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新疆酸驼乳微生物种群结构的PCR-DGGE分析 被引量:11
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作者 努尔古丽.热合曼 陈晓红 董明盛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第11期136-140,共5页
采用PCR-DGGE技术,比较新疆传统发酵酸驼乳中微生物种群结构及图谱相似性。结果表明:不同来源的酸驼乳中微生物组分存在差异,9份样品间细菌种群结构的相似性为78%~84%,5份样品间酵母菌种群结构的相似性为80%~92%。对酸驼乳细菌和酵母... 采用PCR-DGGE技术,比较新疆传统发酵酸驼乳中微生物种群结构及图谱相似性。结果表明:不同来源的酸驼乳中微生物组分存在差异,9份样品间细菌种群结构的相似性为78%~84%,5份样品间酵母菌种群结构的相似性为80%~92%。对酸驼乳细菌和酵母菌DGGE图谱上主要条带的DNA进行测序和序列分析。结果表明:酸驼乳中细菌组成包括巨型球菌(Macrococcus caseolyticus)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、希腊魏氏菌(Weissella hellenica)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、肠球菌(Enterococcus durans)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)及乳酸明串珠菌(Leuconostoc lactis)等;酵母菌主要包括巨大克洛维酵母(Kluyveromyces marxianus)、单孢酿酒酵母(Kazachstania unispora)、嗜酒假丝酵母(Candida ethanolica)及一种地霉菌(Geotrichum sp.)。 展开更多
关键词 酸驼乳 变性梯度凝胶电泳pcr-dgge 微生物区系 乳酸菌 酵母菌
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双孢蘑菇培养料发酵过程中细菌群落结构分析 被引量:7
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作者 王琳 李敏 +3 位作者 魏启舜 张洪海 周影 赵荷娟 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期653-658,共6页
为探明双孢蘑菇培养料发酵过程中细菌群落多样性和组成的演变,获得相关优势菌落的信息,本研究利用变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)对不同季节不同发酵阶段样品的的细菌进行特异性扩增,并选取主要DNA条... 为探明双孢蘑菇培养料发酵过程中细菌群落多样性和组成的演变,获得相关优势菌落的信息,本研究利用变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)对不同季节不同发酵阶段样品的的细菌进行特异性扩增,并选取主要DNA条带进行克隆、测序和生物信息学分析。结果显示,不同发酵时期带谱差异明显。发酵过程中,培养料中主要有芽孢杆菌属、黄杆菌属、杆菌属、假单胞菌属、Solibacillus、嗜热裂孢菌属、高温双歧菌属和未知分类地位的不可培养细菌。不同季节(春季、冬季)的培养料一次发酵过程中细菌多样性变化趋势相似,且发酵结束时细菌菌落结构相似。双孢蘑菇培养料在发酵过程中细菌群落结构至少经历了3个阶段的演替,即建堆初期、一次发酵阶段和二次发酵阶段。双孢蘑菇培养料发酵过程中细菌种群丰富,并随着发酵的不同阶段发生演替,种群多样性受环境温度的影响。双孢蘑菇培养料发酵过程中一直存在的细菌群落与具有木质纤维素降解特性细菌的序列相似度较高,有利于培养料转化为双孢蘑菇栽培基质。 展开更多
关键词 双孢蘑菇培养料 细菌群落结构
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生物炭对农田土壤细菌群落多样性影响的PCR-DGGE分析 被引量:33
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作者 何莉莉 杨慧敏 +4 位作者 钟哲科 公丕涛 刘玉学 吕豪豪 杨生茂 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期4288-4294,共7页
为评价生物炭对农田土壤细菌群落多样性的影响,对不同施肥方式农田土壤细菌总DNA进行提取和16S rDNA特异性扩增,运用变性梯度凝胶电泳DGGE的分子生物学技术,对施肥土壤细菌群落的多样性进行表征。DGGE电泳结果表明,不同处理均可得到20... 为评价生物炭对农田土壤细菌群落多样性的影响,对不同施肥方式农田土壤细菌总DNA进行提取和16S rDNA特异性扩增,运用变性梯度凝胶电泳DGGE的分子生物学技术,对施肥土壤细菌群落的多样性进行表征。DGGE电泳结果表明,不同处理均可得到20条以上的电泳条带,说明水稻土土壤细菌群落较丰富。从泳道条带数量及光密度值方面对细菌群落多样性指标比较发现,施加生物炭的土壤(T2、T3、T4)细菌丰富度最高,细菌种群较多,其次为秸秆还田处理土壤(T1),而空白对照处理土壤(CK1)细菌群落丰富度最低,各处理之间的细菌种群均匀度指数差异不显著;对细菌群落的条带信息与土壤理化性质进行相关性分析得到,细菌群落的结构变化与各土壤理化性质的相关性大小依次为速效钾>总有机碳>有效磷>全氮>pH。 展开更多
关键词 细菌菌落 多样性 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 生物炭 秸秆还田
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罗非鱼-鱼腥草共生养殖池塘沉积物菌群结构与功能特征 被引量:26
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作者 史丽娜 可小丽 +4 位作者 刘志刚 张健东 姚振锋 柯浩 卢迈新 《中国农学通报》 2015年第14期64-73,共10页
为探究鱼腥草浮床对罗非鱼池塘沉积物中细菌群落的影响,采用Biolog-Eco和PCR-DGGE技术,对比分析了2013年9—11月鱼腥草浮床(试验塘)和常规养殖(对照塘)2种模式下,罗非鱼养殖池塘沉积物中菌群的结构和功能多样性特征。Biolog-Eco结果显... 为探究鱼腥草浮床对罗非鱼池塘沉积物中细菌群落的影响,采用Biolog-Eco和PCR-DGGE技术,对比分析了2013年9—11月鱼腥草浮床(试验塘)和常规养殖(对照塘)2种模式下,罗非鱼养殖池塘沉积物中菌群的结构和功能多样性特征。Biolog-Eco结果显示:9月份试验塘沉积物微生物代谢强度和菌群多样性指数均低于对照塘;但10—11月份则明显高于对照塘,且不同月份丰富度指数与对照塘相比均差异显著(P<0.05),说明鱼腥草浮床在养殖中、后期能有效增加细菌生物量和提高种群丰富度。主成分分析(PCA)显示:试验塘和对照塘不同月份沉积物中菌群对羧酸类碳源的相对利用率差异较大,且不同月份利用碳源的差异程度为10月>11月>9月;DGGE结果显示:试验塘和对照塘沉积物主要的菌群结构组成相似,分属于6个门,包括变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、酸杆菌门(Acidobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)、蓝细菌门(Cyanobacteria)和梭杆菌门(Fusobacteria),其中变形菌门(54.17%)均为优势菌群,但同一月份试验塘菌群多样性均明显多于对照塘。结果表明,鱼腥草浮床具有增加罗非鱼池塘沉积物菌群功能多样性和优化菌群结构的作用。 展开更多
关键词 吉富罗非鱼 鱼腥草浮床 微生态板(Biolog-Eco) 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 沉积物 菌群多样性
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变性梯度凝胶电泳在环境微生物生态学中的应用 被引量:11
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作者 单国彬 金文标 +1 位作者 林佶侃 邢新会 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1257-1264,共8页
PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)具有可靠性强、重复性好、方便快捷等优点,已被广泛应用于环境生态学中微生物群落多样性、动态性分析和功能细菌的跟踪。本文综述了PCR-DGGE技术的基本原理,不同DNA提取方法的比较,不同PCR方式的比较及... PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)具有可靠性强、重复性好、方便快捷等优点,已被广泛应用于环境生态学中微生物群落多样性、动态性分析和功能细菌的跟踪。本文综述了PCR-DGGE技术的基本原理,不同DNA提取方法的比较,不同PCR方式的比较及其在环境生态学中研究微生物群落多样性、环境中微生物群落变化的动态监测、硝化菌-反硝化菌和硫酸还原菌(SRB)的动态分析和监测等领域中的应用,并对该技术自身存在的局限性和应用前景进行了评价。 展开更多
关键词 pcr-变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 废水生物处理 微生物群落 活性污泥 生物膜 硝化菌-反硝化菌 硫酸还原菌
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精养团头鲂池塘沉积物微生物群落的结构特征及组成多样性分析 被引量:20
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作者 李晓 李冰 +1 位作者 董玉峰 朱健 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期218-227,共10页
为了研究精养团头鲂池塘冬季不投饵期间沉积物不同层次细菌群落结构的特征,实验分层次采集池塘沉积物,采用PCR—DGGE(变性梯度凝胶电泳技术)及基因测序技术,对池塘沉积物垂向空间分布的微生物群落特征及多样性的组成进行分析。结... 为了研究精养团头鲂池塘冬季不投饵期间沉积物不同层次细菌群落结构的特征,实验分层次采集池塘沉积物,采用PCR—DGGE(变性梯度凝胶电泳技术)及基因测序技术,对池塘沉积物垂向空间分布的微生物群落特征及多样性的组成进行分析。结果显示:精养团头鲂池塘的整个停饵期间沉积物微生物群落的丰富度(平均为38)和多样性指数(平均为3.18)均较高,说明精养池塘沉积物中微生物数量多、种类丰富。上层(0—10cm)和中层(10~20cm)沉积物的微生物群落Shannon指数(3.29、3.27)略高于下层(20~30cm)的Shannon指数(3.17),底层沉积物样品的指数最小(2.96),说明在底层沉积物中微生物群落结构趋于稳定,菌群多样性变化较小。精养团头鲂池塘的整个停饵期间沉积物样品中上层(0~10cm和10~20cm)微生物的群落结构相似性较高(80%以上),而底下层(20~30cm和30~40cm)与中上层微生物的群落结构相似性较低(63%以上),说明通过微生物群落结构的相似性程度可以大致看出样品的空间顺序。微生物群落组成多样性的结果显示:精养团头鲂池塘沉积物在整个停饵期间包含的菌群分属于8个门:变形菌门(β-、γ-、δ-亚群)(33.33%)、绿弯菌门(19.05%)、拟杆菌门(14.29%)、蓝细菌门(9.52%)、螺旋体门(9.52%)、硝化螺旋菌门(4.76%)、酸杆菌门(4.76%)、厚壁菌门(4.76%);结果表明变形菌门为精养团头鲂池塘沉积物在停饵期间的优势菌群,δ-变形菌亚群(14.29%)是变形菌门中的优势菌群。本实验以期得到不同种类微生物的分子信息从而为以后筛选有益菌群奠定基础,并为团头鲂精养池塘微生态环境的人工调控提供依据,从而为适时监测养殖生态环境运营状况建立快速的分子生物学分析方法� 展开更多
关键词 团头鲂 沉积物 DNA提取 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 细菌多样性
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饵料对鳡肠道微生物多样性的影响 被引量:16
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作者 钟蕾 向建国 +1 位作者 曾丹 李宁求 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期830-835,共6页
通过PCR-DGGE指纹分析并结合克隆、测序对饲喂人工配合饲料和冰鲜鱼两种不同饵料的鳡肠道微生物群落结构及多样性差异进行了比较研究。摄食配合饲料和冰鲜鱼的鳡肠道样品中分别检测到21条和17条清晰的DGGE指纹条带;进一步的克隆、测序及... 通过PCR-DGGE指纹分析并结合克隆、测序对饲喂人工配合饲料和冰鲜鱼两种不同饵料的鳡肠道微生物群落结构及多样性差异进行了比较研究。摄食配合饲料和冰鲜鱼的鳡肠道样品中分别检测到21条和17条清晰的DGGE指纹条带;进一步的克隆、测序及BLAST比对分析表明,21条测序谱带与Gen Bank数据库中已知微生物的同源性为98%—100%。配合饲料饲养鳡肠道微生物特有条带代表种群主要为魏斯氏菌(Weissella koreensis)等,冰鲜鱼饲养鳡特有条带代表种为威斯康星米勒菌(Moellerella wisconsensis)等。从PCR-DGGE指纹相似性来看,不同饵料饲养鳡的肠道细菌组成差异较为明显,相似性仅为11.9%—42.6%。鳡肠道菌群的DGGE指纹图谱中条带的H′指数(Shannon-Weiner指数)最高为配合饲料饲养鳡第Ⅴ组样本,达到2.84,最低的为冰鲜鱼饲喂下的鳡第Ⅵ组样本,为2.46。研究结果表明,投喂人工配合饲料和冰鲜鱼会对鳡肠道菌落产生影响,可为鳡饲料的开发提供一定的基础依据。此外,两类鳡的肠道群落PCR-DGGE指纹图谱有助于这两种鳡产品的跟踪和肠道益生菌研究。 展开更多
关键词 肠道微生物 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 16S RDNA
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采用PCR-DGGE技术研究处理农田退水组合人工湿地微生物群落特征 被引量:7
8
作者 吴文卫 刘昂 +5 位作者 谷照虎 徐慧妮 赵磊 陈宣钦 陈丽梅 李昆志 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期978-985,共8页
以种植美人蕉和旱伞竹的复合垂直流人工湿地(MIL)系统的基质(分子筛、陶粒和碎石)及表流人工湿地的基质土壤为材料,采用PCR-DGGE技术研究处理农田退水的湿地中微生物群落结构的差异及其优势菌群.结果显示,MIL系统上行池中种植美人蕉、... 以种植美人蕉和旱伞竹的复合垂直流人工湿地(MIL)系统的基质(分子筛、陶粒和碎石)及表流人工湿地的基质土壤为材料,采用PCR-DGGE技术研究处理农田退水的湿地中微生物群落结构的差异及其优势菌群.结果显示,MIL系统上行池中种植美人蕉、旱伞竹和不种植物对照3个处理的表层水样和上层碎石基质以及表流人工湿地3个处理的基质土样的可操作分类单元OTU(Operation Taxonomy Unit)数目都比较多(12-14),说明其微生物种类较多,微生物多样性较高,其优势种群主要为Uncultured Xylella sp.、Uncultred bacterium以及Uncultured Tolumones sp.和Acidovorax;MIL系统上行池下层的陶粒和分子筛基质的OTU数目以对照和种植旱伞竹的较高(6-11),而种植美人蕉处理最少(4-5),呈现微生物种类少、微生物多样性较低的特点,其优势种群主要有Uncultured Xylella sp.、Uncutured soil bacterium和Uncultured Sphingomon adacsas.这些结果表明垂直复合湿地系统选择种植美人蕉能提高其下层基质还原性,降低细菌多样性,有利于硝态氮的还原去除. 展开更多
关键词 人工湿地 微生物多样性 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 农田退水 美人蕉
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油藏微生物群落结构的分子分析 被引量:5
9
作者 程海鹰 孙珊珊 +4 位作者 梁建春 汪娟娟 罗一菁 魏利 张忠智 《化学与生物工程》 CAS 2008年第9期39-43,共5页
利用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术考察本源微生物驱油前后,即营养剂注入前后微生物群落结构的变化。实验室模拟地层培养结果表明,在以N-1(主要成分为淀粉纤维素)为唯一营养剂、培养温度为48℃时,在有氧或厌氧条件下,24 h后原始... 利用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术考察本源微生物驱油前后,即营养剂注入前后微生物群落结构的变化。实验室模拟地层培养结果表明,在以N-1(主要成分为淀粉纤维素)为唯一营养剂、培养温度为48℃时,在有氧或厌氧条件下,24 h后原始水样中对驱油有利的本源菌便可以被激活,并随着培养时间的延长最终达到稳定。主要激活的对驱油有利的3种菌株为假单胞菌(Pseudomonas sp.)、梭状芽孢杆菌(Clostridium sp.)和烃类降解菌(Hydro-carbon seep bacterium)。经分析,原始底层注入水中虽然含有对驱油不利的脱硫肠状菌属(Desulfotomaculum salinum),但是在经N-1激活后的水样中均未发现该菌的存在,证明N-1不会激活原始水样中的脱硫肠状菌属。为营养体系的筛选、注入方案的优化设计和驱油效果评价提供了理论支撑。 展开更多
关键词 微生物群落结构 分子分析 pcr-变性梯度凝胶电泳(pcrdgge) N-1 微生物采油(MEOR)
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博物馆展厅人流高峰期空气微生物丰度及多样性调查 被引量:6
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作者 唐欢 周理坤 +1 位作者 王春 张丽龙 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期707-711,共5页
目的探讨国庆"小长假"参观人数激增时博物馆展厅内空气微生物数量和种类的变化情况。方法于国庆参观日(2013年10月2日,即人流高峰期)和普通参观日(2013年10月22日),分别用空气采样器对博物馆展厅进行空气微生物采样,采用纯培... 目的探讨国庆"小长假"参观人数激增时博物馆展厅内空气微生物数量和种类的变化情况。方法于国庆参观日(2013年10月2日,即人流高峰期)和普通参观日(2013年10月22日),分别用空气采样器对博物馆展厅进行空气微生物采样,采用纯培养方法对空气微生物进行数量检测,采用基于细菌16Sr RNA基因的变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术对空气微生物进行组成分析。结果人流高峰期展厅内空气微生物菌落总数、丰富度和多样性指数均高于普通参观日,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);但空气微生物优势种属未发生明显变化,葡萄球菌属和不动杆菌属在人流高峰期与普通参观日均为博物馆空气微生物的主要菌属。结论参观人数的大幅增加会导致博物馆展厅内空气微生物数量明显增加。 展开更多
关键词 博物馆 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 空气微生物 参观客流量
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PCR-DGGE法分析不同酒曲中细菌多样性 被引量:4
11
作者 姚淑敏 刘合凤 +3 位作者 高飞 张雅倩 孔雪玉 杨重驿 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2021年第2期89-94,共6页
目的:研究不同酒曲中细菌的多样性.方法:利用DNA提取试剂盒,分别提取6种酒曲的总DNA,利用细菌16S rRNA gene V3区通用引物,采用变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denatured gradient gelelectrophoresis,PCR-DGGE)方法,进行... 目的:研究不同酒曲中细菌的多样性.方法:利用DNA提取试剂盒,分别提取6种酒曲的总DNA,利用细菌16S rRNA gene V3区通用引物,采用变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denatured gradient gelelectrophoresis,PCR-DGGE)方法,进行不同酒曲中细菌多样性的分析.结果:6种酒曲中共分离出12属的细菌,分别为:湖南韶山的酒曲中主要是Weissella,Streptophyta,Bacillus,Pantoea,Okibacterium这5个属的菌株,湖南湘潭酒曲中主要含有Weissella,Pediococcus,Lactococcus,Sphingomonas,Streptophyta,Pantoea这6属的菌株,湖南祁东酒曲中主要含有Weissella,Pediococcus,Bacillus,Klebsiella,Pantoea 5属的菌株,福建福州酒曲含有Weissella,Pediococcus,Pantoea,Pediococcus,Sphingomonas,Streptophyta 6属的菌株,浙江丽水酒曲含有Weissella,Pantoea,Pediococcus,Klebsiella,Enterobacter,Rhizobium,Sphingomonas,Thauera 8属的菌株,浙江兰溪酒曲含有Weissella,Streptophyta,Pantoea 3属的菌株.结论:这说明不同地区的酒曲中的细菌的种类有所不同,同时也说明酒曲中Weissella属的菌是发酵的常见菌群. 展开更多
关键词 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 酒曲 16S rRNA gene V3区 细菌多样性
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发酵温度对青海农用沼气池微生物群落的影响 被引量:4
12
作者 韩睿 朱德锐 +2 位作者 李屹 陈来生 张广楠 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期2483-2494,共12页
为了研究发酵温度对青海农用沼气池微生物群落结构的影响,以沼气池全年6个温度时期的24个泥样为研究对象,采用变性梯度凝胶电泳分析样品中细菌与古菌的群落结构及其变化差异.结果显示:发酵温度的波动变化对微生物群落结构、多样性及沼... 为了研究发酵温度对青海农用沼气池微生物群落结构的影响,以沼气池全年6个温度时期的24个泥样为研究对象,采用变性梯度凝胶电泳分析样品中细菌与古菌的群落结构及其变化差异.结果显示:发酵温度的波动变化对微生物群落结构、多样性及沼气池产气量影响显著.细菌在温度最高(九月中旬)和最低(三月中旬)的2个采样时期多样性最高,古菌仅在温度最高时期多样性最高.在细菌类群中,厚壁菌门Firmicutes、拟杆菌门Bacteroidetes和变形菌门Proteobacteria是所有样品中丰度最高的类群(三者总和>72.43%),是发酵系统中重要的功能细菌类群.细菌属分类水平上,理研菌科佩特里单胞菌属Petrimonas、梭菌属Clostridium、泰氏菌属Tissierella和假单胞菌属Pseudomona是所有样品的优势类群,总丰度比例较为恒定(约32.40%).在古菌类群中,甲烷微菌目是最优势类群,丰度为40.62%~64.74%.产甲烷菌属Methanogenium是所有样品中主要的产气功能种群,丰度波动范围为32.62%~55.74%,随全年温度的变化而波动,此与沼气的产气规律相一致. 展开更多
关键词 发酵温度 青海 农用沼气池 微生物群落结构 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge)
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孝感酒酿微生物多样性及优势菌特性研究 被引量:4
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作者 焦晶凯 易华西 +7 位作者 张兰威 韩雪 张英春 杜明 张莉丽 张爽 张丽 刘辉 《中国酿造》 CAS 2012年第8期14-18,共5页
采用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术法检测不同酒酿样品中微生物多样性,发现酒酿中包含酿酒酵母属(Saccha-romyces sp.)、毕赤酵母属(Pichia sp.)、乳杆菌属(Lactobacillus sp.)和葡萄糖杆菌属(Gluconobacter sp.)等。从3种酒酿中... 采用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术法检测不同酒酿样品中微生物多样性,发现酒酿中包含酿酒酵母属(Saccha-romyces sp.)、毕赤酵母属(Pichia sp.)、乳杆菌属(Lactobacillus sp.)和葡萄糖杆菌属(Gluconobacter sp.)等。从3种酒酿中分离3株优势酵母菌、1株乳酸杆菌和1株球菌,经鉴定为2株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、1株贝酵母(Saccharomyces bayanus)、坚韧肠球菌(Enterococcus durans)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。3株优势酵母菌MJN2、17JN2和MJN3表现了较强的产酒精能力,培养48h后,酒精产量分别达到1.4%vol、1.5%vol和2.2%vol,2株优势乳酸菌JN3和JN1表现出了较强的产酸能力,培养24h后,pH值分别达到5.13和3.69。 展开更多
关键词 酒酿 微生物 pcr-变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge) 发酵性能
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乳清粉对断奶实验兔肠道微生物区系和益生菌的影响 被引量:3
14
作者 吕建敏 刘月环 《中国比较医学杂志》 北大核心 2015年第8期12-17,共6页
目的利用分子生物学技术研究饲粮中添加乳清粉对断奶早期实验兔肠道微生物区系和益生菌的影响。方法采用单因子实验设计,选择40日龄断奶实验兔,随机分为4组(每组12只),分别饲以乳清粉添加水平为0%、2%、5%和10%的饲粮。饲喂30 d后,每组... 目的利用分子生物学技术研究饲粮中添加乳清粉对断奶早期实验兔肠道微生物区系和益生菌的影响。方法采用单因子实验设计,选择40日龄断奶实验兔,随机分为4组(每组12只),分别饲以乳清粉添加水平为0%、2%、5%和10%的饲粮。饲喂30 d后,每组随机取8只兔,麻醉处死,取盲肠内容物提取细菌总DNA,首先利用PCR-DGGE技术分析兔盲肠微生物区系多样性,进而应用实时荧光定量PCR(SYBR Green I)法定量检测盲肠细菌中双歧杆菌和乳酸杆菌含量。结果 (1)实验兔盲肠细菌DGGE各分析参数随乳清粉添加量的提高逐渐上升,添加不同水平乳清粉均可显著增加DGGE条带数(P<0.05,P<0.01)。2%和5%乳清粉添加水平组的DGGE条带数和香农指数均极显著(P<0.01)高于未添加组,但以上2项指标在乳清粉各添加水平间差异无显著性(P>0.05)。DGGE均匀度指数在各实验组间均无差异显著性(P>0.05)。(2)饲粮中添加乳清粉可提高实验兔盲肠内容物中乳酸杆菌和双歧杆菌数量,其中各乳清粉处理组(2%,5%和10%)的乳酸杆菌数量均显著高于0%添加组(P<0.05),10%乳清粉添加组的双歧杆菌数量显著高于未添加组(P<0.05),但与其他2个乳清粉添加组无差异显著性(P>0.05)。结论 (1)饲粮中添加乳清粉可显著提高实验兔盲肠细菌菌群的多样性。(2)在实验兔饲粮中添加乳清粉可有效增加肠道益生菌数量。 展开更多
关键词 实验兔 乳清粉 pcr-变性梯度凝胶电泳(pcrdgge) 实时荧光定量pcr 双歧杆菌 乳酸杆菌
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转cry1Ac+cry2Ab基因棉对土壤细菌群落结构和功能多样性的影响 被引量:3
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作者 尹艳宁 方志翔 +1 位作者 沈文静 刘标 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期206-213,共8页
以不同生育期转cry1 Ac+cry2Ab基因棉和常规棉田土壤为对象,采用传统平板培养、Biolog分析和变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术,研究了该新型转基因材料对土壤细菌群落结构和功能多样性的影响。可培养细菌数量测定结果表明,在棉花整个生育... 以不同生育期转cry1 Ac+cry2Ab基因棉和常规棉田土壤为对象,采用传统平板培养、Biolog分析和变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术,研究了该新型转基因材料对土壤细菌群落结构和功能多样性的影响。可培养细菌数量测定结果表明,在棉花整个生育期,2种棉田土壤可培养细菌数量具有相同的变化趋势;与常规棉相比,转cry1 Ac+cry2 Ab基因棉田可培养土壤细菌数量在蕾期存在显著差异(P<0.05),其他生育期则无显著差异。Biolog分析结果显示,转cry1 Ac+cry2 Ab基因棉和常规棉田土壤细菌活性和碳源利用能力在苗期和蕾期存在明显差异,其他生育期则无明显不同。PCR-DGGE图谱的聚类分析结果表明,转cry1 Ac+cry2 Ab基因棉与常规棉田土壤细菌群落结构均随着生育期的不同而发生改变,且两者仅在花铃期出现明显差异。对PCR-DGGE条带的序列分析表明,转cry1 Ac+cry2 Ab基因棉与常规棉田土壤细菌之间的差异具有随机性,可能与采样时期或采样点的差异有关。综上所述,2种棉田土壤细菌群落结构和功能多样性在整个棉花生育期的变化趋势基本一致,转cry1Ac+cry2Ab基因棉仅在某些时期对其产生短暂影响,大部分时期无明显影响。 展开更多
关键词 转cry1Ac+cry2Ab基因棉 土壤细菌群落结构 功能多样性 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge)
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运用PCR-DGGE和克隆技术对串联附积床系统生物膜菌群的分析 被引量:3
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作者 张岩 鄢胜勇 +3 位作者 张彦清 王慧 杨正阳 王丽丽 《北京工业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期122-130,共9页
采用PCR-DGGE﹑克隆等分子生物学手段研究了多级串联附积床同时硝化反硝化脱氮系统生物膜菌群的时间演变,并对生物膜菌群进行同源性分析和系统发育树构建,同时讨论了生物膜菌群对系统中有机物的去除及对同时硝化反硝化脱氮的贡献.结果表... 采用PCR-DGGE﹑克隆等分子生物学手段研究了多级串联附积床同时硝化反硝化脱氮系统生物膜菌群的时间演变,并对生物膜菌群进行同源性分析和系统发育树构建,同时讨论了生物膜菌群对系统中有机物的去除及对同时硝化反硝化脱氮的贡献.结果表明,随着时间的推移,生物膜菌群发生了较大演变而且具有高度多样性.对DGGE图谱优势条带进行分析表明,优势菌群分为5个不同的细菌类群:β-变形菌类群(β-proteobacteria)﹑γ-变形菌类群(γ-proteobacteria)、未分类菌类群(unclassified bacteria)、α-变形菌类群(α-proteobacteria)、放线菌类群(Actinobacteria).β-变形菌类群不仅在数量上占有优势,而且在有机物的降解、营养物质的去除中起着重要作用.生物膜细菌中起硝化作用的主要是亚硝化单胞菌和硝化螺旋菌;起反硝化作用的主要是施氏假单胞菌. 展开更多
关键词 同时硝化反硝化 pcr变性梯度凝胶电泳(pcrdgge) 克隆测序 生物膜 菌群
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阿魏酸对熏马肠发酵过程中组胺及产组胺微生物的影响 被引量:2
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作者 赵利利 薛林林 +2 位作者 李彬彬 蒋艾廷 卢士玲 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期39-46,共8页
阿魏酸是一种很好的天然植物提取物,它具有多种生理功能,对多种疾病,包括癌症、糖尿病、心血管和神经性疾病都有广泛的治疗作用。作者在熏马肠发酵过程中分别添加质量分数为0、100、300、500 mg/kg的阿魏酸,研究阿魏酸对熏马肠中组胺质... 阿魏酸是一种很好的天然植物提取物,它具有多种生理功能,对多种疾病,包括癌症、糖尿病、心血管和神经性疾病都有广泛的治疗作用。作者在熏马肠发酵过程中分别添加质量分数为0、100、300、500 mg/kg的阿魏酸,研究阿魏酸对熏马肠中组胺质量分数等安全指标影响。采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)检测熏马肠中的组胺质量分数,利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析阿魏酸对熏马肠中产组胺微生物的抑制作用。结果表明:阿魏酸能显著(P<0.05)抑制肠细菌、微球菌/葡萄球菌以及假单胞菌属的生长繁殖,对乳酸菌的抑制作用不显著(P>0.05)。同时,阿魏酸能够很好地抑制产组胺微生物的生长,对控制组胺在熏马肠中的质量分数值起到非常显著的作用。组胺质量分数呈先增加后减少的趋势,在发酵第7天时达到最大值。发酵结束时,300 mg/kg的阿魏酸处理组对于组胺抑制效果最好,为30.71 mg/kg(干质量),相对于对照组降低了43.26%。所以,阿魏酸是一种能够显著抑制组胺的优良添加物,在发酵香肠中具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 阿魏酸 组胺 产组胺微生物 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge)
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施肥方式对黄瓜连作土壤微生物区系及多样性的动态影响 被引量:2
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作者 张洋 李青 +3 位作者 梅丽娟 赵海涛 封克 胡建 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第14期231-235,共5页
利用稀释平板计数和PCR-变性梯度凝胶电泳(简称PCR-DGGE)等方法,分析化肥(FT)、普通有机肥+化肥(FC)、微生物有机肥+化肥(FB)、不施肥(CK)等不同基肥处理条件下,连作1、3、5、7茬黄瓜土壤细菌、放线菌、真菌数量及多样性的动态变化。结... 利用稀释平板计数和PCR-变性梯度凝胶电泳(简称PCR-DGGE)等方法,分析化肥(FT)、普通有机肥+化肥(FC)、微生物有机肥+化肥(FB)、不施肥(CK)等不同基肥处理条件下,连作1、3、5、7茬黄瓜土壤细菌、放线菌、真菌数量及多样性的动态变化。结果表明:(1)随着连作茬数的增加,根际土壤微生物数量呈逐渐增加趋势;(2)与对照相比,施用化肥处理总体上明显促进了连作土壤中放线菌、真菌数量的增加,而对细菌数量的增加有明显的抑制作用,施用普通有机肥+化肥对细菌、放线菌数量的增加均有不同程度的促进作用;(3)连作及不同施肥方式对土壤细菌群落结构均能产生不同程度的影响,除对照处理外,其他施肥处理土壤细菌多样性及丰富度随着连作茬数的增加呈下降趋势,相对于化肥及普通有机肥+化肥处理,微生物有机肥+化肥处理对维持连作过程细菌多样性及丰富度具有明显作用;(4)连作均促进了FT、FB、FC等3种施肥处理根际土壤真菌多样性及丰富度的上升,但与对照相比上升幅度较小,在连作7茬后土壤真菌多样性及丰富度表现为FB>FC>FT。 展开更多
关键词 施肥方式 黄瓜连作 细菌 真菌 多样性 pcr-变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge)
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利用PCR-DGGE技术研究稻草与黑麦草混合青贮过程中菌群的动态变化 被引量:2
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作者 刘蓓一 丁成龙 +6 位作者 乔伟艳 李健 许能祥 潘孝青 秦枫 张霞 顾洪如 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第11期123-126,共4页
为了探讨稻草与黑麦草混合青贮发酵过程中微生物的动态变化规律,以稻草、黑麦草为青贮原料,从青贮后1、5、12、21、31、61、99、154 d的稻草、黑麦草混合青贮样中取样,分别测定pH值,采用培养方法计数乳酸菌、酵母菌、霉菌数量的变化,使... 为了探讨稻草与黑麦草混合青贮发酵过程中微生物的动态变化规律,以稻草、黑麦草为青贮原料,从青贮后1、5、12、21、31、61、99、154 d的稻草、黑麦草混合青贮样中取样,分别测定pH值,采用培养方法计数乳酸菌、酵母菌、霉菌数量的变化,使用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析青贮过程中菌群组成多样性。结果表明:黑麦草与稻草混合青贮pH值在青贮初期下降迅速,乳酸菌数量在5d达到最高峰,然后逐渐下降,酵母菌数量呈先降后升再降等波动变化,稻草与黑麦草混合青贮过程中优势菌主要有植物乳杆菌(Lactoacillus plantarum)、类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides)、食窦魏斯氏菌(W.cibaria)、短乳杆菌(L.brevis),且随着青贮时间延长,优势菌数量下降。由结果可知,将DGGE和16S rRNA序列分析技术结合,能有效地研究青贮细菌的遗传多样性和组成的变化。 展开更多
关键词 青贮 微生物培养 动态变化 pcr-变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge)
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应用PCR-DGGE技术分析鸭场水样样本中细菌群落结构 被引量:2
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作者 嵇辛勤 李世静 +2 位作者 陈佳琪 雷云 陈强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第3期31-36,共6页
为了解贵州省部分鸭场环境中细菌群落结构多样性概况,试验采用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术对贵州省三穗县8个鸭场24份水样样本中细菌群落组成和优势菌群进行分析,并建立DGGE指纹图谱,细菌16S r DNA V3区特异性片段经DGGE凝胶分离... 为了解贵州省部分鸭场环境中细菌群落结构多样性概况,试验采用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术对贵州省三穗县8个鸭场24份水样样本中细菌群落组成和优势菌群进行分析,并建立DGGE指纹图谱,细菌16S r DNA V3区特异性片段经DGGE凝胶分离、切胶、测序及Quantity One软件分析。结果表明:共有30条特异性条带,测序可见17条条带归属于变形菌门(Proteobacteria)细菌种属,3条条带属于厚壁菌门(Firmicutes)细菌种属,2条条带属于酸杆菌门(Acidobacteria)细菌种属,另外有8条条带未确定细菌种属。DGGE图谱可见条带5,11,12出现在1~6号鸭场水样样本中,表明该细菌种属为1~6号鸭场的优势菌属;而条带1,2,3均出现在1~8号鸭场水样样本中,表明这三种细菌种属均为8个鸭场的优势细菌种属。说明应用PCR-DGGE技术能够客观反映出鸭场环境中真实的细菌群落结构信息,鸭场环境中微生物多样性十分丰富。 展开更多
关键词 鸭场 水样 变性梯度凝胶电泳(pcr-dgge)技术 细菌群落结构 优势菌群 细菌种属
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