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主要番茄品种的分子鉴别研究 被引量:26
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作者 于拴仓 柴敏 姜立纲 《中国农学通报》 CSCD 2005年第5期84-89,共6页
采用了RAPD、RGA和SRAP分子标记技术对22个番茄品种进行了分子鉴别的研究。通过引物筛选,选用了7个RAPD随机引物,扩增后共产生了17个多态性位点;2对RGA引物,产生了12个多态性位点;1对SRAP引物,产生了8个多态性位点。分析单引物的品种鉴... 采用了RAPD、RGA和SRAP分子标记技术对22个番茄品种进行了分子鉴别的研究。通过引物筛选,选用了7个RAPD随机引物,扩增后共产生了17个多态性位点;2对RGA引物,产生了12个多态性位点;1对SRAP引物,产生了8个多态性位点。分析单引物的品种鉴别能力发现,RGA和SRAP标记具有较高的鉴别效率。为了鉴别22个番茄品种,分析了双引物组合和三引物组合的鉴别能力,双引物组合不能完全区分22个番茄品种,利用引物BI26和PK1+PK2再加上S91或S92中的任一个就可将22个番茄品种区分开来,并获得各品种独特的核酸指纹。另外,通过聚类分析发现,现代番茄品种之间存在着较为复杂的亲缘关系,用有限的标记位点很难取得理想的聚类结果。 展开更多
关键词 番茄品种 分子鉴别 多态性位点 分子标记技术 SRAP RAPD 鉴别能力 RGA 引物筛选 随机引物 聚类分析 亲缘关系 聚类结果 标记位点 引物 引物 组合和
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小麦双引物RAPD分析方法的研究 被引量:15
2
作者 沈法富 于元杰 尹承佾 《西北植物学报》 CAS CSCD 1998年第3期428-432,共5页
RAPD标记是近几年迅速发展的一种新型分子标记,标准的RAPD的反应是以10个寡聚核苷酸作引物,通过PCR反应扩增出基因组的部分片段,我们在研究外源DNA导入小麦后外源遗传物质的追踪时,对这个方法进行了改进,采取了双... RAPD标记是近几年迅速发展的一种新型分子标记,标准的RAPD的反应是以10个寡聚核苷酸作引物,通过PCR反应扩增出基因组的部分片段,我们在研究外源DNA导入小麦后外源遗传物质的追踪时,对这个方法进行了改进,采取了双引物进行扩增,结果双引物反应能够比单引物反应扩增出更多的多态性片段。分子杂交结果表明,双引物扩增出的新片段与单引物扩增片段无同源性,并对双引物扩增出的多态性片段产生的可能原因进行讨论。 展开更多
关键词 普通小麦 RAPD分析 引物
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‘石硖’龙眼芽变系双引物RAPD鉴定的研究 被引量:12
3
作者 王心燕 肖璇 +1 位作者 乔爱民 孙敏 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期134-136,共3页
以‘石硖’龙眼芽变系及其普通系(对照)为材料,从80对双引物中筛选出4对双引物在二者之间扩增出稳定清晰的多态性片段。4对双引物共扩增出35条带,其中多态性带5条,表明通过双引物扩增可成功地将‘芽变’与母株(对照)区分开来。在此基础... 以‘石硖’龙眼芽变系及其普通系(对照)为材料,从80对双引物中筛选出4对双引物在二者之间扩增出稳定清晰的多态性片段。4对双引物共扩增出35条带,其中多态性带5条,表明通过双引物扩增可成功地将‘芽变’与母株(对照)区分开来。在此基础上对双引物产生多态性扩增的原理进行了分析。 展开更多
关键词 龙眼 芽变 RAPD 引物
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利用RAPD分子标记对番茄杂交种纯度的鉴定研究(英文) 被引量:7
4
作者 李丽 郑晓鹰 E.Klocke 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期149-154,148,共7页
应用RAPD(RandomlyamplifiedpolymorphicDNA)分子标记对番茄京丹1号和毛粉802的F1代杂交种纯度进行鉴定的实验研究。该项研究使用了10个碱基的单随机引物和10个碱基的双随机引物进行扩增。在60个单引物扩增反应中获得7个京丹1号父本特... 应用RAPD(RandomlyamplifiedpolymorphicDNA)分子标记对番茄京丹1号和毛粉802的F1代杂交种纯度进行鉴定的实验研究。该项研究使用了10个碱基的单随机引物和10个碱基的双随机引物进行扩增。在60个单引物扩增反应中获得7个京丹1号父本特有的核酸标记片段。但在14个双随机引物对京丹1号和毛粉802杂交组合的扩增反应中获得了7个京丹1号F1代杂交种特有的核酸标记片段和5个毛粉802父本特有的标记带。实验结果显示,双引物的扩增反应对鉴定双亲亲缘关系极近的杂交种纯度较单引物扩增反应更有效。其中,京丹1号的14个标记片段在北京蔬菜研究中心,种子纯度检测室又进行了重复扩增实验。实验结果为87%的RAPD标记可以在使用不同的PCR仪和不同来源的Taq酶的实验条件下得到。RAPD分子标记技术对鉴定双亲亲缘关系极近的杂交种纯度是真实可靠的。 展开更多
关键词 RAPD 引物 引物 京丹1号 毛粉802 杂交种纯度
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随机扩增多态性DNA分子标记技术在肠球菌分型中的应用 被引量:1
5
作者 付竹贤 关仁梅 +2 位作者 王淑敏 陈偲 罗璠 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第11期86-93,共8页
该研究旨在探索随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)分子标记技术在肠球菌种间快速分型的效果。试验通过筛选模板、单引物、双引物及RAPD反应体系,构建肠球菌种间分型体系,对32株已知肠球菌分型确定分型相似度标... 该研究旨在探索随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)分子标记技术在肠球菌种间快速分型的效果。试验通过筛选模板、单引物、双引物及RAPD反应体系,构建肠球菌种间分型体系,对32株已知肠球菌分型确定分型相似度标准,并通过对46株未知肠球菌进行种间分型以及管家基因rpoA测定验证分型效果。结果显示微波法提取基因组DNA满足实验需要,筛选出7条单引物用于双引物配对组合,最适的双引物反应体系为:2×PCR Taq Mix 12.5μL,模板DNA 1μL,引物各1μL,ddH_(2)O 9.5μL;分型效果最好的双引物组合为Primer1+Primer5,该引物组合可以在80%的相似度下区分肠球菌种间差异,Primer1+Primer3组合在500 bp位置扩增出海氏肠球菌的特征条带,可以作为海氏肠球菌的鉴定指标,用以快速鉴定海氏肠球菌。 展开更多
关键词 肠球菌 随机扩增多态性DNA 引物 体系优化
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家兔RAPD图谱及双引物的运用研究 被引量:2
6
作者 庞荣清 陈振文 +2 位作者 陈成功 潘兴华 陈志龙 《实验动物科学与管理》 2000年第2期21-23,共3页
运用单引物获得了较理想的五个家兔个体的RAPD图谱 ,并探讨了双引物的运用。结果表明 :RAPD可用于家兔品种 (系 )鉴定 ,具有较大运用潜力。双引物能比单引物扩增出更多的具有多态性的条带 。
关键词 RAPD图谱 引物 运用 家兔
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苹果褪绿叶斑病毒双引物对PCR检测体系的建立及应用 被引量:1
7
作者 胡国君 董雅凤 +3 位作者 张尊平 范旭东 任芳 鲁兴凯 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1155-1156,共2页
病毒病在我国苹果树上普遍发生,其中苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)最常见,常混合侵染,引起树体衰弱,苹果产... 病毒病在我国苹果树上普遍发生,其中苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)最常见,常混合侵染,引起树体衰弱,苹果产量和品质下降,经济损失严重(Cieniewicz&Fuchs,2016)。因此,建立快速、准确的检测技术对病毒病防控具有重要意义。Hu et al.(2015)认为在病毒检测过程中,需要增加检测频率来提高准确率,但也会增加检测成本。针对ACLSV,本研究在常规PCR基础上,增加1对检测引物,为确保高检测效率和准确性、减少扩增程序、降低检测成本,在1个反应体系中同时进行2个目标片段的扩增,建立双引物对PCR检测方法,以期为该病毒的分子鉴定提供技术支持。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎痘病毒 苹果茎沟病毒 混合侵染 引物 病毒病 苹果树
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龙柚双引物RAPD分析方法初探 被引量:1
8
作者 蒲俊之 潘一山 +4 位作者 朱旸 王玉玲 林莹 邹金美 何雯婧 《福建热作科技》 2010年第2期1-2,5,共3页
实验选取龙柚3个芽变系基因组DNA作为模板,在100个10bp单引物的基础上,筛选出8个能扩增出稳定、清晰的条带的RAPD引物,用于RAPD双引物的扩增,结果比单引物扩增反应产生出更多更清晰的条带,为龙柚遗传多样性等后续研究奠定基础。
关键词 龙柚 RAPD 引物
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遗传 育种
9
《麦类文摘》 1999年第3期7-13,共7页
Z990491 小麦双引物 RAPD 分析方法的研究/沈法富,于元杰…(山东农大农学系)//西北植物学报.-1998,18(3).-428~432RAPD 标记是近几年迅速发展的一种新型分子标记,标准 RAPD 反应是以10个寡聚核苷酸作引物,通过 PCR 反应扩增出基因组的... Z990491 小麦双引物 RAPD 分析方法的研究/沈法富,于元杰…(山东农大农学系)//西北植物学报.-1998,18(3).-428~432RAPD 标记是近几年迅速发展的一种新型分子标记,标准 RAPD 反应是以10个寡聚核苷酸作引物,通过 PCR 反应扩增出基因组的部分片段。在研究外源 DNA 导入小麦后外源遗传物质的追踪时,对其加以改进,采取了双引物进行扩增,结果比单引物反应扩增出更多的多态性片段。 展开更多
关键词 小麦品种 小麦育种 多态性 引物 西北植物学报 分子标记 农艺性状 基因型 遗传育种 小染色体
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蕹菜溃疡病菌分子检测方法的建立及田间监测
10
作者 陈思妍 薛洋 +8 位作者 韩海亚 林敏怡 黎旭宇 尹德明 陶杰 李世茂 彭李亚 席卓君 周佳暖 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期339-345,共7页
【目的】蕹菜是我国南方重要的经济作物,近年来随着蕹菜种植面积不断扩大,由穿孔黄单胞菌(Xanthomonas perforans)引起的蕹菜溃疡病日趋严重,对生产造成了巨大损失。建立高效快捷的蕹菜溃疡病菌检测技术,可为有效防控病害奠定基础。【... 【目的】蕹菜是我国南方重要的经济作物,近年来随着蕹菜种植面积不断扩大,由穿孔黄单胞菌(Xanthomonas perforans)引起的蕹菜溃疡病日趋严重,对生产造成了巨大损失。建立高效快捷的蕹菜溃疡病菌检测技术,可为有效防控病害奠定基础。【方法】采用普通PCR检测技术,针对蕹菜溃疡病菌X. perforans基因组中特有序列TC2-1_002562(编码噬菌体终止酶大亚基家族蛋白)和TC2-1_002580(编码噬菌体家族蛋白)设计两对特异性检测引物,在同一个PCR体系中达到了快速检测蕹菜溃疡病菌的目的。【结果】建立的PCR检测方法可操作性强,对蕹菜溃疡病菌具有良好的特异性。利用特异性引物对来自广东多个地区的蕹菜植株、土壤和水体进行病原菌分子检测,发现第一批样本仅在5份来自东莞的蕹菜叶片上检测到病原菌,第二批样本分别在土壤、水体和植株上检测到病原菌。【结论】所建立的PCR检测方法能快速检测穿孔黄单胞菌,可用于对蕹菜溃疡病的早期诊断。该病在东莞、深圳等地呈普遍发生态势,田间检测结果表明,病害发展迅速,留种蕹菜种苗或种子很可能是该病的初侵染源,种植环境的水、土壤也是病害循环的重要环节,这对于今后进一步研究病害循环规律、制定针对性防控策略具有重要意义。 展开更多
关键词 蕹菜 溃疡病 穿孔黄单胞菌 引物PCR检测
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RAPD双引物在构建红麻连锁图谱中的应用研究 被引量:3
11
作者 徐建堂 陈美霞 +4 位作者 谢曾荣 祁建民 方平平 陶爱芬 林荔辉 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期666-672,共7页
以阿联红麻(Alian Kenaf)与福红992(Fuhong992)杂交产生的F2代作图群体为研究材料,分别应用RAPD单引物和双引物进行多态性条带扩增,并进行扩增效果的比较研究,以期为作图群体构建红麻遗传连锁图谱奠定基础。结果表明,RAPD双引物比单引... 以阿联红麻(Alian Kenaf)与福红992(Fuhong992)杂交产生的F2代作图群体为研究材料,分别应用RAPD单引物和双引物进行多态性条带扩增,并进行扩增效果的比较研究,以期为作图群体构建红麻遗传连锁图谱奠定基础。结果表明,RAPD双引物比单引物扩增出更多的多态性条带,提高了引物的利用率和多态性条带的扩增效率。 展开更多
关键词 RAPD引物 红麻 遗传连锁图谱
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T-ARMS PCR多重检测方法研究 被引量:2
12
作者 陶明丽 李莹雪 +4 位作者 李豪 张威 李传宇 周连群 李金泽 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第22期2689-2694,共6页
目的 建立有错配的加尾双引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(T-ARMS PCR)多重检测的方法,实现针对肝细胞癌常见基因突变位点TP53 R249S、TP53 R273H、CTNNB1 S45F的多重检测。方法 针对3个基因突变位点进行引物设计,每个基因突变位点所... 目的 建立有错配的加尾双引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(T-ARMS PCR)多重检测的方法,实现针对肝细胞癌常见基因突变位点TP53 R249S、TP53 R273H、CTNNB1 S45F的多重检测。方法 针对3个基因突变位点进行引物设计,每个基因突变位点所设计引物序列的5′端不加一段DNA序列(Tail Free Primer)或者所设计的引物序列5′端加一段相同的DNA序列(Tailed Primer),利用实时荧光定量PCR仪分别检测并比较3个基因突变位点的不同引物序列形成的单重体系、三重体系的扩增结果,研究T-AMRS PCR方法对突变型基因位点突变负荷的检测限、特异性和多靶标检测能力。结果 3个基因突变位点Tailed Primer单重体系扩增结果显示,突变型质粒的扩增均优于野生型质粒,野生型质粒的扩增均被有效抑制,突变负荷检测限低至0.10%,特异性良好。Tailed Primer三重体系减少了引物二聚体的产生,调控CTNNB1 S45F、TP53 R249S、TP53 R273H的解链温度分别为81.11℃、82.36℃、86.35℃,实现不同突变位点的显著区分。与Taqman探针基因分型方法相比,T-AMRS PCR方法野生型和突变型基因的Ct值差异更显著,单荧光通道即可实现突变基因检测。结论 运用T-ARMS PCR进行一管三重检测,分析熔解曲线,能有效检测到目的基因突变,抑制野生型模板的扩增,并区分不同的基因突变位点;同时,Tailed Primer设计减少了多重情况下引物二聚体的产生。该方法可为临床中肝细胞癌的早期筛查、预后预测、病情监测提供理论依据。 展开更多
关键词 有错配的加尾引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应 多重检测 熔解曲线分析 基因突变 肝细胞癌
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双引物探针RT-Realtime PCR检测马铃薯A病毒 被引量:2
13
作者 张京宣 梁炜 +3 位作者 耿金培 陈洪俊 杨益娥 粟智平 《植物检疫》 北大核心 2012年第1期26-28,共3页
马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)是我国重要的检疫性有害生物。本研究根据PVA中CP基因(coat protein gene)的保守序列,设计了两套PCR引物和TaqMan探针,建立了双引物探针RT-RealtimePCR检测PVA的方法。该方法采用实时荧光PCR技术,有效... 马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)是我国重要的检疫性有害生物。本研究根据PVA中CP基因(coat protein gene)的保守序列,设计了两套PCR引物和TaqMan探针,建立了双引物探针RT-RealtimePCR检测PVA的方法。该方法采用实时荧光PCR技术,有效地提高了检测的灵敏度;同时两套引物探针相互验证,有效提高了结果的准确性。实验结果表明,本方法准确、灵敏、简便、快速,检出低限可达0.5fg/μL植物总RNA。 展开更多
关键词 马铃薯A病毒 CP基因 引物探针RT-Realtime PCR
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双引物一条探针的实时荧光RT-PCR检测葡萄卷叶病毒3 被引量:1
14
作者 李金庆 阮国栋 +5 位作者 孙铭璐 徐娟 王克霞 曲直 邹强 段效辉 《中国口岸科学技术》 2022年第12期52-57,共6页
葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)被认为是葡萄卷叶病最重要的致病因子。本研究根据NCBI核酸数据库中葡萄卷叶病毒3复制酶基因序列保守区,设计合成2对上下游引物和1条Taq Man探针,组成2套反应组合。以病毒RNA反转录合成的c DNA为模板,依据2组引... 葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)被认为是葡萄卷叶病最重要的致病因子。本研究根据NCBI核酸数据库中葡萄卷叶病毒3复制酶基因序列保守区,设计合成2对上下游引物和1条Taq Man探针,组成2套反应组合。以病毒RNA反转录合成的c DNA为模板,依据2组引物序列和相同的Taq Man探针序列,在荧光PCR特异性、灵敏度、扩增效率对比试验的基础上,建立了双引物一条探针的实时荧光RT-PCR检测GLRaV-3的新方法,病毒RNA检测下限可达4.5 fg/μL。两套组合相互验证,减少非特异性扩增,进一步提高了方法的特异性。 展开更多
关键词 引物一条探针实时荧光RT-PCR 葡萄卷叶病毒3 检测
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烟草RAPD双引物与单引物PCR扩增多态性效率的比较分析 被引量:1
15
作者 李延坤 陶爱芬 +6 位作者 祁建民 周东新 王涛 张广庆 危成林 兰涛 陈顺辉 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期257-262,共6页
以两个亲缘关系较远的烟草(Nicotiana tabacum)品种台烟7号和白肋21为材料(GS=0.58),研究了单引物扩增和双引物聚合扩增对RAPD-PCR分子标记多态性的影响。结果显示:双引物反应能够比单引物反应扩增出更多的多态性片段,双引物在白肋21和... 以两个亲缘关系较远的烟草(Nicotiana tabacum)品种台烟7号和白肋21为材料(GS=0.58),研究了单引物扩增和双引物聚合扩增对RAPD-PCR分子标记多态性的影响。结果显示:双引物反应能够比单引物反应扩增出更多的多态性片段,双引物在白肋21和台烟7号中扩增出的多态性片段总数是单引物反应扩增出的多态性片段总数的6.6倍。因此,双引物RAPD的运用有助于提高烟草多态性分子标记的有效性。 展开更多
关键词 烟草 RAPD 引物RAPD PCR 多态性
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应用特异双引物法标记DNA探针
16
作者 吉昌华 《第四军医大学学报》 1991年第1期66-68,共3页
作者应用位于探针DNA两端的两个DNA片段作引物,以探针DNA为模板,在大肠杆菌DNA聚合酶I的介导下,经过1—3次变性、退火和延伸过程,使探针DNA得到标记.3次实验结果表明,应用此法标记的DNA探针的比活性可以达到2×10^(14)cpm/g DNA,标... 作者应用位于探针DNA两端的两个DNA片段作引物,以探针DNA为模板,在大肠杆菌DNA聚合酶I的介导下,经过1—3次变性、退火和延伸过程,使探针DNA得到标记.3次实验结果表明,应用此法标记的DNA探针的比活性可以达到2×10^(14)cpm/g DNA,标记效率大于60%;而用缺刻翻译法标记的DNA探针,其标记效率只有22.7%.表明这是一种较好的DNA探针标记方法. 展开更多
关键词 DNA探针 引物 标记
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双引物PCR检测抗草甘膦豆粕饲料中的转基因成分
17
作者 朱元招 尹靖东 尚秀国 《安徽科技学院学报》 2008年第6期17-19,共3页
在一个PCR反应体系内,同步扩增大豆内参照基因lec和抗草甘膦大豆外源基因盒中的CaMV35s启动子、nos终止子或cp4 epsps基因,建立转基因大豆双引物PCR检测方法。PCR产物用限制性内切酶酶切进一步鉴定。结果表明,用双引物PCR扩增出标准转... 在一个PCR反应体系内,同步扩增大豆内参照基因lec和抗草甘膦大豆外源基因盒中的CaMV35s启动子、nos终止子或cp4 epsps基因,建立转基因大豆双引物PCR检测方法。PCR产物用限制性内切酶酶切进一步鉴定。结果表明,用双引物PCR扩增出标准转基因大豆阳性对照、阿根廷大豆、美国RR大豆及豆粕中的lec基因和相应的特异性外源基因;酶切反应确证PCR产物为特定片段大小的目的序列。建立的双引物PCR法适用于抗草甘膦大豆原料和豆粕饲料中转基因成分的简单化、高精度和高灵敏检测。 展开更多
关键词 豆粕 引物PCR 抗草甘膦大豆 转基因成分 饲料
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双引物聚合酶链反应同时快速检测梅毒螺旋体和单纯疱疹病毒Ⅱ型
18
作者 刘爱英 尹跃平 《中国煤炭工业医学杂志》 2006年第10期1036-1038,共3页
目的建立双引物聚合酶链反应(PCR)用于同时快速检测梅毒螺旋体和单纯疱疹病毒Ⅱ型。方法基于单纯疱疹病毒II型(HSV-2)的DNA聚合酶基因以及梅毒螺旋体47KD膜蛋白基因序列,自行设计2对特异性寡核苷酸引物,建立了同时检测上述2种病原体的... 目的建立双引物聚合酶链反应(PCR)用于同时快速检测梅毒螺旋体和单纯疱疹病毒Ⅱ型。方法基于单纯疱疹病毒II型(HSV-2)的DNA聚合酶基因以及梅毒螺旋体47KD膜蛋白基因序列,自行设计2对特异性寡核苷酸引物,建立了同时检测上述2种病原体的双引物PCR。结果各特异性引物仅扩增相应的病原体DNA,即单纯疱疹病毒Ⅱ型扩增产物为202bp以及梅毒螺旋体扩增产物为252bp。其他11种生殖道常见微生物及正常人基因组DNA不被扩增。检测了51例临床标本,梅毒螺旋体暗视野显微镜检查阳性检出率为15.7%,双引物PCR阳性检出率为19.6%;二种方法检测结果间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。HSV阳性培养率23.6%,双引物PCR阳性率47.1%,双引物PCR阳性检出率显著高于HSV培养且差异有统计学意义(P=0.019);上述临床标本分别进行了2种病原体的单引物PCR,与双引物PCR对照结果完全一致。结论我们建立的双引物PCR一次可同时检测2种病原体,且有快速、敏感、特异以及简便的特点。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 Ⅱ型 梅毒螺旋体 引物聚合酶链反应 快速检测
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中国对虾性别相关片段的初步研究 被引量:2
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作者 王兵 樊拥军 +2 位作者 张晓军 李富花 相建海 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第5期82-86,共5页
采用mRNA双随机引物差示技术分离中国对虾性别相关片段。然后利用这些引物组合对中国对虾的基因组进行了PCR检测,发现其中两对引物组合可以扩增出具有性别相关性的片段。
关键词 中国对虾 性别相关 MRNA 随机引物差示技术 基因组 PCR检测 基因差异表达
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