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SENP蛋白在胶质瘤中表达与临床病理分级相关性 被引量:3
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作者 齐玲 沈楠 +5 位作者 王玮瑶 赵东海 杨淑艳 杨宁江 王艳春 任旷 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1219-1221,共3页
目的探讨小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶(SENP)在人脑胶质瘤中的表达变化及与临床病理分级相关性。方法选择神经外科手术切除的脑胶质瘤组织43例作为胶质瘤组,尸解来源的正常脑组织9例作为对照组;Western blot法检测胶质瘤组与对照组中SE... 目的探讨小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶(SENP)在人脑胶质瘤中的表达变化及与临床病理分级相关性。方法选择神经外科手术切除的脑胶质瘤组织43例作为胶质瘤组,尸解来源的正常脑组织9例作为对照组;Western blot法检测胶质瘤组与对照组中SENP1、SENP2、SENP6蛋白表达变化,并分析SENP蛋白表达量与患者临床病理分级之间关系。结果胶质瘤组织中SENP1、SENP2、SENP6蛋白表达量[分别为(0.47±0.12)、(0.78±0.17)、(0.94±0.21)]均明显增加,与对照组[分别为(0.35±0.03)、(0.36±0.13)、(0.23±0.08)]比较,差异有统计学意义(均P<0.05);脑胶质瘤组织中SENP1、SENP2、SENP6蛋白表达量与患者临床病理分级呈正相关(r=0.82、0.83、0.91,均P<0.05)。结论胶质瘤组织中SENP蛋白表达明显升高,SENP蛋白表达量与胶质瘤发生发展密切相关。 展开更多
关键词 泛素修饰蛋白(sumo) sumo特异性蛋白酶(SENP) 胶质瘤 病理分级
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小泛素样修饰蛋白1和P53的表达与子宫平滑肌肉瘤发生的相关性研究 被引量:2
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作者 诸葛丽芳 周坚红 +3 位作者 曲凡 李娟清 兰义兵 周彩云 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期122-126,共5页
目的了解小泛素样修饰蛋白(SUMO)-1、P53蛋白在子宫平滑肌肉瘤中的表达及其临床意义。方法收集2006年3月—2012年3月期间接受手术治疗的20例子宫平滑肌肉瘤,29例良性子宫平滑肌瘤,采用免疫组织化学Envision法检测各组织中SUMO-1和P53蛋... 目的了解小泛素样修饰蛋白(SUMO)-1、P53蛋白在子宫平滑肌肉瘤中的表达及其临床意义。方法收集2006年3月—2012年3月期间接受手术治疗的20例子宫平滑肌肉瘤,29例良性子宫平滑肌瘤,采用免疫组织化学Envision法检测各组织中SUMO-1和P53蛋白的表达,对收集的20例子宫平滑肌肉瘤患者进行电话随访预后情况。结果 SUMO-1、P53在子宫平滑肌肉瘤组中阳性表达率分别为85%、30%;在子宫平滑肌瘤组中阳性表达率分别为52%和0%;子宫平滑肌肉瘤组中的SUMO-1阳性表达率明显高于子宫平滑肌瘤组(P<0.01);子宫平滑肌肉瘤组中的P53阳性表达率明显高于子宫平滑肌瘤组(P<0.01);子宫平滑肌肉瘤中SUMO-1与P53蛋白表达无明显相关性;SUMO-1、P53蛋白的表达分别与子宫平滑肌肉瘤预后均无相关性(P>0.05)。结论 P53可能与子宫平滑肌肉瘤的发生机制相关,并对子宫平滑肌肉瘤与子宫平滑肌瘤有一定的鉴别诊断价值;SUMO-1可能与子宫平滑肌肉瘤的发生密切相关。 展开更多
关键词 泛素修饰蛋白(sumo)-1 P53 子宫平滑肌瘤 子宫平滑肌肉瘤 免疫组织化学
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基因家庭Pax7与Ubc9基因编码蛋白相互作用研究
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作者 刘乙蒙 栾治东 +2 位作者 刘超 李明洋 肖建英 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1173-1175,共3页
目的了解Pax7的重要生物学功能,筛选并验证与其相互作用的Ubc9基因编码蛋白,并明确Pax7与小泛素相关修饰蛋白(SUMO)的关系,为进一步研究Pax7的作用机制奠定基础。方法酵母双杂交系统筛选出与Pax7相互作用的基因Ubc9;GST-pull down方法验... 目的了解Pax7的重要生物学功能,筛选并验证与其相互作用的Ubc9基因编码蛋白,并明确Pax7与小泛素相关修饰蛋白(SUMO)的关系,为进一步研究Pax7的作用机制奠定基础。方法酵母双杂交系统筛选出与Pax7相互作用的基因Ubc9;GST-pull down方法验证Pax7与Ubc9在体外相互作用;Western blot方法检测Pax7的SUMO化状态;免疫共沉淀方法验证Pax7与SUMO的关系。结果 Pax7和Ubc9在酵母中存在相互作用;Pax7和Ubc9在体外可特异性结合;在Ubc9存在的条件下,Pax7呈现SUMO化状态,且可与SUMO相互作用;Pax7在鸡胚胎中也呈现SUMO化状态。结论 Pax7可以与Ubc9相互作用,且这种作用与SUMO有关。 展开更多
关键词 Pax7 UBC9 泛素相关修饰蛋白(sumo)
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SUMO介导截短型人HGF制备及抗肝纤维化作用
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作者 王小花 李玉婷 +2 位作者 董艳 刘亚威 刘海峰 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1532-1536,共5页
目的研究截短型人肝细胞生长因子突变体(tvNK1)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝星状细胞LX-2纤维化的影响。方法把经PCR和双酶切的小分子泛素相关修饰蛋白(SUMO)和tvNK1的融合基因SUMO-tvNK1插入原核表达载体pET28a,诱导表达和Ni2+... 目的研究截短型人肝细胞生长因子突变体(tvNK1)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝星状细胞LX-2纤维化的影响。方法把经PCR和双酶切的小分子泛素相关修饰蛋白(SUMO)和tvNK1的融合基因SUMO-tvNK1插入原核表达载体pET28a,诱导表达和Ni2+亲和层析纯化SUMO-tvNK1;进一步经SUMO蛋白酶Ulp1水解和Ni2+亲和层析纯化tvNK1,MTT法观察其对TGF-β1诱导LX-2纤维化细胞增殖的影响,qPCR及蛋白印迹(WB)检测其对I型胶原蛋白(col1α1)和α–平滑肌球蛋白(α-SMA)蛋白表达的影响。结果宿主菌Rosetta/pET28a-SUMO-tvNK1在37℃经1 mmol/L IPTG诱导5 h获得SUMO-tvNK1的可溶性表达,将超声破碎后上清液经Ni2+亲和层析成功获得SUMO-tvNK1,进一步经Ulp1水解和Ni2+亲和层析纯化tvNK1,SDS-PAGE鉴定其分子量约为22.0 kDa,MTT显示20和40 ng/mL的tvNK1能明显抑制TGF-β1活化的人肝星状细胞LX-2增殖,qPCR及WB显示20和40 ng/mL的tvNK1能显著抑制活化的LX-2细胞中Col1α1和α-SMA在m RNA和蛋白水平表达。结论 SUMO蛋白可用于制备tvNK1,其能抑制TGF-β1活化的LX-2细胞增殖并具有抗纤维化作用,为进一步体内外功能研究打下基础。 展开更多
关键词 截短型人肝细胞生长因子 分子泛素相关修饰蛋白(sumo) 转化生长因子β1(TGF-β1) 肝星状细胞
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新型重组Ulp1的制备工艺研究
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作者 徐海悦 吴勇 +3 位作者 李乐乐 黄宗庆 化浩举 冯军 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1432-1438,共7页
类泛素特异性蛋白酶1(Ulp1)是从融合蛋白中移除小分子泛素相关修饰物蛋白(SUMO)标签工艺中的重要工具蛋白酶,在重组多肽和蛋白生产制备中具有广泛应用。Ulp1蛋白易聚集的特性给下游分离纯化工艺带来了诸多挑战。为克服这些问题,本研究... 类泛素特异性蛋白酶1(Ulp1)是从融合蛋白中移除小分子泛素相关修饰物蛋白(SUMO)标签工艺中的重要工具蛋白酶,在重组多肽和蛋白生产制备中具有广泛应用。Ulp1蛋白易聚集的特性给下游分离纯化工艺带来了诸多挑战。为克服这些问题,本研究设计并重组表达制备了一种S13-Ulp1融合蛋白,以提高Ulp1酶的溶解度,减少聚集,同时降低蛋白等电点,便于采用阴离子交换色谱纯化。通过对发酵、澄清等步骤的工艺参数进行优化,建立了一条发酵表达产量高、纯化工艺简便的S13-Ulp1融合蛋白制备工艺。优化后发酵产量达到了2.34g/L,下游分离纯化总收率为64%,制得的S13-Ulp1蛋白的SDS-PAGE纯度为95%。经酶切试验验证,S13-Ulp1融合蛋白具有与Ulp1相同的特异性,可高效地移除SUMO标签,获得目的多肽。 展开更多
关键词 分子泛素相关修饰蛋白(sumo)蛋白酶:类泛素特异性蛋白酶1(Ulp1) 重组 表达 纯化 离子交换色谱
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