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骨关节炎早期诊断生物学标志物的研究进展 被引量：16
1
作者 闻振坤 郭建斌 张育民 《中华实用诊断与治疗杂志》 2017年第11期1142-1144,共3页
骨关节炎是临床常见的慢性疾病之一,临床表现为关节疼痛、僵硬和关节畸形等,病理改变为软骨退行性变性和消失。目前,骨关节炎诊断主要依据临床表现和影像学检查,但X线平片、CT检查不能反映关节软骨结构变化,MRI检查存在检查所需时间长... 骨关节炎是临床常见的慢性疾病之一,临床表现为关节疼痛、僵硬和关节畸形等,病理改变为软骨退行性变性和消失。目前,骨关节炎诊断主要依据临床表现和影像学检查,但X线平片、CT检查不能反映关节软骨结构变化,MRI检查存在检查所需时间长、价格高等局限性并非检查首选。检测软骨寡聚基质蛋白、印度刺猬蛋白、Ⅱ型胶原螺旋肽等生物学标志物可在关节软骨损伤早期对骨关节炎进行诊断。本文就骨关节炎早期诊断生物学标志物的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨寡聚基质蛋白 印度刺猬蛋白 Ⅱ型胶原螺旋肽
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印度刺猬蛋白与人膝关节骨关节炎软骨破坏度的关系 被引量：9
2
作者 杨正青 宋丽琴 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第31期2434-2437,共4页
目的：探讨膝关节骨关节炎（ OA）患者印度刺猬蛋白（ Ihh）与骨关节炎的相关性。方法2010年3月至2012年6月山西省长治市长治医学院附属和平医院骨科215例膝关节OA患者，男97例，女118例；年龄49∽78（65.2±7.8）岁；34例健康对照... 目的：探讨膝关节骨关节炎（ OA）患者印度刺猬蛋白（ Ihh）与骨关节炎的相关性。方法2010年3月至2012年6月山西省长治市长治医学院附属和平医院骨科215例膝关节OA患者，男97例，女118例；年龄49∽78（65.2±7.8）岁；34例健康对照者，男28例，女6例，年龄45∽62（58.4±8.7）岁。收集膝关节软骨标本，采用改良的Mankin评分评价疾病的严重程度，实时荧光定量聚合酶链反应法测定 Ihh mRNA 的量，免疫印迹法测定 Ihh 蛋白表达水平。结果根据改良的Mankin评分，将膝关节骨关节炎标本分为重度、中度、轻度3个级别。与正常对照组比较，骨关节炎软骨Ihh mRNA和蛋白表达均明显升高。而且随着软骨破坏度加重，Ihh mRNA和蛋白进一步增加，各组结果差异有统计学意义。 Ihh mRNA：正常组[n ＝34，（1.00±0.01）]、轻度损伤组[n＝67，（1.37±0.02）]、中度损伤组[n＝63，（1.90±0.02）]和重度损伤组[n＝85，（2.13±0.03）]（均P＜0.01）。膝关节OA的严重程度由膝关节软组织的损伤程度（ Mankin评分）判断；膝关节软骨损伤程度和Ihh表达呈正相关（ r＝0.581， P＜0.01）。结论 Ihh的表达与膝关节骨关节炎病变过程，软骨细胞的形态改变相关。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨 关节 膝关节 印度刺猬蛋白
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软骨寡聚基质蛋白与Ⅱ型胶原螺旋肽及印度刺猬蛋白诊断膝关节骨性关节炎的价值 被引量：7
3
作者 闻振坤 郭建斌 +3 位作者 韩龙 王旭 李坤 张育民 《中华实用诊断与治疗杂志》 2018年第1期25-27,共3页
目的探讨关节滑液软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)、Ⅱ型胶原螺旋肽(human typeⅡcollagen helical peptide,HELIX-Ⅱ)、印度刺猬蛋白(Indian hedgehog,IHH)在膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)... 目的探讨关节滑液软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)、Ⅱ型胶原螺旋肽(human typeⅡcollagen helical peptide,HELIX-Ⅱ)、印度刺猬蛋白(Indian hedgehog,IHH)在膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)诊断中的应用价值。方法 KOA患者120例为KOA组,同期体检健康者80例为对照组。采用ELISA法检测2组关节滑液中COMP、HELIX-Ⅱ及IHH表达水平,ROC曲线评估关节滑液COMP、HELIX-Ⅱ及IHH诊断KOA的效能。结果 KOA组关节滑液COMP[(65.34±28.75)μg/L]、HELIX-Ⅱ[(2.75±0.13)nmol/L]及IHH[(17.23±4.32)ng/L]水平均高于对照组[(36.10±9.12)μg/L、(0.81±0.67)nmol/L、(10.75±1.79)ng/L](P<0.05);KOA组X线片K-L分级Ⅲ~Ⅳ级患者关节滑液COMP、HELIX-Ⅱ及IHH水平[(71.10±8.11)μg/L、(2.24±0.56)nmol/L、(21.51±3.03)ng/L]高于Ⅰ~Ⅱ级患者[(62.30±9.71)μg/L、(1.44±0.42)nmol/L、(16.33±4.39)ng/L]和0级患者[(57.60±6.73)μg/L、(0.49±0.40)nmol/L、(13.97±2.09)ng/L](P<0.05),且Ⅰ~Ⅱ级患者高于0级患者(P<0.05);ROC曲线结果显示,关节滑液COMP、HELIX-Ⅱ和IHH诊断KOA的最佳截断值为49.25μg/L、1.47nmol/L、13.80ng/L,AUC为0.918(95%CI:0.871~0.965,P<0.001)、0.858(95%CI:0.793~0.924,P<0.001)、0.780(95%CI:0.696~0.864,P<0.001),准确率为89.0%、84.0%、75.0%,灵敏度为83.3%、76.8%、78.3%,特异度为81.6%、80.0%、64.4%。结论 KOA患者关节滑液中COMP、HELIX-Ⅱ和IHH水平增高,且与KOA病变程度相关,在KOA诊断中具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 膝关节骨性关节炎 软骨寡聚基质蛋白 Ⅱ型胶原螺旋肽 印度刺猬蛋白
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印度刺猬蛋白调节成骨细胞中p38丝裂素活化蛋白激酶表达的研究 被引量：3
4
作者 赵恒伍 廉明 +1 位作者 郑学成 曾祥一 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2266-2267,共2页
目的观察印度刺猬蛋白（Ihh）对成骨细胞p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）的调节作用。方法取子鼠颅盖骨分离培养成骨细胞，采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测成骨细胞中p38MAPK的表达量，检测成骨细胞在不同浓度（0、10... 目的观察印度刺猬蛋白（Ihh）对成骨细胞p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）的调节作用。方法取子鼠颅盖骨分离培养成骨细胞，采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测成骨细胞中p38MAPK的表达量，检测成骨细胞在不同浓度（0、10、50、200μg/L）及不同时问（0、1、2、3d）的Ihh作用下p38MAPK的表达，采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖。结果成骨细胞表达p38MAPK；Ihh促进成骨细胞增殖，促进p38MAPK的表达（P〈0．05）；阻断p38MAPK信号转导通路后，成骨细胞增殖明显受抑制，但不能明显抑制Ihh刺激下的成骨细胞增殖（P〈0．05）。结论p38MAPK在成骨细胞增殖分化中起作用，Ihh通过p38MAPK通路促进成骨细胞增殖。 展开更多
关键词 成骨细胞 印度刺猬蛋白 P38丝裂素活化蛋白激酶
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慢性肾衰竭幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛高表达加速软骨细胞分化的机制研究 被引量：2
5
作者 王小健 李荣山 +7 位作者 田伟 郑刚 毕宏 王艳红 董丽娜 郭松佳 路晓 周晓霜 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期758-764,共7页
目的探讨慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛高表达加速软骨细胞分化的机制。方法选取雄性4周龄SD大鼠40只,体重(98±3)g,随机分为对照组(蒸馏水,n=20)和CRF组(腺嘌呤150 mg·kg^(-1)·d... 目的探讨慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛高表达加速软骨细胞分化的机制。方法选取雄性4周龄SD大鼠40只,体重(98±3)g,随机分为对照组(蒸馏水,n=20)和CRF组(腺嘌呤150 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=20),连续灌胃6周后处死幼鼠,采用胫骨制作组织学切片比较生长板长度,免疫荧光检测软骨细胞初级纤毛表达率、Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β联蛋白(β-catenin)表达水平;体外培养两组幼鼠胫骨生长板软骨细胞至第3代,免疫荧光检测软骨细胞初级纤毛表达率及印度刺猬蛋白(Indian hedgehog,IHH)和Wnt/β-catenin通路拮抗蛋白糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)表达水平;应用免疫共沉淀检测IHH与GSK3β之间的作用关系。结果与对照组相比,CRF组组织学切片生长板相对长度变短[(0.51±0.11)比(1.00±0.08),t=16.11,P<0.001],软骨细胞初级纤毛表达率增高[(26.3±5.5)%比(7.6±1.9)%,t=14.37,P<0.001],软骨细胞β-catenin蛋白表达增多[(7.1±2.0)分比(3.6±1.0)分,t=7.10,P<0.001]。体外培养结果显示,与对照组相比,CRF组软骨细胞初级纤毛表达率增高[(31.4±8.2)%比(12.5±3.1)%,t=9.64,P<0.001],IHH蛋白表达增多[(1360±270)比(310±84),t=16.61,P<0.001],而两组GSK3β蛋白表达差异无统计学意义[(850±195)比(780±140),t=1.30,P=0.200]。免疫共沉淀检测结果显示,CRF组GSK3β蛋白与IHH蛋白在软骨细胞内存在直接相互作用。结论CRF幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛表达增多,相关蛋白IHH表达增多,IHH蛋白与Wnt/β-catenin信号通路拮抗蛋白GSK3β存在直接作用,导致Wnt/β-catenin信号通路激活、软骨细胞加速分化,最终导致生长板出现闭合趋势。 展开更多
关键词 肾功能衰竭 慢性 软骨细胞 WNT信号通路 生长板 初级纤毛 印度刺猬蛋白
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关节液组分分析在膝骨关节炎康复中的应用研究
6
作者 罗光会 杜丽英 +6 位作者 王秀珠 张琳 孙一圣 肖卫平 韩伟 罗丛宝 田丽娜 《风湿病与关节炎》 2022年第9期1-5,共5页
目的:研究膝骨关节炎患者康复程度与关节液成分变化之间的关系,寻找特异性及敏感性高的生化标志物,为准确诊断早期膝骨关节炎提供新的方法,探寻康复程度与关节液微环境变化的关系。方法:选择膝骨关节炎患者120例,对所有患者进行膝关节... 目的:研究膝骨关节炎患者康复程度与关节液成分变化之间的关系,寻找特异性及敏感性高的生化标志物,为准确诊断早期膝骨关节炎提供新的方法,探寻康复程度与关节液微环境变化的关系。方法:选择膝骨关节炎患者120例,对所有患者进行膝关节镜检查,按照Outerbridge分级标准将患者分为4组,Ⅰ度到Ⅳ度,每组30例。再将每组分成3组,分别进行自体富血小板血浆(PRP)+ 干细胞,自体PRP,以及臭氧灌注 + 透明质酸钠(HA)治疗。治疗前和治疗后8个月收集膝骨关节炎患者关节液标本各120份。标本均采用ELISA双抗夹心法对关节液中的印度刺猬蛋白、尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)含量进行测定。比较治疗前后印度刺猬蛋白、uPA、MMP-13在关节液中的表达差异,以Spearman等级相关分析Outerbridge分级与关节液组分的关系。采用Shahariarre评分标准评价疗效。结果:印度刺猬蛋白、uPA、MMP-13表达水平与Outerbridge分级之间均呈正相关(r=0.790、r=0.476、r=0.684,P < 0.01);预后良好组与预后不良组印度刺猬蛋白、uPA、MMP-13表达水平比较,差异有统计学意义(P < 0.01);根据Outerbridge分级标准,Ⅰ度患者自体PRP + 干细胞治疗优良率与自体PRP组比较,差异无统计学意义(P > 0.05);Ⅱ~Ⅳ度患者自体PRP +干细胞组治疗优良率明显高于自体PRP组,差异有统计学意义(P < 0.05);Ⅰ~Ⅳ度患者自体PRP + 干细胞组治疗优良率均高于臭氧灌注 + HA组,差异有统计学意义(P < 0.05);Ⅱ度患者自体PRP组治疗优良率与臭氧灌注 + HA组比较,差异无统计学意义(P > 0.05),在Ⅰ度以及Ⅲ~Ⅳ度的患者中2组之间比较,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论:自体PRP联合间充质干细胞治疗膝骨关节炎较常规HA + 臭氧灌注治疗效果显著,且膝骨关节炎患者的康复程度与关节液中印度刺猬蛋白、uPA、MMP-13的表达水平相关,说明膝骨关� 展开更多
关键词 膝骨关节炎 印度刺猬蛋白 尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂 基质金属蛋白酶-13 关节液组分 康复
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软骨终板细胞印度刺猬蛋白表达对软骨终板退变的意义 被引量：1
7
作者 张健 宋洁富 +5 位作者 王小健 秦德安 安奇君 赵中涛 梁庆元 安雪军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2004-2007,共4页
目的探讨细胞内印度刺猬蛋白(Ihh)表达水平变化对软骨终板细胞的影响与意义。方法2018年5月至12月手术收集山西医科大学附属山西省人民医院骨科31例软骨终板(CEP)组织标本,体外分离人CEP细胞培养至P3代,随机分为过表达组、空载体组和敲... 目的探讨细胞内印度刺猬蛋白(Ihh)表达水平变化对软骨终板细胞的影响与意义。方法2018年5月至12月手术收集山西医科大学附属山西省人民医院骨科31例软骨终板(CEP)组织标本,体外分离人CEP细胞培养至P3代,随机分为过表达组、空载体组和敲减组,分别添加Ihh信使RNA质粒、空载体和Ihh沉默RNA质粒,质粒转染培养48 h后,使用蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测标本Ihh及相关指标的蛋白和mRNA表达,免疫荧光和原位杂交染色观测细胞表型。3组实验数据因方差不齐,呈正态性分布,选择Welch检验,Games-Howell法组间多重比较。结果质粒干预CEP软骨细胞Ihh水平表达,Westernblot结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh(0.79±0.09,0.31±0.20,0.04±0.03)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)(0.18±0.08,0.49±0.14,1.13±0.27)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)(0.78±0.17,0.51±0.12,0.37±0.06)灰度值差异有统计学意义(F=176.670、37.650、26.070,P<0.01)。RT-qPCR结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh mRNA(3.13±1.21,0.92±0.18,0.39±0.22)、ColⅡmRNA(0.66±0.13,1.03±0.24,1.64±1.32)和MMP-13 mRNA(9.17±2.35,1.04±0.27,3.56±0.26)相对表达水平差异有统计学意义(F=17.170、15.890、34.732,P<0.01)。免疫荧光和原位杂交结果显示与空载体组比较,Ihh和MMP-13在过表达组最强,敲减组最弱,而ColⅡ在敲减组中最强,过表达组最弱。结论下调软骨细胞内Ihh表达可明显增加ColⅡ,减少MMP-13,维持细胞表型,进一步延缓CEP软骨细胞退变。 展开更多
关键词 印度刺猬蛋白 软骨终板 Modic退变 质粒转染
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印度刺猬蛋白在软骨细胞异常钙化退变中的作用及其机制
8
作者 周新 王少伟 +7 位作者 杨彦飞 牛文杰 梁浩然 卢建功 王康 李鹏翠 卫小春 段王平 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2244-2246,共3页
目的探讨印度刺猬蛋白(Ihh)在软骨细胞异常钙化退变的作用及其机制.方法取刚出生6d的C57小鼠,提取肋软骨细胞,利用苏木精-伊红(HE)染色、番红O固绿染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学进行软骨细胞表型鉴定.实验分为Ihh高表达组,加入Ihh重组蛋白... 目的探讨印度刺猬蛋白(Ihh)在软骨细胞异常钙化退变的作用及其机制.方法取刚出生6d的C57小鼠,提取肋软骨细胞,利用苏木精-伊红(HE)染色、番红O固绿染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学进行软骨细胞表型鉴定.实验分为Ihh高表达组,加入Ihh重组蛋白5 mg/L;Ihh信号通路抑制组,加入环耙明20μmol/L;空白对照组,加入磷酸盐缓冲液(PBS).实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Ⅱ型胶原(COLⅡ)、Ⅹ型胶原(COLX)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)、蛋白多糖(AGG)、多通跨膜蛋白(ANKH)、核苷酸焦磷酸酶1(ENPP1)等因子的mRNA表达水平.利用流式细胞仪检测抑制Ihh信号通路后对软骨细胞凋亡的影响.结果Ihh高表达组与空白对照组相比ALP(3.450±1.357比1.223±0.740)、OCN(2.410±0.395比1.093±0.453)、Runx2(3.057±1.477比1.144±0.574)、COLX(3.804±1.400比1.116±0.511)表达增加,ANKH(0.255±0.042比1.101±0.471)、AGG(0.574±0.355比1.007±0.126)、COLⅡ(0.670±0.065比1.027±0.236)、ENPP1(0.354±0.058比1.091±0.446)表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),Ihh信号通路抑制组与空白对照组相比ANKH(5.345±1.341比1.101±0.471),ENPP1(4.289±0.978比1.091±0.446)、COLⅡ(2.141±0.685比1.027±0.236)、AGG(2.892±0.761比1.007±0.126)表达增加,COLX(0.501±0.164比1.116±0.511)、Runx2(0.243±0.081比1.144±0.574)、OCN(0.326±0.077比1.093±0.453)、ALP(0.329±0.190比1.223±0.740)表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).流式结果显示抑制Ihh信号通路能引起软骨细胞凋亡(t=9.412,P<0.05).结论Ihh可以通过上调COLX、Runx2、OCN及ALP,抑制ANKH、ENPP1、AGG及COLⅡ基因的表达,进一步促进软骨细胞的异常钙化退变. 展开更多
关键词 印度刺猬蛋白 软骨细胞 钙化
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