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南芥菜花叶病毒(ArMV) 被引量:10
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作者 张有才 陈宪斌 焦慧燕 《植物检疫》 北大核心 1994年第5期284-285,共2页
南芥菜花叶病毒(ArMV)张有才,陈宪斌,焦慧燕(佳木斯动植物检疫局154002)在新公布的“中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录”中,南芥茶花叶病毒(Arabismosaicvirus,异名,Raspb... 南芥菜花叶病毒(ArMV)张有才,陈宪斌,焦慧燕(佳木斯动植物检疫局154002)在新公布的“中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录”中,南芥茶花叶病毒(Arabismosaicvirus,异名,RaspberryyellowdWarf;R... 展开更多
关键词 芥菜 芥菜 花叶病毒 病毒 检疫
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用OPD-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫法检测植物病毒ArMV、CMV、SBMV和TuMV 被引量:3
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作者 焦奎 孙刚 +5 位作者 张书圣 刘澄凡 张成良 张作芳 刘靖宇 魏澎 《分析测试学报》 CAS CSCD 1999年第4期9-12,共4页
首次将邻苯二胺(OPD) -H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系 ,应用于植物病毒南芥菜花叶病毒(ArMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)和芜箐花叶病毒(TuMV)的血清学检测。该法测定以上植物病毒感染病叶澄清液的最... 首次将邻苯二胺(OPD) -H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系 ,应用于植物病毒南芥菜花叶病毒(ArMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)和芜箐花叶病毒(TuMV)的血清学检测。该法测定以上植物病毒感染病叶澄清液的最高稀释比(体积比)分别为1∶500000 ,1∶500000,1∶2500000和1∶2500000,而酶联免疫吸附分析(ELISA)测定的最高稀释比分别为1∶2500 ,1∶12500 ,1∶100000和1∶25000。该法测定以上植物病毒的灵敏度和测定范围均优于经典的ELISA光度法。 展开更多
关键词 芥菜 花叶病毒 黄瓜 方菜豆花 芜箐 病毒
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新的外检对象——南芥菜花叶病毒(ArMV) 被引量:2
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作者 张有才 陈宪斌 焦慧彦 《北方园艺》 CAS 北大核心 1993年第4期47-48,共2页
在新公布的《中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录》中,南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,异名:Raspberry yellow dwarf;Rhubarb mosaic virus)被列为二类检疫危险性病毒,现将其介绍如下: 一、病毒性状该病毒属线虫传... 在新公布的《中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录》中,南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,异名:Raspberry yellow dwarf;Rhubarb mosaic virus)被列为二类检疫危险性病毒,现将其介绍如下: 一、病毒性状该病毒属线虫传球体病毒组。 展开更多
关键词 芥菜 花叶病 病毒 鉴定
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南芥菜花叶病毒卫星RNA及其核酶的结构分析 被引量:2
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作者 杨希才 Ksper,J.M. +2 位作者 Hadidi,A. Tousignant,M.E. 田波 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期239-247,共9页
以提纯的南芥菜花叶病毒(Arabis Mosaic Virus,ArMV)卫星 RNA(sArMV)为模板,以合成的 DNA寡核苷酸为引物,经过反转录-PCR 扩增合成全长的 ds cDNA。ds cDNA 的两端连接 EcoRI Adaptors,插入到经 EcoRI 酶解的脱磷酸化的 pUC 9质粒中,转... 以提纯的南芥菜花叶病毒(Arabis Mosaic Virus,ArMV)卫星 RNA(sArMV)为模板,以合成的 DNA寡核苷酸为引物,经过反转录-PCR 扩增合成全长的 ds cDNA。ds cDNA 的两端连接 EcoRI Adaptors,插入到经 EcoRI 酶解的脱磷酸化的 pUC 9质粒中,转化 E.coli JM83。用^(32)P 标记的 sArMV 为探针,进行菌落原位杂交和 EcoRI 酶解分析,筛选出含有全长 cDNA 片段的克隆。用 Taq Track^R SequencingSystems 的序列分析表明:克隆的 sArMV cDNA 由300bp 脱氧核糖核苷酸组成,与其 RNA 序列分析的结果相同,含有一个首尾相连的由54个核苷酸组成的核酶,具有完整的垂头状结构及能自我切割5'GUC↓3′的生物功能。 展开更多
关键词 芥菜 花叶病毒 卫星 RNA 核酶
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从进境水仙上检测出南芥菜花叶病毒 被引量:21
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作者 于翠 杨翠云 +1 位作者 杨艳 洪健 《植物检疫》 2005年第6期359-361,共3页
利用DAS-ELISA对从荷兰进口的6个品种的水仙种球进行检测发现,品种为Recurvus的水仙种球对ArMV的多抗血清呈阳性反应达85%。免疫吸附电镜观察到在感病水仙种球中存在直径约30nm的球状病毒粒子。根据ArMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计... 利用DAS-ELISA对从荷兰进口的6个品种的水仙种球进行检测发现,品种为Recurvus的水仙种球对ArMV的多抗血清呈阳性反应达85%。免疫吸附电镜观察到在感病水仙种球中存在直径约30nm的球状病毒粒子。根据ArMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计引物,RT-PCR能从感病样品中扩增到预期580bp特异条带,序列测定分析表明此条带的序列为ArMV部分CP基因,在系统关系树上与ArMV的其它分离物形成一簇、亲缘关系很近,表明从进境水仙上检测到了ArMV。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒 水仙 ELISA 免疫吸附电镜 RT-PCR
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一步RT-PCR检测南芥菜花叶病毒方法的建立 被引量:20
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作者 闻伟刚 赵秀玲 +1 位作者 翁志平 孙立群 《植物检疫》 北大核心 2003年第6期330-332,共3页
本研究采用Trizol快速提取植物叶片总RNA ,通过GeneBank设计特异性引物 ,并利用一步RT PCR技术 ,最终建立了一套比较实用的检测ArMV的方法。该方法对于其它病毒的检测同样具有借鉴意义。
关键词 芥菜花叶病毒 检测 一步RT-PCR法 总RNA提取 检疫
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南芥菜花叶病毒的几种PCR检测方法的建立和比较研究 被引量:14
7
作者 于翠 杨翠云 +1 位作者 张舒亚 乔艳艳 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期388-393,共6页
以进境种球中截获的带毒洋水仙和郁金香为试验材料,建立了ArMV的免疫捕获RT-PCR、巢式PCR和Real-timePCR方法,并比较了几种检测方法的灵敏度。DAS-ELISA的检测灵敏度较低,为1 mg洋水仙或10 mg郁金香带毒种球,而各种PCR方法的灵敏度可高... 以进境种球中截获的带毒洋水仙和郁金香为试验材料,建立了ArMV的免疫捕获RT-PCR、巢式PCR和Real-timePCR方法,并比较了几种检测方法的灵敏度。DAS-ELISA的检测灵敏度较低,为1 mg洋水仙或10 mg郁金香带毒种球,而各种PCR方法的灵敏度可高于DAS-ELISA 100倍以上,其中Real-time PCR检测的灵敏度最高,可从20 ng洋水仙或2μg郁金香的带毒种球中检出ArMV。鉴于DAS-ELISA灵敏度较低,建议在用ELISA初筛时,如样品OD405值与阴性对照OD405值之比在2.0左右时需要再用分子方法加以确证,以防漏检。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒 PCR 检测方法 灵敏度
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进境百合种球南芥菜花叶病毒的检测及分子鉴定 被引量:12
8
作者 刘毅 丁元明 +5 位作者 陈丽梅 周剑 段禄华 和万忠 寸东义 刘忠善 《植物检疫》 北大核心 2009年第1期7-9,共3页
本研究根据南芥菜花叶病毒(Arabismosaicvirus,ArMV)CP基因序列,设计并合成了特异性巢式PCR检测引物,通过第1轮RT-PCR和第2轮PCR扩增得到预期的930bp和260bp的条带,扩增序列与GenBank中登录的外壳蛋白基因存在86%~97%的同源性.结果表... 本研究根据南芥菜花叶病毒(Arabismosaicvirus,ArMV)CP基因序列,设计并合成了特异性巢式PCR检测引物,通过第1轮RT-PCR和第2轮PCR扩增得到预期的930bp和260bp的条带,扩增序列与GenBank中登录的外壳蛋白基因存在86%~97%的同源性.结果表明百合上分离到的病毒为ArMV,进一步研究也证明巢式PCR灵敏度与普通RT-PCR相比高出了103倍。 展开更多
关键词 百合 芥菜花叶病毒 RT—PCR 巢式PCR
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南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测试剂盒的研制 被引量:9
9
作者 陈先锋 张吉红 +3 位作者 崔俊霞 张慧丽 郭立新 余澍琼 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期189-190,共2页
南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)是我国对外公布的检疫性有害生物,其寄主广泛,极易传播、蔓延[1],因此,加强对该病毒的检测具有重要的意义。目前,针对ArMV的检测方法主要有DAS-ELISA和RT-PCR技术[2]。这两种方法在检测周期... 南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)是我国对外公布的检疫性有害生物,其寄主广泛,极易传播、蔓延[1],因此,加强对该病毒的检测具有重要的意义。目前,针对ArMV的检测方法主要有DAS-ELISA和RT-PCR技术[2]。这两种方法在检测周期方面具有明显的优势,且操作简单,但对仪器的依赖性较强。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒 检测试剂盒 DAS-ELISA RT-PCR技术 检疫性有害生物 MOSAIC VIRUS ArMV
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郁金香种球传带南芥菜花叶病毒的检测 被引量:7
10
作者 高崇省 郭京泽 +1 位作者 刘鹏 王金成 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期98-99,171,共3页
对从荷兰进口的郁金香种球进行检疫,应用培育长出的叶片作为检测材料,采用双抗夹心酶联免疫吸附测定方法(DAS-ELISA)和RNA逆转录PCR扩增法(RT-RCR)进行南芥菜花叶病毒的检测。从这些种球上发现了我国进境植物检疫二类危险性有害生物—... 对从荷兰进口的郁金香种球进行检疫,应用培育长出的叶片作为检测材料,采用双抗夹心酶联免疫吸附测定方法(DAS-ELISA)和RNA逆转录PCR扩增法(RT-RCR)进行南芥菜花叶病毒的检测。从这些种球上发现了我国进境植物检疫二类危险性有害生物—南芥菜花叶病毒。 展开更多
关键词 郁金香种球 芥菜花叶病毒
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进境荷兰郁金香种苗中南芥菜花叶病毒的鉴定 被引量:7
11
作者 李彬 于翠 +3 位作者 吴翠萍 粟寒 曾义 安榆林 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期19-24,共6页
为了防止南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)传入我国,采用血清学、分子生物学、电镜观察及生物学接种等方法对从荷兰进口的郁金香种苗进行了ArMV检测。结果表明:ArMV血清学反应为强阳性;RT-PCR反应扩增出370bp的特异性目标条带;... 为了防止南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)传入我国,采用血清学、分子生物学、电镜观察及生物学接种等方法对从荷兰进口的郁金香种苗进行了ArMV检测。结果表明:ArMV血清学反应为强阳性;RT-PCR反应扩增出370bp的特异性目标条带;RT-PCR产物与已报道的3个ArMV部分外壳蛋白基因的核苷酸序列同源性为91.00%~93.24%,氨基酸序列同源性为99%~100%;免疫电镜观察到叶片病汁液中含有直径约30nm的球状病毒粒体;该病毒在黄花烟、白肋烟、矮牵牛和昆诺藜等鉴别寄主上引起坏死和褪绿等典型症状,经DAS-ELISA检测,这些接种寄主均呈ArMV血清学阳性反应。故将该病毒鉴定为南芥菜花叶病毒。 展开更多
关键词 郁金香 芥菜花叶病毒 双抗体夹心ELISA 反转录-PCR 生物学接种
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应用RT-Realtime PCR检测南芥菜花叶病毒 被引量:6
12
作者 邓丛良 吕玉峰 +2 位作者 梁新苗 汪万春 高文娜 《植物检疫》 2008年第2期80-82,共3页
根据南芥菜花叶病毒不同分离物外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成引物和1条TaqMan荧光探针,建立了ArMV的反转录实时荧光PCR(RT-Realtime PCR)检测方法。该方法利用TaqMan荧光探针实时监测目的基因的扩增,实现PCR扩增与探针检测同时进... 根据南芥菜花叶病毒不同分离物外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成引物和1条TaqMan荧光探针,建立了ArMV的反转录实时荧光PCR(RT-Realtime PCR)检测方法。该方法利用TaqMan荧光探针实时监测目的基因的扩增,实现PCR扩增与探针检测同时进行,实验结果表明该方法具有"灵敏、准确、简便、快速"的特点,适合于口岸对南芥菜花叶病毒的快速检测。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒(ArMV) 实时荧光RT-PCR 检测
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进境唐菖蒲种球南芥菜花叶病毒分子鉴定 被引量:5
13
作者 秦绍钊 丁元明 +3 位作者 王云月 寸东义 刘忠善 李春燕 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期215-218,共4页
Arabis mosaic virus(ArMV)had been found in the Gladiolus hybridus imported from the Netherlands by DAS-ELISA.Two pairs of primers were designed according to the conserved region of the coat protein(CP) gene sequence o... Arabis mosaic virus(ArMV)had been found in the Gladiolus hybridus imported from the Netherlands by DAS-ELISA.Two pairs of primers were designed according to the conserved region of the coat protein(CP) gene sequence of Arabis mosaic virus(ArMV),and two amplified bands with expected sizes of 750 bp and 250 bp were obtained by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR).The sensitivity of nested PCR was higher than that of single RT-PCR.Analysis of the partial sequenced CP gene showed that the isolate was closed to ArMV with similarity of 99.0%-100%.All the results demonstrated that the isolated virus was ArMV. 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒 进境检疫 分子鉴定 检疫性有害生物 唐菖蒲 种球 mosaic virus
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从荷兰进口植物中检出南芥菜花叶病毒 被引量:4
14
作者 马新颖 汪琳 +2 位作者 任鲁风 高文娜 周琦 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期217-218,共2页
关键词 芥菜花叶病毒 植物病毒 荷兰 人类免疫缺陷病毒 基因芯片技术 呼吸系统综合征 芯片检测 进口
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进境唐菖蒲种球携带南芥菜花叶病毒的检测 被引量:4
15
作者 丁元明 秦绍钊 +2 位作者 王云月 曹云华 杜宇 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期46-48,共3页
利用DAS-ELISA对荷兰进境的唐菖蒲培育叶片进行南芥菜花叶病毒检疫,再对血清呈阳性的种球进行培育,以长出的叶片作为检测材料,采用RT-PCR方法进行南芥菜花叶病毒的检测,并对PCR产物进行克隆与测序。结果表明,从唐菖蒲种球上发现了我国... 利用DAS-ELISA对荷兰进境的唐菖蒲培育叶片进行南芥菜花叶病毒检疫,再对血清呈阳性的种球进行培育,以长出的叶片作为检测材料,采用RT-PCR方法进行南芥菜花叶病毒的检测,并对PCR产物进行克隆与测序。结果表明,从唐菖蒲种球上发现了我国进境植物检疫二类危险性有害生物南芥菜花叶病毒(Arabismosaic virus,ArMV)。 展开更多
关键词 唐菖蒲 DAS-ELISA RT-PCR 芥菜花叶病毒
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侵染唐菖蒲和百合3种病毒的多重RT-PCR检测方法 被引量:3
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作者 郑耘 陈枝楠 +2 位作者 陈富华 毛海滨 李一农 《植物检疫》 北大核心 2010年第3期19-22,共4页
本文针对侵染百合和唐菖蒲的南芥菜花叶病毒、百合无症病毒和菜豆黄花叶病毒,建立了同时检测3种病毒的多重RT—PCR检测方法。该方法根据上述3种病毒保守的衣壳蛋白基因序列,设计特异性引物,优化了反应条件。通过对9种不同寄主和6种... 本文针对侵染百合和唐菖蒲的南芥菜花叶病毒、百合无症病毒和菜豆黄花叶病毒,建立了同时检测3种病毒的多重RT—PCR检测方法。该方法根据上述3种病毒保守的衣壳蛋白基因序列,设计特异性引物,优化了反应条件。通过对9种不同寄主和6种病毒的检测,验证该检测方法具有很高的特异性、稳定性,其灵敏度为植物总RNA稀释10^1~10^2倍。特别是,该方法缩短了检测周期,适合于植物病毒快速检测工作的需要。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒 百合无症病毒 菜豆黄花叶病毒 PCR
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南芥菜花叶病毒分子生物学快速检测方法的研究 被引量:3
17
作者 吴兴海 邵秀玲 +3 位作者 张凤娟 王英超 陈长法 肖西志 《江西农业学报》 CAS 2007年第7期34-35,共2页
根据南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic Nepovirus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR检测引物,对南芥菜花叶病毒和非南芥菜花叶病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应。结果,南芥菜花叶病毒的感病植物组织的PCR产物均出现364bp的特异性... 根据南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic Nepovirus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR检测引物,对南芥菜花叶病毒和非南芥菜花叶病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应。结果,南芥菜花叶病毒的感病植物组织的PCR产物均出现364bp的特异性扩增条带,而非南芥菜花叶病毒均未出现扩增条带,证明这对引物具有南芥菜花叶病毒鉴定特异性。将提取的南芥菜花叶病毒总RNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果表明,此体系最低可检出南芥菜花叶病毒提取的RNA模板浓度为150pg/μL。 展开更多
关键词 分子生物学 芥菜花叶病毒 快速检测
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半巢式RT-Realtime PCR检测南芥菜花叶病毒 被引量:3
18
作者 粟智平 杨益娥 +3 位作者 邓丛良 李金庆 王颖 段效辉 《现代农业科技》 2015年第18期145-147,共3页
根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime ... 根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、Realtime PCR等方法高。结果表明:该方法检测灵敏度可达0.06 fg/μL植物总RNA。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒(ArMV) 半巢式RT—ReMtimePCR 检测
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微滴数字RT-PCR检测南芥菜花叶病毒 被引量:2
19
作者 赵晓丽 杨术江 +3 位作者 陈红运 向军 张永江 邓丛良 《植物检疫》 2021年第2期49-52,共4页
为建立一种快速、灵敏、特异的定量检测南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,ArMV)的微滴数字RT-PCR方法,根据ArMV外壳蛋白基因保守序列设计了特异性引物和探针,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估。结果表明,该数字RT-PCR检... 为建立一种快速、灵敏、特异的定量检测南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,ArMV)的微滴数字RT-PCR方法,根据ArMV外壳蛋白基因保守序列设计了特异性引物和探针,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估。结果表明,该数字RT-PCR检测方法的特异性好,与其他对照病毒均无交叉反应;检测灵敏度可达0.56 copies/μL;3次重复试验变异系数为0.74%,重复性良好。本实验建立的方法适用于实际样品中ArMV的快速定量检测。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒 微滴数字RT-PCR 实时荧光RT-PCR 检测
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逆转录环介导等温扩增技术检测南芥菜花叶病毒 被引量:2
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作者 郭立新 谭毅 +3 位作者 刘永丰 邓丛良 段维军 许邹亮 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期91-95,95,共5页
根据南芥菜花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了2组RT-LAMP引物,通过筛选试验,最终确定Ar4组引物为最佳引物,建立了南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测方法。同时,通过实时浊度仪和钙黄绿素分别对检测结果进行了判断。特异性和灵敏度试验结... 根据南芥菜花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了2组RT-LAMP引物,通过筛选试验,最终确定Ar4组引物为最佳引物,建立了南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测方法。同时,通过实时浊度仪和钙黄绿素分别对检测结果进行了判断。特异性和灵敏度试验结果显示,RT-LAMP方法快速、特异且灵敏,其灵敏度与普通RT-PCR法一致。 展开更多
关键词 芥菜花叶病毒 逆转录环介导等温扩增 检测
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