤时间浓度的AAPH,建立OPC损伤模型。利用不同浓度梓醇对损伤OPC进行干预,CCK-8法测定... 目的:观察梓醇对AAPH损伤后少突胶质细胞前体细胞(OPC)突起的保护作用。方法:神经干细胞(NSC)诱导产生OPC,使用不同浓度时间AAPH损伤OPC,选取合适损伤时间浓度的AAPH,建立OPC损伤模型。利用不同浓度梓醇对损伤OPC进行干预,CCK-8法测定细胞存活率,Olig1鉴定及观察OPC突起损伤程度,计算OPC细胞突起率。结果:和空白对照(NC)组细胞比较,模型(MO)组细胞CCK-8吸光度显著降低,细胞突起率明显减少(P<0.01),Olig1积分光密度显著降低。与MO组比较,不同浓度梓醇均能显著增加OPC细胞的存活率(P<0.05,P<0.01),保护OPC细胞突起,增加Olig1蛋白的表达,其中,以10μmol/L浓度梓醇效果最佳。结论:梓醇对AAPH损伤后的OPC具有显著的保护作用。 展开更多
关键词 梓醇 胶质细胞前体细胞 AAPH 起数量 多发性硬化
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复髓鞘机制及其在多发性硬化症脱髓鞘模型中的研究进展 被引量:4
10
作者 郑双双 赵经纬 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期524-530,共7页
在多发性硬化症患者的中枢神经系统中,脱髓鞘的轴突难以有效复髓鞘是治疗疾病的主要障碍,而髓鞘再生失败的瓶颈问题是少突胶质细胞前体细胞(OPC)不能分化为成熟的少突胶质细胞。复髓鞘是继脱髓鞘后自然发生的再生反应,包括OPC的激活、... 在多发性硬化症患者的中枢神经系统中,脱髓鞘的轴突难以有效复髓鞘是治疗疾病的主要障碍,而髓鞘再生失败的瓶颈问题是少突胶质细胞前体细胞(OPC)不能分化为成熟的少突胶质细胞。复髓鞘是继脱髓鞘后自然发生的再生反应,包括OPC的激活、迁移和分化;具有保护神经轴突、进而避免神经元变性坏死的作用。近年来在体脱髓鞘模型研究发现,二甲双胍、氯马斯汀能有效加强复髓鞘,鉴定了髓鞘转录因子1样蛋白(Myt1L)、N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体、星形细胞连接蛋白43(Cx43)、G蛋白偶联受体17(GPR17)、κ阿片受体(KOR)、甾醇14α-脱甲基化酶(CYP51)、脱氢胆固醇还原酶14(TM7SF2)和3-β-羟基类固醇-8,7-异构酶(EBP)等促进OPC分化的潜在药物靶点。本文基于对复髓鞘机制的理解,讨论了促进OPC分化和增强复髓鞘的研究进展,这些进展为进一步研发治疗多发性硬化症的新方法提供了思路。 展开更多
关键词 髓鞘再生 多发性硬化症 胶质细胞前体细胞
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髓鞘再生的抑制因素和促进髓鞘再生策略的研究进展
11
作者 李晓慧 陈莹 +4 位作者 宋丽娟 马东 尉杰忠 王青 马存根 《医学综述》 CAS 2024年第18期2183-2187,共5页
在多发性硬化(MS)等脱髓鞘性疾病中,髓鞘的损伤与再生过程扮演至关重要的角色。少突胶质细胞(OLs)和少突胶质细胞前体细胞(OPCs)是这一过程的核心,它们负责新髓鞘的形成与损伤后的修复。髓鞘碎片的及时清除对于髓鞘再生至关重要,胶质细... 在多发性硬化(MS)等脱髓鞘性疾病中,髓鞘的损伤与再生过程扮演至关重要的角色。少突胶质细胞(OLs)和少突胶质细胞前体细胞(OPCs)是这一过程的核心,它们负责新髓鞘的形成与损伤后的修复。髓鞘碎片的及时清除对于髓鞘再生至关重要,胶质细胞的功能调节在这一过程中起着中心作用。富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白结构域的Nogo受体相互作用蛋白-1的抑制,以及芬戈莫德等药物的应用可以显著促进髓鞘的修复和再生。此外,靶向药物和分子疗法的开发可直接影响OLs和OPCs的功能,从而有效促进髓鞘的修复和再生。未来MS综合治疗体系(包括药物疗法、基因编辑技术及干细胞技术)的应用,可从多个层面干预和修复髓鞘损伤,为患者提供更为个性化和有效的治疗方案。 展开更多
关键词 髓鞘再生 胶质细胞前体细胞 信号分子 治疗手段
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少突胶质细胞前体细胞在双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型中的变化特点 被引量:3
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作者 黄嘉璐 穆建坤 +2 位作者 孟召友 周振华 陈康宁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1237-1241,共5页
目的观察神经胶质细胞在双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘模型中的变化特点,探讨其与髓鞘再生的内在联系。方法选8周龄C57BL/6雄性小鼠,分为正常组、急性脱髓鞘组及髓鞘再生组。正常组每天饲养正常鼠粮;模型组小鼠饲养含有0... 目的观察神经胶质细胞在双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘模型中的变化特点,探讨其与髓鞘再生的内在联系。方法选8周龄C57BL/6雄性小鼠,分为正常组、急性脱髓鞘组及髓鞘再生组。正常组每天饲养正常鼠粮;模型组小鼠饲养含有0.2%CPZ的混合鼠粮,连续饲养6周;髓鞘再生组在连续喂养6周CPZ鼠粮后,换用正常鼠粮2周。实验过程中通过卢卡斯快蓝染色及透射电镜技术判断脑组织胼胝体区髓鞘脱失及恢复程度,通过免疫组化及免疫荧光技术检测脑内NG2,Olig2和GFAP的表达来评估少突胶质细胞前体细胞及星形胶质细胞的变化特点。结果与正常组相比,急性脱髓鞘组胼胝体髓鞘脱失明显,Olig2、GFAP表达明显升高(P<0.05),侧脑室旁外侧隔核(LSD)NG2升高水平较胼胝体区(CC)更为明显(P<0.05,P<0.01);髓鞘再生组髓鞘有所修复,Olig2、GFAP表达仍高于正常组,但较急性脱髓鞘组有一定程度降低(P<0.05)。结论髓鞘损伤期少突胶质细胞前体细胞不能有效迁移至受损部位,修复期Olig2表达降低,星形胶质细胞持续高水平表达可能是髓鞘修复障碍的影响因素。 展开更多
关键词 双环己酮草酰二腙 脱髓鞘 髓鞘再生 胶质细胞前体细胞 OLIG2 星形胶质细胞
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高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠少突胶质细胞前体细胞ADAM10 mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 郭大志 冯园 +2 位作者 胡慧军 李娜 潘树义 《中国医药导报》 CAS 2018年第5期9-12,共4页
目的探讨高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠少突胶质细胞前体细胞ADAM10 mRNA表达的影响。方法体外纯化培养新生大鼠皮层少突胶质细胞前体细胞(OPCs),按3种处理方式分为对照组、急性一氧化碳中毒组(ACOP组)、高压氧组(HBO组)。对照组不进行... 目的探讨高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠少突胶质细胞前体细胞ADAM10 mRNA表达的影响。方法体外纯化培养新生大鼠皮层少突胶质细胞前体细胞(OPCs),按3种处理方式分为对照组、急性一氧化碳中毒组(ACOP组)、高压氧组(HBO组)。对照组不进行任何处理;ACOP组将细胞放在密闭容器内,根据体积比例注入1%一氧化碳;HBO组将一氧化碳处理的OPCs放入动物实验舱中,以98%O_2、2%CO_2洗舱10 min,然后15 min内加压至0.35 MPa并停留2h,20 min内减至常压,处理期间舱温控制在37℃,余处理同ACOP组。以HBO处理后即刻为0h,三组均在6、24h和48h时间点取材;采用RT-PCR方法观察不同时间点OPCs细胞ADAM10 mRNA的表达。结果在6、24h和48h三个时间点,大鼠少突胶质细胞前体细胞ADAM10 mRNA在对照组无明显变化,ACOP组逐渐减少,HBO组逐渐增多,差异有统计学意义(F=8.491,P<0.01);与对照组在6、24h和48h三个时间点大鼠少突胶质细胞前体细胞ADAM10 mRNA水平比较,ACOP组均明显减少,HBO组均明显增加(F=88.692,P<0.01)。结论大鼠少突胶质细胞前体细胞ADAM10分子在一氧化碳中毒造成的脑白质损伤及高压氧治疗中发挥重要作用。 展开更多
关键词 高压氧 一氧化碳中毒 胶质细胞前体细胞 ADAM10
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趋化因子CCL21及其受体CCR7在缺血性脑白质损伤中的表达及作用 被引量:2
14
作者 张蕊 江俊莹 +2 位作者 戴琦 王琳 陈雪梅 《国际脑血管病杂志》 2020年第7期530-535,共6页
目的探讨趋化因子CCL21及其受体CCR7在缺血性脑白质损伤(white matter lesion,WML)中的表达及作用。方法对C57Bl/6小鼠采用永久性双侧颈总动脉闭塞法(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAo)制备缺血性WML模型。伊文思蓝灌... 目的探讨趋化因子CCL21及其受体CCR7在缺血性脑白质损伤(white matter lesion,WML)中的表达及作用。方法对C57Bl/6小鼠采用永久性双侧颈总动脉闭塞法(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAo)制备缺血性WML模型。伊文思蓝灌注染色评估血脑屏障通透性。应用免疫荧光染色检测CCL21及其受体CCR7在缺血性WML组织中的表达。对脑微血管内皮细胞进行氧葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)制备体外缺血性WML模型,在OGD 6 h复氧24 h后采用蛋白质印迹分析检测CCL21蛋白表达水平。应用重组CCL21对原代培养的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)进行处理,然后加入脂多糖诱导炎症反应,通过定量聚合酶链反应检测成熟少突胶质细胞标志物髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)mRNA表达水平。结果与假手术组相比,BCCAo后脑组织内伊文思蓝染液渗出显著增多(P<0.05),脑血管内皮细胞CCL21表达水平显著下调(P<0.05),OPCs的CCR7表达水平显著下调(P<0.05)。脑微血管内皮细胞OGD后,CCL21蛋白表达水平较对照组显著下调(P<0.05)。重组CCL21处理OPCs后,MBP mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。结论WML后CCL21/CCR7表达显著下调,应用重组CCL21能促进OPCs细胞分化和成熟,提示其可能在缺血性WML中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 脑缺血 白质 趋化细胞因子CCL21 CCR7 疾病模型 动物 内皮细胞 胶质细胞前体细胞 细胞 培养的 葡萄糖
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少突胶质前体细胞的培养、鉴定及巨噬细胞移动抑制因子对其促增殖作用研究 被引量:2
15
作者 段朝霞 张洁元 +2 位作者 陈魁君 王建民 李兵仓 《中国医药导报》 CAS 2012年第35期52-54,57,共4页
目的少突胶质细胞是中枢神经系统的重要组成部分。本文探讨获取小鼠高纯度少突胶质前体细胞系的培养及鉴定方法,以及巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对其增殖活性的调节。方法取新生(0-2 d)C57B6小鼠的大脑皮层进行混合胶质细胞培养,在9-10 ... 目的少突胶质细胞是中枢神经系统的重要组成部分。本文探讨获取小鼠高纯度少突胶质前体细胞系的培养及鉴定方法,以及巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对其增殖活性的调节。方法取新生(0-2 d)C57B6小鼠的大脑皮层进行混合胶质细胞培养,在9-10 d时采用振荡、差速贴壁的方法分离、纯化少突胶质前体细胞,然后用添加了神经营养因子(N2)、血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基培养。倒置显微镜下每天观察细胞的生长情况,免疫荧光法对表面抗原进行细胞鉴定。然后按104个细胞/孔加入96孔板培养,细胞70%-80%融合时用不同浓度MIF处理细胞,48 h后用甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖程度。结果获得纯度90%以上少突胶质前体细胞(OPCs),少突胶质前体细胞NG2及血小板衍生生长因子受体(PDGFR)抗体阳性;胶质细丝酸性蛋白(GFAP)及髓鞘碱性蛋白(MBP)均为阴性。MTT检测结果显示低剂量的MIF能促进OPCs的增殖,并具有剂量效应关系;高剂量MIF则抑制OPCs的增殖。结论通过振荡及差速贴壁法并结合少突胶质细胞定向培养基可以成功获得高纯度的OPCs,MIF能以剂量效应关系促进OPCs增殖。为进一步深入探讨其相关机制及OPCs移植治疗脊髓损伤奠定基础。 展开更多
关键词 胶质细胞前体细胞 细胞培养 巨噬细胞移动抑制因子
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钙敏感受体过表达可促进缺血后未成熟脑白质祖细胞的增殖及分化 被引量:2
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作者 毛凤霞 雷梦园 +5 位作者 程欣茹 张菊 徐千雅 时赞扬 韩素鸽 张茜 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期325-330,共6页
目的探讨钙敏感受体(CaSR)过表达对缺血后未成熟脑白质祖细胞增殖分化的促进作用。方法从5 d龄SD大鼠脑室周围白质组织中提取、培养脑白质祖细胞,并分为对照组、氧糖剥夺(OGD)组、OGD+三氯化钆(GdCl3)组和OGD+CaSR沉默组,其中利用GdCl3... 目的探讨钙敏感受体(CaSR)过表达对缺血后未成熟脑白质祖细胞增殖分化的促进作用。方法从5 d龄SD大鼠脑室周围白质组织中提取、培养脑白质祖细胞,并分为对照组、氧糖剥夺(OGD)组、OGD+三氯化钆(GdCl3)组和OGD+CaSR沉默组,其中利用GdCl3特异性激动CaSR表达,利用基因沉默方式抑制CaSR表达。OGD后24 h、48 h、72 h、7 d和14 d,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中CaSR mRNA水平,采用免疫荧光双标染色检测各组细胞的分化情况;OGD后48 h细胞球形成时,利用倒置显微镜检测细胞增殖情况。结果(1)CaSR mRNA表达情况:OGD后48 h、72 h、7 d,OGD组细胞内CaSR mRNA表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。OGD后48 h、72 h、7 d及14 d,OGD+GdCl3组CaSR mRNA表达量均明显高于对照组及OGD组,OGD+CaSR沉默组CaSR mRNA表达量均明显低于对照组及OGD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)细胞增殖分化情况:OGD后48 h时,OGD组细胞球直径[(75.26±26.07)μm]较对照组[(57.96±18.92)μm]明显增大,OGD+GdCl3组细胞球直径[(91.92±21.82)μm]较对照组及OGD组明显增大,而OGD+CaSR沉默组细胞球直径[(24.09±8.34)μm]较对照组及OGD组明显减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。OGD后48 h、72 h时,OGD组中O4+/CaSR+少突胶质细胞前体细胞(OPCs)数目明显高于对照组,OGD+GdCl3组中O4+/CaSR+OPCs数目明显高于对照组及OGD组,OGD+CaSR沉默组中O4+/CaSR+OPCs数目明显低于对照组及OGD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CaSR过表达可进一步促进脑白质祖细胞增殖及分化为OPCs。 展开更多
关键词 钙敏感受 脑白质祖细胞 胶质细胞前体细胞 未成熟脑 脑室周围白质软化
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香芍颗粒对脑卒中后抑郁小鼠行为和内侧前额叶皮质OPCs、OLs的影响
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作者 徐宇浩 李成刚 +1 位作者 张智 徐运 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期984-993,共10页
目的:探讨香芍颗粒对脑卒中后抑郁(PSD)小鼠行为和内侧前额叶皮质(mPFC)少突胶质细胞前体细胞(OPCs)、少突胶质细胞(OLs)的影响。方法:80只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)组、PSD+PBS组和PSD+香芍组,每... 目的:探讨香芍颗粒对脑卒中后抑郁(PSD)小鼠行为和内侧前额叶皮质(mPFC)少突胶质细胞前体细胞(OPCs)、少突胶质细胞(OLs)的影响。方法:80只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)组、PSD+PBS组和PSD+香芍组,每组20只。采用MCAO后轻度慢性不可预见性应激(CUMS)和孤独饲养的方法构建PSD模型。采用激光散斑成像、改良神经严重程度评分(mNSS)和TTC染色评估MCAO模型,采用体质量、糖水偏好实验和悬尾实验评估PSD模型。PSD建模后4组小鼠均灌胃28 d,假手术组、MCAO组、PSD+PBS组给予溶剂(PBS)0.2 mL灌胃,1次/d;PSD+香芍组按照60 mg/kg剂量将香芍颗粒溶于0.2 mL PBS中灌胃,1次/d。采用免疫荧光染色法检测mPFC中OPCs和OLs的数量,采用Western blotting实验检测mPFC中髓鞘碱性蛋白(MBP)和磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路蛋白的表达。结果:(1)模型验证结果:激光散斑成像实验观察到小鼠在MCAO术前、术中及再灌注后手术侧大脑中动脉供血区脑血流的明显改变;MCAO组、PSD+PBS组、PSD+香芍组小鼠中TTC染色后均观察到典型的红色非梗死区和白色梗死区;MCAO组、PSD+PBS组、PSD+香芍组小鼠mNSS评分均>4分且差异无统计学意义(P>0.05);提示MCAO模型构建成功。PSD建模后治疗前,4组小鼠行为学评估结果显示,与假手术组和MCAO组相比,PSD+PBS组和PSD+香芍组小鼠体质量明显下降,糖水偏好度明显降低,悬尾不动时间明显延长,差异均有统计学意义(P<0.05),提示PSD模型构建成功。(2)治疗后小鼠行为学实验结果:治疗28 d后,4组小鼠体质量、糖水偏好度和悬尾不动时间差异均有统计学意义(P<0.05)。与PSD+PBS组相比,PSD+香芍组小鼠体质量和糖水偏好度明显上升,悬尾不动时间明显缩短,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)免疫荧光染色及Western blotting实验结果:4组小鼠mPFC中OPCs( 展开更多
关键词 香芍颗粒 脑卒中后抑郁 内侧额叶皮质 胶质细胞前体细胞 胶质细胞
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生酮饮食激活脂肪酸氧化促进ME区的少突胶质细胞前体细胞增殖 被引量:1
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作者 王奔 李斯 +1 位作者 吴青峰 穆文辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期425-434,共10页
下丘脑正中隆起(mdian eminence,ME)是神经元和少突胶质细胞的可能生态位,营养因素可能通过诱导ME区细胞变化而调控下丘脑功能。为了确定生理条件下休眠的下丘脑干细胞是否存在饮食诱导的可塑性,本研究使用正常饲料、高脂饮食和生酮饮食... 下丘脑正中隆起(mdian eminence,ME)是神经元和少突胶质细胞的可能生态位,营养因素可能通过诱导ME区细胞变化而调控下丘脑功能。为了确定生理条件下休眠的下丘脑干细胞是否存在饮食诱导的可塑性,本研究使用正常饲料、高脂饮食和生酮饮食(一种低碳水、高脂肪的饮食)等不同喂养方式,比较了不同饮食条件下小鼠ME区伸展细胞(tanycytes,TCs)和少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的增殖情况,首次发现生酮饮食可诱导促进ME区OPCs增殖,阻断脂肪酸氧化通路可抑制生酮饮食诱导的OPCs增殖。本研究初步揭示了饮食诱导对ME区OPCs的影响,为进一步研究ME区OPCs的功能提供了启示。 展开更多
关键词 下丘脑 正中隆起 胶质细胞前体细胞 生酮饮食
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脑源性神经营养因子前体在脊髓损伤后对少突胶质细胞存活及生长的影响 被引量:2
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作者 刘燊 冯世庆 +2 位作者 周先虎 宁广智 张超 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2668-2670,共3页
目的 观察脑源性神经生长因子前体(proBDNF)在少突胶质细胞前体细胞(OPCs)的表达及其对OPCs存活及生长的调控作用.方法 取新生C57BL/6小鼠大脑皮层分离少突胶质细胞前体细胞,体外原代培养.应用Western blot法观察proBDNF及其受体p75... 目的 观察脑源性神经生长因子前体(proBDNF)在少突胶质细胞前体细胞(OPCs)的表达及其对OPCs存活及生长的调控作用.方法 取新生C57BL/6小鼠大脑皮层分离少突胶质细胞前体细胞,体外原代培养.应用Western blot法观察proBDNF及其受体p75NTR和sortilin在OPCs内的表达水平;设置100 μg/L胎牛血清白蛋白(BSA)对照组和proBDNF梯度浓度组(1、10、100 μg/L),每组6孔细胞.应用结晶紫及β-tublin染色,观察OPCs细胞形态,评估proBDNF对OPCs生长的影响.结果 Western blot结果显示OPCs细胞内源性表达proBDNF及其受体p75 NTR和sortilin;与BSA对照组比较,proBDNF治疗组OPCs的数量显著减少[(537.67±34.93)个比(440.67±9.29)、(390.67±9.45)、(337.25±7.27)个],差异有统计学意义(P<0.01);同时proBDNF可以抑制OPCs的生长,与BSA对照组比较,proBDNF治疗组OPCs的长突起减少,照片显示细胞平均面积减小显著[(2.44±0.71) μm2比(1.65±0.12)、(1.30±0.11)、(0.95±0.08)μm2],差异均有统计学意义(1 μg/L proBDNF组P<0.05,其他组P<0.01).结论 OPCs内源性表达proBDNF及其受体.proBDNF对OPCs的存活及生长具有抑制作用,该作用可能通过p75 NTR-sortilin通路介导. 展开更多
关键词 脑源性神经生长因子 胶质细胞前体细胞 脊髓损伤
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大鼠少突胶质细胞前体细胞的生后发育特点及围生期电生理特性的研究 被引量:2
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作者 陈鹏慧 蔡文琴 王丽雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1783-1786,共4页
目的研究少突胶质细胞前体细胞(OPC)的发育特点及围生期电生理特性。方法应用免疫组化及Western blot,观察生后不同发育阶段大鼠大脑皮质、海马等区域OPC细胞数量。应用脑片膜片钳记录出生后7d大鼠皮层白质和海马OPC电生理学特性。结果... 目的研究少突胶质细胞前体细胞(OPC)的发育特点及围生期电生理特性。方法应用免疫组化及Western blot,观察生后不同发育阶段大鼠大脑皮质、海马等区域OPC细胞数量。应用脑片膜片钳记录出生后7d大鼠皮层白质和海马OPC电生理学特性。结果出生后0、7、14、21、35、50d、18个月大鼠大脑皮层及海马区域均有OPC细胞表达。在发育生后7d,细胞数量密度最高,成年大鼠也有较高数量OPC的分布。P7d大鼠海马OPC有小的内向Na+电流,而白质区域OPC仅表现外向K+电流和细胞膜被动反应。结论P7d大鼠皮层及海马区域OPC细胞数量及NG2蛋白表达量最大,海马和白质区域的OPC表现电生理学特性的异质性。 展开更多
关键词 胶质细胞前体细胞 NG2 发育 膜片钳
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