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张应力下大鼠髁突软骨细胞外泌体微RNA表达谱分析
1
作者 施源 邵佳琪 +2 位作者 张佳男 张赞赞 卢海平 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期57-63,共7页
目的分析静止和循环张应力条件下大鼠髁突软骨细胞(mandibular condylar chondrocytes, MCC)外泌体显著差异微RNA(microRNA, miRNA)的表达谱并探究张应力调节髁突软骨内成骨的作用机制。方法分别选择5只2周龄雄性SD大鼠(共10只)在静止... 目的分析静止和循环张应力条件下大鼠髁突软骨细胞(mandibular condylar chondrocytes, MCC)外泌体显著差异微RNA(microRNA, miRNA)的表达谱并探究张应力调节髁突软骨内成骨的作用机制。方法分别选择5只2周龄雄性SD大鼠(共10只)在静止和循环张应力条件下培养大鼠MCC, 提取细胞外泌体, 两组外泌体分别命名为对照组和实验组。采用透射电子显微镜、纳米流式检测仪、纳米颗粒追踪分析等方法观察并鉴定, 通过高通量测序筛选表达显著差异的miRNA, 采用TargetScan、miRanda网站进行生物信息学分析及成骨相关靶基因预测。结果实验组大鼠MCC外泌体均呈"双凹圆盘状"单层膜结构, CD9、CD81表达阳性, 粒径分布符合外泌体特征, 与对照组大鼠MCC外泌体一致。高通量测序筛选表达显著差异的miRNA共85个(P<0.05)。差异miRNA主要参与的生物学过程与分子功能分别为生物学过程和蛋白质结合;京都基因与基因组数据库通路富集分析显示在哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路有显著富集(P<0.05)。其中miR-199a-5p的候选靶基因有骨形态发生蛋白3(bone morphogenetic protein 3, BMP3)、内皮素转换酶-1, miR-186-5p可靶向Smad8、BMP3, 以发挥成骨相关功能。结论相比于静止状态, CTS刺激能改变大鼠MCC外泌体中miR-199a-5p、miR-186-5p等miRNA的表达量, 可考虑作为调节外泌体应用潜能的一种手段。 展开更多
关键词 外泌体 张应力 外泌体测序 微RNAS 大鼠髁突软骨细胞
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淫羊藿素对大鼠软骨细胞作用的实验研究 被引量：10
2
作者 何李乐 王万春 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期517-521,共5页
目的:研究淫羊藿素对大鼠软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:将细胞随机分为6组,分别予以浓度为0,4,8,16,32,64μmol/L的淫羊藿素(纯度为99%)处理不同时间组。药物作用于细胞后,MTT比色法检测大鼠软骨细胞的增殖,Annexin V/PI双染色流式... 目的:研究淫羊藿素对大鼠软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:将细胞随机分为6组,分别予以浓度为0,4,8,16,32,64μmol/L的淫羊藿素(纯度为99%)处理不同时间组。药物作用于细胞后,MTT比色法检测大鼠软骨细胞的增殖,Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞的凋亡。结果:MTT实验结果显示,4和8μmol/L的淫羊藿素作用于大鼠软骨细胞72 h,大鼠软骨细胞的增殖能力高于对照组(P<0.05);16,32,64μmol/L的淫羊藿素作用于大鼠软骨细胞72 h,大鼠软骨细胞的增殖能力低于对照组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,在药物处理24 h和48 h后,4μmol/L的淫羊藿素所引起的细胞凋亡率较对照组明显降低(P<0.05);8,16,32μmol/L的淫羊藿素则会增加细胞的凋亡率(P<0.05)。结论:淫羊藿素在低浓度(4,8μmol/L)时能促进大鼠软骨细胞的体外增殖和抑制凋亡,而过高浓度的淫羊藿素反会抑制细胞增殖和促进凋亡。 展开更多
关键词 大鼠软骨细胞 淫羊藿素 MTT比色法 ANNEXIN V/PI双染色流式细胞术
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核因子κB诱捕抑制白细胞介素-1β诱导的软骨细胞生成一氧化氮的实验研究 被引量：3
3
作者 刘建湘 杜靖远 +3 位作者 杨述华 刘日光 易诚青 李新春 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期346-348,i003,共4页
目的探讨用核因子诱捕(decoy)方法抑制软骨细胞生成一氧化氮(NO)的可行性。方法培养大鼠软骨细胞,人工合成大鼠诱生型一氧化氮合酶(iNOS)基因上能够与核因子(NF)-κB序列识别和结合并带有荧光标记的特异性双链寡脱氧核苷酸(ODN)序列NF-... 目的探讨用核因子诱捕(decoy)方法抑制软骨细胞生成一氧化氮(NO)的可行性。方法培养大鼠软骨细胞,人工合成大鼠诱生型一氧化氮合酶(iNOS)基因上能够与核因子(NF)-κB序列识别和结合并带有荧光标记的特异性双链寡脱氧核苷酸(ODN)序列NF-κBdecoyODN,将不同浓度的NF-κBdecoyODN转染入培养的大鼠软骨细胞,通过荧光显微镜观察其转染效率及降解情况,检测其对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞NO生成及iNOSmRNA转录的影响。结果NF-κBdecoyODN能转染入软骨细胞胞核并能维持一定时间,其中4μmol/L以上浓度的NF-κBdecoyODN能够有效抑制IL-1β诱导的软骨细胞iNOSmRNA的转录及NO生成。结论NF-κBdecoyODN能够转染入软骨细胞并抑制IL-1β诱导的软骨细胞iNOSmRNA的转录及NO生成,为抑制NO的生成提供了新的思路和方法。 展开更多
关键词 白细胞介素-1Β 细胞生成 核因子ΚB 实验研究 诱捕 诱生型一氧化氮合酶 decoy 大鼠软骨细胞 寡脱氧核苷酸 iNOS NO生成 mRNA转录 ODN mol/L 荧光标记 人工合成 不同浓度 转染效率 微镜观察 抑制NO NF 特异性 培养 序列
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大鼠IL-10真核表达载体在软骨细胞中的表达 被引量：2
4
作者 赵阳 柳子星 +3 位作者 王颖 张惠珍 王树军 葛海良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期349-351,共3页
目的 构建大鼠IL-10真核表达载体并在大鼠软骨细胞中进行表达。方法 将目的基因片段通过酶切连入真核表达载体pcDNA3,并以Super Fect Transfection Reagent介导转入大鼠软骨细胞表达,RT-PCR检测细胞中mRNA水平,及ELISA检测细胞培养上清... 目的 构建大鼠IL-10真核表达载体并在大鼠软骨细胞中进行表达。方法 将目的基因片段通过酶切连入真核表达载体pcDNA3,并以Super Fect Transfection Reagent介导转入大鼠软骨细胞表达,RT-PCR检测细胞中mRNA水平,及ELISA检测细胞培养上清液中的IL-10蛋白含量。结果 成功构建了大鼠IL-10真核表达载体,转入软骨细胞后,检测到细胞内IL-10mRNA转录,细胞培养24、48和72 h后,经ELISA检测上清液中IL-10蛋白含量分别为36、62和100 pg/mL。结论 大鼠IL-10真核表达载体的构建并在软骨细胞中表达,为研究IL-10诱导软骨细胞同种异体移植耐受奠定了基础。 展开更多
关键词 大鼠软骨细胞 真核表达 大鼠IL-10
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大鼠下颌前导后髁突软骨组织中BMP-2的含量变化研究 被引量：2
5
作者 张勤 郑司鹏 +2 位作者 刘红 刁晓洁 贾莹 《新疆医科大学学报》 CAS 2015年第12期1489-1491,1495,共4页
目的探讨下颌前导对大鼠髁突软骨细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)含量的影响。方法 64只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠全天佩戴自制的前导装置,对照组不佩戴矫治器。于第0、1、3、5天及第1、2、4、8周分别处死各组大鼠,应用酶... 目的探讨下颌前导对大鼠髁突软骨细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)含量的影响。方法 64只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠全天佩戴自制的前导装置,对照组不佩戴矫治器。于第0、1、3、5天及第1、2、4、8周分别处死各组大鼠,应用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测、分析大鼠髁突软骨内BMP-2的含量变化。结果 (1)与对照组比较,实验组大鼠髁突软骨BMP-2含量增高,差异有统计学意义(P=0.000)。随加力时间进展,BMP-2含量也随之改变,各时间点BMP-2含量比较差异有统计学意义(P=0.011)。(2)下颌前导加载后髁突软骨细胞BMP-2含量与时间呈二次项(抛物线)模型趋势,体现一定的时间节律(P=0.000)。结论下颌前导能够促进髁突软骨细胞BMP-2的释放含量,从而可能参与髁突软骨的骨改建过程。 展开更多
关键词 下颌前导 大鼠髁状突软骨细胞 骨形成蛋白-2
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松果菊苷对脂多糖诱导的骨关节炎软骨细胞增殖及炎性特征的影响 被引量：1
6
作者 庞运芬 雷丹青 《广西医科大学学报》 CAS 2020年第3期410-415,共6页
目的:探讨松果菊苷(ECH)在延缓骨关节炎(OA)关节软骨退变中对软骨细胞增殖活性、炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和环氧化酶-2(COX-2)]以及糖胺聚糖蛋白(ACAN、GAG)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响。方... 目的:探讨松果菊苷(ECH)在延缓骨关节炎(OA)关节软骨退变中对软骨细胞增殖活性、炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和环氧化酶-2(COX-2)]以及糖胺聚糖蛋白(ACAN、GAG)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响。方法:将细胞分为3组,分别为空白组(未处理)、模型组(LPS处理)和实验组(LPS+ECH处理)。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、苏木精-伊红(HE)染色、番红O和免疫荧光染色检测ECH减缓软骨细胞外基质的降解和抑制炎症的效果。结果:通过四甲基偶氮唑盐(MTT)试验,选择ECH浓度为10μg/mL进行实验。结果明表,ECH能抑制LPS诱导的软骨细胞ACAN的表达下调和IL-1β、MMP3、MMP13、iNOS和COX-2的表达上调;维持软骨细胞的形态;促进GAG的分泌;抑制MMP13的分泌。结论:ECH能有效提高细胞活力,促进软骨细胞增殖,抑制相关炎症基因的表达,提高糖胺聚糖蛋白表达,缓解软骨细胞外基质的降解。 展开更多
关键词 松果菊苷 大鼠软骨细胞 骨关节炎 脂多糖 炎性特征
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嘛呢骨痹液对大鼠创伤性骨痹的治疗作用
7
作者 程体娟 张煦 +4 位作者 王奋刚 王志坚 程彦斌 曹勇军 吴国德 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期36-37,共2页
目的观察嘛呢骨痹液对大鼠创伤性骨痹的治疗作用。方法手术制作大鼠创伤性骨痹模型,观察药物对组织形态学改变的影响。结果大剂量组大鼠软骨细胞明显增生,体积大,胞浆丰富,潮线消失,骨小梁明显增宽。结论嘛呢骨痹液对大鼠创伤性骨痹具... 目的观察嘛呢骨痹液对大鼠创伤性骨痹的治疗作用。方法手术制作大鼠创伤性骨痹模型,观察药物对组织形态学改变的影响。结果大剂量组大鼠软骨细胞明显增生,体积大,胞浆丰富,潮线消失,骨小梁明显增宽。结论嘛呢骨痹液对大鼠创伤性骨痹具有明显治疗作用。 展开更多
关键词 创伤性骨痹 嘛呢骨痹液 治疗作用 大鼠软骨细胞 形态学改变 大剂量 骨小梁
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2012年总目次
8
《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2012年第12期I0001-I0008,共8页
实验研究 龟鹿二仙胶及其拆方含药血清对硝普钠诱导的大鼠软骨细胞bax、bcl-2表达的影响………李楠雒焕生尹玉彪等20（1）：1补肾活血方对家兔膝骨关节炎滑膜组织基因表达谱的影响……………………………阚卫兵姜玉祥宋朋飞等20（1）：... 实验研究 龟鹿二仙胶及其拆方含药血清对硝普钠诱导的大鼠软骨细胞bax、bcl-2表达的影响………李楠雒焕生尹玉彪等20（1）：1补肾活血方对家兔膝骨关节炎滑膜组织基因表达谱的影响……………………………阚卫兵姜玉祥宋朋飞等20（1）：5消瘀散巴布剂和湿敷贴剂外用治疗急性软组织损伤的实验研究…………………………朱春城彭力平肖立新等20（1）：9夹板固定带下横向压力分布机理实验研究…………………………………………… 展开更多
关键词 总目次 急性软组织损伤 BCL-2表达 实验研究 大鼠软骨细胞 龟鹿二仙胶 基因表达谱 膝骨关节炎
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shRNA沉默RAGE基因对骨性关节炎SD大鼠软骨细胞外基质代谢的影响
9
作者 张驰 周燕芸 +1 位作者 翁艳 陈冬冬 《福建医药杂志》 CAS 2018年第6期131-134,共4页
目的研究RAGE基因在骨性关节炎形成中的作用,探讨其对骨性关节炎SD大鼠软骨细胞外基质代谢的影响。方法通过构建RAGE基因的shRNA表达载体,沉默RAGE基因在骨性关节炎SD大鼠软骨细胞的表达,采用Western blot分别检测空白对照组、空载组、s... 目的研究RAGE基因在骨性关节炎形成中的作用,探讨其对骨性关节炎SD大鼠软骨细胞外基质代谢的影响。方法通过构建RAGE基因的shRNA表达载体,沉默RAGE基因在骨性关节炎SD大鼠软骨细胞的表达,采用Western blot分别检测空白对照组、空载组、shRNA沉默组中RAGE、p-p38 MAPK、MMP-13、ADAMTS-4和ADAMTS-5的蛋白水平。结果与空白对照组和空载组(Rc)相比,R1、R2、R3、R4的RAGE、p-p38MAPK、 MMP-13、ADAMTS-4和ADAMTS-5蛋白表达水平显著下降(P<0.05);RAGE、p-p38MAPK和MMP-13的蛋白水平在空白对照组和空载组(Rc)间差异无统计学意义;RAGE、ADAMTS-4和ADAMTS-5的蛋白水平在空白对照组和空载组(Rc)间差异有统计学意义(P<0.05)结论shRNA沉默RAGE基因表达对骨性关节炎SD大鼠软骨细胞外基质代谢有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 SHRNA RAGE SD大鼠软骨细胞 骨关节炎
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二烯丙基二硫对IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞的影响 被引量：2
10
作者 王宏强 仇成凤 +3 位作者 邓紫薇 史志华 李峰 谭力铭 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1498-1503,共6页
观察二烯丙基二硫(DADS)对IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞的影响,除空白对照组外,其余各组加入IL-1β(10 ng/m L)诱导24 h后换DADS处理,通过CCK8实验、平板克隆实验检测增殖能力,Western blot实验检测MMP13、TIMP1和CollagenⅡ蛋白表达... 观察二烯丙基二硫(DADS)对IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞的影响,除空白对照组外,其余各组加入IL-1β(10 ng/m L)诱导24 h后换DADS处理,通过CCK8实验、平板克隆实验检测增殖能力,Western blot实验检测MMP13、TIMP1和CollagenⅡ蛋白表达水平。结果发现:12.5和25μmol/L DADS对IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞有增殖作用(P<0.05),50和100μmol/L DADS对IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞有抑制作用(P<0.05);12.5和25μmol/L DADS显著增加IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞克隆集落形成能力(P<0.05),50μmol/L DADS显著抑制IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞克隆集落形成能力(P<0.05);DADS能显著抑制MMP13的表达,增加TIMP1和CollagenⅡ的表达。以上结果提示DADS对IL-1β诱导SD大鼠关节软骨细胞具有双向调节作用,25μmol/L DADS保护关节软骨细胞的分子机制可能与DADS显著抑制MMP13的表达,增加TIMP1和CollagenⅡ的表达相关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 IL-1Β SD大鼠关节软骨细胞 双向调节
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