一种简便的遗传转化技术在大麦中的应用 被引量：4

1

作者 马伯军 袁妙葆 +2 位作者 王光清 杨金水 葛扣麟 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期51-53,共3页

本文报导一种简便实效的以大麦的愈伤组织小细胞团做为受体，进行ＰＥＧ＋电击法的双重强化转化新途径，并对如何提高转化效率进行了探索。

关键词 大麦 多细胞团 受体 PEG 电击法 遗传转化技术

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粘附分子与卵巢癌SKOV3ipl多细胞团簇形成和耐药的关系 被引量：2

2

作者 万小平 陈建利 +3 位作者 席晓薇 丰有吉 吴直江 郁茵华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2003年第1期1-5,共5页

目的 :以卵巢癌SKOV3ipl细胞形成的多细胞团簇为模型 ,检测CD4 4、CD5 4、CD2 9、E 钙粘蛋白 (E cadherin ,E cad)mRNA水平及蛋白表达 ,探讨粘附分子与多细胞团簇形成及耐药的关系。方法 :用液体重叠系统获得SKOV3ipl多细胞团簇 ,以单... 目的 :以卵巢癌SKOV3ipl细胞形成的多细胞团簇为模型 ,检测CD4 4、CD5 4、CD2 9、E 钙粘蛋白 (E cadherin ,E cad)mRNA水平及蛋白表达 ,探讨粘附分子与多细胞团簇形成及耐药的关系。方法 :用液体重叠系统获得SKOV3ipl多细胞团簇 ,以单层细胞为对照 ,用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测上述四种粘附分子mRNA水平 ,用流式细胞检测法 (FCM)测定其在团簇细胞中的表达。结果 :RT PCR结果表明 ,团簇细胞的CD4 4mRNA和CD2 9mRNA条带光密度值分别是单层细胞的 0 6 2 6和 0 792倍 ,CD5 4mRNA和E cadmRNA条带光密度值分别是单层细胞的 1 815和 1 344倍 ,提示单层SK OV 3ipl细胞形成团簇后CD4 4和CD2 9基因表达活性下调 ,而CD5 4和E cad基因表达活性增强。FCM结果表明 ,SKOV3ipl单层细胞及团簇细胞CD4 4表达率分别为 (75 995± 3 0 4 6 % )、(5 0 70 0± 9 35 1% ) ,团簇细胞CD4 4表达比单层细胞明显降低 (P =0 0 0 1)。和对照细胞相比 ,单层SKOV3ipl细胞不表达CD5 4 (P =0 5 6 3) ,形成团簇后表达明显升高 (P <0 0 1)。单层细胞和团簇细胞CD2 9都有高表达 ,阳性率分别为 (96 2 90± 1 2 0 1% )、(92 4 94± 2 0 5 5 % ) ,团簇细胞CD2 9表达明显低于单层细胞 (P =0 0 14 )。和对照细胞相比 。 展开更多

关键词 多细胞团簇 卵巢肿瘤 粘附分子 化疗 耐药

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人卵巢癌Skov3多细胞团簇对细胞外基质和人腹膜间皮细胞的黏附性研究及β1-整合素的影响 被引量：4

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作者 刘召芬 陈建利 万小平 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第14期1050-1053,共4页

目的:通过测定卵巢癌细胞系Sk-ov3多细胞团簇对细胞外基质(ECM)和人腹膜间皮细胞的黏附性,以及β1整合素抗体对此黏附性的影响,探讨多细胞团簇在卵巢癌扩散和转移中的作用,以及β1整合素的作用。方法:Skov3团簇通过液体重叠培养系统获... 目的:通过测定卵巢癌细胞系Sk-ov3多细胞团簇对细胞外基质(ECM)和人腹膜间皮细胞的黏附性,以及β1整合素抗体对此黏附性的影响,探讨多细胞团簇在卵巢癌扩散和转移中的作用,以及β1整合素的作用。方法:Skov3团簇通过液体重叠培养系统获得。无血清的Skov3团簇悬液加入覆以ECM、牛血清蛋白(BSA,作为对照)或单层腹膜间皮细胞的96孔板,镜下记数团簇,培养6或12h。PBS洗掉未黏附细胞,同法记数。为了检测β1-整合素对团簇黏附的影响,团簇悬液中分别加入CD29mAb或正常鼠免疫球蛋白(mIgG,作为对照)培养30min,再同法培养、记数。结果:Skov3团簇对ECM的黏附率为38%±12%,而对BSA的黏附率为8%±16%,P=0·001。mIgG组黏附率为37%±10%,CD29mAb组黏附率为14%±3%,P=0·001,CD29mAb的黏附抑制率为60%。团簇黏附于单层间皮细胞,mIgG组黏附率为41%±11%,而CD29mAb组黏附率为17%±5%,P=0·001。CD29mAb的抑制率为55%±2%。结论:本实验结果提示:卵巢癌多细胞团簇可通过β1整合素黏附于ECM和人腹膜间皮细胞。因此,团簇在卵巢癌播散和转移中具有不可忽视的作用。β1整合素介导这种黏附,阻断β1整合素的功能,可部分阻断团簇的黏附。提示,抗细胞黏附可能为治疗卵巢癌提供一种新方法。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 多细胞团簇 细胞黏附分子 细胞外基质 Β1-整合素

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Src在胃癌腹腔转移多细胞团簇抗失巢凋亡中的作用 被引量：4

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作者 何晨晨 唐波 +2 位作者 董慧 崔浩 余佩武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2157-2162,共6页

目的探讨Src蛋白对体外三维培养的胃癌多细胞团簇(multicellular aggregates,MCAs)增殖及凋亡的影响。方法体外三维培养人胃腺癌细胞BGC823和MKN45成MCAs,Western blot检测MCAs和单层贴壁培养的胃癌细胞中Src蛋白表达情况。siRNA法干扰... 目的探讨Src蛋白对体外三维培养的胃癌多细胞团簇(multicellular aggregates,MCAs)增殖及凋亡的影响。方法体外三维培养人胃腺癌细胞BGC823和MKN45成MCAs,Western blot检测MCAs和单层贴壁培养的胃癌细胞中Src蛋白表达情况。siRNA法干扰Src表达,转染胃癌细胞后检测其对胃癌细胞BGC823和MKN45 MCAs形态学的影响。分别采用CCK-8和流式细胞术检测干扰Src表达对胃癌BGC823和MKN45 MCAs细胞活力和细胞凋亡率的影响。结果利用BGC823和MKN5成功建立胃癌MCAs体外三维培养模型,Western blot检测结果表明,与对照组比较,MCAs中Src的表达水平明显高于单层贴壁培养的胃癌细胞[BGC823:(0.615±0.068)vs(0.219±0.017),P<0.01;MKN45:(0.657±0.087)vs(0.420±0.015),P<0.05]。干扰胃癌细胞BGC823和MKN45 Src表达,可以显著降低MCAs形成能力,并明显影响MCAs活力。流式细胞术检测结果表明,干扰Src表达可以显著诱导MCAs发生凋亡[BGC823:(9.456±0.209)vs(3.026±0.201),P<0.01;MKN45:(9.356±0.416)vs(2.541±0.251),P<0.05]。结论 Src是胃癌MCAs抗失巢凋亡的关键分子,抑制Src表达可以显著抑制胃癌BGC823 MCAs和MKN45 MCAs形成,影响胃癌MCAs增殖,并诱导胃癌MCAs凋亡。 展开更多

关键词 胃癌 腹腔转移 SRC 多细胞团簇 失巢凋亡

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纤维连接蛋白在卵巢癌多细胞团簇中的作用和顺铂对团簇的影响 被引量：2

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作者 龚琳 郑莹 +1 位作者 刘珊玲 彭芝兰 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期930-934,共5页

目的:探讨纤维连接蛋白(FN)对卵巢癌多细胞团簇(MCA)的影响和涉及的整合素受体的调节作用,以及顺铂(DDP)对MCA的影响。方法:用液体重叠技术培养SKOV3和OVCAR-3两种卵巢癌细胞株,获得MCA后用不同浓度的FN进行干预,观察FN对MCA的作用并研... 目的:探讨纤维连接蛋白(FN)对卵巢癌多细胞团簇(MCA)的影响和涉及的整合素受体的调节作用,以及顺铂(DDP)对MCA的影响。方法:用液体重叠技术培养SKOV3和OVCAR-3两种卵巢癌细胞株,获得MCA后用不同浓度的FN进行干预,观察FN对MCA的作用并研究DDP对两种MCA的影响;运用流式细胞术和RT-PCR检测整合素受体α3β1、α4β1、α5β1的表达情况。裸鼠建立人卵巢癌腹水瘤模型后用FN及DDP进行干预,分析两者对裸鼠体内肿瘤和腹水形成的影响,进一步证实MCA形成的相关因素。结果:(1)培养SKOV3和OVCAR-3两种MCA的最佳FN浓度分别为10μg/ml和20μg/ml。(2) SKOV3的MCA和单层细胞DDP的半数抑制浓度(IC50)为20.29μmol/L和29.80μmol/L,OVCAR-3的MCA和单层细胞DDP的IC50为33.11μmol/L和41.69μmol/L; DDP处理前两种卵巢癌细胞株的单层细胞和MCA各细胞周期差异均有统计学意义(P<0.05),DDP作用后MCA凋亡率均明显增加(P<0.05)。(3)流式细胞术、RT-PCR检测显示两种细胞主要表达α4β1(P<0.05),MCA组各整合素均高于单层细胞组(P<0.05)。加入FN后,各整合素表达量均明显增加(P<0.05)。(4)裸鼠干预结果显示,FN组的肿瘤总数和腹水量均超过0.9%氯化纳液组和DDP组(P<0.05),而DDP能有效抑制肿瘤生长和腹水形成(P<0.05)。结论:体外实验说明FN对卵巢癌MCA的形成有明显的促进作用,两种细胞株表面均有整合素受体α3β1、α4β1、α5β1的表达,以α4β1为主,FN可促进它们表达。动物实验证实FN对体内种植的肿瘤细胞也具有明显的促生长作用,而DDP能有效抑制肿瘤生长和腹水形成。 展开更多

关键词 卵巢癌 多细胞团簇 纤维连接蛋白 顺铂 整合素

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酪氨酸激酶受体B在OVCAR-3卵巢癌细胞中的表达及意义 被引量：2

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作者 于晓辉 蔡斌 +2 位作者 杨懿霞 严沁 万小平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第6期405-409,共5页

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高侵袭能力。TrkB过度表达与神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤的化疗耐药和不良预后有关。本研... 背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高侵袭能力。TrkB过度表达与神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤的化疗耐药和不良预后有关。本研究旨在探讨TrkB及其配体脑源性神经营养因子(brain- derived neurotrophic factor,BDNF)在卵巢上皮性癌细胞系OVCAR-3中的表达及其意义。方法:检测卵巢癌细胞系OVCAR-3细胞贴壁培养(AC)、细胞立体培养(AIC)以及细胞立体培养得到的多细胞团簇(CS)经胰酶消化成单细胞后再次贴壁培养(RAC)细胞中TrkB及BDN F的表达差异。结果:经RT-PCR检测,与贴壁培养细胞(adhesive cells)比较,TrkB mRNA高表达于OVCAR-3多细胞团簇中(multicellular-spheroids),两组数值分别(23.5±0.5)%,(35.3±0.7)%,差异有显著性(P<0.001);BDNF mRNA的表达则正相反,两组数值分别(41.4±0.6)%,(32.2±0.7)%,差异有显著性(P<0.001)。经Western blot检测,TrkB的前体蛋白(未发生糖基化的受体形式)广泛地高表达于上述3种不同培养方式的OVCAR-3细胞中;与贴壁培养细胞比较,OVCAR-3细胞立体培养全长TrkB(发生糖基化的完整受体形式,分子量145 000)明显高表达(P<0.001)。结论:卵巢癌细胞中存在TrkB及BDNF的自分泌环路,TrkB可能是介导卵巢癌失巢凋亡抑制的因子。 展开更多

关键词 酪氨酸激酶受体B 脑原性神经营养因子 卵巢癌 失巢凋亡 多细胞团簇

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酪氨酸激酶受体B在卵巢上皮性癌中的表达及其意义 被引量：2

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作者 于晓辉 蔡斌 +2 位作者 杨懿霞 严沁 万小平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第7期501-506,共6页

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor, TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在良性肿瘤中及正常卵巢上皮中不表达,在癌组织中不但表达,并且与交界性肿瘤比较表达明显... 背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor, TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在良性肿瘤中及正常卵巢上皮中不表达,在癌组织中不但表达,并且与交界性肿瘤比较表达明显增高;转移灶和低分化癌组织中明显增高,如在神经母细胞瘤和其它多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,本研究旨在探讨其过度表达与肿瘤组织分化及病人预后的关系。方法:选取卵巢癌石蜡标本73例(包括与原发灶相对应的8例腹水中的癌细胞团簇),其中低分化腺癌34例,28例卵巢交界性上皮性肿瘤;16例卵巢良性上皮性肿瘤及13例正常卵巢组织作为对照,行免疫组化ABC法检测TrkB的表达;随机选取上述病例中30例(包括4例与原发灶相对应的大网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇)、交界性上皮性肿瘤7例;卵巢良性上皮性肿瘤4例及正常卵巢组织(包括卵巢皮质和髓质)2例作为对照,行RT-PCR检测TrkB的表达。结果:RT-PCR结果表明,TrkB mRNA在卵巢癌与卵巢交界性肿瘤中的相对转录水平分别为(16.7±3.1)%和(4.6±0.4)%,在卵巢癌组织中表达明显增加(P<0.001);TrkB mRNA在大网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇中的TrkB mRNA相对表达量分别为(31.4±1.4)%和(28.2±0.7)%,与相应的原发灶(18.1±1.1)%比较,差异有显著性(P<0.001)。免疫组化结果表明,卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢上皮不表达TrkB;TrkB在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率分别为67.12%(49/73)和14.29%(4/28),两者比较差异有显著性(P<0.001),TrkB前体蛋白(表达于胞质)广泛地高表达于卵巢上皮性癌组织中67.12%(49/73),全长TrkB蛋白(表达于胞膜)在腹水中的癌细胞团簇100%(8/8)和低分化卵巢癌组织中100%(34/34)表达增强,与原发灶49.32%(36/73)和高分化癌7.69%(3/39)比较,差异有显著性(P<0.01)。TrkB阳性表达与卵巢� 展开更多

关键词 酪氨酸激酶受体B 卵巢癌 失巢凋亡 多细胞团簇

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纤维连接蛋白对卵巢癌多细胞团簇形成的影响 被引量：2

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作者 谢晓砚 刘珊玲 +4 位作者 王和 林琳 朱红梅 张建军 郑莹 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期240-244,共5页

目的初步探索纤维连接蛋白对卵巢癌多细胞团簇形成的影响及可能参与的整合素受体亚型。方法以卵巢癌细胞系SKOV3为对象,在体外建立多细胞团簇模型,研究纤维连接蛋白对团簇形成的影响,在此基础上再用荧光定量PCR和免疫蛋白印迹从mRNA和... 目的初步探索纤维连接蛋白对卵巢癌多细胞团簇形成的影响及可能参与的整合素受体亚型。方法以卵巢癌细胞系SKOV3为对象,在体外建立多细胞团簇模型,研究纤维连接蛋白对团簇形成的影响,在此基础上再用荧光定量PCR和免疫蛋白印迹从mRNA和蛋白水平上检测因纤维连接蛋白刺激而表达改变的整合素受体亚型。结果纤维连接蛋白能够促进大于250μm的多细胞团簇的形成;纤维连接蛋白刺激形成的多细胞团簇中整合素受体亚型ITGA5的表达受到了抑制。结论本研究证实了纤维连接蛋白能促进卵巢癌多细胞团簇的形成,并初步提示整合素受体亚型ITGA5很可能参与了这一影响过程。 展开更多

关键词 卵巢癌 多细胞团簇 纤维连接蛋白 整合素受体

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卵巢癌SKOV3ip1多细胞团簇细胞内顺铂和紫杉醇浓度测定及意义 被引量：1

9

作者 陈建利 丰有吉 陈刚 《现代妇产科进展》 CSCD 2002年第1期8-10,共3页

目的 :探讨药物渗透性与卵巢癌SKOV3ip1细胞形成的多细胞团簇化疗耐药性的关系。方法 :用液体重叠系统获得SKOV3ip1多细胞团簇 ,毛细管区带电泳法测定SKOV3ip1单层和团簇细胞胞内顺铂和紫杉醇含量。结果 :顺铂作用 2h后单层细胞和团族... 目的 :探讨药物渗透性与卵巢癌SKOV3ip1细胞形成的多细胞团簇化疗耐药性的关系。方法 :用液体重叠系统获得SKOV3ip1多细胞团簇 ,毛细管区带电泳法测定SKOV3ip1单层和团簇细胞胞内顺铂和紫杉醇含量。结果 :顺铂作用 2h后单层细胞和团族细胞内顺铂浓度分别为 19.2 196± 5 .3111nmol/ (L·10 6细胞 )和 2 1.994 4± 8.9776nmol/ (L·10 6细胞 ) ,差异无显著性 (P =0 .6 3)。紫杉醇作用 1h后单层细胞和团簇细胞胞内紫杉醇浓度分别为 5 .332 9± 0 .9818nmol/ (L·10 6细胞 )和 11.15 99± 0 .70 4 1nmol/ (L·10 6细胞 ) ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1)。结论 :同样条件下 ,团簇细胞胞内顺铂和紫杉醇浓度不比单层细胞内药物浓度低 ,顺铂、紫杉醇在卵巢癌SKOV3ip1多细胞团簇中的渗透因素不是引起团簇细胞化疗耐药的原因。 展开更多

关键词 多细胞团簇 卵巢肿瘤 顺铂 紫杉醇 药物疗法 卵巢癌 SKOV3ip1

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酪氨酸激酶受体B与人卵巢癌OVCAR-3细胞侵袭能力的关系 被引量：1

10

作者 于晓辉 蔡斌 +4 位作者 杨懿霞 严沁 万小平 任海军 刘天卿 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第10期728-733,共6页

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,TrkB在卵巢癌细胞中的表... 背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,TrkB在卵巢癌细胞中的表达及其与卵巢癌细胞的高侵袭能力的关系的研究鲜有报道。本研究探讨失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)与人卵巢癌OVCAR-3细胞侵袭能力的关系。方法:RT-PCR和Western印迹法检测卵巢癌细胞系OVCAR-3细胞贴壁培养、细胞立体培养以及细胞立体培养得到的多细胞团簇经胰酶消化成单细胞后再次贴壁培养细胞TrkB的表达差异;体内、体外细胞侵袭实验检测通过RNAi技术沉默TrkB后OVCAR-3细胞侵袭及转移能力的改变。结果:RT-PCR结果表明,OVCAR-3多细胞团簇中TrkBmRNA的表达高于贴壁细胞(P<0.001);Western印迹结果显示,与OVCAR-3贴壁细胞比较,立体培养细胞中全长TrkB表达升高[(17.47±0.58)%vs(8.93±0.19)%,(P<0.001)]。体内、体外细胞侵袭实验表明,OVCAR-3细胞团簇的侵袭转移能力较普通贴壁细胞明显增强(P<0.01);TrkB沉默后OVCAR-3的侵袭及转移能力受到抑制(P<0.01)。结论:TrkB通过失巢凋亡抑制机制介导了卵巢上皮性癌细胞的侵袭和转移。 展开更多

关键词 酪氨酸激酶受体B 卵巢癌 失巢凋亡 ANOIKIS 多细胞团簇

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人卵巢癌SKOV3细胞多细胞团簇黏附性和转移性的体外研究

11

作者 刘召芬 陈建利 万小平 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2007年第5期341-344,I0001,共5页

目的:探讨卵巢癌SKOV3多细胞团簇是否具有黏附性和转移性,以及单细胞和多细胞团簇黏附性和转移性的差异,以确定二者在卵巢癌扩散和转移中的作用。方法:用液体重叠培养系统获得SKOV3团簇,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定SKOV3单细胞和团簇对... 目的:探讨卵巢癌SKOV3多细胞团簇是否具有黏附性和转移性,以及单细胞和多细胞团簇黏附性和转移性的差异,以确定二者在卵巢癌扩散和转移中的作用。方法:用液体重叠培养系统获得SKOV3团簇,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定SKOV3单细胞和团簇对细胞外基质(ECM)的黏附性;用Boyden小室和MTT法测定二者的转移性。结果:SKOV3团簇和单细胞均可黏附于ECM,黏附性对比中团簇组光吸收值(OD490)明显小于单细胞组(0.34±0.03vs0.57±0.77,P=0.000)。单细胞和团簇均可通过Boyden小室发生转移。团簇转移后的细胞以单细胞形式存在,光镜下观察转移后的两组细胞形态相似。团簇组转移细胞数明显少于单细胞组(35.00±30.00vs97.00±54.00,P=0.000);团簇组转移细胞的光吸收值(OD560)明显低于单细胞组(0.28±0.03vs0.37±0.10,P=0.005)。结论:卵巢癌多细胞团簇具有黏附性和转移性,其黏附性和转移性低于单细胞;以悬浮状态存在于卵巢癌患者腹水中的癌单细胞或多细胞团簇,在卵巢癌扩散和转移过程中均发挥着一定的作用。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 多细胞团簇 黏附 迁移 细胞

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人卵巢癌多细胞团簇在细胞外基质中的黏附性和扩散性

12

作者 刘召芬 陈建利 +1 位作者 席晓薇 万小平 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1315-1319,共5页

目的研究人卵巢癌多细胞团簇(MCAs)在细胞外基质(ECM)中的黏附性和扩散性。方法液体重叠培养获得MCAs。将MCAs悬液以及加入不同的细胞黏附分子(CD44、CD29、CD54、E-cad)单克隆抗体(mAb)和m IgG(作为对照)的MCAs悬液,接种至覆以ECM或牛... 目的研究人卵巢癌多细胞团簇(MCAs)在细胞外基质(ECM)中的黏附性和扩散性。方法液体重叠培养获得MCAs。将MCAs悬液以及加入不同的细胞黏附分子(CD44、CD29、CD54、E-cad)单克隆抗体(mAb)和m IgG(作为对照)的MCAs悬液,接种至覆以ECM或牛血清蛋白(BSA)(作为对照)的96孔板,培养6 h,记录每孔0 h团簇和6 h的黏附团簇数,并计算黏附率;分别测定团簇0 h和24 h的面积,以其面积变化倍数确定团簇的扩散性。结果MCAs对ECM黏附率为38%,明显高于BSA对照组的8%(P=0.001);CD29 mAb和CD44 mAb对团簇黏附的抑制率分别为60%和29%;MCAs在ECM上24 h几乎完全扩散,面积扩大倍数明显高于BSA对照组(5.96±0.92vs1.34±0.9)(P<0.01);CD29 mAb和CD44 mAb对团簇扩散的抑制率分别为74%和33%。结论MCAs具有的黏附性和扩散性可能是卵巢癌难治的重要原因。CD29 mAb和CD44 mAb可抑制MCAs的黏附和扩散,为抗黏附治疗卵巢癌提供了新策略。 展开更多

关键词 卵巢癌 多细胞团簇 细胞黏附分子 黏附 扩散

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体外三维培养卵巢癌A2780细胞及其多药耐药机制的实验研究

13

作者 高爱莲 《河南职工医学院学报》 2008年第3期222-225,共4页

目的建立卵巢癌A2 780细胞形成的多细胞团簇模型,探讨凋亡在卵巢癌细胞群集耐药中的作用。方法以三维培养方法获得人卵巢癌A 2 780多细胞球体(MCS)模型,单层细胞(MC)为对照;MTT法和liquid over-lay技术检测细胞的药物敏感性;流式细胞术... 目的建立卵巢癌A2 780细胞形成的多细胞团簇模型,探讨凋亡在卵巢癌细胞群集耐药中的作用。方法以三维培养方法获得人卵巢癌A 2 780多细胞球体(MCS)模型,单层细胞(MC)为对照;MTT法和liquid over-lay技术检测细胞的药物敏感性;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;RT-PCR分析凋亡相关基因caspase-3和bcl-2的表达变化。结果细胞在培养2 d后即可形成由多个细胞组成的细胞团,培养5 d后,形成有多层细胞结构的细胞球;与A2 780/MC相比,A 2 780/MCS细胞药物敏感性及细胞凋亡率均显著下降,差异有显著性;而与A2 780/MC相比,凋亡诱导基因caspase-3在A2 780/MCS细胞中明显下降,凋亡抑制基因bcl-2明显增高(P<0.05)。结论卵巢癌细胞群集耐药可能与肿瘤细胞凋亡相关基因caspase-3和bcl-2的表达相关。 展开更多

关键词 多细胞团簇 卵巢肿瘤 CASPASE-3 BCL-2

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