反相高效液相色谱法同时测定甘草酸及其酶转化产物 被引量：5

1

作者 卢定强 戴燕 +1 位作者 李晖 胡继军 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期355-357,共3页

甘草酸（glycyrrhizic acid，GL）及其衍生物是一类具有重要生理活性的化合物。利用酶转化GL可以生成具有更高生理活性的单葡萄糖醛酸甘草次酸（glycyrrhetyl 3-O-mono-β-D—glucuronide，GAMG）。为了深入研究该酶对GL的生物转化特性... 甘草酸（glycyrrhizic acid，GL）及其衍生物是一类具有重要生理活性的化合物。利用酶转化GL可以生成具有更高生理活性的单葡萄糖醛酸甘草次酸（glycyrrhetyl 3-O-mono-β-D—glucuronide，GAMG）。为了深入研究该酶对GL的生物转化特性，该文建立了一种能同时检测GL及其酶转化产物GAMG的高效液相色谱分析方法。采用Apollo C18分析柱，流动相V（甲醇）：V（水）：V（冰醋酸）=75：25：5，流速1．0mL／min，紫外检测波长254nm。在进样量为0．2—20μg内成良好的线性关系，GL的加样回收率为94．3％-103．2％，相对标准偏差为0．85％-2．53％；GAMG的加样回收率为92．6％-98．7％，相对标准偏差为1．45％-3．25％。方法准确、简捷、耗材低廉。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 甘草酸 单葡萄糖醛酸甘草次酸 酶转化

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甘草酸转化单葡萄糖醛酸甘草次酸中催化酶的选择 被引量：4

2

作者 刘美琴 《云南化工》 CAS 2018年第10期128-129,共2页

甘草酸是甘草药材中的重要药用成分,将甘草酸定向转化成单葡萄糖酸甘草次酸可以提高其药物活性降低毒性。制备新鲜猪肝脏匀浆,离心切取肝脏溶酶体作为转化催化剂,通过紫外-分光光度法对反应产物进行分析,证实反应生成了单葡萄糖醛酸甘... 甘草酸是甘草药材中的重要药用成分,将甘草酸定向转化成单葡萄糖酸甘草次酸可以提高其药物活性降低毒性。制备新鲜猪肝脏匀浆,离心切取肝脏溶酶体作为转化催化剂,通过紫外-分光光度法对反应产物进行分析,证实反应生成了单葡萄糖醛酸甘草次酸,几乎不生成甘草次酸,说明溶酶体选择性较高。 展开更多

关键词 甘草酸 单葡萄糖醛酸甘草次酸 甘草次酸 溶酶体 酶催化

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产单葡萄糖醛酸甘草次酸菌株的筛选及发酵条件的优化 被引量：3

3

作者 郭立纯 赵伟 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第16期88-94,共7页

从甘草土壤中筛选纯化得到一株产β-D-葡萄糖醛酸苷酶(β-D-glucuronidase,β-GUS)的菌株,采用常温室压等离子体诱变技术(ARTP)对原始菌株进行诱变,筛选得到高产突变菌株。经传代10次培养验证该菌株遗传性状稳定。通过菌落形态、显微镜... 从甘草土壤中筛选纯化得到一株产β-D-葡萄糖醛酸苷酶(β-D-glucuronidase,β-GUS)的菌株,采用常温室压等离子体诱变技术(ARTP)对原始菌株进行诱变,筛选得到高产突变菌株。经传代10次培养验证该菌株遗传性状稳定。通过菌落形态、显微镜制片观察和ITS序列比较确定菌株为蓝状真菌属,命名为Talaromyces sp.02。对其进行发酵产酶优化,确定发酵产酶的工艺。结果表明,以5 g/L的甘草酸为诱导剂,3 g/L的硝酸钠为氮源,初始p H 5.5,发酵温度30℃,10%的接种量,发酵144 h,在此条件下,该菌株可水解甘草酸(Glycyrrhizin,GL)生成单葡萄糖醛酸甘草次酸(Glycyrrhetinic acid monoglucuronide,GAMG),产量可达4.03 g/L,且几乎无副产物甘草次酸的生成,其发酵产率可达到87.88%,葡萄糖醛酸苷酶的酶活为162.20 U/m L,是原始复筛菌株的3.23倍,是一株具有开发前景和应用潜力的葡萄糖醛酸苷酶生产菌株。 展开更多

关键词 甘草 甘草酸 单葡萄糖醛酸甘草次酸 β-D-葡萄糖醛酸苷酶 蓝状真菌属 发酵条件优化

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单葡萄糖醛酸甘草次酸高效生物制备菌种筛选及发酵工艺 被引量：2

4

作者 赵明哲 张森 +3 位作者 陈量量 邱首哲 郭盛 段金廒 《生物加工过程》 CAS 2023年第1期67-75,共9页

甘草中含量较少的三萜类成分单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG)在药品、食品和化妆品领域具有较高的应用价值。生物制备法具有污染小、反应条件温和、底物特异性高和副产物少的优点。为改善GAMG的制备工艺,本研究对甘草产地根际土壤中菌种进... 甘草中含量较少的三萜类成分单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG)在药品、食品和化妆品领域具有较高的应用价值。生物制备法具有污染小、反应条件温和、底物特异性高和副产物少的优点。为改善GAMG的制备工艺,本研究对甘草产地根际土壤中菌种进行单一碳源平板初筛和液态发酵复筛,选育了可将甘草酸(GL)转化为GAMG的高效转化菌株土曲霉菌(TMZ05),并结合单因素实验及正交试验优化发酵工艺,最终确定其最优发酵工艺条件:底物质量浓度5 g/L、种子液菌丝体接种量40个、发酵温度30℃、发酵液初始pH 6、发酵时间3 d。在最优发酵工艺条件下,GAMG最高摩尔收率可达62.34%;β-葡萄糖醛酸苷酶酶活最高可达307.14 U/mL。 展开更多

关键词 单葡萄糖醛酸甘草次酸 生物转化 甘草酸 土曲霉菌

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甘草酸酶催化水解单葡萄糖醛酸甘草次酸的反应溶剂研究

5

作者 刘美琴 《江西化工》 2019年第2期151-153,共3页

甘草酸(GL)是甘草类中药材中的有效成分,将甘草酸转化为单葡萄糖酸甘草次酸(GAMG)可以提高其药物活性并降低生物毒性。离心切取新鲜猪肝脏匀浆中间段溶酶体作为酶催化剂,用胆碱基深共晶溶剂作为反应溶剂进行酶催化水解反应,用紫外-可见... 甘草酸(GL)是甘草类中药材中的有效成分,将甘草酸转化为单葡萄糖酸甘草次酸(GAMG)可以提高其药物活性并降低生物毒性。离心切取新鲜猪肝脏匀浆中间段溶酶体作为酶催化剂,用胆碱基深共晶溶剂作为反应溶剂进行酶催化水解反应,用紫外-可见分光光度法对反应产物进行分析,比较了两种介质下的反应转化率。 展开更多

关键词 深共晶溶剂 甘草酸 单葡萄糖醛酸甘草次酸 溶酶体 酶催化

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微生物转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸甘草酸 被引量：11

6

作者 王云 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期151-151,160,共2页

通过研究筛选得到一株微生物能够高效转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸甘草酸,转化率约为90%。

关键词 微生物 转化 甘草酸 单葡萄糖醛酸甘草酸

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高效液相色谱法同时测定甘草酸及其发酵产物 被引量：4

7

作者 韩园园 杨学东 +1 位作者 唐绪岩 李春 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1059-1062,共4页

建立甘草酸发酵液中甘草酸及其发酵产物乌拉尔甘草皂苷乙、3-O-β-D-葡萄糖醛酸-24-OH-18β-甘草次酸、单葡萄糖醛酸甘草次酸、18α-单葡萄糖醛酸甘草次酸和甘草次酸的RP-HPLC含量测定方法,为单葡萄糖醛酸甘草次酸的生产工艺研究及产品... 建立甘草酸发酵液中甘草酸及其发酵产物乌拉尔甘草皂苷乙、3-O-β-D-葡萄糖醛酸-24-OH-18β-甘草次酸、单葡萄糖醛酸甘草次酸、18α-单葡萄糖醛酸甘草次酸和甘草次酸的RP-HPLC含量测定方法,为单葡萄糖醛酸甘草次酸的生产工艺研究及产品质量控制提供方法学基础。采用Kromasil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇（B）-1%乙酸溶液（A）为流动相进行梯度洗脱：0 min,63%B;40 min,66%B;50 min,75%B;70 min,90%B;80 min,90%B。体积流速：1.0 mL/min;进样量：10μL;柱温：25℃;检测波长：254 nm。甘草酸、乌拉尔甘草皂苷乙、3-O-β-D-葡萄糖醛酸-24-OH-18β-甘草次酸、单葡萄糖醛酸甘草次酸、18α-单葡萄糖醛酸甘草次酸和甘草次酸的线性范围分别为11.25-180.0μg/mL（r=0.9986）;3.031-96.99μg/mL（r=0.9978）;2.595-83.00μg/mL（r=0.9999）;62.50-2000μg/mL（r=0.9999）;11.25-180.0μg/mL（r=0.9980）;1.560-50.00μg/mL（r=0.9992）;平均回收率（n=9）分别为98.3%,101.2%,98.4%,101.9%,101.7%,97.42%,RSD分别为2.5%,1.4%,0.96%,2.8%,0.73%,0.32%。 展开更多

关键词 甘草酸 乌拉尔甘草皂苷乙 3-O-β-D-葡萄糖醛酸-24-OH-18β-甘草次酸 18β 18α-单葡萄糖醛酸甘草次酸 甘草次酸 RP-HPLC 含量测定

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酵母细胞催化合成18α-甘草酸

8

作者 邢登雪 张良 +4 位作者 李文强 梁建华 秦磊 张根林 李春 《化工学报》 EI CSCD 北大核心 2024年第9期3266-3276,共11页

18α-甘草酸(18α-GL)是一种齐墩果烷型皂苷,比其差向异构体18β-GL极性小、亲脂性好,更强的抗毒抗炎作用和更高的肝脏靶向性使18α-GL成为保肝护肝领域的主要药物成分。但目前18α-GL的制备方法污染大、效率低,亟需开发一种绿色简单地... 18α-甘草酸(18α-GL)是一种齐墩果烷型皂苷,比其差向异构体18β-GL极性小、亲脂性好,更强的抗毒抗炎作用和更高的肝脏靶向性使18α-GL成为保肝护肝领域的主要药物成分。但目前18α-GL的制备方法污染大、效率低,亟需开发一种绿色简单地合成18α-GL的方法。利用酵母细胞异源表达糖基转移酶,通过全细胞催化方式鉴定出可催化18α-甘草次酸(18α-GA)特异性合成18α-单葡萄糖醛酸甘草次酸(18α-GAMG)的糖基转移酶cGuCSyGT和催化18α-GAMG特异性合成18α-GL的糖基转移酶GgUGT1。进一步运用蛋白质结构预测和分子动力学模拟探究cGuCSyGT对18α-GA的催化活性比18β-GA低的原因。最后采用优化底物添加浓度、底盘细胞、底物添加时间、反应时间、培养基成分补加和底物溶剂的策略构建了酵母催化合成18α-GAMG和18α-GL的最优工艺,使18α-GAMG和18α-GL的产量分别达到(36.38±1.87)mg/L和(39.32±0.75)mg/L。本研究实现了18α-GAMG和18α-GL的微生物催化合成,可为18α-GL的微生物全合成提供理论基础和技术支撑。 展开更多

关键词 甘草 18Α-甘草酸 18α-单葡萄糖醛酸甘草次酸 糖基转移酶 酵母细胞催化

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亲水性离子液体[EMIM]BF_4对固定化β-葡萄糖醛酸苷酶催化活性的影响 被引量：8

9

作者 曹红 孙倩 +2 位作者 李春 李开雄 李军 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1873-1879,共7页

以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法制备固定化β-葡萄糖醛酸苷酶;以1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([EMIM]BF4)/缓冲溶液均相体系为介质,研究了亲水性离子液体[EMIM]BF4对固定化酶生物催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)... 以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法制备固定化β-葡萄糖醛酸苷酶;以1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([EMIM]BF4)/缓冲溶液均相体系为介质,研究了亲水性离子液体[EMIM]BF4对固定化酶生物催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的影响.实验结果表明,当均相体系中[EMIM]BF4的体积分数为16%,pH为5.4,反应温度为50℃及摇床转速为200 r/min时,酶活力达到最高,并且明显优于纯缓冲溶液体系中的最高酶活.重复利用性实验结果表明,与纯缓冲液介质体系相比,固定化酶在含亲水性离子液体[EMIM]BF4的均相介质中表现出较好的操作稳定性.表观动力学参数和活化能数据表明,亲水性离子液体[EMIM]BF4在催化体系中能够增强酶和底物GL的亲和力,有效稳定酶-底物的过渡态,并降低反应活化能,而使固定化β-葡萄糖醛酸苷酶表现出较高的催化活性. 展开更多

关键词 亲水性离子液体 1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐 固定化β-葡萄糖醛酸苷酶 催化活性 甘草酸 单葡萄糖醛酸基甘草次酸

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响应面设计法优化单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)发酵转化培养基 被引量：4

10

作者 李丽敏 邹树平 +1 位作者 戴大章 李春 《生物加工过程》 CAS CSCD 2009年第5期29-33,共5页

以甘草酸(glycyrrhizin,GL)为底物,利用产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)液态发酵转化单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG),采用响应面设计法对初始发酵培养基进行优化。用部分因子分析法研究原始发酵培养基各成分对响应值的显著程度,... 以甘草酸(glycyrrhizin,GL)为底物,利用产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)液态发酵转化单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG),采用响应面设计法对初始发酵培养基进行优化。用部分因子分析法研究原始发酵培养基各成分对响应值的显著程度,发现甘草酸(GL)、NaNO3和K2HPO4的质量浓度对发酵产生GAMG的影响显著(P<0.01)。用中心组合设计确立甘草酸、NaNO3和K2HPO4的适宜质量浓度分别为2.8、3.0和0.8 g/L。在优化条件下进行发酵时,GAMG的转化率从75.49%提高到89.11%,比优化前提高了13.62%。 展开更多

关键词 单葡萄糖醛酸基甘草次酸 产紫青霉 响应面设计

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离子液体[BMIM]BF_4对甘草酸及其衍生物色谱行为的影响 被引量：4

11

作者 郑兰兰 曹红 +2 位作者 唐明翔 欧阳巧凤 张馨 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期815-819,共5页

将离子液体1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐（[BMIM]BF。）加入到高效液相色谱流动相中，研究其对甘草酸（GL）及其衍生物甘草次酸（GA）和单葡萄糖醛酸基甘草次酸（GAMG）色谱行为的影响。结果显示，加入离子液体后的流动相能够明显改善... 将离子液体1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐（[BMIM]BF。）加入到高效液相色谱流动相中，研究其对甘草酸（GL）及其衍生物甘草次酸（GA）和单葡萄糖醛酸基甘草次酸（GAMG）色谱行为的影响。结果显示，加入离子液体后的流动相能够明显改善色谱峰形、减少峰拖尾、增大峰面积和峰高、提高检测灵敏度，并缩短GL，GA及GAMG3种化合物的同时检测时间，提高检测效率。优化色谱条件为：InertSustain C18（4．6mm×250mmi．d．，5μm）反相色谱柱为分离柱，柱温40℃；甲醇-1．0mmol／L[BMIM]BF4（体积比81：19，乙酸调至pH3．0）为流动相，流速0．7mL／min，进样体积20μL，检测波长251nm。GL，GA及GAMG在5．00—100mg／L范围内线性关系良好（r≥0．9998），检出限分别为0．02，0．04，0．09mg／L；加标回收率分别为100．1％，98．0％，98．2％，RSD为0．18％～0．43％。同时测定GL生物转化体系中3种组分，结果满意。 展开更多

关键词 离子液体 [BMIM]BF4 高效液相色谱法 甘草酸 甘草次酸 单葡萄糖醛酸基甘草次酸

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水／离子液体[BMIM]PF6两相体系中全细胞催化生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸 被引量：4

12

作者 陈金燕 邹树平 +2 位作者 何冬梅 杨晓刚 李春 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期3136-3142,共7页

研究了水/离子液体两相体系中重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115(r-PGUS-P)全细胞转化甘草酸(GL)生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的反应。确定最适反应体系为离子液体[BMIM]PF6/水(2∶8,体积比),最适缓冲液pH、反应温度、底物浓度和... 研究了水/离子液体两相体系中重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115(r-PGUS-P)全细胞转化甘草酸(GL)生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的反应。确定最适反应体系为离子液体[BMIM]PF6/水(2∶8,体积比),最适缓冲液pH、反应温度、底物浓度和细胞加入量分别为5.4、45℃、6.0mmol.L-1和8.0g.L-1。在此条件下反应58h,产物GAMG得率和化学键选择性分别为69.6%和67.2%,与纯水相反应体系相比,分别提高了12.4%和12.61%。离子液体循环使用7次后,回收利用率为93.47%。产物GAMG和副产物甘草次酸(GA)在此两相体系中得到有效分离,为后续产物分离带来便利。 展开更多

关键词 离子液体 全细胞 甘草酸 β-D葡萄糖醛酸苷酶 单葡萄糖醛酸基甘草次酸

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固定化细胞连续生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸 被引量：2

13

作者 王彩霞 张腾江 +2 位作者 肖玉清 冯旭东 李春 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第15期301-307,共7页

产紫青霉菌株(Penicillium purpurogenum Li-3)能定向转化甘草酸(GL)为单葡萄糖醛酸基甘草次酸(glycyrrtinic acid 3-O-mono-β-D-glucuronide,GAMG),针对课题组前期海藻酸钙包埋产紫青霉Li-3的珠体机械强度不高,操作使用性能低等问题,... 产紫青霉菌株(Penicillium purpurogenum Li-3)能定向转化甘草酸(GL)为单葡萄糖醛酸基甘草次酸(glycyrrtinic acid 3-O-mono-β-D-glucuronide,GAMG),针对课题组前期海藻酸钙包埋产紫青霉Li-3的珠体机械强度不高,操作使用性能低等问题,通过添加天然物质和化学处理改变凝胶结构,提高改性海藻酸钙珠体的机械强度,并考察了改性海藻酸钙固定化细胞的催化性质。利用改性海藻酸钙固定的产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)微球在具有隔离筛的改进型填充床反应器中连续转化甘草酸(GL)生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)。结果表明添加4%的硅藻土能够改善固定化细胞微球的机械强度,提高了反应的转化率。改性前后的固定化细胞微球的最适p H值和最适温度均未发生变化,但改性的固定化细胞反应转化率与对照相比分别提高了22%和30%。向底物中添加0.12%的吐温-80能进一步使GAMG的产量提高44%。同时,改性的固定化细胞微球具有较好的贮存稳定性和重复使用性。最后利用改性固定化细胞微球在具有隔离筛的改进型填充床反应器内实现了连续生产GAMG,在最佳反应条件下,GAMG的产量为0.193 g/(L·d),GL的转化率为34%,时空产率约为13.7μmol/(L·h)。利用改性固定化细胞微球在改进型的填充床反应器内进行连续反应生产GAMG,为建立高效全细胞转化甘草酸合成GAMG的反应体系奠定了基础。 展开更多

关键词 细胞 酸 P H 单葡萄糖醛酸基甘草次酸 生物转化 固定化细胞 填充床反应器

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聚氨酯泡沫法固定化Penicillium purpurogenum Li-3细胞 被引量：2

14

作者 叶海 曹红 +2 位作者 李扬 郑兰兰 李军 《食品工业》 北大核心 2012年第11期122-125,共4页

以聚氨酯泡沫为化载体,采用吸附法将产紫青霉Penicillium purpurogenum Li-3细胞进行固定化。试验表明:聚氨酯泡沫立方体颗粒尺寸为6 mm、加入量为2%时GAMG产量最高,可达到1.84 g/L。游离细胞催化重复使用批次为2次,固定化细胞重复使用... 以聚氨酯泡沫为化载体,采用吸附法将产紫青霉Penicillium purpurogenum Li-3细胞进行固定化。试验表明:聚氨酯泡沫立方体颗粒尺寸为6 mm、加入量为2%时GAMG产量最高,可达到1.84 g/L。游离细胞催化重复使用批次为2次,固定化细胞重复使用批次为4次,GAMG的产量维持在1.83 g/L,固定化细胞催化周期为36h,相比游离细胞缩短了一半。 展开更多

关键词 甘草酸(GL) 单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG) 聚氨酯泡沫 固定化

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固芯液化技术对微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞使用性能的影响 被引量：1

15

作者 蔡静晓 曹红 +6 位作者 叶海 罗婷 杨露 王娜 刘进 刘瑞麟 李春 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2016年第10期69-76,共8页

以微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3)催化甘草酸(GL)定向合成具有更高生物利用度、甜度以及安全性的单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)为目的,研究固芯液化技术对微囊化细胞使用性能的影响。结果显示,液芯微囊化细胞的生... 以微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3)催化甘草酸(GL)定向合成具有更高生物利用度、甜度以及安全性的单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)为目的,研究固芯液化技术对微囊化细胞使用性能的影响。结果显示,液芯微囊化细胞的生长情况和传质性能明显优于固芯微囊化细胞,并在第1批次催化反应中,液芯微囊化细胞的相对活性达到98.7%,比固芯微囊化细胞(72.7%)要高。9批次重复利用实验表明,与固芯微囊化细胞相比,液芯微囊化细胞的相对活性较高,而机械强度和操作稳定性要稍显逊色。此外,固芯液化的技术与条件对微囊化细胞发挥最佳催化效果至关重要。 展开更多

关键词 固芯液化技术 微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞 使用性能 甘草酸 单葡萄糖醛酸基甘草次酸

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双三氟甲烷磺酰亚胺类离子液体对产紫青霉菌株全细胞催化特性的影响 被引量：1

16

作者 张馨 李扬 +3 位作者 曹红 欧阳巧凤 郑兰兰 李春 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1870-1875,共6页

研究了双三氟甲烷磺酰亚胺阴离子Tf_2N^-分别与5种不同阳离子组成的离子液体对产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响.结果表明,[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌的生长有促进作用,[... 研究了双三氟甲烷磺酰亚胺阴离子Tf_2N^-分别与5种不同阳离子组成的离子液体对产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响.结果表明,[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌的生长有促进作用,[Py_(14)]Tf_2N,[Bmim]Tf_2N,[BPy]Tf_2N和[P_(6,4,4,4)]Tf_2N 4种离子液体对产紫青霉菌的生长则均有不同程度的抑制.代谢活力保留值R的测定结果表明,[P_(6,4,4,4)]Tf_2N和[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌体细胞表现出相对较高的生物相容性;5种离子液体对菌体细胞的细胞膜透性均有改善作用.全细胞催化反应数据显示,最优离子液体为[P_(y14)]Tf_2N,当其加入量为25%,反应84 h后,单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)产率高达95.38%.5种离子液体对产紫青霉菌的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响不仅与阴离子Tf_2N^-有关,阳离子的组成、结构和性质也发挥重要的作用. 展开更多

关键词 双三氟甲烷磺酰亚胺阴离子 阳离子 离子液体 产紫青霉菌 单葡萄糖醛酸基甘草次酸

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重组β-葡萄糖醛酸苷酶键选择性的半理性改造

17

作者 普鸿丽 吕波 +1 位作者 赵东旭 李春 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1119-1128,共10页

为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC... 为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对键选择进行筛选,得到优势突变酶R329K、T369V。结果显示:与PGUS-E酶相比,突变酶R329K、T369V键选择性分别提高26.9%、34.3%。突变酶的酶学性质研究表明,突变酶的最适p H和温度与PGUS-E一致,但其酶催化效率下降。由此可见,R329、T369对酶催化的键选择性和酶的活性有显著影响。综上结果,本文应用饱和突变方法改善了PGUS-E的键选择性,为酶的结构和功能关系理解提供了实验依据。 展开更多

关键词 Β-葡萄糖醛酸苷酶 单葡萄糖醛酸基甘草次酸 键专一性 定点饱和突变

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微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞的制备及其催化性能研究

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作者 黄晓林 曹红 +3 位作者 欧阳巧凤 沈瑞麟 李春 吴廷华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期156-161,169,共7页

采用海藻酸钠(SA)-羧甲基纤维素钠(CMC)液芯微胶囊技术制备微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3),研究其制备条件及其催化性能,考察不同因素对微囊化细胞直径、机械强度、破损率、催化活性的影响。结果表明,在羧甲基纤维... 采用海藻酸钠(SA)-羧甲基纤维素钠(CMC)液芯微胶囊技术制备微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3),研究其制备条件及其催化性能,考察不同因素对微囊化细胞直径、机械强度、破损率、催化活性的影响。结果表明,在羧甲基纤维素钠的浓度为1.4%、海藻酸钠的浓度为1.2%、Ca Cl2的浓度为1.0%、固化过程Ca Cl2浓度为0.5%及加菌量为3.0%的条件下,制得的微囊化细胞在重复利用9次后,相对活性仍达到56.9%,显示出较好的机械强度和操作稳定性。本文为高效生物转化甘草酸合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)提供了技术支持。 展开更多

关键词 微囊化 产紫青霉细胞 甘草酸 单葡萄糖醛酸基甘草次酸

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甘草皂苷生物转化的研究 被引量：31

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作者 吴少杰 杨志娟 +1 位作者 朱丽华 金风燮 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期516-518,共3页

目的　对甘草皂苷糖链进行有选择的部分水解 ,以得到单葡萄糖醛酸基甘草皂苷元。方法　生物酶水解法和液体发酵转化法。结果　利用试验菌最佳产酶条件所产的酶水解甘草皂苷 ,获得产物的产率为 2 3.7%。在液体发酵法中 ,产物的产率约为 1... 目的　对甘草皂苷糖链进行有选择的部分水解 ,以得到单葡萄糖醛酸基甘草皂苷元。方法　生物酶水解法和液体发酵转化法。结果　利用试验菌最佳产酶条件所产的酶水解甘草皂苷 ,获得产物的产率为 2 3.7%。在液体发酵法中 ,产物的产率约为 10 %。产物可用 85 %乙醇从 HP2 0树脂柱上洗脱下来 ,同时未转化的甘草皂苷可用5 0 %乙醇洗脱而循环利用。结论　该方法简洁方便 ,提高了甘草皂苷的转化率。 展开更多

关键词 甘草皂苷 生物转化 单葡萄糖醛酸基甘草皂苷元 生物酶水解法 液体发酵转化 转化率

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