青蒿琥酯对人胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡及Caspase 3蛋白表达的影响 被引量：6

1

作者 朱天明 颜宏锐 胡金敏 《中国临床研究》 CAS 2011年第7期556-558,共3页

目的研究青蒿琥酯对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的作用及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)蛋白表达的影响。方法将终浓度为5×104个/ml的人胃癌SGC-7901细胞置于培养板孔中,单独(空白对照)或与20、40、80μg/ml浓度的青蒿琥酯培... 目的研究青蒿琥酯对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的作用及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)蛋白表达的影响。方法将终浓度为5×104个/ml的人胃癌SGC-7901细胞置于培养板孔中,单独(空白对照)或与20、40、80μg/ml浓度的青蒿琥酯培养,然后加入四唑氮蓝(MTT)溶液共同培育。采用MTT法检测青蒿琥酯对人胃癌SGC-7901细胞生长的影响。SGC-7901细胞在培养板中培养后,应用倒置显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳梯状条带法观察细胞的凋亡情况。Caspase3蛋白试剂盒检测Caspase3酶活性的变化情况。结果青蒿琥酯对人胃癌细胞SGC-7901细胞体外增殖有明显的抑制作用,其抑制率随时间延长(6、12、24h)和药物浓度增加(20、40、80μg/ml)而增强(21.89%、32.20%、47.85%,P<0.05);青蒿琥酯处理24h后,细胞形态学观察到细胞凋亡坏死;琼脂糖电泳观察到明显DNA片段化;Caspase3的酶活性伴随着药物浓度的增加(0、20、40、80μg/ml)而增高〔(2.57±0.32)、(5.58±0.49)、(6.87±0.73)、(10.21±0.57)U/ml,P<0.05〕。结论青蒿琥酯能够抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖,促进其凋亡。Caspase3蛋白的高表达在促进SGC-7901细胞凋亡中起着重要作用。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 胃肿瘤 SGC-7901细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase 3) 细胞凋亡

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Caspase家族与内耳细胞凋亡 被引量：5

2

作者 邬莎 王爱梅 《国际耳鼻咽喉头颈外科杂志》 2007年第6期317-320,共4页

caspase 蛋白酶是执行细胞凋亡的主要酶类。正常情况下,caspase 以无活性的酶原形式存在于细胞中,当有凋亡刺激因素时可被激活,经不同的途径引起细胞凋亡。本文就 caspase家族的结构、特性、活化后效应及其在内耳细胞凋亡机制中所起的... caspase 蛋白酶是执行细胞凋亡的主要酶类。正常情况下,caspase 以无活性的酶原形式存在于细胞中,当有凋亡刺激因素时可被激活,经不同的途径引起细胞凋亡。本文就 caspase家族的结构、特性、活化后效应及其在内耳细胞凋亡机制中所起的作用做一综述。 展开更多

关键词 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase) 内耳(Ear Inner) 细胞凋亡 (Apoptosis)

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胰岛保护和功能维护的研究进展 被引量：2

3

作者 高宏君 邱敏华 陈继冰 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期207-212,共6页

胰岛移植在糖尿病及其并发症的治疗中有很广阔的前景,但移植后功能不良、排斥反应和供体不足等是胰岛移植领域的瓶颈。优化胰腺保存方法对获取有效胰岛的数量及功能的维护有积极意义;在培养期间对胰岛进行抗排斥反应和抗凋亡处理,包括... 胰岛移植在糖尿病及其并发症的治疗中有很广阔的前景,但移植后功能不良、排斥反应和供体不足等是胰岛移植领域的瓶颈。优化胰腺保存方法对获取有效胰岛的数量及功能的维护有积极意义;在培养期间对胰岛进行抗排斥反应和抗凋亡处理,包括间充质干细胞(MSC)、MSC来源的外泌体、抗凋亡药物和基因修饰等可能成为临床胰岛移植胰岛保护与功能维护的重要方法;胰岛移植后抗立即经血液介导的炎症反应(IBMIR)药物的使用对于胰岛功能的保护也具有重要作用。本文围绕从胰岛制备到胰岛移植的全过程,探讨胰岛保护和功能维护相关策略,旨在为提升供体质量以弥补供体绝对数量的不足,提升胰岛移植效率提供参考。 展开更多

关键词 胰岛移植 胰岛保护 糖尿病 干细胞 外泌体 立即经血液介导的炎症反应(IBMIR) B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)

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IL-18/IL-18BP介导NK-92MI细胞杀伤GTKO猪内皮细胞的初步研究

4

作者 孟强 张文杰 +4 位作者 吴伟康 牛坤伟 杨龙 张玄 陶开山 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期75-82,共8页

目的探讨白细胞介素(IL)-18/IL-18结合蛋白(BP)介导自然杀伤(NK)-92MI细胞杀伤α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)猪内皮细胞的效应及可能机制。方法将NK-92MI细胞分为NK组、NK+IL-18组、NK+GTKO组、IL-18+NK+GTKO组和IL-18+IL... 目的探讨白细胞介素(IL)-18/IL-18结合蛋白(BP)介导自然杀伤(NK)-92MI细胞杀伤α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)猪内皮细胞的效应及可能机制。方法将NK-92MI细胞分为NK组、NK+IL-18组、NK+GTKO组、IL-18+NK+GTKO组和IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NK-92MI细胞中炎症相关基因的信使核糖核酸(mRNA)表达,乳酸脱氢酶(LDH)法检测NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤效应,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测GTKO猪内皮细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测具有杀伤效应的蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果与NK组、NK+IL-18组以及NK+GTKO组比较,IL-18+NK+GTKO组NK-92MI细胞中干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8、IL-3、IL-6和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的mRNA表达水平均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与IL-18+NK+GTKO组比较,IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组NK-92MI细胞中IFN-γ、TNF-α、IL-8、IL-3、IL-6和GM-CSF的mRNA表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与NK+GTKO组相比,IL-18+NK+GTKO组NK-92MI细胞中穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ蛋白表达水平均升高,NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤率增加,GTKO猪内皮细胞凋亡率增加,GTKO猪内皮细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2和裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的比例均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与IL-18+NK+GTKO组比较,IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组穿孔素、颗粒酶B、IFN-γ蛋白表达水平均降低,NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤率降低,GTKO猪内皮细胞凋亡率下降,GTKO猪内皮细胞中Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3/Caspase-3的比例均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论IL-18BP可阻断IL-18诱导的NK-92MI细胞中炎症相关基因表达和NK-92MI细胞杀伤GTKO猪内皮细胞的效� 展开更多

关键词 白细胞介素-18 白细胞介素-18结合蛋白 异种肝移植 自然杀伤细胞 凋亡 α-1 3-半乳糖基转移酶(GGTA1) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase) 穿孔素 颗粒酶B

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PBNA-413对心肌缺血/再灌注损伤大鼠凋亡相关蛋白及基因表达的影响 被引量：5

5

作者 汪琪 廖坚 +3 位作者 谢渭林 许培华 曾丽梅 黄志华 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期134-139,共6页

目的：探讨拳参正丁醇提取物-413（Bistortae Rhizoma n-butyl alcohol extract,PBNA-413）对大鼠心肌缺血/再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion,MI/R）细胞凋亡的影响。方法：将30只SD雄性大鼠随机分为5组,假手术组,MI/R模型... 目的：探讨拳参正丁醇提取物-413（Bistortae Rhizoma n-butyl alcohol extract,PBNA-413）对大鼠心肌缺血/再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion,MI/R）细胞凋亡的影响。方法：将30只SD雄性大鼠随机分为5组,假手术组,MI/R模型组,PBNA-413低剂量组（0.1 mg·kg（-1））,PBNA-413中剂量组（0.3 mg·kg（-1））,PBNA-413高剂量组（1.0 mg·kg（-1））。采用结扎左冠状动脉前降支40 min,恢复血流60 min,复制MI/R模型,记录肢体Ⅱ导联心电图。采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠心肌组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）,Caspase-9 mRNA及蛋白表达。结果：大鼠心肌缺血后,模型组大鼠心电图ST段及T波较假手术组明显升高（P〈0.05,P〈0.01）,PBNA-413处理后ST段及T波降低（P〈0.01）,以中剂量和高剂量的效果好。与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织Bax,Caspase-3及Caspase-9蛋白表达升高（P〈0.05,P〈0.01）,Bcl-2蛋白表达降低（P〈0.01）;与模型组比较,PBNA-413中剂量组Bax及Caspase-3和Caspase-9蛋白表达降低（P〈0.05,P〈0.01）,Bcl-2蛋白表达升高（P〈0.01）。除Caspase-9外,Bax,Bcl-2和Caspase-3的基因水平出现与蛋白类似变化。结论：PBNA-413可能通过抑制细胞凋亡从而有效保护MI/R心肌。 展开更多

关键词 拳参正丁醇提取物-413(PBNA-413) 心肌缺血/再灌注 细胞凋亡 B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2) Bcl-2相关X蛋白(Bax) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3 caspase-9

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NLRP3炎症小体与相关炎症信号通路在肾缺血-再灌注损伤中的作用 被引量：4

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作者 袁强 申开文 +1 位作者 张瑞波 沈俊 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期177-183,共7页

肾缺血-再灌注损伤(IRI)常见于肾移植术中,是引起急性肾衰竭的重要病理生理过程,严重影响受者预后。炎症反应在IRI的发病机制及病理过程中占据着重要地位。活化的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可通过介导多种促炎因子的成熟与释放,调... 肾缺血-再灌注损伤(IRI)常见于肾移植术中,是引起急性肾衰竭的重要病理生理过程,严重影响受者预后。炎症反应在IRI的发病机制及病理过程中占据着重要地位。活化的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可通过介导多种促炎因子的成熟与释放,调节机体炎症反应及相关细胞功能。本文对肾IRI中的NLRP3炎症小体及其相关炎症信号通路的作用机制进行了总结,旨在为临床肾IRI的防治提供新思路。 展开更多

关键词 缺血-再灌注损伤(IRI) 肾移植 NOD样受体蛋白3(NLRP3) Toll样受体(TLR) 模式识别受体(PRR) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-1 线粒体DNA(mtDNA)

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葱白提取物对癫痫大鼠学习记忆及细胞凋亡的影响 被引量：4

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作者 邵延萱 李晶 +1 位作者 薛晴 罗文哲 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第19期4350-4353,共4页

目的通过腹腔注射戊四氮(PTZ)构建大鼠癫痫模型,分析葱白提取物对模型大鼠脑电图(EEG)、学习记忆能力、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3和抗凋亡因子(Livin)的影响,探讨葱白提取物神经保护效果及作用机制。方法取购于哈尔滨医科大学... 目的通过腹腔注射戊四氮(PTZ)构建大鼠癫痫模型,分析葱白提取物对模型大鼠脑电图(EEG)、学习记忆能力、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3和抗凋亡因子(Livin)的影响,探讨葱白提取物神经保护效果及作用机制。方法取购于哈尔滨医科大学实验动物中心的雄性的健壮成年大鼠30只,随机分为正常组(生理盐水腹腔注射+生理盐水灌胃)、模型组(PTZ腹腔注射+生理盐水灌胃)、治疗组(PTZ腹腔注射+葱白提取物灌胃)各10只。3组完成前述操作周期后描记EEG、监测学习记忆能力、记录凋亡蛋白Caspase-3、Livin的改变规律和特点。结果经葱白提取物灌胃治疗后,模型组EEG中的尖波或者棘波有所恢复,变成了平缓的慢波和小波;且学习记忆能力得到了显著改善。模型组皮质及海马Caspase-3表达的阳性细胞数目显著变多,而海马区阳性细胞数又明显多于颞叶皮质区。治疗组Livin在皮质和海马区表达水平显著上调(P<0.05)。结论葱白提取物可通过上调Livin阳性细胞数、下调Caspase-3阳性细胞数来削弱并抑制神经细胞的坏死和凋亡,加快大脑局部的血液循环来增强学习记忆能力;改善EEG波形来达到神经保护作用。 展开更多

关键词 癫痫 葱白提取物 脑电图(EEG) 学习记忆 抗凋亡因子(Livin) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3

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基于P53、Bax、Caspase-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响 被引量：3

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作者 陈红梅 冯强 +1 位作者 黎娟 陈铁民 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期1182-1185,共4页

目的基于P53、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响。方法以宫颈癌HeLa细胞为研究对象,给予不同浓度竹节参水提取物(0、50、100、150μg/ml)进行培... 目的基于P53、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响。方法以宫颈癌HeLa细胞为研究对象,给予不同浓度竹节参水提取物(0、50、100、150μg/ml)进行培养(分别为A、B、C、D组),MTT法检测HeLa细胞增殖抑制情况;TUNEL法对比HeLa细胞凋亡率;流式术观察HeLa细胞周期;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态;RT-PCR法测定P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果与A组相比,B组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞增殖活力减弱。与A组相比,B组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。HeLa细胞周期在竹节参水提取物的作用下G0/G1期上升,S期下降。A组未添加竹节参水提取物,HeLa细胞细胞核形态为卵圆状,染色也较为均匀;B组添加竹节参水提取物后,部分HeLa细胞细胞核形态改变,出现缩小和浓缩现象,荧光现象也增强;C、D组细胞因提取物浓度增加,细胞核形态改变加剧,荧光亮度攀升,细胞核边缘破碎。宫颈癌Hela细胞中P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达随竹节参水提取物浓度的增加而增加。结论竹节参水提取物可以降低体外宫颈癌细胞的增殖活力,并诱导其自噬和凋亡,这可能是通过竹节参水提取物调控P53、Bax、Caspase-3基因表达来实现的。 展开更多

关键词 P53 B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3 竹节参水提取物 宫颈癌

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褪黑素对缺血再灌注大鼠肾组织中Caspase-3表达、血浆TNF-α、IL-6及血清BUN、ScrIIGU的影响

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作者 易晔 王莹 +1 位作者 陈建武 黄薇 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期1989-1992,共4页

目的观察褪黑素(MT)对缺血再灌注(IR)大鼠肾组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3表达及血浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平的影响。方法60只大鼠随机分为假手术组(n=10)、IR组(n=25)及... 目的观察褪黑素(MT)对缺血再灌注(IR)大鼠肾组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3表达及血浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平的影响。方法60只大鼠随机分为假手术组(n=10)、IR组(n=25)及IR+MT 3.0 mg/kg组(MT 3.0 mg组,n=25)。于再灌注后6 h及24 h两个时间点处死大鼠并留取下腔静脉血及肾组织标本;全自动生化分析仪检测血清BUN、Scr变化,光镜观察肾脏组织及细胞形态改变,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-6、TNF-α、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,免疫组化检测Caspase-3表达,原位末端标记(TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡率。结果IR 6 h及24 h后,与IR组相比,MT 3.0 mg组血清BUN、Scr水平、Paller评分、血浆TNF-α、IL-6、hs-CRP水平、肾组织中Caspase-3蛋白表达及细胞凋亡率显著降低(均P<0.01)。结论早期给予MT可明显改善IR导致的大鼠肾损伤,保护肾脏功能。其机制与减少IL-6、TNF-α产生,降低Caspase-3表达,降低其调控的细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 褪黑素 缺血再灌注 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3

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基于PI3K/Akt信号通路探讨雄性激素对慢性心力衰竭心肌细胞凋亡的影响 被引量：3

10

作者 胡阳 邓洁 +5 位作者 王婷婷 姜华 罗勇 杨永丽 苏慧鹏 王煜 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第10期2471-2476,共6页

目的探讨雄激素通过抑制磷脂酰激酶-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3表达的影响。方法选择清洁级雄性SD大鼠55只随机分为对照(Control)组(10只)、CHF组(15... 目的探讨雄激素通过抑制磷脂酰激酶-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3表达的影响。方法选择清洁级雄性SD大鼠55只随机分为对照(Control)组(10只)、CHF组(15只)、睾酮(T)+CHF组(15只)、PI3K/Akt阻断剂(LY294002)+T+CHF组(15只),8月龄以上,适应性喂养3 w后,按分组建立CHF模型,T干预是在开始注射盐酸阿霉素同时经过皮下注射丙酸T,LY294002干预是在开始注射盐酸阿霉素同时经过腹腔注射LY294002。同时,Control组和CHF组皮下注射相等体积的花生油及腹腔注射相等体积的生理盐水。结果CHF组较Control组左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室收缩期内径(LVDs)明显增大,心率明显增快(P<0.05)。与CHF组比较,T+CHF组LVDd、LVDs稍有缩小,但无统计学差异(P>0.05),心率明显减慢(P<0.05)。与T+CHF组比较,LY294002+T+CHF组心率明显加快,心肺射血分数明显降低(P<0.05)。与Control组比较,CHF组T水平明显降低(P<0.05);与CHF组相比,T+CHF组和LY294002+T+CHF组T水平明显升高(P<0.05)。盐酸阿霉素干预各组心肌细胞内可见较多棕色的细胞核碎裂颗粒。CHF组TUNEL阳性细胞数、Caspase-3蛋白明显高于Control组(P<0.05);T+CHF组TUNEL阳性细胞数、Caspase-3蛋白比CHF组明显降低(P<0.05);LY294002+T+CHF组TUNEL阳性细胞数、Caspase-3蛋白明显高于T+CHF组(P<0.05);CHF组TUNEL阳性细胞数、Caspase-3蛋白与LY294002+T+CHF组无统计学差异(P>0.05);LY294002+T+CHF组p-Akt和p-PI3K蛋白表达明显低于其他组(P<0.05),T+CHF组p-Akt和p-PI3K蛋白表达较CHF组明显升高(P<0.05)。通过免疫组化检测心肌组织中p-Akt、p-PI3K、Caspase-3的蛋白表达进一步证实上述改变。结论补充雄激素可能通过抑制PI3K/Akt信号通路减少CHF大鼠心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 睾酮(T) 慢性心力衰竭(CHF) 磷酸酰激酶-3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3

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磷酸甘油酸变位酶5调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用 被引量：1

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作者 乔兵兵 李世朋 +2 位作者 宋浩森 季敏 赵龙栓 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期412-420,共9页

目的研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制。方法建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只。分析IRI对小鼠肝组织及血清... 目的研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制。方法建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只。分析IRI对小鼠肝组织及血清学指标的影响;分析小鼠肝脏IRI过程中PGAM5、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1的表达情况。建立肝细胞IRI模型(IRI组),采用Caspase-1抑制剂Z-YVAD-FMK预处理后再建立肝细胞IRI模型(抑制剂组),将未处理的AML12细胞作为对照组,分析抑制Caspase-1活性对细胞焦亡的影响。采用脂质体3000将PGAM5小干扰核糖核酸(siRNA)(siRNA组)和siRNA阴性对照(siRNA-NC)(siRNA-NC组)转染至AML12细胞,再建立肝细胞IRI模型,将未处理的AML12细胞作为对照组,分析PGAM5调控细胞焦亡对肝细胞IRI的影响。结果 6 h组和12 h组小鼠肝组织中部分肝细胞水肿,肝窦区变窄,中央静脉充血,偶见点灶状坏死等,且12 h组较6 h组病变加重。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平升高,且12 h组高于6 h组;6 h组和12 h组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平升高,12 h组低于6 h组;6 h组和12 h组小鼠肝组织IL-1β信使核糖核酸(mRNA)相对表达量升高,12 h组低于6 h组;6 h组和12 h组肝组织细胞凋亡率升高,12 h组低于6 h组(P<0.01~0.05)。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠肝组织PGAM5 mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均升高,且12 h组高于6 h组(P<0.01~0.05);6 h组和12 h组肝组织PGAM5、Caspase-1蛋白表达增多。IRI组细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解Caspase(cleaved Caspase)-1及Gasdermin D(GSDMD)蛋白相对表达量较对照组升高,GSDMD荧光强度较对照组增强;抑制剂组NLRP3、cleaved Caspase-1及GSDMD蛋白相对表达量较IRI组下降,GSDMD荧光强度较IRI组减弱(P<0.01~0.05)。与对照组比较,siRNA-NC组细胞存活率下降,PGAM5、NLRP3 展开更多

关键词 细胞焦亡 肝移植 缺血-再灌注损伤(IRI) 磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-1 NOD样受体蛋白3(NLRP3) 肿瘤坏死因子(TNF)-α 白细胞介素(IL)-1β

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加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响 被引量：20

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作者 聂闪闪 李洵 +1 位作者 赵玉航 王东生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期25-30,共6页

目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等... 目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等体积的生理盐水灌胃,各组连续灌胃10 d,末次给药1.5 h后,水合氯醛腹腔麻醉,心脏采血,分离血清,56℃灭菌,0.22μm过滤,制备加味四君子汤高、中、低剂量组含药血清,各剂量组含药血清孵育胃癌细胞SGC-7901,运用流式细胞仪检测细胞早期和晚期凋亡情况,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测肿瘤抑制基因p53,c-核蛋白类基因(c-Myc),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)mRNA的表达,运用细胞免疫荧光技术检测p53,c-Myc,Caspase-3,Bcl-2蛋白的相对表达量情况。结果:与空白组比较,加味四君子汤含药血清高剂量组细胞凋亡比率显著升高(P<0.01),且可使胃癌细胞SGC-7901早期+晚期凋亡率达到22.58%(P<0.01)。Real-time PCR结果显示加味四君子汤中剂量组能显著促进Caspase-3 mRNA表达(P<0.01),加味四君子汤高剂量组能显著上调p53及c-Myc mRNA表达量(P<0.01),加味四君子汤高剂量组显著抑制Bcl-2 mRNA表达(P<0.01)。免疫荧光结果显示加味加味四君子汤高剂量组能使c-Myc,Caspase-3,p53蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:加味四君子汤含药血清能抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进凋亡相关分子p53,c-Myc,Caspase-3的表达,发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 加味四君子汤含药血清 胃癌细胞SGC-7901 细胞凋亡 肿瘤抑制基因P53 c-核蛋白类基因(c-Myc) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3) 凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)

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白术多糖抗神经细胞缺氧性凋亡的机制研究 被引量：17

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作者 胡微煦 向勤 +3 位作者 文珠 何丹 夏晓健 胡国柱 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期84-88,共5页

目的:探讨白术多糖抗神经细胞缺氧性凋亡的机制。方法:研究分为正常对照组、凋亡阳性组、白术多糖0.025g/L组、白术多糖0.05g/L组、白术多糖0.1g/L组、白术多糖0.25g/L组。采用"Neurobasal+B27"体外神经细胞无血清培养,免疫... 目的:探讨白术多糖抗神经细胞缺氧性凋亡的机制。方法:研究分为正常对照组、凋亡阳性组、白术多糖0.025g/L组、白术多糖0.05g/L组、白术多糖0.1g/L组、白术多糖0.25g/L组。采用"Neurobasal+B27"体外神经细胞无血清培养,免疫细胞化学鉴定神经细胞,MTT测定药物毒性,Rh-123染色流式细胞仪检测线粒体损伤,RT-PCR及免疫细胞化学测定Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表达。结果:与凋亡阳性组比较,白术多糖在0.025g/L^0.1g/L降低缺氧的神经细胞线粒体损伤,0.025g/L^0.05g/L下调缺氧的神经细胞Caspase-3 mRNA的表达,0.05g/L下调缺氧的神经细胞Bax mRNA的表达,0.025g/L^0.25g/L下调缺氧的神经细胞Caspase-3和Bax蛋白表达,0.025g/L^0.25g/L上调缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白表达,0.025g/L^0.05g/L提高Bcl-2/Bax mRNA及0.025g/L^0.1g/L提高Bcl-2/Bax蛋白的比例(P<0.05)。结论:白术多糖在一定发范围内能有效地抑制神经细胞缺氧性凋亡,其机理是降低凋亡基因及蛋白产生,上调抗凋亡蛋白产生,提高Bcl-2/Bax比例。 展开更多

关键词 白术多糖 神经细胞 缺氧 凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3) B淋巴细胞瘤-2基因相关蛋白(BCL-2-asso-ciated X protein Bax) B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)x

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安寐丹通过线粒体介导的海马神经细胞凋亡改善睡眠剥夺模型大鼠的学习记忆水平 被引量：16

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作者 谢光璟 徐波 +1 位作者 黄攀攀 王平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期38-44,共7页

目的:探讨安寐丹通过线粒体介导海马神经细胞凋亡对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响。方法:48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、安寐丹低、中、高剂量(4.86,9.72,19.44 g·kg^-1·d^-1)组和艾司唑仑组(0.1 mg·kg^-1·d^-1)... 目的:探讨安寐丹通过线粒体介导海马神经细胞凋亡对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响。方法:48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、安寐丹低、中、高剂量(4.86,9.72,19.44 g·kg^-1·d^-1)组和艾司唑仑组(0.1 mg·kg^-1·d^-1),每组8只。通过自制睡眠剥夺箱进行持续性睡眠剥夺14 d。以Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测海马组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)的含量。透射电镜观察海马区神经元线粒体形态结构,免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测海马区细胞色素C(Cyt-C),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白及Bcl-2,Bax mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组上平台潜伏期、游泳总路程延长,初次到达平台时间延长,跨越平台次数减少,目标象限时间显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白及mRNA水平下降,Bax蛋白及mRNA水平显著升高(P<0.01),线粒体结构破坏,嵴断裂,肿胀变形;Cyt-C,Caspase-3蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,安寐丹低、中、高剂量组明显改善SD大鼠空间探索和定位航行水平(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白及mRNA水平升高,Bax蛋白及mRNA水平明显降低(P<0.05,P<0.01);线粒体损伤改善,水肿减轻;Cyt-C,Caspase-3蛋白及mRNA表达显著下降(P<0.01)。结论:安寐丹能够改善睡眠剥夺大鼠学习记忆水平,其作用与线粒体介导的海马神经细胞凋亡,降低Cyt-C,Caspase-3等蛋白表达相关。 展开更多

关键词 安寐丹 睡眠剥夺 细胞凋亡 学习记忆 细胞色素C(Cyt-C) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)

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抵挡汤对糖尿病大血管病变小鼠主动脉NLRP3炎症小体活化炎症级联反应的作用机制 被引量：15

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作者 傅红敏 任秋月 常柏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1-8,共8页

目的:观察糖尿病大血管病变进程,探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响。方法:选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大血管病变模型,并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂... 目的:观察糖尿病大血管病变进程,探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响。方法:选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大血管病变模型,并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂量组和辛伐他汀组;并以同批次同周龄ApoE-/-小鼠仅高脂喂养,作为ApoE-/-组;取相同遗传背景的C57BL/6小鼠常规喂养作为正常组。分别于实验第8,20周取材。观察不同时期各组小鼠主动脉病理特点及斑块面积占比,比较各组小鼠血糖、血脂、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉NOD样受体3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-1β(IL^(-1)β),白细胞介素-18(IL^(-1)8),白细胞介素-1α(IL^(-1)α),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎症因子。结果:与正常组比较,ApoE-/-组、模型组内斑块占比显著增高(P<0.01),与模型组比较,各给药组能明显降低血管内斑块占比(P<0.05);与正常组比较,ApoE-/-组、模型组主动脉NLRP3,Caspase-1蛋白表达水平显著升高(P<0.01),血清中IL^(-1)β,IL^(-1)8,IL^(-1)α,TNF-α显著升高(P<0.01),与模型组比较,各给药组能够明显抑制主动脉NLRP3,Caspase-1蛋白的表达,降低血清中IL^(-1)β,IL^(-1)8,IL^(-1)α,TNF-α等炎症因子水平(P<0.05),且以中剂量组抑制作用最强(P<0.05)。结论:抵挡汤能独立于降糖、降脂之外改善糖尿病大血管病变,这可能与下调NLRP3,Caspase-1蛋白表达,减轻炎症级联反应相关。 展开更多

关键词 糖尿病 大血管病变 NOD样受体(3NLRP3)炎症小体 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-(1caspase-1)

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葶苈大枣泻肺汤通过Caspase-1诱导A549细胞焦亡与凋亡的机制 被引量：11

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作者 焦建玮 白玉杰 +2 位作者 白玉莲 张艳景 焦平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期54-61,共8页

目的:探讨葶苈大枣泻肺汤诱导A549细胞焦亡和凋亡的机制。方法:将A549细胞随机分为空白组、葶苈大枣泻肺汤低、中、高质量浓度组(中药低、中、高质量浓度组),中药低、中、高质量浓度组分别以葶苈大枣泻肺汤20、40、60 mg·L^(-1)处... 目的:探讨葶苈大枣泻肺汤诱导A549细胞焦亡和凋亡的机制。方法:将A549细胞随机分为空白组、葶苈大枣泻肺汤低、中、高质量浓度组(中药低、中、高质量浓度组),中药低、中、高质量浓度组分别以葶苈大枣泻肺汤20、40、60 mg·L^(-1)处理,空白组以等体积培养液处理。药物作用48 h后,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、细胞凋亡抑制因子(Survivin)蛋白及核转录因子-κB(NF-κB)通路蛋白相对表达量,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液肿瘤坏死因子-β(TNF-β)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果:与空白组比较,中药低、中、高质量浓度组细胞划痕愈合率明显降低,细胞凋亡率明显增加,Survivin蛋白相对表达量明显降低,Caspase-1、GSDMD、NLRP3相对表达量明显增加,ROS和NF-κB磷酸化水平明显上升,细胞上清液TNF-β和IL-1β含量明显增加(P<0.05);与中药低质量浓度组比较,中药中、高质量浓度组细胞划痕愈合率明显降低,细胞凋亡率明显增加,Survivin蛋白相对表达量明显降低,Caspase-1、GSDMD、NLRP3相对表达量明显增加,ROS和NF-κB磷酸化水平明显上升,细胞上清液TNF-β和IL-1β含量明显增加(P<0.05);与中药中质量浓度组比较,中药高质量浓度组细胞划痕愈合率明显降低,细胞凋亡率明显增加,Survivin蛋白相对表达量明显降低,Caspase-1、GSDMD、NLRP3相对表达量明显增加,ROS和NF-κB磷酸化水平明显上升,细胞上清液TNF-β和IL-1β含量明显增加(P<0.05)。结论:葶苈大枣泻肺汤可提高NLRP3蛋白表达,抑制Survivin蛋白表达,促进A549细胞凋亡;同时,可激活NF-κB通路和ROS系统,上调细胞焦亡因子Caspase-1,GSDMD的表达,介导A549细胞焦亡。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 葶苈大枣泻肺汤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1) 细胞焦亡 细胞凋亡

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电针对颅脑损伤大鼠神经功能及凋亡相关蛋白Cyt-C、Caspase-9表达的影响 被引量：8

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作者 谷婷 王鑫 +6 位作者 杨欢 折雪妮 陈坤黄寓 吴涛 杨琪 杨强 王瑞辉 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期749-755,共7页

目的:观察电针对颅脑损伤(TBI)大鼠神经功能、脑组织病理形态、细胞凋亡水平及凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)表达的影响,探索电针治疗TBI的可能机制。方法:将70只清洁级SD大鼠随机分为空白组(8只... 目的:观察电针对颅脑损伤(TBI)大鼠神经功能、脑组织病理形态、细胞凋亡水平及凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)表达的影响,探索电针治疗TBI的可能机制。方法:将70只清洁级SD大鼠随机分为空白组(8只)、假手术组(8只)、模型组(27只)和电针组(27只)。模型组及电针组再按干预3、7、14 d分为3个亚组,每亚组9只,并采用改良式Feeney自由落体法制备大鼠TBI模型;假手术组仅暴露颅骨、钻孔,不行自由落体打击。于造模后1 d对电针组大鼠行电针干预,穴取"百会""水沟"及患侧"内关""足三里",断续波,频率2 Hz,每天1次,每次10 min,分别干预3、7、14 d。分别于干预3、7、14 d采用改良神经功能缺损量表(m NSS)评定各组大鼠神经功能损伤程度;HE染色法和尼氏染色法观察脑组织病理形态改变;TUNEL法观察脑组织细胞凋亡水平;免疫组织化学法、Western blot法检测脑组织Cyt-C、Caspase-9蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠干预3、7、14d时m NSS评分均明显升高(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠干预3、7、14d时mNSS评分均降低(P<0.05)。干预3d时模型组及电针组大鼠脑损伤区域均可见组织坏死,核破碎、固缩及明显空泡,尼氏体减少、分布松散;干预7、14d时模型组及电针组均可见新生结缔组织填充和正常细胞,尼氏体增加,且电针组整体修复情况、尼氏体数量优于模型组。与假手术组比较,模型组大鼠干预3、7、14 d时脑组织凋亡细胞数均明显增多(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠干预3、7、14 d时脑组织凋亡细胞数均减少(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠干预3、7、14 d时损伤脑组织Cyt-C、Caspase-9蛋白表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠干预3、7、14 d时损伤脑组织Cyt-C、Caspase-9蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:电针可明显改善TBI模型大鼠神经功能损伤� 展开更多

关键词 颅脑损伤 电针 神经功能 细胞凋亡 细胞色素C(Cyt-C) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)

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温经汤加味对EM肾虚血瘀证大鼠局部微环境Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin的影响 被引量：6

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作者 崔轶凡 孙瑞英 +1 位作者 王志平 曹娟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期42-51,共10页

目的:探讨温经汤加味对子宫内膜异位症(EM)肾虚血瘀证大鼠的干预作用及其机制研究。方法:SPF级雌性未孕大鼠随机选出正常组,其余大鼠采用"冰水浸泡+皮下注射盐酸肾上腺素法"进行肾虚血瘀证造模,造模结束后,仅开腹不进行内膜... 目的:探讨温经汤加味对子宫内膜异位症(EM)肾虚血瘀证大鼠的干预作用及其机制研究。方法:SPF级雌性未孕大鼠随机选出正常组,其余大鼠采用"冰水浸泡+皮下注射盐酸肾上腺素法"进行肾虚血瘀证造模,造模结束后,仅开腹不进行内膜移植大鼠,设为假手术组,其余大鼠以自体内膜移植法进行EM造模,EM肾虚血瘀证造模成功大鼠随机分为阳性药组及温经汤加味(中药)低、中、高剂量组。中药低、中、高剂量组分别以5,10,20 g·kg^(-1)灌胃,每日给药1次,连续4周;阳性药选取达那唑63 mg·kg^(-1)灌胃,每日给药1次,连续4周。4周后,取各组大鼠内膜组织(异位、在位)进行苏木素-伊红(HE)染色,观察其组织病理学变化;免疫组化(IHC)法、蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8),基质金属蛋白酶-9(MMP-9),上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)及神经钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin mRNA表达。结果:经IHC法和Western blot法,与假手术组比较,EM肾虚血瘀证模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.01),Caspase-8,E-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,达那唑组、中药低、中、高剂量组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白明显降低(P<0.05,P<0.01),Caspase-8,E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。经Real-time PCR法检测,与假手术组大鼠比较,模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin mRNA表达显著升高(P<0.01),Caspase-8,E-cadherin mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组大鼠在位内膜比较,达那唑组、中药高、中剂量组在位、异位内膜组织MMP-9,N-cadherin mRNA表达明显降低,Caspase-8,E-cadherin mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:温经汤加味能够通过调节Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin等因子水平异� 展开更多

关键词 子宫内膜异位症(EM) 肾虚血瘀证 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8) 基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin) 神经钙黏蛋白(N-cadherin) 温经汤加味

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棕榈酸对转化生长因子β1刺激的肝星状细胞增殖、凋亡及Caspase-12蛋白表达的影响 被引量：5

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作者 李雅楠 闫宇 +2 位作者 王铭 刘芳 肖永红 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第30期15-20,共6页

目的研究棕榈酸对转化生长因子β_1(TGF-β_1)刺激的肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)蛋白表达的影响。方法将液氮保存下的肝星状细胞株,于37℃、5%CO2孵箱中进行复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:... 目的研究棕榈酸对转化生长因子β_1(TGF-β_1)刺激的肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)蛋白表达的影响。方法将液氮保存下的肝星状细胞株,于37℃、5%CO2孵箱中进行复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白组、TGF-β_1(5 ng/ml)组、TGF-β_1+低、中、高剂量棕榈酸组,即5 ng/ml TGF-β1刺激24 h,再分别加入50、100及200μmol/L不同剂量棕榈酸作用24 h后,用MTT比色法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡率、免疫细胞化学法测定Caspase-12蛋白表达。结果不同浓度棕榈酸均能抑制细胞增殖(P<0.05),且随着剂量的增加,细胞相对增殖率(RGR)降低,低、中、高剂量组分别为76.56%、60.93%和34.37%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。透视电镜发现,不同剂量棕榈酸组出现细胞核变小,细胞出现大量线粒体空泡,染色质边集等典型凋亡表现。空白组、TGF-β_1组、TGF-β_1+低、中、高剂量棕榈酸组凋亡率分别为(3.32±0.29)%、(1.70±0.14)%、(7.26±0.46)%、(11.24±0.52)%及(15.55±0.31)%,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);随着棕榈酸剂量的增加,细胞Caspase-12蛋白表达增加(P<0.05)。结论棕榈酸能抑制细胞增殖,增加Caspase-12蛋白表达,促进HSC凋亡。 展开更多

关键词 肝星状细胞 棕榈酸 细胞增殖 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)

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清肺通络方调控Caspase-1对肺炎支原体诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B焦亡的干预作用 被引量：4

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作者 姜永红 陈一柳 +1 位作者 樊秋月 刘旭华 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第2期450-460,共11页

【目的】探讨清肺通络方(桑白皮、地骨皮等)对肺炎支原体(MP)诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路介导的细胞焦亡的干预作用。【方法】建立MP感染的BEAS-2B细胞模型,分别给予清肺通络... 【目的】探讨清肺通络方(桑白皮、地骨皮等)对肺炎支原体(MP)诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路介导的细胞焦亡的干预作用。【方法】建立MP感染的BEAS-2B细胞模型,分别给予清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预。制备过表达Caspase-1质粒,转染MP感染的BEAS-2B细胞,给予清肺通络方干预。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活性,Western Blot法检测细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、消皮素D-N端片段(GSDMD-N)的表达水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平,生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)和Na+-K+-ATP酶活性,流式细胞术检测细胞焦亡。【结果】MP感染BEAS-2B细胞增殖活性明显降低,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平均明显升高,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平也显著升高,LDH活性明显升高,Na+-K+-ATP酶活性明显下降,细胞焦亡率显著上升。应用清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预MP感染BEAS-2B细胞,及应用清肺通络方干预过表达Caspase-1质粒转染的MP感染BEAS-2B细胞后,细胞增殖活性均升高,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平降低,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平均显著降低,LDH活性明显降低、Na+-K+-ATP酶活性明显上升,细胞焦亡率明显下降。【结论】MP感染BEAS-2B细胞后,激活Caspase-1/GSDMD通路,促进炎症因子释放,使细胞结构受损,最终导致细胞焦亡。清肺通络方可以抑制Caspase-1/GSDMD通路的激活,减轻炎症反应,减轻细胞损伤,抑制细胞焦亡。 展开更多

关键词 清肺通络方 肺炎支原体 细胞焦亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1) BEAS-2B细胞

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