淀粉样前体蛋白糖基化修饰对其加工剪切的调控 被引量：2

1

作者 史婧婧 邹霞 张延 《生物技术》 CAS 2022年第1期90-98,78,共10页

β淀粉样肽(Aβ)的过量产生和沉积是阿尔兹海默症(AD)主要的病理特征。Aβ是淀粉样前体蛋白(APP)经β/γ-分泌酶依次剪切的产物,因此关于APP加工剪切过程的研究对深入理解AD的发生机制具有重要意义。APP是一种同时具有N-糖链和O-糖链修... β淀粉样肽(Aβ)的过量产生和沉积是阿尔兹海默症(AD)主要的病理特征。Aβ是淀粉样前体蛋白(APP)经β/γ-分泌酶依次剪切的产物,因此关于APP加工剪切过程的研究对深入理解AD的发生机制具有重要意义。APP是一种同时具有N-糖链和O-糖链修饰的糖基化蛋白,APP的糖基化可以影响其在细胞内的转运定位和成熟加工。多种糖基转移酶及糖苷酶,如多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T),O-GlcNAc糖苷酶(OGA)等可以调节APP糖基化水平进而影响Aβ产生。该文总结梳理了APP上N-糖基化、O-GalNAc糖基化、O-GlcNAc糖基化的表达情况及其对APP转运加工影响的研究进展,指出了糖基化调控的复杂性和存在的矛盾现象,为深入探索APP功能机制启发思路,同时为从糖基化角度寻找AD诊疗靶点提供理论依据。 展开更多

关键词 淀粉样前体蛋白 n-糖基化 O-糖基化 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶 Aβ生成

原文传递

ppGalNAcT2反义RNA对胃癌细胞SGC7901生物学特性的影响 被引量：2

2

作者 金美芳 邵雪军 吴士良 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2008年第5期389-392,I0001,共5页

目的:研究人胃癌细胞SGC7901中多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)基因表达与肿瘤转移相关基因MMP2,TGF-β1表达的相关性,以及对细胞增殖和形态生物学特性的影响。方法:用两个已构建好的反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G... 目的:研究人胃癌细胞SGC7901中多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)基因表达与肿瘤转移相关基因MMP2,TGF-β1表达的相关性,以及对细胞增殖和形态生物学特性的影响。方法:用两个已构建好的反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆。通过共聚焦显微镜,RT-PCR检测反义封闭pp-GalNAc-T2基因RNA表达后,胃癌细胞SGC7901中TGF-β1,MMP2表达水平,细胞增殖以及形态的变化。结果:反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞SGC7901pp-GalNAc-T2的表达水平明显降低,细胞的形态发生改变,分裂增殖减慢。结果还显示,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达可使TGF-β1,MMP2基因在mRNA表达水平均增加,提示pp-GalNAc-T2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响。结论:pp-GalNAc-T2可能在肿瘤的增殖、浸润和转移中发挥作用。 展开更多

关键词 SGC7901细胞 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶 基质金属蛋白酶 转化生长因子-Β1

下载PDF 职称材料

人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2基因反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究 被引量：1

3

作者 仇灏 金美芳 +4 位作者 周迎会 孙其昌 刘可人 沈宏杰 吴士良 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期43-48,共6页

反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp... 反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp-GalNAc-T2的人胃癌细胞株SGC7901的总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增两段不同长度pp-GalNAc-T2基因片段,构建反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆.通过流式细胞术、荧光显微镜、RT-PCR及Western印迹检测反义封闭pp-GalNAc-T2基因RNA表达后胃癌细胞SGC7901增殖以及TGF-β1、MMP2表达水平的变化.反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞SGC7901 pp-GalNAc-T2的表达水平明显降低,细胞分裂增殖减慢,表明反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达对胃癌细胞SGC7901的生长增殖有影响.结果还显示,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达可使TGF-β1、MMP2基因在mRNA与蛋白质表达水平均增加,提示pp-GalNAc-T2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响.以上结果表明,pp-GalNAc-T2基因在肿瘤细胞中广泛表达,并可能与肿瘤的增殖及浸润转移相关. 展开更多

关键词 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶 基质金属蛋白酶 转化生长因子-Β1 SGC7901细胞

下载PDF 职称材料

siRNA下调Smad3基因后对多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶表达的影响

4

作者 胡从莉 王泽荣 +2 位作者 孙斌 徐正荣 吴士良 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期830-833,I0001,共5页

目的以Smad3基因为研究对象,筛选出该基因的有效siRNA干扰载体,并探讨下调表达Smad3基因对多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcTs)家族mRNA水平表达的影响。方法将事先构建的3个带有荧光标记的干扰载体分别转染人肝星状细胞株(HSC)中,... 目的以Smad3基因为研究对象,筛选出该基因的有效siRNA干扰载体,并探讨下调表达Smad3基因对多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcTs)家族mRNA水平表达的影响。方法将事先构建的3个带有荧光标记的干扰载体分别转染人肝星状细胞株(HSC)中,通过RT-PCR、Western blot方法分别从mRNA水平及蛋白水平检测干扰效率。并通过转染有效的Smad3基因的siRNA表达载体,检测下调Smad3以后对糖基转移酶ppGalNAcTs家族mRNA表达的影响情况。结果成功筛选到Smad3基因的有效siRNA干扰载体,检测出转染了Smad3的siRNA表达载体的肝星状细胞中Smad3的mRNA和蛋白表达都受到了抑制,而糖基转移酶ppGalNAcTs的mRNA表达也随之发生了一些变化。结论成功筛选到一个Smad3基因的siRNA干扰载体,继而可转染人肝星状细胞,并抑制其中Smad3蛋白的表达,为研究siRNA方法在肝纤维化中的治疗作用提供了实验基础和理论支持。 展开更多

关键词 SMAD3基因 SIRnA 肝纤维化 转化生长因子-Β 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶

原文传递

GALNT7在乳腺癌中的表达及临床价值

5

作者 喻钶 王峰 王华 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2024年第6期0131-0135,共5页

分析多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶7(GALNT7)在乳腺癌中的表达及其临床价值。方法 应用免疫组织化学方法对116名患者进行了GALNT7基因的表达分析,分析GALNT7蛋白的表达与病人的临床、病理学特点的关联,并采用Kaplan-Meier方法对总体存活... 分析多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶7(GALNT7)在乳腺癌中的表达及其临床价值。方法 应用免疫组织化学方法对116名患者进行了GALNT7基因的表达分析,分析GALNT7蛋白的表达与病人的临床、病理学特点的关联,并采用Kaplan-Meier方法对总体存活进行检测,采用单一因子和多元因子的 Cox回归模式,对风险因子对结果的影响进行分析。结果 GALNT7在乳腺癌细胞中的表达水平和TNM分期、淋巴结转移密切相关,同时存在正比例关系。另外,其表达量受到TNM分级的影响,针对呈(+)性者而言,其生存率远远低于非阳性的病人,两者之间存在显著性差异。GALNT7蛋白水平与患者预后密切相关。结论 GALNT7可作为一个潜在的乳腺癌分子标志物和潜在的分子靶标。 展开更多

关键词 乳腺癌 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶7 免疫组织化学法 预后

下载PDF 职称材料

miR-4698介导GALNT4表达对肝癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：1

6

作者 江忍 张茂娜 +2 位作者 张弘 江悦 张军 《中国医师杂志》 CAS 2021年第4期558-562,共5页

目的检测miR-4698在肝癌组织及细胞系中的相对表达,分析其对肝癌细胞增殖和迁移的影响及分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织和肝癌细胞系中miR-4698的相对表达。在表达最低的肝癌细胞系中,采用脂质体转染法... 目的检测miR-4698在肝癌组织及细胞系中的相对表达,分析其对肝癌细胞增殖和迁移的影响及分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织和肝癌细胞系中miR-4698的相对表达。在表达最低的肝癌细胞系中,采用脂质体转染法分别转染miR-4698模拟物和对照模拟物,命名为实验组和对照组。qRT-PCR检测转染效率。细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测过表达miR-4698对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-4698与靶基因的结合。qRT-PCR和Western blot分别检测靶基因在mRNA水平和蛋白水平的相对表达。结果与癌旁组织相比,miR-4698在肝癌组织的表达明显降低(P<0.01)。与正常肝细胞系相比,miR-4698在肝癌细胞系的表达明显降低(P<0.05),在Huh7细胞的表达最低(P<0.01)。转染后,与对照组相比,实验组Huh7细胞中miR-4698的表达明显增加(P<0.01)。过表达miR-4698可抑制肝癌Huh7细胞的增殖能力(P<0.05)和迁移能力(P<0.05)。生物信息学显示miR-4698的靶基因是多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4),双荧光素酶报告基因证实miR-4698可互补结合GALNT4(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,过表达miR-4698可抑制GALNT4基因的表达(P<0.01)。Western blot实验显示,miR-4698过表达后,Huh7细胞中GALNT4蛋白表达降低,细胞增殖相关蛋白Cyclin B和CDK1表达降低,细胞转移相关蛋白N-cadherin和ZEB-2表达降低。结论miR-4698在肝癌组织和细胞系中表达明显下降,过表达miR-4698可通过抑制GALNT4基因的表达,降低肝癌Huh7细胞的增殖和迁移能力。 展开更多

关键词 肝肿瘤 微RnAS 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶4 细胞增殖 细胞迁移分析

原文传递

ppGalNac-T10对人结直肠癌细胞株LoVo的生物学特性的影响

7

作者 冯菁华 高媛 +3 位作者 陈玕 彭翼飞 郑文岭 马文丽 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期428-432,共5页

探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalNAc-T10)对人结直肠癌细胞株LoVo细胞特性的影响.ppGalNAc-T10正义真核表达载体pcDNA3.1-T10(+)、反义真核表达载体pcDNA3.1-T10(-)与空载体pcDNA3.1分别转染LoVo细胞,Western blot检测ppGalNAc-... 探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalNAc-T10)对人结直肠癌细胞株LoVo细胞特性的影响.ppGalNAc-T10正义真核表达载体pcDNA3.1-T10(+)、反义真核表达载体pcDNA3.1-T10(-)与空载体pcDNA3.1分别转染LoVo细胞,Western blot检测ppGalNAc-T10蛋白水平表达的变化,确定转染效果.CCK8法检测转染后各实验组细胞增殖的变化,细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化,穿膜实验检测细胞侵袭能力的变化.Western blot证明各实验组经转染不同ppGalNAc-T10载体后,ppGalNAc-T10蛋白表达量发生变化,转染pp-GalNAc-T10正义真核表达载体的LoVo细胞,ppGalNAc-T10的蛋白表达量增加,同时细胞的增殖受到抑制,迁移能力和侵袭能力降低;而转染ppGalNAc-T10反义真核表达载体的LoVo细胞,ppGalNAc-T10的蛋白表达量降低,细胞生长加快,迁移能力和侵袭能力增强.ppGalNAc-T10可能影响人结直肠癌细胞株LoVo细胞的增殖、迁移能力和侵袭能力. 展开更多

关键词 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalnAc-T10) 结直肠癌细胞株 生物学性能

下载PDF 职称材料

RNAi沉默GALNT7基因对宫颈癌细胞恶性行为的影响

8

作者 彭瑞清 门剑龙 任静 《实用检验医师杂志》 2014年第3期147-152,共6页

目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶7(polypeptide N-acetylgalactosaminyhransferase 7,GALNT7)基因对宫颈癌细胞生长、侵袭及迁移能力的影响。方法利用RNA干扰技术沉默GALNT7(siR-GALNT7),以非特异性序列(pSilencer 2.1)转染细胞作... 目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶7(polypeptide N-acetylgalactosaminyhransferase 7,GALNT7)基因对宫颈癌细胞生长、侵袭及迁移能力的影响。方法利用RNA干扰技术沉默GALNT7(siR-GALNT7),以非特异性序列(pSilencer 2.1)转染细胞作为阴性对照,转染宫颈癌细胞HeLa和C33A细胞,采用MTT实验、集落形成实验、Transwell侵袭实验以及细胞划痕实验来检测干扰GALNT7基因后宫颈癌细胞生长、侵袭以及转移能力的变化。结果 Western Blot检测结果显示,转染siRGALNT7质粒的实验组中两种宫颈癌细胞中GALNT7的蛋白表达水平明显降低,与转染siR-Ctrl的对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);siR-GALNT7使HeLa和C33A细胞生长活性分别下降了19%和22%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);siR-GALNT7使HeLa和C33A细胞的集落形成能力分别下降了56%和52%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);siR-GALNT7使HeLa和C33A细胞侵袭能力分别下降了48%和54%,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);siR-GALNT7使HeLa细胞迁移能力下降了约30%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论RNA干扰在体外明显降低了宫颈癌细胞中GALNT7基因的表达,同时抑制了宫颈癌细胞的生长侵袭以及迁移能力,GALNT7基因有可能成为宫颈癌基因治疗的重要靶点。 展开更多

关键词 宫颈癌细胞:多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶7 RnA干扰

下载PDF 职称材料

食管鳞状细胞癌组织pp-GalNac-T10高表达与淋巴结转移有关

9

作者 姜浩元 潘星华 高媛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期926-929,共4页

目的研究多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(pp-GalNac-T10)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达水平及其与临床指标的关系。方法对120例ESCC患者的组织芯片,采用免疫组织化学法检测pp-GalNac-T10在ESCC中的表达,并分析其表达与临床病理参... 目的研究多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(pp-GalNac-T10)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达水平及其与临床指标的关系。方法对120例ESCC患者的组织芯片,采用免疫组织化学法检测pp-GalNac-T10在ESCC中的表达,并分析其表达与临床病理参数之间的关系。结果 ESCC组织中pp-GalNac-T10表达与癌旁组织类似,但pp-GalNac-T10表达的阳性率与ESCC淋巴结受累、TNM分期情况相关,pp-GalNac-T10在发生转移患者的癌组织表达强度明显高于未发生转移患者的癌组织。结论 pp-GalNac-T10的表达与ESCC的淋巴结转移有关。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 多肽n-乙酰氨基半乳糖转移酶10(pp-Galnac-T10) 淋巴结转移

下载PDF 职称材料

多肽-N乙酰氨基半乳糖转移酶10在肺癌中的表达及意义

10

作者 蔡翠霞 高媛 +1 位作者 刘玥 王涵多 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期206-210,共5页

目的探讨检测多肽-N乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalNAc-T10)单细胞技术与应用蛋白在肺癌、乳腺癌和结肠癌中的表达。方法采用免疫组织化学检测ppGalNAc-T10在110例肺癌组织、100例乳腺癌组织和110例结肠癌组织中的表达;不同的肿瘤均有10... 目的探讨检测多肽-N乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalNAc-T10)单细胞技术与应用蛋白在肺癌、乳腺癌和结肠癌中的表达。方法采用免疫组织化学检测ppGalNAc-T10在110例肺癌组织、100例乳腺癌组织和110例结肠癌组织中的表达;不同的肿瘤均有10例相对应的正常组织作为对照。结果同正常肺组织相比较,ppGalNAc-T10在肺癌组织中表达较低;且ppGalNAc-T10的表达与肿瘤侵袭深度相关(P<0.01)。PpGalNAc-T10蛋白在乳腺癌和结肠癌及其相对应的正常组织的表达差异无显著性。结论PpGalNAc-T10在肺癌中,有可能成为的1个有效标记蛋白。 展开更多

关键词 肺癌 乳腺癌 结肠癌 多肽-n乙酰氨基半乳糖转移酶10 人

下载PDF 职称材料

黏蛋白型O-聚糖在人类肿瘤中的结构异常及生物学功能 被引量：7

11

作者 刘春亮 吴士良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第5期475-483,共9页

黏蛋白是细胞表面的或分泌的、具有高度O-糖基化修饰的糖蛋白.在黏蛋白中,O-聚糖(O-glycan)是通过N-乙酰氨基半乳糖与丝氨酸或苏氨酸之间形成α连接,该结构即被称为黏蛋白型O-聚糖.黏蛋白型O-聚糖是由多肽∶N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGa... 黏蛋白是细胞表面的或分泌的、具有高度O-糖基化修饰的糖蛋白.在黏蛋白中,O-聚糖(O-glycan)是通过N-乙酰氨基半乳糖与丝氨酸或苏氨酸之间形成α连接,该结构即被称为黏蛋白型O-聚糖.黏蛋白型O-聚糖是由多肽∶N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T)家族催化起始合成的,近年来,该酶的催化机制及结构特点已成为糖基转移酶研究的热点.在肿瘤中常常伴随着黏蛋白型O-聚糖结构上和数量上的改变,形成肿瘤特异聚糖结构(cancer-associated glycans),如肿瘤Tn和T抗原等.肿瘤特异聚糖使肿瘤细胞的抗原性和黏附能力发生改变,促进肿瘤细胞的恶性增生与转移.而这些肿瘤特异聚糖结构,也为肿瘤的诊断与抗肿瘤药物或疫苗开发提供了理论基础. 展开更多

关键词 糖组学 O-聚糖 多肽∶n-乙酰氨基半乳糖转移酶 肿瘤特异聚糖

下载PDF 职称材料

人ppGalNAc-T2的原核表达、纯化及其蓖麻蛋白样结构域的结构预测

12

作者 金美芳 丁向明 +4 位作者 仇灏 吴士良 周嘉梁 郭向红 潘浩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期476-481,共6页

多肽∶N乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcT)是催化O糖基化的起始酶,在O聚糖的形成中起着关键的作用.为更好地研究该家族酶的结构与功能,采用PCR技术从pDONR201T2得到ppGalNAcT2全长编码序列,亚克隆至原核表达载体pGEX4T1,转化大肠杆菌BL21... 多肽∶N乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcT)是催化O糖基化的起始酶,在O聚糖的形成中起着关键的作用.为更好地研究该家族酶的结构与功能,采用PCR技术从pDONR201T2得到ppGalNAcT2全长编码序列,亚克隆至原核表达载体pGEX4T1,转化大肠杆菌BL21,获得相应表达产物,用谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱进行纯化,并进行了Western印迹检测和初步的酶活测定.为进一步研究其功能还在结构研究上利用网络结构模拟SWISSMODEL服务器对ppGalNAcT2的蓖麻蛋白样结构域进行结构模拟.成功构建了原核表达载体pGEX4T1T2,获得有效表达和纯化,并初步鉴定了其活性,同时预测了其可能的三维结构和活性位点. 展开更多

关键词 多肽:n-乙酰氨基半乳糖转移酶 融合表达 谷胱甘肽S-转移酶亲和柱 蛋白印迹 蓖麻蛋白样结构域 结构模拟

下载PDF 职称材料

疾病及发育中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶ppGalNAc-T的重要性 被引量：1

13

作者 崔雅璐 徐颖姣 +2 位作者 贾文娟 杨芳 张延 《生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第11期1264-1274,共11页

蛋白质的O-GalNAc糖基化是生物体内广泛存在的一种重要的蛋白质翻译后修饰,参与了众多生命活动过程。多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T酶)是调控蛋白质O-GalNAc糖基化修饰的起始糖基转移酶,它催化N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)共价... 蛋白质的O-GalNAc糖基化是生物体内广泛存在的一种重要的蛋白质翻译后修饰,参与了众多生命活动过程。多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T酶)是调控蛋白质O-GalNAc糖基化修饰的起始糖基转移酶,它催化N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)共价结合到蛋白质丝氨酸或苏氨酸的侧链羟基上,形成Tn糖链抗原结构。人体内ppGalNAc-T酶家族共有20个成员,各成员在不同的组织和细胞中的表达具有时空特异性,同时对其修饰的底物蛋白存在选择性。ppGalNAc-T酶的异常表达与组织器官发育,以及肿瘤、家族性钙质沉积、冠心病、阿尔兹海默症、先天性心脏病等复杂性疾病的发生发展密切相关。该文总结了近年来关于ppGalNAc-T酶在组织器官发育过程以及复杂性疾病发生发展中的研究概况,为深入理解ppGalNAc-T酶和O-糖基化的功能及其生物学意义提供参考。 展开更多

关键词 O-GalnAc糖基化 多肽:n-乙酰氨基半乳糖转移酶 发育 疾病 肿瘤

原文传递

人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族分子进化的初步研究

14

作者 杭赛宇 吴士良 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2006年第2期105-108,共4页

目的:探讨人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性,揭示其进化规律。方法:采用生物信息学软件和网上数据库对核酸蛋白质序列进行同源比较,结构域分析和进化树绘制。结果:人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二... 目的:探讨人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性,揭示其进化规律。方法:采用生物信息学软件和网上数据库对核酸蛋白质序列进行同源比较,结构域分析和进化树绘制。结果:人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二级结构均有较高的同源性,系统进化树显示各成员来源于同一祖先并在不同时期分野。结论:各成员来自于同一祖先的同一家族,其进化方式属于趋异性进化。 展开更多

关键词 多肽:n-乙酰氨基半乳糖转移酶 序列比较 结构域 系统进化树

下载PDF 职称材料

多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2与共刺激分子B7-H3相互作用的结构信息学初步探讨

15

作者 蒋俊华 邱天宇 +3 位作者 顾文超 孙海洪 吴士良 周迎会 《中国血液流变学杂志》 CAS 2010年第3期356-359,413,共5页

目的 研究多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2（ppGalNAc-T2）与共刺激分子B7-H3的相互关系.方法 通过同源模拟,得到共刺激分子B7-H3两种不同剪接体（2IgB7-H3,4IgB7-H3）的分子结构,寻找PDB数据库中的ppGalNAc-T2的蛋白质晶体结构,利用软... 目的 研究多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2（ppGalNAc-T2）与共刺激分子B7-H3的相互关系.方法 通过同源模拟,得到共刺激分子B7-H3两种不同剪接体（2IgB7-H3,4IgB7-H3）的分子结构,寻找PDB数据库中的ppGalNAc-T2的蛋白质晶体结构,利用软件GRAMM（http：//vakser.bioinformatics.ku.edu/main/resources_gramm.php）,与同源模拟得到的两种不同剪接体的B7-H3分子结构相结合,寻找两者之间是否存在直接结合的可能.结果 成功地模拟了共刺激分子B7-H3两种剪接体的分子结构,发现ppGalNA-T2与共刺激分子B7-H3有相互结合的可能性.结论 结构生物信息学的研究发现ppGalNAc-T2分子与B7-H3具有潜在相互作用位点,ppGalNAc-T2可能参与B7-H3蛋白质的O-糖链合成反应,并且很有可能是通过直接接触来催化控制B7-H3分子的O-糖链合成. 展开更多

关键词 多肽:n-乙酰氨基半乳糖转移酶-2 共刺激分子B7-H3 GRAMM 蛋白质同源模拟

下载PDF 职称材料

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的原核表达、纯化及酶活检测

16

作者 贾伟 杭赛宇 +2 位作者 史宁 周迎会 吴士良 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2006年第2期93-96,共4页

目的:以人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)为研究对象,利用载体pGEX-5X-3在大肠杆菌(E.Coli)BL21中原核表达其编码序列,并对表达产物进行纯化、复性及酶活检测。方法:首先利用PCR技术从克隆载体pDONR201-T2得到ppGalNAc-T... 目的:以人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)为研究对象,利用载体pGEX-5X-3在大肠杆菌(E.Coli)BL21中原核表达其编码序列,并对表达产物进行纯化、复性及酶活检测。方法:首先利用PCR技术从克隆载体pDONR201-T2得到ppGalNAc-T2全长编码序列,将其亚克隆至原核表达载体pGEX-5X-3,形成重组表达质粒pGEX-5X-3/T2。重组质粒转化大肠杆菌DH5α,测序鉴定后转化BL21,异丙基硫代半乳糖(IPTG)诱导后,表达产物为主要以包涵体形式存在的融合蛋白。对其复性后用谷胱甘肽-琼脂糖(G lutath ione-Sepharose)4B亲和层析柱进行纯化。然后根据ppGalNAc-T2的催化功能,设计底物,建立酶促反应体系,利用高效液相色谱(HPLC)进行酶活分析。结果:成功构建了原核表达重组载体pGEX-5X-3/T2,通过蛋白质电泳检测到分子量约为90 kD的融合蛋白的表达,利用亲和层析得到纯化的酶蛋白,并经W estern印迹得以验证。反应后体系上柱洗脱后出现酶促反应的产物洗脱峰。结论:成功构建了重组表达载体pGEX-5X-3/T2,ppGalNAc-T2全长编码序列被成功表达、纯化及复性,检测到具有酶活性。 展开更多

关键词 多肽:n-乙酰氨基半乳糖转移酶2 原核表达 GST融合蛋白 谷胱甘肽-琼脂糖米和层析 酶活检测

下载PDF 职称材料

ppGalNacT2与B7-H3在胃癌患者组织中的表达及意义

17

作者 胡鹤娟 邱秀芹 +1 位作者 顾丽 张雅娟 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第10期774-776,共3页

目的探讨胃癌患者组织中多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶2（ppGalNacT2）与共刺激分子B7-H3蛋白的表达及其临床意义。方法用免疫组化染色法检测54例胃癌组织及相应的癌旁组织中ppGalNacT2与B7-H3蛋白的表达,分析两者的相关性及其与胃癌患... 目的探讨胃癌患者组织中多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶2（ppGalNacT2）与共刺激分子B7-H3蛋白的表达及其临床意义。方法用免疫组化染色法检测54例胃癌组织及相应的癌旁组织中ppGalNacT2与B7-H3蛋白的表达,分析两者的相关性及其与胃癌患者临床病理参数的关系。结果胃癌患者癌组织中ppGalNacT2及B7-H3蛋白的阳性表达率分别为55.5%（30/54）及46.3%（25/54）,明显高于相应的对照组[7.4%（4/54）及9.2%（5/54）,χ~2=29.01,P〈0.05;χ~2=18.46,P〈0.05];在高、中度分化的胃癌患者ppGalNacT2及B7-H3蛋白的阳性表达率（11.1%,9.3%）均明显低于低分化者（44.4%,37%）,差异有统计学意义（P均〈0.05）。在胃癌组织中ppGalNacT2与B7-H3蛋白的表达水平呈正相关（r=0.46,P〈0.05）。结论ppGalNacT2与B7-H3均参与胃癌的发病,并与胃癌分化程度有关。 展开更多

关键词 胃癌 多肽:n-乙酰氨基半乳糖转移酶2 共刺激分子 免疫 糖基化

下载PDF 职称材料

壳聚糖对白血病细胞糖基转移酶表达的影响及对细胞的抑制作用

18

作者 杨玲焰 秦芳 吴士良 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2008年第4期287-290,共4页

目的:观察壳聚糖对白血病细胞(K562,SHI-1)的作用。方法:以不同浓度的壳聚糖处理白血病细胞K562后,运用RT-PCR方法检测实验组K562细胞中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2(ppGalNAc-T2)mRNA表达差异。另用不同浓度的壳聚糖分别作用于白血病... 目的:观察壳聚糖对白血病细胞(K562,SHI-1)的作用。方法:以不同浓度的壳聚糖处理白血病细胞K562后,运用RT-PCR方法检测实验组K562细胞中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2(ppGalNAc-T2)mRNA表达差异。另用不同浓度的壳聚糖分别作用于白血病K562细胞和SHI-1细胞,MTT法检测壳聚糖对两种细胞的相对抑制率。结果:与阴性对照组比较,实验组K562细胞的ppGalNAc-T2表达降低,且随壳聚糖浓度升高,表达量进一步减少;MTT实验显示不同浓度的壳聚糖对K562细胞和SHI-1细胞均有抑制作用,并呈浓度依赖性。结论:壳聚糖对肿瘤细胞有一定的抑制作用,同时还可以减少ppGalNAc-T2在mRNA水平的表达。 展开更多

关键词 多肽:n-乙酰氨基半乳糖转移酶-2 壳聚糖 RT-PCR 白血病细胞

下载PDF 职称材料