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FHL2与LDHA相互作用促进胶质瘤细胞的增殖
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作者 吴国庆 张婷 +3 位作者 宋小锋 朱婷 李娜 李明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期976-983,共8页
目的:探讨四个半LIM结构域2(FHL2)蛋白对胶质瘤细胞增殖的影响及其分子机制。方法:利用TCGA和CGGA数据库分析胶质瘤组织中FHL2 mRNA表达水平与患者预后的关系。通过WB法检测人胶质瘤组织标本及人胶质瘤细胞U87、T98G、U251、SNB19、GSC2... 目的:探讨四个半LIM结构域2(FHL2)蛋白对胶质瘤细胞增殖的影响及其分子机制。方法:利用TCGA和CGGA数据库分析胶质瘤组织中FHL2 mRNA表达水平与患者预后的关系。通过WB法检测人胶质瘤组织标本及人胶质瘤细胞U87、T98G、U251、SNB19、GSC23、A172、LN229、G267和星形胶质细胞NHA中的FHL2蛋白表达水平。利用慢病毒载体构建稳定敲低FHL2的U87细胞和过表达FHL2的SNB19细胞,即U87-shGFP、U87-shFHL2-1#、U87-shFHL2-4#和SNB19-3flag、SNB19-3flag-FHL2组。通过CCK-8法、克隆形成实验检测敲低和过表达FHL2对细胞增殖的影响,免疫共沉淀(Co-IP)和液相色谱-串联质谱(LC/MS)法筛选FHL2在胶质瘤细胞中的相互作用蛋白,并用Co-IP和免疫荧光法验证它们的结合作用和共定位情况。使用酶标仪检测敲低和过表达FHL2细胞内乳酸产量和乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化,WB法分析FHL2、LDHA及p-LDHA在正常脑组织和胶质瘤组织中的蛋白表达差异及其相互关系。在过表达FHL2的SNB19细胞中使用LDHA的小分子抑制剂AT-101,通过CCK-8实验和酶标仪比色法验证FHL2在胶质瘤乳酸代谢中的作用,验证AT-101在胶质瘤中潜在的治疗效果。结果:Co-IP和LC/MS检测发现,FHL2与LDHA在胶质瘤细胞中存在相互作用。FHL2过表达可提高LDHA活性和乳酸生成(均P<0.001),进而促进胶质瘤细胞增殖(P<0.001)。相反,敲低FHL2会降低LDHA活性和乳酸产量(P<0.001或P<0.05)并抑制细胞增殖(P<0.001)。AT101能抑制LDHA活性,并显著抑制FHL2促进胶质瘤细胞的增殖,同时恢复磷酸化LDHA(Y10)水平(P<0.01或P<0.001)。结论:FHL2与LDHA蛋白相互作用,FHL2通过激活p-LDHA(Y10)的表达促进LDHA活性和乳酸产生,进而促进胶质瘤细胞的增殖,靶向这种相互作用可能成为治疗胶质瘤的潜在策略。 展开更多
关键词 四个lim结构域2 乳酸脱氢酶A 胶质瘤 U87细胞 SNB19细胞 增殖
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FHL1和Paxillin在大鼠气道黏液高分泌中的表达 被引量:2
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作者 杨艳娟 杨桂兰 +2 位作者 郑西卫 张慧芳 程德云 《宁夏医学杂志》 CAS 2017年第9期769-771,I0001,共4页
目的探讨FHL1和Paxillin在大鼠气道黏液分泌中的作用。方法将20只雄性Wistar大鼠分为正常对照组和实验组(内毒素E组)。采用HE染色和阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色进行气道上皮杯状细胞计数及检测气道黏液物质表达。采用免疫组化法检... 目的探讨FHL1和Paxillin在大鼠气道黏液分泌中的作用。方法将20只雄性Wistar大鼠分为正常对照组和实验组(内毒素E组)。采用HE染色和阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色进行气道上皮杯状细胞计数及检测气道黏液物质表达。采用免疫组化法检测各组大鼠黏液腺FHL1、Paxillin和MUC5AC蛋白的表达,对肺组织切片进行图像分析。结果内毒素E组气道上皮杯状细胞数、气道MUC5AC、气道及肺组织FHL1、Paxillin和黏液物质表达分别与正常对照组相比升高(P<0.05)。FHL1和Paxillin的表达与MUC5AC的表达呈正相关(r=0.962,0.868,P<0.05)。结论大鼠气道和肺组织高表达FHL1和Paxillin,可能参与了气道黏液高分泌的发生。 展开更多
关键词 四个lim结构域蛋白 桩蛋白 黏液高分泌
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活化激酶C受体1、四个半LIM结构域蛋白1在食管鳞状细胞癌中的表达及与患者预后的关系
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作者 乔滨 刘孝民 +1 位作者 肖中岳 孙佳春 《癌症进展》 2023年第7期743-745,757,共4页
目的探讨活化激酶C受体1(RACK1)、四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及与患者预后的关系。方法选取122例局部晚期ESCC患者,取其ESCC组织及癌旁组织,免疫组化法检测RACK1、FHL1的表达情况,并比较不同临床疗效ESC... 目的探讨活化激酶C受体1(RACK1)、四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及与患者预后的关系。方法选取122例局部晚期ESCC患者,取其ESCC组织及癌旁组织,免疫组化法检测RACK1、FHL1的表达情况,并比较不同临床疗效ESCC患者ESCC组织中RACK1、FHL1表达情况。局部晚期ESCC患者预后的影响因素采用多元Logistic回归分析。结果ESCC组织中RACK1、FHL1蛋白阳性表达率均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。依据实体瘤疗效评价标准,有效87例,无效35例,有效ESCC患者ESCC组织中RACK1、FHL1阳性表达率均高于无效患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic分析结果显示,淋巴结转移、分化程度为低分化、肿瘤直径≥5 cm、RACK1阴性表达、FHL1阴性表达均是局部晚期ESCC患者预后死亡的独立危险因素(P﹤0.01)。结论RACK1、FHL1在局部晚期ESCC组织中阳性表达率较低,可作为评估紫杉醇联合顺铂化疗疗效、患者预后的可靠指标。 展开更多
关键词 活化激酶C受体1 食管鳞状细胞癌 四个lim结构域蛋白1 化疗 预后
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FHL2与PBX3在宫颈癌组织中表达与临床病理特征及预后的相关性 被引量:6
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作者 周伟平 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第1期82-86,共5页
目的 探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)FHL2与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在宫颈癌组织中的表达与临床特征及预后的相关性。方法 选取该院2013年12月至2015年12月收治的55例宫颈癌患者作为研究对象,回顾性分析患者的临床资料,将收集... 目的 探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)FHL2与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在宫颈癌组织中的表达与临床特征及预后的相关性。方法 选取该院2013年12月至2015年12月收治的55例宫颈癌患者作为研究对象,回顾性分析患者的临床资料,将收集到的患者标本分组,55例癌组织标本作分为研究组。将55例癌旁组织标本(距肿瘤边缘4cm处)作为对照组。并采用免疫组化法检测所有患者的FHL2与PBX3蛋白的表达,分析FHL2与PBX3蛋白表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系,并采用Cox比例风险分析影响宫颈癌患者预后的相关因素。结果 研究组FHL2、PBX3蛋白阳性表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);FHL2、PBX3蛋白表达与宫颈癌患者的年龄、病理类型等临床特征不相关(P>0.05),但与宫颈癌患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移、浸润深度以及病理分级相关(P<0.05),当肿瘤分化程度越低、有淋巴转移、浸润深度越深以及病理程度越高时,FHL2、PBX3蛋白阳性表达率越高(P<0.05);宫颈癌患者平均中位生存期20个月,其中FHL2阳性表达和阴性表达患者的中位生存期分别为18、30个月,PBX3阳性表达和阴性表达患者的中位生存期分别为17、32个月中位生存期;经单因素分析得出:肿瘤低分化、淋巴结转移、浸润深度>1/2、病理分级G3、FHL2、PBX3阳性表达的患者生存时间均显著缩短,差异有统计学意义(P<0.05);经多因素Cox比例风险回归模型分析得出:肿瘤低分化、淋巴结转移、浸润深度>1/2、病理分级G3、FHL2、PBX3阳性表达均为影响宫颈癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论 FHL2与PBX3蛋白在宫颈癌组织中的表达水平升高,且表达水平与宫颈癌患者的临床特征显著相关,对于宫颈癌的发生、发展以及预后均有着重要的临床意义。 展开更多
关键词 四个lim结构域蛋白2 前B细胞白血病同源盒基因3 宫颈癌
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FHL2在胃癌上皮细胞间质转化中的表达 被引量:2
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作者 孔风娟 师雷锋 《中国临床研究》 CAS 2018年第3期365-368,共4页
目的通过SGC-823胃癌细胞上皮细胞间质转化(EMT)模型,研究四个半结构域蛋白2(FHL2)的改变和相关分子生物学特性的改变。方法 (1)体外培养人胃癌细胞株SCCT-823细胞(对照组),采用奥沙利铂持续刺激法诱导SGC-823细胞成为耐奥沙利铂胃癌细... 目的通过SGC-823胃癌细胞上皮细胞间质转化(EMT)模型,研究四个半结构域蛋白2(FHL2)的改变和相关分子生物学特性的改变。方法 (1)体外培养人胃癌细胞株SCCT-823细胞(对照组),采用奥沙利铂持续刺激法诱导SGC-823细胞成为耐奥沙利铂胃癌细胞,制作EMT模型(实验组);(2)采用倒置相差显微镜观察实验组和对照组形态学差异;(3)采用Transwell侵袭实验检测两组细胞侵袭能力;(4)采用Western blot实验检测两组细胞波形蛋白、E-钙黏蛋白和FHL2蛋白表达。结果 (1)与对照组相比,实验组表型由上皮样细胞向间质样细胞表型转变;(2)对照组穿过膜的细胞数为65.7±11.65,实验组穿过膜的细胞数为123.4±28.13,实验组细胞的侵袭能力增强,差异具有统计学意义(t=12.434,P<0.01);(3)与对照组相比,实验组胃癌细胞E-钙黏蛋白表达水平下调(1.47±0.13 vs 0.76±0.1),波形蛋白(0.65±0.21 vs 1.01±0.25)和FHL2蛋白(0.34±0.09 vs 0.71±0.11)表达水平上调(P均<0.05)。结论经奥沙利铂刺激后,SGC-823胃癌细胞发生EMT,细胞表型由上皮样细胞向间质细胞表型变化,且将具有更强的侵袭能力,E-钙黏蛋白表达水平下调,波形蛋白和FHL2蛋白表达水平上调。 展开更多
关键词 胃癌 奥沙利铂 上皮间质转化 波形蛋白 E-钙黏附分子 四个lim结构域蛋白2
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FHL2通过MGMT影响胶质母细胞瘤U87细胞对替莫唑胺的耐药性
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作者 陈丽莉 代晶 +1 位作者 郑彦文 李明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期20-27,共8页
目的:探讨干扰四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)的表达对胶质母细胞瘤U87细胞中O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)表达的影响,以及对U87细胞替莫唑胺(TMZ)耐药性的影响。方法:利用慢病毒感染技术分别将携带不同FHL2干扰序列的慢病毒(shFHL2-1... 目的:探讨干扰四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)的表达对胶质母细胞瘤U87细胞中O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)表达的影响,以及对U87细胞替莫唑胺(TMZ)耐药性的影响。方法:利用慢病毒感染技术分别将携带不同FHL2干扰序列的慢病毒(shFHL2-1#、shFHL2-4#)及其阴性对照(shN)感染U87细胞,分别命名为shFHL2-1#、shFHL2-4#和shN组;采用siRNA转染技术将siMGMT-1#、siMGMT-4#和siN转染至U87细胞,为siMGMT-1#、siMGMT-4#和siN组,qPCR和WB法验证FHL2或MGMT的敲低效果。用TMZ处理上述各组细胞(以DMSO处理组为对照),随后以CCK-8法和细胞克隆形成实验检测TMZ处理前后FHL2或MGMT敲低组细胞的增殖情况,FCM检测TMZ处理前后FHL2敲低组细胞的凋亡情况,WB法和免疫荧光法检测敲低FHL2对U87细胞中MGMT表达的影响,WB法检测TMZ处理对各组细胞中FHL2和MGMT表达水平的影响。结果:成功构建敲低FHL2或MGMT表达的U87细胞。与shN组相比,shFHL2-1#、shFHL2-4#组U87细胞的增殖能力减弱、凋亡水平升高(均P<0.01),MGMT表达水平明显降低(均P<0.01)。经TMZ处理后,与相应的DMSO处理组相比,shN组细胞中FHL2和MGMT的表达水平显著升高(均P<0.05),而细胞的增殖和凋亡均无显著变化(均P>0.05);shFHL2-1#、shFHL2-4#组细胞中FHL2和MGMT的表达水平无显著改变(均P>0.05),但细胞增殖能力进一步显著降低、凋亡水平进一步显著升高(均P<0.01)。敲低MGMT使U87细胞增殖减慢(P<0.01),而siMGMT-1#、siMGMT-4#组细胞经TMZ处理后增殖能力进一步降低(均P<0.01)。结论:干扰FHL2表达使得U87细胞增殖减慢而凋亡加剧、MGMT表达下调,提示FHL2可能通过影响MGMT的表达调控U87细胞对TMZ的耐药性。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 U87细胞 四个lim结构域蛋白2 替莫唑胺 耐药性 O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶
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FHL2通过SK-1/S1P通路改善高糖诱导内皮细胞功能障碍的机制研究
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作者 陈卫卫 廖煌 +1 位作者 史振鸿 陈跃武 《心脑血管病防治》 2023年第9期15-19,共5页
目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)对高糖引起内皮细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用MTT检测含不同浓度葡萄糖培养基培养下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的细胞活力。将HUVECs分为对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L葡萄... 目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)对高糖引起内皮细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用MTT检测含不同浓度葡萄糖培养基培养下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的细胞活力。将HUVECs分为对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、siNC组(30 mmol/L葡萄糖+siNC)和siFHL2组(30 mmol/L葡萄糖+siFHL2)。利用Western blot检测对照组和高糖组的HUVECs中FHL2蛋白表达水平。采用实时定量PCR法检测转染siFHL2后FHL2的表达水平。运用Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞凋亡情况。利用Western blot检测凋亡相关蛋白FHL2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved caspase 3表达水平。采用成管实验检测各组HUVECs的成管能力。利用Western blot检测各组SK-1/1-磷酸鞘氨醇(SK-1/S1P)通路中的蛋白表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)检测S1P表达水平变化。结果与对照组相比,高糖组HUVECs内FHL2表达上调(t=4.407,P<0.05)。与对照组相比,高糖组HUVECs凋亡水平升高,Bax和cleaved caspase 3的表达也较对照组显著上调,而下调FHL2表达后,细胞凋亡减少,凋亡相关蛋白Bax和cleaved caspase 3的表达下调(P<0.05)。此外,FHL2表达下调改善了HUVECs的成管能力。分子机制分析显示,与对照组比较,高糖组p-SK-1表达显著下调(P<0.05),而下调FHL2后p-SK-1水平显著上调(P<0.05),S1P水平也显著上调(P<0.05)。结论FHL2可改善高糖引起的内皮细胞功能障碍,其作用机制可能与SK-1/S1P信号通路有关。 展开更多
关键词 四个lim结构域蛋白2 内皮细胞 高糖 功能障碍 SK-1/1-磷酸鞘氨醇通路
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FHL2和PBX3在卵巢癌组织中表达与临床病理特征的相关性研究
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作者 黄小杏 梁秀冰 +4 位作者 莫劲思 黄世勇 郝丽莉 李江 曾庆苏 《空军军医大学学报》 CAS 2023年第5期453-457,共5页
目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在卵巢癌(OC)组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取广东省阳江市人民医院2017年6月至2019年6月收治的63例OC患者作为研究对象,收集患者的OC组织和... 目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在卵巢癌(OC)组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取广东省阳江市人民医院2017年6月至2019年6月收治的63例OC患者作为研究对象,收集患者的OC组织和癌旁正常组织(距肿瘤边缘4 cm处)进行研究,采用免疫组化法检测组织中的FHL2与PBX3蛋白的表达水平,并分析其与OC患者临床病理特征的关系,采用Cox回归模型分析影响OC患者预后的相关因素。结果患者癌组织中FHL2和PBX3蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05);FHL2与PBX3蛋白表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、腹水和病理分期具有显著相关性(P<0.05);所有OC患者中位生存期为30.75(24.82,36.70)个月,其中FHL2阳性和阴性表达OC患者的中位生存期分别为17.67(6.33,29.01)和35.36(32.30,38.41)个月,PBX3阳性和阴性表达OC患者的中位生存期分别为17.01(14.11,19.91)和33.75(31.45,36.05)个月,差异具有统计学意义(Log rank P<0.05)。经单因素分析,肿瘤低分化、淋巴结转移、病理分期Ⅲ+Ⅳ期、FHL2及PBX3阳性表达患者的生存时间均显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.05);Cox回归模型分析表明,淋巴转移情况(HR=0.17,95%CI:0.05~0.53)、腹水(HR=0.02,95%CI:0.00~0.17)、病理分期(HR=11.45,95%CI:2.95~44.49)、FHL2(HR=0.19,95%CI:0.05~0.71)及PBX3表达水平(HR=0.22,95%CI:0.08~0.57)均为OC患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论FHL2与PBX3蛋白在OC组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织,且表达水平与OC患者的临床特征显著相关。该研究对于OC的发生、发展及预后均有着重要的临床意义。 展开更多
关键词 四个lim结构域蛋白2 前B细胞白血病同源盒基因3 卵巢癌
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