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急性感染对中国明对虾非特异免疫水平的影响 被引量：27
1
作者 黄旭雄 周洪琪 宋理平 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期325-331,共7页
本文研究了哈维弧菌(Vibrio harveyi)急性感染和WSSV急性暴发后中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)非特异性免疫水平的变化。给中国明对虾幼虾腹肌注射30μL哈维弧菌菌液(7.2×107CFU/mL),以未注射及注射无菌生理盐水为空白对照... 本文研究了哈维弧菌(Vibrio harveyi)急性感染和WSSV急性暴发后中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)非特异性免疫水平的变化。给中国明对虾幼虾腹肌注射30μL哈维弧菌菌液(7.2×107CFU/mL),以未注射及注射无菌生理盐水为空白对照组和盐水对照组,检测急性感染48h之内不同时间段死亡个体及仍然存活的中国明对虾幼虾的超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶(LSZ)活性。受到哈维弧菌攻击仍然存活的幼虾SOD活性极显著高于空白对照组、生理盐水对照组和感染后48h内死亡个体,而感染后48h内死亡个体的SOD活性与两对照组虾无显著差异。弧菌感染的幼虾LSZ活性较两对照组有极显著的降低,越早死亡的个体LSZ活性越低。通过环境胁迫诱导暴发WSSV症状的中国明对虾与未表现出WSSV症状者相比,总血淋巴细胞密度(THCs)、腹肌SOD活性及LSZ活性均极显著地降低,血清蛋白浓度极显著升高,而血清酚氧化酶(PO)活性增高不显著。 展开更多
关键词 中国明对虾 急性感染 哈维弧菌 WSSV 免疫水平
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方斑东风螺“急性死亡症”的病原病理研究 被引量：22
2
作者 王江勇 王瑞旋 +5 位作者 苏友禄 吴开畅 郭志勋 姜敬哲 刘广锋 赵旺 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期93-99,共7页
对海南发生的方斑东风螺(Babylonia areolata)"急性死亡症"进行了病原分离纯化、人工感染试验,以及病原16S rDNA分析和生理生化鉴定。结果显示病原菌为哈维弧菌(Vibrio harveyi);药敏试验结果显示,该病原菌对常见的抗菌药物... 对海南发生的方斑东风螺(Babylonia areolata)"急性死亡症"进行了病原分离纯化、人工感染试验,以及病原16S rDNA分析和生理生化鉴定。结果显示病原菌为哈维弧菌(Vibrio harveyi);药敏试验结果显示,该病原菌对常见的抗菌药物如恩诺沙星、复合磺胺等敏感,而对青霉素表现为耐药;组织病理结果显示鳃叶、腹足、肝胰腺、消化道、肾等器官的细胞出现变性、坏死、血细胞浸润等现象。 展开更多
关键词 东风螺 “急性死亡症” 哈维弧菌 组织病理
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2012年～2014年南海海水养殖鱼类病原菌哈维弧菌分离株的耐药性分析 被引量：19
3
作者 蒋魁 徐力文 +5 位作者 苏友禄 王雨 郭志勋 许海东 高芳 冯娟 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期99-107,共9页
哈维弧菌(Vibrio harveyi)是海水养殖鱼类主要的病原菌,给养殖业带来了巨大的损失。该研究采用K-B法对南海地区沿岸养殖鱼类90株哈维弧菌分离株进行抗生素耐药性分析,通过系统聚类法以平方Euclidean距离来分析菌株间的耐药性同类关系,... 哈维弧菌(Vibrio harveyi)是海水养殖鱼类主要的病原菌,给养殖业带来了巨大的损失。该研究采用K-B法对南海地区沿岸养殖鱼类90株哈维弧菌分离株进行抗生素耐药性分析,通过系统聚类法以平方Euclidean距离来分析菌株间的耐药性同类关系,探讨哈维弧菌耐药性的时空分布和耐药谱的多样性。结果显示,90株哈维弧菌共有耐药谱26种,谱型丰富度为28.9%。其中,多重耐药谱(耐3类及以上抗生素)21种,包含菌株共35株,占总菌株数的38.9%,谱型丰富度为80.8%。从时间分布上看,2012年、2013年和2014年分别具有10、18和8种耐药谱型;从地区分布上看,海南、广东和广西3个地区分别包含17、13和2种耐药谱型,时间与地区的耐药谱型差异明显。90株哈维弧菌样本聚类分析得到GroupⅠ、GroupⅡ和其他组群,分别含有11、12和4种耐药谱,耐药谱型率分别为16.9%、57.1%和100%,而GroupⅠ和GroupⅡ组群进而分为5个亚群i^v。结果表明,在广东、海南和广西地区养殖鱼类中所分离到的哈维弧菌耐药谱具有复杂多样性特征,随着时间年份的递增,哈维弧菌耐药谱种类也发生着更新变化,耐药谱不断扩大延伸。 展开更多
关键词 哈维弧菌 耐药谱 聚类分析 海水鱼类
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海水养殖鱼哈维弧菌分离株的耐药谱型分析 被引量：17
4
作者 曾德乾 冯娟 +2 位作者 徐力文 苏友禄 郭志勋 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期129-138,共10页
为了解和分析南海沿岸地区临床分离的哈维弧菌(Vibrio harveyi)菌株耐药谱多样性,采用K-B法对84株哈维弧菌分离株进行了12种抗生素的敏感性实验,并通过聚类分析对分离菌株耐药性进行研究,探讨其抗生素耐药性同菌株时空分布的关系。实验... 为了解和分析南海沿岸地区临床分离的哈维弧菌(Vibrio harveyi)菌株耐药谱多样性,采用K-B法对84株哈维弧菌分离株进行了12种抗生素的敏感性实验,并通过聚类分析对分离菌株耐药性进行研究,探讨其抗生素耐药性同菌株时空分布的关系。实验结果显示,84株哈维弧菌的耐药谱型数量为26种,谱型丰富度为31.0%;多重耐药谱型数量(耐药种数3种以上)为13种,占总耐药谱型数量的50.0%,谱型丰富度达59.1%。海南、广东、广西、福建的分离株分别包含有18种、15种、3种、1种耐药谱型,4个地区均具有J型(FUR/AMO)耐药谱;2007―2012年各年份菌株耐药谱型为:2007年2种(J、M,耐2种抗生素)、2010年4种(A、B、J、M,耐5种抗生素)、2011年24种(除Y、Z外的A-X耐药谱型,耐7种抗生素),2012年26种(包括Y、Z耐药谱型,耐8种抗生素)。聚类分析将实验菌株分为i^vi共6个亚群,进而聚类为Group I、Group II两个组群;各亚群菌株具有独特的耐药谱型,耐药谱型分别是N、P、T、U、Y(i亚群),R、S(ii亚群),K、P(iii亚群),F、H、O、X、V、W(iv亚群),E、G、Q(v亚群),C、L、Z(vi亚群);两个组群菌株没有共同的耐药谱型。研究结果表明,哈维弧菌分离株耐药谱型多样,谱型丰富度较高,来源不同的菌株耐药谱型存在差异,聚类分析方法能够根据耐药性情况有效地对菌株分型。 展开更多
关键词 哈维弧菌 海水养殖 耐药谱 聚类分析 亚群
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方斑东风螺“翻背症”的病原及初步治疗研究 被引量：11
5
作者 赵旺 吴开畅 +4 位作者 王江勇 凌慧 杨蕊 岑小勇 叶乐 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期552-556,共5页
对海南发生"翻背症"的方斑东风螺进行了病原分离、鉴定,药敏分析及药物治疗试验。结果显示,病原为哈维弧菌,该菌对喹诺酮类、磺胺类药物敏感,对青霉素、阿莫西林等耐药;药物治疗结果显示,试验组诺氟沙星、复方磺胺甲恶唑、苯... 对海南发生"翻背症"的方斑东风螺进行了病原分离、鉴定,药敏分析及药物治疗试验。结果显示,病原为哈维弧菌,该菌对喹诺酮类、磺胺类药物敏感,对青霉素、阿莫西林等耐药;药物治疗结果显示,试验组诺氟沙星、复方磺胺甲恶唑、苯扎溴铵及对照组的最终存活率分别为39.05%、32.38%、29.52%和14.29%,诺氟沙星的治疗效果较好,可用于治疗方斑东风螺"翻背症"。 展开更多
关键词 方斑东风螺 翻背症 哈维弧菌 药物治疗
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两株珍珠龙趸病原性哈维弧菌(Vibrio harveyi)的分离与鉴定 被引量：11
6
作者 蒋魁 徐力文 +5 位作者 苏友禄 马红玲 刘广锋 郭志勋 高芳 冯娟 《生态科学》 CSCD 2017年第6期16-24,共9页
自海南陵水和广东深圳养殖场患病珍珠龙趸(pearl gentian)分离到2株优势菌(X12XC30和X13SZ03),经回归感染实验证实2株菌是珍珠龙趸的病原菌,对珍珠龙趸的半致死浓度(LD50)分别是6.58×106 CFU·g-1和9.83×105 CFU·g-... 自海南陵水和广东深圳养殖场患病珍珠龙趸(pearl gentian)分离到2株优势菌(X12XC30和X13SZ03),经回归感染实验证实2株菌是珍珠龙趸的病原菌,对珍珠龙趸的半致死浓度(LD50)分别是6.58×106 CFU·g-1和9.83×105 CFU·g-1。对菌株进行形态、颜色和生长条件等常规生理生化实验,并进行16S r DNA,rct B和tox R等管家基因的序列分析综合鉴定。结果显示:2株病原菌均为短杆状革兰氏阴性菌,TCBS生长为黄色,对O/129(150 ug·片-1)敏感,生理生化指标与哈维弧菌标准株一致;16S r DNA,rct B和tox R序列在Genbank上检索与哈维弧菌的同源性最高,根据管家基因的序列构建系统进化树,自然地与哈维弧菌分支聚类为一支,确定这2株菌均为哈维弧菌。药敏实验发现2株哈维弧菌均耐呋喃唑酮,而对诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星和氯霉素等药物敏感。哈维弧菌具有较高的致死率,在珍珠龙趸养殖业中存在潜在的威胁。 展开更多
关键词 哈维弧菌 珍珠龙趸 鉴定
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哈维弧菌及其主要致病因子的研究进展 被引量：11
7
作者 李洋 李强 张显昱 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期159-166,共8页
哈维弧菌作为水产养殖中重要的致病菌,近十多年得到了广泛研究。就哈维弧菌的危害对象和发病症状进行了概述,归纳了该病致病因子的研究进展,并总结了目前哈维弧菌的检测技术和防治方法,以期为哈维弧菌致病机理的进一步深入研究提供参考... 哈维弧菌作为水产养殖中重要的致病菌,近十多年得到了广泛研究。就哈维弧菌的危害对象和发病症状进行了概述,归纳了该病致病因子的研究进展,并总结了目前哈维弧菌的检测技术和防治方法,以期为哈维弧菌致病机理的进一步深入研究提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 哈维弧菌 致病因子 检测方法 防治技术
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一株斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)病原菌的分离与鉴定 被引量：9
8
作者 林克冰 吴建绍 +3 位作者 黄兆斌 葛辉 朱志煌 孙敏秋 《福建水产》 2014年第6期419-427,共9页
2011年7月,福建省晋江某养殖场养殖的斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）发病,病鱼体重3~10 g,症状为鱼体色变深,拒食,离群缓慢游动,背鳍下方局部鳞片脱落、表皮溃烂,肝脏点状发红。2011年7月从濒死病鱼肝脏、肾脏中分离到2株细菌,分... 2011年7月,福建省晋江某养殖场养殖的斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）发病,病鱼体重3~10 g,症状为鱼体色变深,拒食,离群缓慢游动,背鳍下方局部鳞片脱落、表皮溃烂,肝脏点状发红。2011年7月从濒死病鱼肝脏、肾脏中分离到2株细菌,分别命名为201107-I与201107-II,经生理、生化指标和16S rRNA基因鉴定,这两株均为哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）。毒性实验发现这两株菌都能引起斜带石斑鱼表皮溃烂症,其中201107-II毒性较强,被用于后续感染实验。通过肌肉注射、腹腔注射与创伤浸浴3种方式进行回归感染实验,得到3种方式对石斑鱼的半致死量LD50分别为4.3×104、2.9×105和5.4×106cfu/g鱼体重。从人工感染的石斑鱼肾脏中再次分离到该菌,经生理、生化指标和16S rRNA基因鉴定,为同株菌。药敏实验结果表明,该菌株对红霉素、大观霉素、氯霉素等16种抗生素高度敏感,对呋喃唑酮、克拉霉素、环丙沙星等9种抗生素中度敏感,对苯唑西林、青霉素G、万古霉素等13种抗生素不敏感。本研究对石斑鱼病害防治与健康养殖具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 哈维弧菌 细菌鉴定 药敏
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豹纹鳃棘鲈尾部溃烂症病原菌的鉴定与药敏试验 被引量：8
9
作者 辜良斌 徐力文 +3 位作者 冯娟 苏友禄 刘广峰 郭志勋 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期71-80,共10页
2011年海南会文烟堆某豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)养殖场突发大量死亡,病鱼体色发白,尾鳍溃烂。从病鱼病灶处分离出1株菌X11YD05,回归感染证实为患病豹纹鳃棘鲈病原菌,对平均体质量为30.8 g的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)... 2011年海南会文烟堆某豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)养殖场突发大量死亡,病鱼体色发白,尾鳍溃烂。从病鱼病灶处分离出1株菌X11YD05,回归感染证实为患病豹纹鳃棘鲈病原菌,对平均体质量为30.8 g的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的半数致死量(LD50)为1.67×105cfu·g-1。为进一步确定病原菌的分类学特征,扩增其16S rDNA、toxR、rpoD、mreB、topA和rctB等6种管家基因,构建系统发育树。结果发现,X11YD05与哈维弧菌(Vibrio harveyi)有较高同源率。结合生理生化试验,确定X11YD05为哈维弧菌。16种药敏试验表明该菌仅对氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、复方新诺明等5种抗生素敏感。 展开更多
关键词 豹纹鳃棘鲈 哈维弧菌 烂尾症 16S RDNA
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哈维弧菌对水产动物的致病性及其噬菌体防控研究进展 被引量：7
10
作者 张美霞 耿慧君 +2 位作者 王丽丽 李晓宇 徐永平 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期717-723,共7页
哈维弧菌是一种海洋致病菌,可感染甲壳类、贝类和鱼类等多种水产动物,引发患病动物急性败血症、突眼和慢性皮肤溃疡等。一直以来多采用抗生素控制该病,然而耐药菌株的出现和抗生素在养殖动物体内的残留,已经严重威胁到消费者健康,欧盟... 哈维弧菌是一种海洋致病菌,可感染甲壳类、贝类和鱼类等多种水产动物,引发患病动物急性败血症、突眼和慢性皮肤溃疡等。一直以来多采用抗生素控制该病,然而耐药菌株的出现和抗生素在养殖动物体内的残留,已经严重威胁到消费者健康,欧盟等国家已经禁止使用抗生素预防水产养殖动物哈维弧菌病,因而亟待寻求新的生态友好型抗菌剂。噬菌体因其在治疗细菌性疾病方面的独特优势而受到广泛关注。本文拟就哈维弧菌的流行病学、致病机制、抗生素治疗存在的问题及其噬菌体治疗研究进展进行概述,以期为噬菌体防控水产养殖动物哈维弧菌病提供理论和技术依据。 展开更多
关键词 哈维弧菌 水产动物 致病机制 噬菌体治疗
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花鲈irak4基因cDNA的克隆与表达分析 被引量：6
11
作者 李富祥 王鹏飞 +1 位作者 闫路路 邱丽华 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期70-79,共10页
Toll样受体家族信号通路参与了机体特异性免疫和先天性免疫过程,白介素1受体相关激酶4 (IRAK4)是Toll样受体家族信号通路中的重要成员之一。该研究克隆了花鲈(Lateolabrax maculatus) lmirak4序列,并分析了其序列特征、表达模式及亚细... Toll样受体家族信号通路参与了机体特异性免疫和先天性免疫过程,白介素1受体相关激酶4 (IRAK4)是Toll样受体家族信号通路中的重要成员之一。该研究克隆了花鲈(Lateolabrax maculatus) lmirak4序列,并分析了其序列特征、表达模式及亚细胞定位。Lmirak4基因cDNA开放阅读框(ORF)全长942 bp,编码313个氨基酸,含有1个N端死亡结构域和1个中央蛋白激酶结构域。推导的Lmirak4氨基酸序列与其他鱼类Irak4氨基酸序列具有高度一致性。组织分布结果显示,lmirak4在各组织中表达具有差异性,在头肾中表达量最高。感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)与哈维弧菌(Vibrio harveyi)后,花鲈头肾、肝脏和脾脏中lmirak4 mRNA的表达水平显著增加。亚细胞定位显示,外源性Lmirak4主要分布于HEK-293T细胞质中,在花鲈头肾原代培养细胞中成功表达但无明显分布差异。 展开更多
关键词 花鲈 irak4 无乳链球菌 哈维弧菌 细胞转染
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用灭活哈维弧菌菌苗浸泡免疫大黄鱼的研究 被引量：6
12
作者 毛芝娟 楼丹 +4 位作者 杨波 吴建军 吴雄飞 川合研儿 陈昌福 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期326-330,共5页
用经福尔马林灭活的哈维弧菌 (Vibrioharveyi)菌苗对大黄鱼 (Pseudodciaenacrocea)幼鱼进行浸泡免疫接种 ,分别以 1.0× 10 8cells/mL、1.0× 10 7cells/mL和 1.0× 10 6cells/mL的菌液浓度 ,浸泡处理鱼体 1min、10min和 6 ... 用经福尔马林灭活的哈维弧菌 (Vibrioharveyi)菌苗对大黄鱼 (Pseudodciaenacrocea)幼鱼进行浸泡免疫接种 ,分别以 1.0× 10 8cells/mL、1.0× 10 7cells/mL和 1.0× 10 6cells/mL的菌液浓度 ,浸泡处理鱼体 1min、10min和 6 0min后 ,放入设置在象山港内的网箱中饲养 ,并且在浸泡免疫接种后的 12 6d内 ,定期检测试验鱼的免疫保护力 (RPS)。结果表明 ,在浸泡免疫接种后的 5 6～ 77d内 ,受免鱼的RPS达到了 95 %～ 10 0 % ,随后RPS稍有下降 ,但是 ,直到免疫浸泡接种后第 112～ 12 6天时 ,供试鱼的RPS仍达到 70 %～ 80 %。从设置在野外的网箱中供试鱼的统计结果看 ,与对照组相比 ,免疫鱼疾病发生较少 ,发病时期推迟 ,病程缩短 ,成活率提高 (80 .0 %～95 .0 % ) ,明显高于对照组。对不同日龄大黄鱼幼鱼进行浸泡免疫的试验结果表明 ,4 0日龄、75日龄和 10 0日龄的大黄鱼幼鱼均能在免疫接种后获得特异性免疫保护力。在第 1次免疫接种 5 6d后以同样方式加强免疫 ,试验鱼在 112d内保持了很高的RPS水平 ,明显地高于同期的 1次免疫接种鱼体。 展开更多
关键词 大黄鱼 哈维弧菌 灭活菌苗 浸泡免疫
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3种致病弧菌感染对大黄鱼7种酶活性的影响 被引量：4
13
作者 葛明峰 李思源 王国良 《海洋学研究》 北大核心 2012年第2期74-80,共7页
大黄鱼溃疡病主要由3种致病弧菌引起:溶藻弧菌Vibrio alginol yticus、哈维弧菌V.harveyi和副溶血弧菌V.parahaemolyticus。为了解大黄鱼抗病原菌感染的免疫反应机理,对其疾病防御提供重要的理论基础,本实验将健康的大黄鱼随机分为3个... 大黄鱼溃疡病主要由3种致病弧菌引起:溶藻弧菌Vibrio alginol yticus、哈维弧菌V.harveyi和副溶血弧菌V.parahaemolyticus。为了解大黄鱼抗病原菌感染的免疫反应机理,对其疾病防御提供重要的理论基础,本实验将健康的大黄鱼随机分为3个实验组和1个对照组,分别注身射0.2 mL的哈维弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌及灭菌生理盐水。在人工感染后的第0,1,2,4,7.10,13,16,20天分别采样,通过测定每组大黄鱼血清中7种免疫相关酶活性,比较这3种致病弧菌对大黄鱼影响的差异性。结果表明:在感染后的1～10d,实验组大黄鱼血清中血清溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化物酶(P0D)、髓过氧化物酶(MPO)的活性变化,总体表现为先升高、后降低再逐渐升高最后趋于一致的现象,且不同病原菌之间存在一定的时效差异。碱性磷酸酶(AKP)对入侵体内的哈氏弧菌反应转敏感,ACPPOD和MPO对溶藻弧菌反应较敏感,LSZ和PO对副溶血弧菌反应较敏感。 展开更多
关键词 大黄鱼 溶藻弧菌 哈维弧菌 副溶血弧菌 酶活性
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微塑料胁迫对近江牡蛎免疫及抗菌力的影响 被引量：4
14
作者 牟红莉 王瑞旋 +2 位作者 林小植 王俊 王江勇 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期325-330,共6页
为探究微塑料对近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)免疫及抗菌力的影响,本研究将不同浓度(0.05 mg/L、0.5 mg/L、5 mg/L)的聚苯乙烯微塑料—菌悬液注入牡蛎壳腔内,研究牡蛎在胁迫24 h和72 h后鳃组织中6种免疫指标的活力,同时记录死亡率... 为探究微塑料对近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)免疫及抗菌力的影响,本研究将不同浓度(0.05 mg/L、0.5 mg/L、5 mg/L)的聚苯乙烯微塑料—菌悬液注入牡蛎壳腔内,研究牡蛎在胁迫24 h和72 h后鳃组织中6种免疫指标的活力,同时记录死亡率。结果显示,微塑料胁迫24 h后,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力随暴露浓度的升高而升高,但一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)和乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)随暴露浓度升高被显著抑制,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活力仅在0.5 mg/L处理下显著上升,过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力呈现先上升再下降后上升的趋势。微塑料胁迫72 h后,CAT、AKP、A-chE和SOD的活力变化趋势与24 h的变化趋势大致相同,但活性显著减弱,牡蛎的累计死亡率与对照组相比显著上升。以上结果表明,随着微塑料浓度的增加和暴露时间的延长,牡蛎的抗菌能力和免疫能力均呈下降趋势。 展开更多
关键词 近江牡蛎 微塑料 哈维弧菌 抗氧化酶 免疫指标
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MALDI-TOF-MS检测哈维弧菌前处理条件的探索及聚类分析 被引量：4
15
作者 武静 陈英剑 +1 位作者 李继霞 胡成进 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第1期14-17,共4页
目的 对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测哈维弧菌的前处理条件进行优化,并通过聚类分析初步探讨质谱对哈维弧菌溯源性的价值。方法 本研究首先利用rpoB测序对33株哈维弧菌进行确证,然后利用MALDI-TOF-MS采集哈维弧... 目的 对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测哈维弧菌的前处理条件进行优化,并通过聚类分析初步探讨质谱对哈维弧菌溯源性的价值。方法 本研究首先利用rpoB测序对33株哈维弧菌进行确证,然后利用MALDI-TOF-MS采集哈维弧菌蛋白指纹图谱。并通过培养基的选择、培养时间及样本处理方法对检验前操作程序进行优化。最后,利用MALDI-TOF-MS对33株哈维弧菌进行聚类分析,探讨质谱对细菌溯源性的价值。结果 本研究所用3种培养基的选择对哈维弧菌的鉴定结果差异无统计学意义(P>0.05)。培养时间18、24h哈维弧菌的鉴定结果优于48h的鉴定结果,差异有统计学意义(P<0.05)。但培养18、24h之间鉴定结果差异无统计学意义(P>0.05)。甲酸提取法的效果明显优于直接涂抹法,差异有统计学意义(P<0.05)。基于MALDI-TOF-MS法的聚类分析,能哈维弧菌病感染病原体的溯源提供理论依据。结论 MALDI-TOF-MS法操作简单、快速,可实现对哈维弧菌的准确鉴定和溯源性分析,在海洋渔业和海水养殖业将会发挥重要作用。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 哈维弧菌 快速检测 rpoB分析 聚类分析
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日本对虾IKKβ基因克隆及其表达分析
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作者 范嗣刚 孙珍珠 +6 位作者 郭靖 吴昊 邓维德 李翔 黎源 陈燕飞 文菁 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1837-1846,共10页
【目的】明确日本对虾NF-κB抑制蛋白激酶β基因(PjIKKβ)生物学特征及其在各组织和哈维弧菌刺激下的表达模式,为揭示IKKβ在日本对虾先天免疫中的作用机制提供理论依据。【方法】克隆PjIKKβ基因cDNA序列,通过ORF Finder、ExPASy ProtP... 【目的】明确日本对虾NF-κB抑制蛋白激酶β基因(PjIKKβ)生物学特征及其在各组织和哈维弧菌刺激下的表达模式,为揭示IKKβ在日本对虾先天免疫中的作用机制提供理论依据。【方法】克隆PjIKKβ基因cDNA序列,通过ORF Finder、ExPASy ProtParam、SMART、SignalP 5.0、TMHMM、Prot-Comp等在线软件进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测PjIKKβ基因在日本对虾各组织及哈维弧菌悬液刺激后的表达模式。【结果】PjIKKβ基因序列全长2794 bp,其开放阅读框(ORF)长2373 bp,共编码790个氨基酸残基。PjIKKβ蛋白包含1个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域(S-TKc)、1个亮氨酸锌指结构域(LZ)和1个螺旋—环—螺旋结构域(HLH),定位于细胞质和细胞核中,无跨膜结构,无信号肽。PjIKKβ与凡纳滨对虾IKKβ氨基酸序列相似性最高(98%),其次是与斑节对虾IKKβ氨基酸序列(97%);多序列比对分析结果显示,各物种IKKβ蛋白序列在S-TKc结构域的保守性较高,而在其他区域的保守性低。基于IKKβ氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示,在甲壳动物分支中日本对虾先与凡纳滨对虾聚在一起,再与斑节对虾聚为一个分支。PjIKKβ基因在日本对虾肝胰腺、肌肉、鳃、神经节、胃、心脏、血淋巴和眼柄等8个组织中均有表达,以神经节、肌肉、血淋巴和眼柄中的相对表达量较高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05);注射后24、48和72 h,PjIKKβ基因在注射哈维弧菌日本对虾血淋巴中的相对表达量上调,且与注射PBS日本对虾的相对表达量存在极显著差异(P<0.01)。【结论】PjIKKβ蛋白含有1个S-TKc结构域、1个LZ结构域和1个HLH结构域,在进化过程中非常保守;PjIKKβ基因的组织表达特征及其在哈维弧菌刺激后的表达变化,进一步证实PjIKKβ基因参与了日本对虾的先天免疫应答反应。 展开更多
关键词 日本对虾 IKKβ基因 哈维弧菌 表达特征 先天免疫
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哈维弧菌对皱纹盘鲍不同组织内细菌群落结构的影响
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作者 张婷 王瑞旋 +4 位作者 孙敬锋 黄嘉健 林小植 周飞 马细兰 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期56-65,共10页
利用Illumina测序技术研究了皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)消化道、鳃和足部的菌群结构,以及受哈维弧菌(Vibrio harveyi)胁迫后皱纹盘鲍消化道、鳃和足部肌肉菌群的动态变化。在皱纹盘鲍的消化道、鳃以及足部肌肉中检测到9个门的细... 利用Illumina测序技术研究了皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)消化道、鳃和足部的菌群结构,以及受哈维弧菌(Vibrio harveyi)胁迫后皱纹盘鲍消化道、鳃和足部肌肉菌群的动态变化。在皱纹盘鲍的消化道、鳃以及足部肌肉中检测到9个门的细菌,其中变形菌门(Proteobacteria)为优势菌门,在3种组织中的占比分别为30.1%~64.4%、37.45%~70.6%和71.1%~85.9%;拟杆菌门(Bacteroidetes,5.53%~46.09%)、梭杆菌门(Fusobacteria,4.43%~36.80%)及软壁菌门(Tenericutes,0.60%~28.77%)为次优势菌门;其余为放线菌门等5个菌门和一些未知类群。在属水平上,皱纹盘鲍消化道内的优势菌属为支原体属(Mycoplasma,15.85%~34.55%);鳃组织中的优势菌属为假单胞菌属(Pseudomonas,54.81%);足部肌肉中的优势菌属为假单胞菌属(Pseudomonas,44.83%~69.76%)和Curvibacter(21.24%),此外还有Pelomonas等菌属。引入病原哈维弧菌后,随着胁迫时间的延长,皱纹盘鲍消化道内弧菌的数量由7.2×10^(5)cfu·mL^(–1)升高至10.9×10^(5)cfu·mL^(–1);血液内的弧菌数量由2×10^(3)cfu·mL^(–1)升高至4.7×10^(3)cfu·mL^(–1);在受哈维弧菌胁迫48h后足部肌肉中弧菌的数量下降,其余时间点足部肌肉中弧菌的数量均增加。除了受哈维弧菌胁迫24h后消化道的Ace、Chao指数以及受胁迫96h后消化道的Ace指数高于对照组之外,其余时间点鲍消化道、鳃及足部肌肉的Ace、Chao指数均低于对照组。除受哈维弧菌胁迫24h后的鲍消化道、足部肌肉试验组和胁迫96h后的鳃组织试验组中的Shannon指数高于对照组外,其余时间点均低于对照组。引入哈维弧菌后,消化道内拟杆菌门及梭杆菌门的丰度均增加;鳃组织的变形菌门丰度下降,梭杆菌门的丰度增加;足部肌肉的变形菌门丰度增加,拟杆菌门的丰度则下降。在属的水平上,除了个别时间点外,消化道内的假单胞菌属、拟杆菌属(Bacteroides)、中度产丙酸菌属(Propionigenium)的丰 展开更多
关键词 哈维弧菌 皱纹盘鲍 细菌多样性
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圆眼燕鱼哈维弧菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：4
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作者 李莉 朱永肖 +3 位作者 卢晓颖 杨健 赵贤亮 孔祥会 《动物医学进展》 北大核心 2019年第1期74-79,共6页
从患病圆眼燕鱼(Platax orbicularis)体内分离到一批形态一致的优势菌株,通过细菌鉴定并检测其药物敏感性,以期为圆眼燕鱼的疾病防治提供参考。对分离菌株进行形态观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列分析,结果显示该菌株与弧菌表... 从患病圆眼燕鱼(Platax orbicularis)体内分离到一批形态一致的优势菌株,通过细菌鉴定并检测其药物敏感性,以期为圆眼燕鱼的疾病防治提供参考。对分离菌株进行形态观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列分析,结果显示该菌株与弧菌表型特征一致,16SrRNA与GenBank中哈维弧菌(Vibrio harveyi)的同源性高达99%,在系统进化树中与哈维弧菌(KU245727)聚为一分支,结合该菌的生理生化特征和基因序列分析,鉴定该优势菌株为哈维弧菌。药敏试验结果显示,该分离菌对头孢噻肟、强力霉素、恩诺沙星、萘啶酸、卡那霉素、妥布霉素、氯霉素、复方新诺明等14种药物敏感,对阿莫西林、青霉素G、乙酰螺旋霉素、杆菌肽、多黏菌素B、利福平、红霉素和磺胺异恶唑等8种药物表现为耐药。采用PCR方法检测该菌株携带TEM、Sul2、ANT(3′′)-1耐药基因。研究结果可为哈维弧菌的鉴定及圆眼燕鱼的疾病诊治提供参考。 展开更多
关键词 圆眼燕鱼 哈维弧菌 分离鉴定 16SrRNA 药敏试验
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大海马肠炎病原菌分离、鉴定及生物防治 被引量：3
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作者 姜芳燕 杨宁 +2 位作者 冯慧敏 黄海 武耀廷 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期5317-5324,共8页
从大海马(Hippocampus kuda)肠道内通过划线培养,分离优势菌落,获得5株优势菌株。通过回归感染实验,验证了菌株C11和菌株HC2对大海马的致病性和致死性。经菌落形态特征、生理生化特征及16SrRNA序列分析,鉴定其分别为哈维弧菌(Vibrio har... 从大海马(Hippocampus kuda)肠道内通过划线培养,分离优势菌落,获得5株优势菌株。通过回归感染实验,验证了菌株C11和菌株HC2对大海马的致病性和致死性。经菌落形态特征、生理生化特征及16SrRNA序列分析,鉴定其分别为哈维弧菌(Vibrio harveyi)和副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)。药敏试验表明菌株C11对氨苄西林、左氟沙星、氨曲南等7种抗生素表现出高敏感性;菌株HC2对复方新诺明、链霉素、大观霉素等6种抗生素表现出高敏感性。生物活性物质的抑菌实验表明,茶多酚、乳酸、没食子酸、大蒜素和聚赖氨酸等5种活性物质有抑菌效果,而另外13种活性物质无抑菌作用。本研究旨在为海马实际生产提供一种无毒副作用、无药物残留和健康环保的养殖方式。 展开更多
关键词 大海马 哈维弧菌 副溶血弧菌 分离鉴定 生物防治
原文传递
中药黄芩对多重耐药哈维弧菌耐药性的逆转作用 被引量：3
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作者 王雅茹 叶清清 +3 位作者 方伟彬 刘广锋 冯娟 管淑玉 《广东药学院学报》 CAS 2016年第3期366-369,共4页
目的研究中药黄芩对多重耐药哈维弧菌的耐药逆转作用并初步探讨其作用机理。方法以耐阿莫西林、呋喃唑酮和红霉素的哈维弧菌X12XC30为实验对象,用倍比稀释法测定黄芩对菌株X12XC30的亚抑菌浓度;以SDS为对照,采用影印培养法测定黄芩作用2... 目的研究中药黄芩对多重耐药哈维弧菌的耐药逆转作用并初步探讨其作用机理。方法以耐阿莫西林、呋喃唑酮和红霉素的哈维弧菌X12XC30为实验对象,用倍比稀释法测定黄芩对菌株X12XC30的亚抑菌浓度;以SDS为对照,采用影印培养法测定黄芩作用24 h和48 h的耐药逆转率;通过质粒凝胶电泳观察黄芩对该菌株质粒的消除情况。结果黄芩对阿莫西林和呋喃唑酮的总逆转率为3.00%(24h)和4.33%(48 h);SDS对阿莫西林和呋喃唑酮的总逆转率为0.33%(24 h)和1.33%(48 h)。结论黄芩对多重耐药哈维弧菌有耐药逆转作用。 展开更多
关键词 黄芩 哈维弧菌 多重耐药 耐药性逆转
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