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鹅α和γ干扰素基因的克隆及序列分析 被引量：18
1
作者 秘晶玮 王君伟 +1 位作者 许丽娜 李洪涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期359-362,共4页
从植物血凝素(PHA)刺激的鹅外周血白细胞提取总RNA,采用RT_PCR方法扩增鹅IFN基因,将其克隆到pMD18_T载体中,进行序列分析。克隆到的鹅IFN_α和IFN_γ基因与GeneBank上已公布的鸭IFN核苷酸序列进行比较,其同源性分别为IFN_α96.70%I、FN_... 从植物血凝素(PHA)刺激的鹅外周血白细胞提取总RNA,采用RT_PCR方法扩增鹅IFN基因,将其克隆到pMD18_T载体中,进行序列分析。克隆到的鹅IFN_α和IFN_γ基因与GeneBank上已公布的鸭IFN核苷酸序列进行比较,其同源性分别为IFN_α96.70%I、FN_γ94.95%;氨基酸序列同源性分别为IFN_α93.72%I、FN_γ93.29%。这为进一步研究鹅干扰素的生物学特性和应用奠定了基础。 展开更多
关键词 鹅 干扰素(IFN) 基因-克隆 序列分析
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鸭圆环病毒全基因组克隆与序列分析 被引量：41
2
作者 傅光华 程龙飞 +3 位作者 施少华 彭春香 陈红梅 黄瑜 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期138-143,共6页
为研究鸭圆环病毒全基因组的分子生物学特性,运用重叠PCR技术从鸭组织脏器提取的DNA中扩增出2条核苷酸序列,拼接后对其核酸组成、基因组结构及病毒的遗传变异进行分析。结果表明所获病毒核酸为大小1995nt的环型DNA,包含6个ORF,与登录在G... 为研究鸭圆环病毒全基因组的分子生物学特性,运用重叠PCR技术从鸭组织脏器提取的DNA中扩增出2条核苷酸序列,拼接后对其核酸组成、基因组结构及病毒的遗传变异进行分析。结果表明所获病毒核酸为大小1995nt的环型DNA,包含6个ORF,与登录在GenBank中克隆株MuDCV(AY228555)的同源性高达97·4%,可见所扩增的核酸序列为鸭圆环病毒基因组序列。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒 全基因组克隆 序列分析
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生长素合成途径的研究进展 被引量：40
3
作者 王家利 刘冬成 +1 位作者 郭小丽 张爱民 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期292-301,共10页
生长素是一类含有一个不饱和芳香族环和一个乙酸侧链的内源激素,参与植物生长发育的许多过程。植物和一些侵染植物的病原微生物都可以通过改变生长素的合成来调节植株的生长。吲哚-3-乙酸(IAA)是天然植物生长素的主要活性成分。近年来,... 生长素是一类含有一个不饱和芳香族环和一个乙酸侧链的内源激素,参与植物生长发育的许多过程。植物和一些侵染植物的病原微生物都可以通过改变生长素的合成来调节植株的生长。吲哚-3-乙酸(IAA)是天然植物生长素的主要活性成分。近年来,随着IAA生物合成过程中一些关键调控基因的克隆和功能分析,人们对IAA的生物合成途径有了更加深入的认识。IAA的生物合成有依赖色氨酸和非依赖色氨酸两条途径。依据IAA合成的中间产物不同,依赖色氨酸的生物合成过程通常又划分成4条支路:吲哚乙醛肟途径、吲哚丙酮酸途径、色胺途径和吲哚乙酰胺途径。该文综述了近几年在IAA生物合成方面取得的新进展。 展开更多
关键词 摘要生长素是~类含有一个不饱和芳香族环和一个乙酸侧链的内源激素 参与植物生长发育的许多过程.植物和一些侵染植物的病原微生物都可以通过改变生长素的合成来调节植株的生长.吲哚.3.乙酸0AA)是天然植物生长素的主要活性成分.近年来 随着IAA生物合成过程中一些关键调控基因的克隆和功能分析 人们对IAA的生物合成途径有了更加深入的认识.IAA的生物合成有依赖色氨酸和非依赖色氨酸两条途径.依据IAA合成的中间产物不同 依赖色氨酸的生物合成过程通常又划分成4条支路:吲哚乙醛肟途径 吲哚丙酮酸途径 色胺途径和吲哚乙酰胺途径.该文综述了近几年在IAA生物合成方面取得的新进展.
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猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组克隆与序列分析 被引量：14
4
作者 曹胜波 陈焕春 +3 位作者 肖少波 赵俊龙 吕建强 钱平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期137-141,共5页
参照国外发表的猪Ⅱ型圆环病毒 (porcinecircovirustype 2 ,PCV - 2 )全基因组序列 ,设计一对PCV - 2特异性引物 ,用该室分离的PCV - 2豫A株感染PK - 15细胞 ,从中提取PCV - 2复制型基因组DNA ,并以之为模板进行PCR扩增。回收PCR产物 ,... 参照国外发表的猪Ⅱ型圆环病毒 (porcinecircovirustype 2 ,PCV - 2 )全基因组序列 ,设计一对PCV - 2特异性引物 ,用该室分离的PCV - 2豫A株感染PK - 15细胞 ,从中提取PCV - 2复制型基因组DNA ,并以之为模板进行PCR扩增。回收PCR产物 ,构建重组测序质粒T -PCV - 2。测序结果表明 ,猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组为 176 7bp ,与GenBank收录的PCV - 2国外分离株核苷酸的同源性可高达 97%。序列分析表明 ,复制型豫A株的基因组包含 10个读码框架 ,其中ORF1、ORF2是其两个最主要的读码框架 ,分别编码 314、2 34个氨基酸。豫A株和PCV - 1间的ORF1、ORF2的氨基酸序列同源性分别为 85 %、6 6 % ,与其它PCV - 2毒株间的ORF1氨基酸同源性均在 98%以上 ,而ORF2的氨基酸同源性为 92 %～ 97%。 展开更多
关键词 猪Ⅱ型圆环病毒豫A株 全基因组克隆 序列分析 PCV-2
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短小芽孢杆菌葡聚糖内切酶基因的克隆及序列测定 被引量：13
5
作者 杨智源 陈荣忠 +1 位作者 杨丰 徐洵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期74-81,共8页
从台湾海峡潮间带的红树林土壤中分离到一株产纤维素酶的短小芽孢杆菌S 2 7,该菌只产生葡聚糖内切酶。对该酶的研究显示其作用最适温度为 55℃ ,最适 pH为 5～ 7,在pH9的条件下仍具有 79 0 %的活力。用pBluescriptⅡ为载体 ,E .coliDH1... 从台湾海峡潮间带的红树林土壤中分离到一株产纤维素酶的短小芽孢杆菌S 2 7,该菌只产生葡聚糖内切酶。对该酶的研究显示其作用最适温度为 55℃ ,最适 pH为 5～ 7,在pH9的条件下仍具有 79 0 %的活力。用pBluescriptⅡ为载体 ,E .coliDH1 0B为受体 ,克隆到该酶的基因 ,并对其进行测序。测序结果显示其全长为 1 980bp ,推测其含 660个氨基酸。比较GenBank中的已知葡聚糖内切酶 ,发现该酶的氨基酸序列与嗜纤维杆菌 (Clostridiumcel lulovorans)的EngC及Bacillussp .KSM 52 2的EG Ⅳ同源性极高。 展开更多
关键词 短小芽杆菌S-27菌株 葡聚糖内切酶 基因的克隆 序列测定
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在MDCK细胞上高产的乙型流行性感冒病毒株的筛选及其全基因组克隆 被引量：9
6
作者 齐立 吴昆昱 +4 位作者 李梓 张烨 董婕 张立国 张智清 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期195-199,共5页
流行性感冒(流感)病毒可引起世界范围的大流行,因此需要及时地生产流感疫苗来预防流感的流行。乙型流感病毒是疫苗的重要组成部分。传统制备疫苗的方法是使用鸡胚生产,存在很多缺陷,应用哺乳动物细胞生产流感疫苗是个更好的选择。但是,... 流行性感冒(流感)病毒可引起世界范围的大流行,因此需要及时地生产流感疫苗来预防流感的流行。乙型流感病毒是疫苗的重要组成部分。传统制备疫苗的方法是使用鸡胚生产,存在很多缺陷,应用哺乳动物细胞生产流感疫苗是个更好的选择。但是,乙型流感病毒感染MDCK细胞后,很难得到持续的高产。此实验筛选到的乙型流感病毒在MDCK细胞连续传代15代后,PFU值从第1代的8×104到第15代2×109,TCID50从第1代6 5到第15代的8 0。将筛选到的毒株进行全基因组克隆,用两套引物获得乙型流感病毒的全部8个节段。此结果为利用反向遗传技术将高产毒株与流行毒株重配,进而在哺乳动物细胞上生产基因工程流感疫苗打下基础。 展开更多
关键词 流行性感冒 病毒 乙型流感 毒株 通用引物 哺乳动物细胞 疫苗 全基因组克隆
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海洋生物功能基因组研究 被引量：8
7
作者 卫剑文 吴文言 +4 位作者 钟肖芬 杨文利 赵贵军 彭立胜 徐安龙 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第10期85-90,共6页
21世纪是海洋的世纪 ,海洋生物功能基因组研究将因此而成为全球生命科学研究的新热点。通过对国内外海洋生物功能基因组研究的发展现状、发展趋势和该领域的研究方向的综述 ,阐明了开展中国海洋生物功能基因组研究的必要性。
关键词 海洋生物功能基因组 功能基因表达克隆 基因芯片 蛋白质组
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分子标记技术在真菌上的应用(综述) 被引量：3
8
作者 齐向辉 周国英 王燕 《河北职业技术师范学院学报》 CAS 2003年第3期72-76,80,共6页
对分子标记在真菌分离菌株的分子鉴定、基因定位克隆、遗传图谱构建、遗传多样性分析、遗传亲子分析及线粒体DNA遗传研究等方面的应用进行了综述。
关键词 分子标记技术 真菌 分离 菌株 分子鉴定 基因定位克隆 遗传图谱 遗传多样性分析 遗传亲子分析 线粒体DNA
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广西猪瘟流行毒株全基因组的克隆与序列分析 被引量：5
9
作者 吴显实 罗廷荣 +6 位作者 廖素环 刘芳 陆芹章 黄伟坚 温荣辉 秦爱珍 余克伦 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期125-128,共4页
参考已发表的猪瘟病毒 (CSFV) Shimen株、HCL V株、Paderborn株的核苷酸序列 ,设计并合成 1 1对引物 ,应用RT- PCR技术 ,成功地分 1 1个片段扩增了 CSFV广西流行毒株 GXWZ0 2的全基因组。将这 1 1个基因片段克隆 ,并测定了其核苷酸序列... 参考已发表的猪瘟病毒 (CSFV) Shimen株、HCL V株、Paderborn株的核苷酸序列 ,设计并合成 1 1对引物 ,应用RT- PCR技术 ,成功地分 1 1个片段扩增了 CSFV广西流行毒株 GXWZ0 2的全基因组。将这 1 1个基因片段克隆 ,并测定了其核苷酸序列。应用计算机生物软件 Vector NTI将 1 1个基因片段进行拼接 ,确认 CSFV GXWZ0 2株全基因组序列的长度为 1 2 2 96个核苷酸 (Gen Bank收录号 AY3 6 776 7)。将 GXWZ0 2株与国内外已发表的 Shimen、HCL V、3 9、Brescia、Eystrup、Glentorf、Alfort1 87、Paderborn、CS、AL D、GPE- 、P97、L PC毒株进行全基因组核苷酸序列和推定的氨基酸序列比较 ,核苷酸同源性分别为 85 .4 %、 84 .6 %、88.7%、85 .7%、 85 .7%、 85 .3 %、85 .6 %、 95 .3 %、 85 .7%、85 .7%85 .4 %、83 .4 %、84 .3 % ,推定的氨基酸同源性分别为 92 .6 %、91 .7%、94 .2 %、 93 .1 %、92 .9%、92 .3 %、 93 .0 %、97.7%、92 .6 %、93 .0 %、92 .6 %、90 .5 %、90 .6 %。 GXWZ0 2与 Shimen、HCL V的全基因组序列及推定的氨基酸序列有明显差异 ,表明 GXWZ0 2株在遗传性和抗原性上发生了较明显的变化。系统发育树分析 ,所比较的 1 4株 CSFV被分为2个群 :GXWZ0 2、Paderborn和 3 9这 3个毒株被归为群 . 展开更多
关键词 猪瘟病毒 基因组克隆 序列分析 GXWZ02株 猪瘟
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肝癌染色体17p13.3区的杂合性缺失分析及缺失区连续克隆群的构建 被引量：4
10
作者 赵新泰 万大方 +4 位作者 蒋惠秋 何英华 覃文新 Paul Watkins 顾健人 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期377-380,共4页
目的　检测原发性肝癌在染色体 17p13.3区的杂合性缺失状况 ,确定其共同缺失范围和最小热点缺失范围 ,并获得缺失范围内基因组克隆和构建连续克隆群。方法　应用Southern杂交分析VNTR(variablenumberoftandemrepeat,VNTR)和RFLP标志在... 目的　检测原发性肝癌在染色体 17p13.3区的杂合性缺失状况 ,确定其共同缺失范围和最小热点缺失范围 ,并获得缺失范围内基因组克隆和构建连续克隆群。方法　应用Southern杂交分析VNTR(variablenumberoftandemrepeat,VNTR)和RFLP标志在肝癌中杂合性缺失 (LOH)状况。应用PCR扩增微卫星标志 ,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析各个微卫星标志的LOH状况。以微卫星标志为引物 ,经过 3轮PCR筛选阳性基因组克隆。通过检测各位点标志对基因组克隆的反应 ,构建连续克隆群。结果　检测了 5 4份原发性肝癌样品在染色体 17p13.3区 16个位点标志和染色体 17p13.1区的p5 3基因的TP5 3位点标志的LOH情况 ,发现从D17S5位点至D17S34位点间的各个标志都有较高LOH ,频率 >6 3%。而从D17S5位点起、近着丝粒方向的 3个标志LOH率都较低或无LOH。染色体17p13.1的TP5 3标志只有 31%的LOH ,低于染色体 17p13.3区的D17S5至D17S34位点间各标志的LOH率。有 2例肝癌样品在近端粒的D17S34、D17S186 6位点和近着丝粒的D17S5、D17S15 74位点均无LOH ,但在D17S849至D17S15 74间的各位点上均呈LOH或为纯合子。在缺失范围内 ,共筛选了 18个位点的基因组克隆 ,获得了相对应的阳性基因组克隆 ,经过检测各位点对基因组克隆的反应性 ,构建了覆盖 展开更多
关键词 肝癌 染色体17p13.3 杂合性缺失 基因组克隆
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适用于基因全长克隆的灰毡毛忍冬不同器官总RNA提取方法筛选 被引量：6
11
作者 刘湘丹 徐玉琴 +2 位作者 王珊 童巧珍 周日宝 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第12期60-63,共4页
目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅... 目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅适用于叶总RNA的提取;改良CTAB法对茎总RNA提取效果最佳;而多糖多酚试剂盒法提取的花蕾总RNA质量高、完整性较好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。结论 Trizol法最适于灰毡毛忍冬叶总RNA提取;改良CTAB法最适于茎总RNA提取;多糖多酚试剂盒法最适于花蕾总RNA提取;3种方法提取出来的总RNA均能满足灰毡毛忍冬中相关基因全长克隆及时空表达分析的要求。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 基因全长克隆 总RNA 不同器官 提取方法
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2型糖尿病易感基因定位克隆研究进展 被引量：3
12
作者 项坤三 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2002年第2期108-111,共4页
关键词 2型糖尿病 易感基因定位克隆 研究
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山东烟区首次发现番茄斑萎病毒侵染 被引量：6
13
作者 张万红 冯佳 +10 位作者 ALI Kamran 罗健达 杨举田 王术科 宗浩 申莉莉 李莹 王凤龙 张石飞 杨金广 金轲 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2020年第5期87-91,共5页
为确定番茄斑萎病毒(TSWV)在山东烟草上的侵染,基于GenBank中已有的TSWV基因组序列设计该病毒特异性引物,通过总RNA提取,RT-PCR扩增,全基因组序列测定和拼接分析等,结果表明,山东临沂疑似病样中含有TSWV,该TSWV分离物具有3条RNA链,大小... 为确定番茄斑萎病毒(TSWV)在山东烟草上的侵染,基于GenBank中已有的TSWV基因组序列设计该病毒特异性引物,通过总RNA提取,RT-PCR扩增,全基因组序列测定和拼接分析等,结果表明,山东临沂疑似病样中含有TSWV,该TSWV分离物具有3条RNA链,大小分别为8911、4773和2971bp,与国内已报道的其他TSWV分离物核酸序列同源性均在99.0%以上,蛋白氨基酸序列同源性均在98.0%以上。系统进化分析结果显示,该分离物与已报道的TSWV云南分离物聚类到同一分支中,推测山东烟区中的TSWV可能由云南烟区通过带毒介体的迁入而传入。该研究为山东烟区TSWV的发生流行溯源和该危险性病毒病的精准测报及防控提供科学依据。 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒(TSWV) 全基因组克隆 系统发育树
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酶工程的研究进展 被引量：6
14
作者 黎海彬 郭宝江 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2006年第z1期40-43,共4页
酶工程是现代生物技术的重要组成部分,它作为一项高新技术将为工业的发展起重要推动作用。介绍了自然酶的开发、酶的化学和遗传修饰、酶的固定化、人工合成酶、酶基因的克隆和表达、酶的遗传设计等方面的理论和技术研究的最新进展。
关键词 酶工程 人工合成酶 酶基因的克隆和表达 固定化 遗传修饰
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朊蛋白病诊断标志分子14-3-3Zeta基因亚克隆及其表达 被引量：4
15
作者 沈继龙 SG CHEN 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期8-10,共3页
目的　为了制备朊蛋白病特异性实验诊断的标志物及为探讨 14- 3 - 3在神经细胞功能调节中的作用创造条件。方法　根据 14- 3- 3Zeta亚型基因序列设计引物 ,扩增DNA片段 ,经酶切纯化后连接到pCYB3表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1菌株 ,用培... 目的　为了制备朊蛋白病特异性实验诊断的标志物及为探讨 14- 3 - 3在神经细胞功能调节中的作用创造条件。方法　根据 14- 3- 3Zeta亚型基因序列设计引物 ,扩增DNA片段 ,经酶切纯化后连接到pCYB3表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1菌株 ,用培养基筛选 ,经管状凝胶电泳纯化融合蛋白。结果与结论　获取了 14- 3- 3/pCYB3阳性重组体 ,经IPTG诱导及免疫印迹 -增强化学发光 (Westernblot-ECL)鉴定 ,表达出 14- 3- 3/intein -CBD融合蛋白 ,分子量为 82 7kDa . 展开更多
关键词 14-3-3蛋白质 朊蛋白病 Zeta基因亚克隆
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10株猪圆环病毒2型(PCV2)河南株全基因组的克隆与序列分析 被引量：5
16
作者 陈陆 彭志锋 +5 位作者 杨霞 陈圆圆 王宏魁 孙彦婷 郑鹿平 王川庆 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期166-173,共8页
为了解猪圆环病毒2型(PCV2)河南株的起源及遗传变异,从河南省不同临床表现的病猪中克隆了10株PCV2的全基因组,并对其进行了序列测定及分析。结果表明,河南株之间以及与中国其他地区PCV2流行株之间同源性均很高;河南株均处于欧洲分支中,... 为了解猪圆环病毒2型(PCV2)河南株的起源及遗传变异,从河南省不同临床表现的病猪中克隆了10株PCV2的全基因组,并对其进行了序列测定及分析。结果表明,河南株之间以及与中国其他地区PCV2流行株之间同源性均很高;河南株均处于欧洲分支中,提示PCV2河南株可能起源于欧洲株;河南省不同年份的PCV2中确实存在一定的基因差异,但PCV2全基因组从总体上来说遗传进化相对稳定;河南省猪群中与PCV相关的疾病不是由PCV2变异毒株引起的。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 全基因组克隆 序列分析
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三株传染性法氏囊病病毒超强毒株全基因组的克隆与序列分析 被引量：4
17
作者 高立 李凯 +5 位作者 祁小乐 高玉龙 高宏雷 王永强 孔宪刚 王笑梅 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期887-894,共8页
为了获得本实验室3株(HuB-1、HeB10XS02、SD10LY01)传染性法氏囊病病毒(IBDV)分离毒株的全基因组序列,并了解其序列特征,首先测定了这3株毒株对SPF鸡的致死率,然后利用融合PCR技术扩增获得全基因组序列,对其进行遗传进化分析。结果显示,... 为了获得本实验室3株(HuB-1、HeB10XS02、SD10LY01)传染性法氏囊病病毒(IBDV)分离毒株的全基因组序列,并了解其序列特征,首先测定了这3株毒株对SPF鸡的致死率,然后利用融合PCR技术扩增获得全基因组序列,对其进行遗传进化分析。结果显示,3株毒株对SPF鸡的致死率均在60%以上,为IBDV超强毒株(vvIBDV)。遗传进化分析表明,3株分离毒株的A节段均位于超强毒分支。IBDV的B节段分为明显的3个亚群,其中HuB-1、SD10LY01的B节段属于第Ⅲ亚群,HeB10XS02的B节段则属于第Ⅱ亚群。第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚群之间在VP1蛋白上存在17个保守氨基酸差异位点,其中第145~147位氨基酸形成独特的'三联体'基序,不同亚群具有不同的基序。本研究结果为更好地了解vvIBDV基因组特征以及致病性分子基础的研究提供了重要理论依据。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV) 全基因组克隆 序列分析
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微生物次级代谢产物生物合成基因簇的克隆与异源表达 被引量：4
18
作者 李可萌 赫卫清 《生命的化学》 CAS 2021年第3期420-427,共8页
微生物次级代谢产物结构、功能极为多样,具有抗感染、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性,是新药研发的重要来源。随着新一代DNA测序技术以及生物信息学工具的快速发展,微生物基因组中大量次级代谢产物的生物合成基因簇(biosynthetic gene ... 微生物次级代谢产物结构、功能极为多样,具有抗感染、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性,是新药研发的重要来源。随着新一代DNA测序技术以及生物信息学工具的快速发展,微生物基因组中大量次级代谢产物的生物合成基因簇(biosynthetic gene clusters,BGCs)被发现,BGCs克隆与异源表达在研究次级代谢产物中起着越来越关键的作用。目前,已经发展出很多新的大型BGCs克隆策略,包括TAR、Red/ET重组、DiPaC和SSR。获得的完整BGCs可以转化到适合的底盘细胞中进行异源表达,通过调控其转录水平和优化代谢途径产生新的次级代谢产物或实现目标化合物的高产。 展开更多
关键词 次级代谢产物 生物合成基因簇克隆 异源表达
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嗅觉神经系统的可塑性研究 被引量：2
19
作者 魏永祥 韩德民 《国际耳鼻咽喉头颈外科杂志》 2006年第2期150-154,共5页
关键词 神经系统可塑性 嗅觉 嗅感觉神经元 RICHARD 发育阶段 基因组克隆 生理学奖 终末分化 分化能力 细胞周期
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兔出血症病毒基因组的克隆及克隆基因的酶切图谱 被引量：3
20
作者 袁世山 徐为燕 +2 位作者 杜念兴 高谦 陈章良 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期245-251,共7页
本试验用甘油-酒石酸钾密度梯度离心纯化了兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV),所得病毒制剂实心颗粒占90％,没有宿主核酸污染。在常规SDS-蛋白酶K法的基础上,建立了一种耗时短、重复性高的RHDV核酸抽提程序。按照细... 本试验用甘油-酒石酸钾密度梯度离心纯化了兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV),所得病毒制剂实心颗粒占90％,没有宿主核酸污染。在常规SDS-蛋白酶K法的基础上,建立了一种耗时短、重复性高的RHDV核酸抽提程序。按照细小病毒基因组的特性,在体外合成了RHDV dsDNA,证明兔出血症病毒基因组是具有3′端发夹结构的ssDNA。以核酸酶S1修饰RHDV dsDNA,将其克隆入BS质粒载体,转化大肠杆菌DH5株。经筛选鉴定,共得RHDV DNA克隆23个,其中最大者(pYC-2)为4.6kb。选用18种限制性内切酶作酶谱分析,结果表明,12种酶在pYC-2克隆基因上不存在切点;以双酶法,用Cla Ⅰ、HincⅡ,Pvu Ⅰ、Bgl Ⅱ和Hpa Ⅰ绘制出pYC-2DNA的酶切图谱。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 基因组克隆 酶切图谱
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