寨卡病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒三重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价 被引量：13

1

作者 龚雪蕊 李阿茜 +5 位作者 刘洋 李川 张全福 李德新 梁米芳 王世文 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期52-58,共7页

本研究旨在建立寨卡病毒（ZIKV virus,ZIKV）、登革病毒（Dengue virus,DENV）以及基孔肯雅病毒（Chikungunya virus,CHIKV）三种病毒快速筛查、诊断的核酸检测技术。选用ZIKV的NS1基因、DENV的NS5蛋白基因以及CHIKV的E1蛋白基因作为靶... 本研究旨在建立寨卡病毒（ZIKV virus,ZIKV）、登革病毒（Dengue virus,DENV）以及基孔肯雅病毒（Chikungunya virus,CHIKV）三种病毒快速筛查、诊断的核酸检测技术。选用ZIKV的NS1基因、DENV的NS5蛋白基因以及CHIKV的E1蛋白基因作为靶标区域设计三组特异性引物探针,建立三重实时荧光定量RT-PCR检测方法。用ZIKV、DENV、CHIKV病毒体外转录RNA和病毒细胞培养物对该方法的灵敏性、特异性、重复性等方面进行评价,最后临床样本以及模拟标本验证。结果显示：三重实时荧光定量RT-PCR检测方法扩增效率均可达到90%以上,三种病毒体外转录RNA最低检测限均低于15拷贝/PCR,病毒培养物最低检出限均低于10PFU/mL且与单重检测方法无明显差异。与其他病毒无交叉反应,变异系数均在2%以内。临床标本及模拟标本检出率均可达95%以上。本研究建立的检测寨卡病毒、登革病毒以及基孔肯雅病毒的三重实时荧光RT-PCR方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于寨卡病毒病等相关临床标本的检测。 展开更多

关键词 三重实时荧光定量RT-PCR 寨卡病毒(zikv) 登革病毒(DENV) 基孔肯雅病毒(CHIKV)

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小鼠抗寨卡病毒包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体的制备

2

作者 薛潘 董阳超 +7 位作者 武福星 陈洋 张剑 元航 武苏闪 袁若栋 李宝莉 雷迎峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期447-454,共8页

目的制备小鼠抗寨卡病毒(ZIKV)包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体。方法首先构建ZIKV Eecto的原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,将其转化至大肠杆菌感受态BL21后,利用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。重组Eecto蛋白以包涵体形式表... 目的制备小鼠抗寨卡病毒(ZIKV)包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体。方法首先构建ZIKV Eecto的原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,将其转化至大肠杆菌感受态BL21后,利用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。重组Eecto蛋白以包涵体形式表达,经过变性、复性和超滤获得纯化的蛋白。将Eecto蛋白3次免疫后,获得多克隆抗体血清,进行效价测定,并利用ZIKV prME真核表达质粒转染的HEK293T细胞进行Western blot法和免疫荧光法分析。取效价较高的小鼠脾脏制备脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过有限稀释法获取分泌抗体的杂交瘤细胞,并进一步制备腹水。对腹水进行抗体效价测定、亚类分析。以ZIKV同属病毒日本脑炎病毒(JEV)、黄热病病毒(YFV)、登革病毒1-4(DENV1-4)、蜱传脑炎病毒(TBEV)的Eecto为包被抗原,利用ELISA分析ZIKV单克隆抗体的交叉反应性,进一步对效价高、特异性强的抗体进行特异性分析。结果成功构建了原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,并获得纯化的Eecto蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性;制备筛选得到1D6、4F11、4H7、4F8四株单克隆抗体,其中三株(1D6、4H7、4F8)为IgGκ型抗体,一株(4F11)为IgMκ,1D6腹水效价大于1∶108;其中1D6和4H7为ZIKV特异性抗体,与其他黄病毒无交叉反应。结论成功制备了小鼠抗ZIKV Eecto单克隆抗体,为后续建立ZIKV检测方法及致病机制研究提供了实验材料。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 包膜蛋白胞外区(Eecto) 原核表达 单克隆抗体

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寨卡病毒及其疫苗的研究进展 被引量：4

3

作者 袁伟 卢洪洲 《世界临床药物》 CAS 2017年第8期511-514,共4页

寨卡病毒(ZIKV)属于黄病毒属,由一条单股正链核糖核酸构成。ZIKV主要通过蚊媒传播,多数感染者无明显临床症状或仅表现为轻微症状。ZIKV在世界范围内广泛传播,对ZIKV及其疫苗的深入研究是控制疾病传播的当务之急。本文针对ZIKV及其疫苗... 寨卡病毒(ZIKV)属于黄病毒属,由一条单股正链核糖核酸构成。ZIKV主要通过蚊媒传播,多数感染者无明显临床症状或仅表现为轻微症状。ZIKV在世界范围内广泛传播,对ZIKV及其疫苗的深入研究是控制疾病传播的当务之急。本文针对ZIKV及其疫苗的研究进展进行简要综述。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 纯化灭活疫苗 DNA疫苗 RNA疫苗 重组载体疫苗

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寨卡和登革病毒流行病学相似性分析 被引量：4

4

作者 刘荣飞 陈盈 陆家海 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期508-511,共4页

寨卡病毒(ZIKV)和登革病毒(DENV)在分子结构和流行特征方面具有很多相似性,登革热疫情现在已经作为很多模型预测寨卡流行的参考。全面综合和对比ZIKV和DENV在宿主、传播途径、易感人群方面的异同,对了解2者的关系有重要意义。同时结合... 寨卡病毒(ZIKV)和登革病毒(DENV)在分子结构和流行特征方面具有很多相似性,登革热疫情现在已经作为很多模型预测寨卡流行的参考。全面综合和对比ZIKV和DENV在宿主、传播途径、易感人群方面的异同,对了解2者的关系有重要意义。同时结合广东省登革热疫情、寨卡疫情,分析2者在广东省的流行情况,为防控提供参考意见。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 登革病毒(DENV) 流行

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寨卡病毒检测研究进展 被引量：2

5

作者 那琳 许梅花 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1534-1538,共5页

寨卡病毒病是近年来在非洲、亚洲、南美洲等地流行的一种隐性传染病。该病由寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染导致,虽然患者或携带者的病情并不明显,或在短期内很难察觉。但由于近些年来的突然流行,患者数目的急剧增加,而且各国间贸易往... 寨卡病毒病是近年来在非洲、亚洲、南美洲等地流行的一种隐性传染病。该病由寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染导致,虽然患者或携带者的病情并不明显,或在短期内很难察觉。但由于近些年来的突然流行,患者数目的急剧增加,而且各国间贸易往来愈加繁荣,亦加快了该疾病流行的步伐。疾病的防治离不开确切的诊断,如何快速、准确检测出寨卡病毒不容小觑,是急需解决的世界性难题之一。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 寨卡病毒病 检测样本 检测方法

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基于寨卡病毒NS2B蛋白特异抗原多肽的荧光素酶免疫吸附法检测寨卡病毒抗体 被引量：2

6

作者 王天禹 芜为 +3 位作者 邓瑶 王文玲 谭文杰 唐时幸 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期396-401,共6页

目前国内外针对寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的研究多集中于E蛋白与NS1蛋白,而对于其他非结构蛋白的研究则相对较少。为了进一步了解ZIKV感染免疫机制,为ZIKV免疫学检测和流行病学研究提供新的工具方法,本研究建立了基于NS2B蛋白多肽抗原... 目前国内外针对寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的研究多集中于E蛋白与NS1蛋白,而对于其他非结构蛋白的研究则相对较少。为了进一步了解ZIKV感染免疫机制,为ZIKV免疫学检测和流行病学研究提供新的工具方法,本研究建立了基于NS2B蛋白多肽抗原荧光素酶免疫吸附试验(Luciferase immunosorbent assay,LISA)的新方法,应用于检测抗ZIKV IgG抗体(anti-ZIKV IgG)。通过构建NS2B蛋白特异性多肽抗原与新型荧光素酶融合表达的载体,转染真核细胞后获得含有目标抗原与荧光素酶融合蛋白的细胞裂解物,建立anti-ZIKV IgG检测的LISA法。采用正常人血清、ZIKV感染的阳性血清、乙脑病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)感染阳性血清,登革病毒(Dengue virus,DENV)感染阳性血清,评价该方法的特异性、灵敏度与重复性及交叉反应,并与基于NS1纯化抗原的商业化ELISA试剂盒(NS1-ELISA)进行平行比较。成功建立的NS2B-LISA方法,检测灵敏度和特异度分别为92%和96.2%,通过阳性样本倍比稀释评价两种检测方法灵敏度,NS2B-LISA的灵敏度比NS1-ELISA高16倍。重复性实验显示NS2B-LISA法检测anti-ZIKV IgG板间变异系数为(3.1±0.7)%,板内变异系数为(2.6±0.9)%。本研究基于NS2B蛋白多肽抗原成功建立了anti-ZIKV IgG检测的LISA新方法,该方法简便、特异、灵敏、重复性好,易于高通量自动化,可用于anti-ZIKV IgG感染的免疫学诊断与流行病学研究。 展开更多

关键词 寨卡病毒病 寨卡病毒(zikv) 荧光素酶 NS2B IgG抗体 检测

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寨卡病毒NS1的结构研究进展及其应用 被引量：2

7

作者 陈江涛 张建琼 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期791-797,共7页

寨卡病毒感染与小头畸形和神经系统并发症紧密相关,甚至可能损伤男性生殖系统,引起了全球性的关注,研究其结构和致病机制以及开发有效的诊断治疗方法成为当务之急。寨卡病毒的非结构蛋白NS1是病毒与宿主相互作用的重要蛋白,在病毒复制... 寨卡病毒感染与小头畸形和神经系统并发症紧密相关,甚至可能损伤男性生殖系统,引起了全球性的关注,研究其结构和致病机制以及开发有效的诊断治疗方法成为当务之急。寨卡病毒的非结构蛋白NS1是病毒与宿主相互作用的重要蛋白,在病毒复制、发病机制及免疫逃逸中起着关键作用。本文总结了寨卡病毒NS1的空间精细结构,并将其与其它黄病毒NS1进行比较。本文也分析了寨卡病毒基于NS1的致病机理,总结了NS1在疾病诊断中的应用。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) NS1蛋白结构 致病性

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寨卡病毒及其与宿主蛋白相互作用研究进展 被引量：1

8

作者 任琴 杜寿文 +6 位作者 吕孔鹏 张星艳 戴少波 李体远 田明尧 吴诗品 李昌 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1201-1207,共7页

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)作为一种新出现的蚊媒病原体,与成人格林-巴利综合征(Guillain–Barresyndrome,GBS)、新生儿小头畸形以及神经系统缺陷等疾病有关。2016年世界卫生组织将寨卡疫情列为国际关注的公共卫生突发事件,近年来关于Z... 寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)作为一种新出现的蚊媒病原体,与成人格林-巴利综合征(Guillain–Barresyndrome,GBS)、新生儿小头畸形以及神经系统缺陷等疾病有关。2016年世界卫生组织将寨卡疫情列为国际关注的公共卫生突发事件,近年来关于ZIKV病原学、流行病学、感染与致病、抗病毒免疫应答、疫苗与药物的研究越来越多,为有效防控该病提供了理论依据和具体实践。本文就ZIKV蛋白组成及相应功能、感染周期、ZIKV受体及ZIKV-宿主相互作用等的最新研究进展进行综述,旨在正确认识和深入理解ZIKV致病与机体抗病相关机制,为设计有效的预防或治疗疫苗或药物提供参考资料。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 蛋白组成及功能 病毒受体 病毒-宿主相互作用

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寨卡病毒感染的辅助性宿主因子研究进展

9

作者 郭娇菡(综述) 徐建青(审校) 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期144-148,158,共6页

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染可造成宿主神经系统损伤,与胎儿头小畸形和格林-巴利综合征的发生相关。有许多针对包括ZIKV在内的黄病毒疫苗与抗病毒药物正处于研发阶段。本文总结了辅助ZIKV感染的宿主因子研究现状,有助于揭示ZIKV的感... 寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染可造成宿主神经系统损伤,与胎儿头小畸形和格林-巴利综合征的发生相关。有许多针对包括ZIKV在内的黄病毒疫苗与抗病毒药物正处于研发阶段。本文总结了辅助ZIKV感染的宿主因子研究现状,有助于揭示ZIKV的感染机制。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 黄病毒 生命周期 病毒-宿主相互作用

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CRISPR/Cas9技术在人类重要病毒性传染病中的应用

10

作者 张珊 胡康洪 +2 位作者 魏艳红 孙鸽 孙殿兴 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期491-496,F0003,共7页

近年来,CRISPR/Cas9作为一种新型的基因编辑工具,具备特异性强、使用广泛、操作相对简便等特点。通过对病毒基因组进行基因编辑从而干扰病毒复制和清除感染,以及在重要宿主因子、受体靶蛋白等方面应用都具有明显优势。本文着重以CRISPR/... 近年来,CRISPR/Cas9作为一种新型的基因编辑工具,具备特异性强、使用广泛、操作相对简便等特点。通过对病毒基因组进行基因编辑从而干扰病毒复制和清除感染,以及在重要宿主因子、受体靶蛋白等方面应用都具有明显优势。本文着重以CRISPR/Cas9技术在一些导致人类重要传染性疾病的病毒如乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、单纯疱疹病毒(HSV)、寨卡病毒(ZIKV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)中的应用、面临的技术瓶颈问题和解决方案及治疗前景进行讨论。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 乙型肝炎病毒(HBV) 丙型肝炎病毒(HCV) Epstein-Barr病毒(EBV) 单纯疱疹病毒(HSV) 寨卡病毒(zikv) 人类免疫缺陷病毒(HIV) 综述

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寨卡病毒RNA恒温快速扩增检测方法的建立 被引量：1

11

作者 朱禹 李阿茜 +8 位作者 刘洋 李乃哲 余东阳 李川 李建东 王世文 李德新 梁米芳 柳燕 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期610-616,共7页

2015年以来,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险。为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKV NS1片段保守区设计特异性引物探针,经... 2015年以来,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险。为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKV NS1片段保守区设计特异性引物探针,经优化建立了多种功能蛋白介导的ZIKV RNA恒温快速扩增检测方法。利用所制备的ZIKV NS1片段体外转录RNA作为参考品,并与实时荧光定量RT-PCR检测结果进行比较。同时利用ZIKV细胞培养物中加入健康人血清制备的模拟临床标本进行初步验证。结果显示,建立的RNA恒温快速扩增检测方法可100%检出100拷贝/μL体外转录RNA,可在15 min以内判读,大大低于PCR的常规检测时间;用该方法检测其他相关病毒,无交叉反应。病毒滴度在(104~107 PFU/mL)之间的模拟临床病人标本可达到100%检出。本研究建立的ZIKV RNA恒温扩增快速检测方法快速、灵敏、特异,适用于ZIKV现场应急检测,为ZIKV的防控提供了重要的技术支撑。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) RNA恒温快速扩增 核酸检测

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寨卡病毒,不仅仅是小头畸形 被引量：1

12

作者 王培刚 高娜 +1 位作者 范东瀛 安静 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期243-251,共9页

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科黄病毒属,由蚊虫叮咬传播。ZIKV发现于1947年。2007年以来,由于基因突变,ZIKV获得了更强的神经嗜性和在蚊虫体内播散的能力,因而在全球加快流行,并与成人吉兰-巴雷综合征和胎儿小头畸形的发生密... 寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科黄病毒属,由蚊虫叮咬传播。ZIKV发现于1947年。2007年以来,由于基因突变,ZIKV获得了更强的神经嗜性和在蚊虫体内播散的能力,因而在全球加快流行,并与成人吉兰-巴雷综合征和胎儿小头畸形的发生密切相关。最近的临床观察和动物研究进一步表明,ZIKV感染引起的临床症状复杂多样,所造成的疾病不仅仅是小头畸形,它还能够损伤雄性生殖系统,干扰下丘脑对神经内分泌系统的调节,引起多种激素分泌缺陷,导致生长发育迟缓和学习记忆能力损伤。因此,对于先天感染ZIKV的新生儿,不仅要在孕期监测小头畸形的发生,出生后也需进行长期的跟踪观察;对于出生后感染ZIKV的婴幼儿以及学龄前儿童,无论病情轻重,也需要进行随访,以明确ZIKV感染的远期影响。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 小头畸形 雄性生殖系统 神经内分泌系统 性传播

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寨卡病毒抑制剂的研究进展 被引量：1

13

作者 崔香玲 周睿 +1 位作者 岑山 周金明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期264-271,共8页

寨卡病毒属于黄病毒科黄病毒属,主要通过伊蚊属传播。越来越多研究表明寨卡病毒感染与胎儿的小头畸型症和成人的格林巴利综合征紧密相关,但目前尚无有效的疫苗或FDA已批准的药物。新近研究表明,小分子抑制剂可通过多种机制抑制寨卡病毒... 寨卡病毒属于黄病毒科黄病毒属,主要通过伊蚊属传播。越来越多研究表明寨卡病毒感染与胎儿的小头畸型症和成人的格林巴利综合征紧密相关,但目前尚无有效的疫苗或FDA已批准的药物。新近研究表明,小分子抑制剂可通过多种机制抑制寨卡病毒。虚拟筛选技术、老药新用等思路有望为抗寨卡病毒药物的研发带来新突破。本文就目前寨卡病毒抑制剂的研究进展进行综述,旨在为发现新型高效寨卡病毒抑制剂提供依据及思路。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 小分子抑制剂 虚拟筛选技术 老药新用

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寨卡病毒感染者血液、尿液和唾液中IgA抗体水平初步研究 被引量：1

14

作者 芜为 张全福 +4 位作者 李阿茜 李川 李建东 梁米芳 李德新 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期304-309,共6页

为研究寨卡病毒（ZIKV）感染者血清、尿液和唾液样本中特异性IgA抗体水平,进一步了解ZIKV感染免疫机制,本研究重组表达制备寨卡病毒NS1蛋白,对其浓度、纯度进行鉴定,初步评估了NS1蛋白抗原性,并建立间接酶联免疫（Indirect-ELISA）方法... 为研究寨卡病毒（ZIKV）感染者血清、尿液和唾液样本中特异性IgA抗体水平,进一步了解ZIKV感染免疫机制,本研究重组表达制备寨卡病毒NS1蛋白,对其浓度、纯度进行鉴定,初步评估了NS1蛋白抗原性,并建立间接酶联免疫（Indirect-ELISA）方法,检测患者临床血清、尿液和唾液样本中的寨卡特异性IgA抗体。利用健康人群血清、尿液和唾液标本,评估检测方法的特异性,并确定以阴性对照的均值加3倍标准差作为判定检测结果的阈值,特异性为100%。对经病毒核酸检测所确诊病例的33份血清样本、4份尿液样本和3份唾液样本进行检测。选择3份具有较高IgA抗体水平的血清,通过2倍系列稀释的方法评价了血清样本中特异性IgA抗体的滴度,可有效检出经3 200倍以上稀释的血清样本中的IgA抗体。重复性检测实验显示板间变异系数为（3.0±0.8）%,板内变异系数为（2.7±1.0）%。寨卡患者血清、尿液和唾液样本中的特异性IgA抗体的检出率分别为75.8%（25/33）、100%（4/4）和33.3%（1/3）,提示IgA抗体在3种体液标本中均具有显著的存在,具有充当体外诊断指标的意义。同时尿液、唾液标本中特异性IgA抗体的存在,提示潜在的粘膜免疫效应,有助于增强对病毒体内播散和体外传播的理解,也初步提示了寨卡病毒NS1蛋白可用于相关免疫学诊断试剂的研发。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) 间接法ELISA IGA抗体

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寨卡病毒新型疫苗的研究进展 被引量：1

15

作者 詹瑛 邓瑶 谭文杰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期932-937,共6页

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染可造成胎儿小头症及成人格林巴利综合症,世界卫生组织已将其定为世界公众健康紧急事件。因此急需要发展新型Zika疫苗。本文简要介绍寨卡病毒生物学性状、流行病学、临床表现,并重点对寨卡病毒3种新型疫苗(... 寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染可造成胎儿小头症及成人格林巴利综合症,世界卫生组织已将其定为世界公众健康紧急事件。因此急需要发展新型Zika疫苗。本文简要介绍寨卡病毒生物学性状、流行病学、临床表现,并重点对寨卡病毒3种新型疫苗(DNA、病毒载体、mRNA疫苗)研究进展进行综述与应用展望。 展开更多

关键词 寨卡病毒(zikv) DNA疫苗 病毒载体疫苗 mRNA疫苗

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