期刊文献+
共找到70篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
鹅胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其mRNA在组织中的表达量变化 被引量:12
1
作者 肖翠红 李馨 +2 位作者 佟春玉 颜国华 刘国君 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期216-219,共4页
利用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆了黑龙江籽鹅IGF-Ⅰ基因,并检测了生长期间该基因mRNA在各组织中的表达量变化。结果表明,鹅IGF-Ⅰ基因与鸡、鸭IGF-Ⅰ基因的同源性分别为97.6%、99.3%;鹅肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达水平在30日龄... 利用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆了黑龙江籽鹅IGF-Ⅰ基因,并检测了生长期间该基因mRNA在各组织中的表达量变化。结果表明,鹅IGF-Ⅰ基因与鸡、鸭IGF-Ⅰ基因的同源性分别为97.6%、99.3%;鹅肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达水平在30日龄和60日龄较高,而30日龄的表达量极显著高于22、28日龄鹅胚和1日龄籽鹅,显著高于10日龄雏鹅;30日龄雏鹅IGF-ⅠmRNA在肝、卵巢、胸肌、肺、脾、腿肌、垂体、肌胃、肾、心等组织中都有表达,其中肝、卵巢、胸肌、肺的表达量较高。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-Ⅰ 定量反转录聚合酶链反应
下载PDF
肝型脂肪酸结合蛋白在大鼠非酒精性脂肪肝中的动态表达 被引量:6
2
作者 赵和平 梁利群 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期64-66,共3页
目的:观察肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)在大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型中的动态表达,探讨L-FABP在大鼠NAFLD所起的作用。方法:选取Wistar大鼠40只,随机分为对照组和模型组。其中对照组给予普通饲料,模型组给予高脂饲料。分别于4,8,12... 目的:观察肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)在大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型中的动态表达,探讨L-FABP在大鼠NAFLD所起的作用。方法:选取Wistar大鼠40只,随机分为对照组和模型组。其中对照组给予普通饲料,模型组给予高脂饲料。分别于4,8,12周处死。测血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)。并测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算ISI。HE染色观察肝脏脂肪组织病理变化。并应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定大鼠的肝脏组织中L-FABPmRNA的表达。结果:4周、8周1、2周模型组大鼠肝脏中L-FABPmRNA表达增强(P<0.01),且随着造模时间的延长,L-FABP的表达逐渐增高,与对照组差异显著(P<0.01)。模型组血清ALT、AST、TC、TG的水平均较对照组显著增高(P<0.01),而ISI明显降低(P<0.01)。结论:持续12周的高脂饮食可以成功复制大鼠NAFLD模型,且随着造模时间的延长可引起L-FABP表达逐渐增强。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 肝型脂肪酸结合蛋白 定量反转录聚合酶链反应
原文传递
急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达 被引量:2
3
作者 潘阳琼 刘延方 +1 位作者 孙慧 王桂叶 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1075-1078,共4页
背景:据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。目的:观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。方法:50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18... 背景:据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。目的:观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。方法:50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2~4mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。结果与结论:50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组(P<0.05),急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病(P<0.05)。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 骨髓 TAP63 表达 定量反转录聚合酶链反应
下载PDF
氟暴露患者外周血中MCM3的表达及肝肾功能变化
4
作者 张亚楼 赵阳 +3 位作者 唐莉 吴起清 白生宾 钟近洁 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第37期6682-6688,共7页
背景:前期研究发现MCM3与氟中毒相关,但其在氟中毒早期暴露者中的表达情况尚不清楚。目的:分析氟暴露患者及对照人群外周血中MCM3 mRNA的表达量。方法:选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合... 背景:前期研究发现MCM3与氟中毒相关,但其在氟中毒早期暴露者中的表达情况尚不清楚。目的:分析氟暴露患者及对照人群外周血中MCM3 mRNA的表达量。方法:选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合荧光法实时定量PCR检测外周血单个核细胞中MCM3 mRNA的表达,同时测定两组肝肾功能指标。结果与结论:暴露组及非暴露组MCM3 mRNA表达量分别为0.573 60±0.102 59、0.550 0±0.171 81,两组差异无显著性意义(P>0.05)。所测的肝肾功能指标在两组中差异无显著性意义。结果显示轻度氟暴露对患者外周血单个核细胞中MCM3 mRNA表达无显著影响。氟对暴露者肝、肾功能的影响需要选取更多的指标综合分析。 展开更多
关键词 组织构建 组织构建临床实践 MCM3基因 定量反转录聚合酶链反应 肝功能 肾功能 国家自然科学基金
下载PDF
地塞米松对成骨细胞中mac25基因表达的调节
5
作者 蔡马 张宝 姜立 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第26期124-125,共2页
目的:探讨糖皮质激素地塞米松在骨代谢过程中对成骨细胞mac25基因表达的产物胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1的调节作用。方法:实验于2004-01/09在仲恺农业技术学院生理生化教研室实验室完成。选择新生24h的SD大鼠8只,雌雄各半,麻醉... 目的:探讨糖皮质激素地塞米松在骨代谢过程中对成骨细胞mac25基因表达的产物胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1的调节作用。方法:实验于2004-01/09在仲恺农业技术学院生理生化教研室实验室完成。选择新生24h的SD大鼠8只,雌雄各半,麻醉后切取颅盖骨,剥离骨膜后,用磷酸盐缓冲液漂洗后剪成1mm×1mm×1mm大小的骨块,体外培养成骨细胞,1周后传代接种于96孔培养板上。将培养的成骨细胞分为两组,实验组成骨细胞与地塞米松共同培养,地塞米松在培养液中的浓度为10-7mol/L;对照组成骨细胞则应用Dulbecco’s的改良的Eagle’s培养基常规培养。培养2周后提取总RNA进行半定量反转录聚合酶链反应分析及琼脂糖凝胶电泳,比较两组成骨细胞中mac25mRNA的表达水平。结果:实验组成骨细胞中mac25mRNA的表达水平显著高于对照组犤2.31±0.12,1.16±0.11,(t=2.671,P<0.01)犦。结论:糖皮质激素能在转录水平上增强成骨细胞中mac25/胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1的表达,骨微环境中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1水平的升高可阻断胰岛素样生长因子Ⅰ、胰岛素样生长因子Ⅱ与胰岛素的作用,这可能是糖皮质激素抑制骨形成的原因之一。 展开更多
关键词 地塞米松/治疗应用 成骨细胞 基因表达 地塞米松 胰岛素样生长因子结合蛋白 调节作 定量反转录聚合酶链反应 胰岛素样生长因子Ⅰ 胰岛素样生长因子Ⅱ 糖皮质激素
下载PDF
+G_Z重复暴露对大鼠脑组织c-fos、c-jun和神经生长因子基因表达的影响
6
作者 蔡庆 刘红巾 +1 位作者 陈友纯 朱美财 《空军总医院学报》 1999年第2期75-78,共4页
目的:为了解+ GZ 重复暴露后大鼠脑组织cfos、cjun 和神经生长因子(NGF) 基因表达的变化,探讨它们在+ GZ 所致脑损伤中的作用和意义。方法:用半定量反转录聚合酶链反应(RTPCR) 检测方法检测+ GZ... 目的:为了解+ GZ 重复暴露后大鼠脑组织cfos、cjun 和神经生长因子(NGF) 基因表达的变化,探讨它们在+ GZ 所致脑损伤中的作用和意义。方法:用半定量反转录聚合酶链反应(RTPCR) 检测方法检测+ GZ 重复暴露后大鼠脑组织cfos、cjun 和NGF m RNA 表达水平。结果:cfos 和cjun 在+ GZ 重复暴露后30 min m RNA 表达明显升高,6h 和24h 降至正常;NGF 在30 min 和6 h 表达均明显升高,24 h 恢复正常。结论:表明+ GZ 重复暴露可诱导大鼠脑组织cfos、cjun 和NGF m RNA 的表达,提示它们的表达增加可能在+ GZ 所致脑损伤中起病理或保护作用。 展开更多
关键词 脑组织 加速 C-FOS C-JUN 神经生长因子 基因表达 定量反转录聚合酶链反应
下载PDF
耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的耐药机制研究 被引量:19
7
作者 季萍 朱震宏 张朝霞 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1061-1063,共3页
目的探讨新疆地区临床分离的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶、外排泵Mex AB-oprM和外膜蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗菌药物耐药性之间的关系。方法聚合酶链反应(PCR)和测序法分别检测1~4组铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶;RT-... 目的探讨新疆地区临床分离的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶、外排泵Mex AB-oprM和外膜蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗菌药物耐药性之间的关系。方法聚合酶链反应(PCR)和测序法分别检测1~4组铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶;RT-PCR检测1、2、4组铜绿假单胞菌外排泵Mex AB-oprM和孔蛋白OprD2的表达水平。结果含亚胺培南耐药和美罗培南耐药组均有≥42.9%检出亚胺培南(IMP)、VIM金属酶基因型;OprD2显著低于表达在亚胺培南与美罗培南同时耐药组(87.5%),高于亚胺培南与美罗培南同时敏感组(20.0%),差异有统计学意义;Mex AB-oprM在各组中分别有60.0%、57.1%、37.5%的高表达,差异无统计学意义。结论外膜的低通透性、金属β-内酰胺酶的水解和主动外排泵过度表达,三者相互协同作用是该地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的主要机制。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 金属Β-内酰胺 外排泵 外膜孔蛋白 实时荧光定量反转录聚合酶链反应
原文传递
宫颈癌及癌前病变组织中microRNAs的差异表达 被引量:12
8
作者 曾康康 莫祥兰 +1 位作者 刘斐 胡晓霞 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期789-793,共5页
目的寻找与宫颈癌及宫颈癌前病变相关的microRNA。方法利用miRNA芯片,筛查宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中差异表达的miRNA,并用实时定量RT-PCR在60份宫颈组织标本中对4个miRNA进行验证。利用生物信息学对部分差异表达的mi... 目的寻找与宫颈癌及宫颈癌前病变相关的microRNA。方法利用miRNA芯片,筛查宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中差异表达的miRNA,并用实时定量RT-PCR在60份宫颈组织标本中对4个miRNA进行验证。利用生物信息学对部分差异表达的miRNA的靶基因进行功能分析。结果与正常宫颈组织比较,宫颈癌及高级别宫颈病变(HSIL)中存差异表达的miRNAs,其中在宫颈癌中下调最明显的是miR-218(下调倍数为0.175),上调最明显的是miR-21(上调倍数为5.68)。实时定量RT-PCR验证结果与miRNA芯片结果基本一致。功能分析显示预测的miR-218及miR-21的靶基因与肿瘤的生长、侵袭转移有关。结论宫颈癌及癌前病变中存在异常表达的miRNA,它们在宫颈癌发生过程中可能起癌基因或抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 宫颈上皮内瘤变 MICRORNA 微阵列芯片技术 实时定量反转录聚合酶链反应
下载PDF
猪脑心肌炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:11
9
作者 施开创 陈宏备 +4 位作者 覃芳芸 李向涛 胡杰 郑喜邦 李军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期928-932,共5页
为了建立猪脑心肌炎病毒(EMCV)的检测方法,根据GenBank中EMCV 3D基因的保守序列设计并合成1对引物和1条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了该病毒的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。该方法线性关系好,以重组质粒标准品构建的标准曲线... 为了建立猪脑心肌炎病毒(EMCV)的检测方法,根据GenBank中EMCV 3D基因的保守序列设计并合成1对引物和1条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了该病毒的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。该方法线性关系好,以重组质粒标准品构建的标准曲线的相关系数达到0.998;敏感性高,检测下限为10copies/μL,比普通PCR敏感100倍;特异性强,只有EMCV呈阳性,而与猪口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、BHK-21正常细胞均无交叉反应;重复性好,组内与组间的变异系数均小于1.5%。应用所建立的检测方法,对猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠的脑、心、脾中的病毒载量进行了检测,同时对临床采集的153份可疑病料进行了检测。结果表明,本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于EMCV的检测及定量分析。 展开更多
关键词 脑心肌炎病毒 荧光定量反转录聚合酶链反应 TAQMAN探针
原文传递
产AmpC酶铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究 被引量:12
10
作者 李小燕 吴爱武 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第6期423-428,共6页
目的研究产AmpC酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的分子机制。方法2003—2007年从临床标本中分离到铜绿假单胞菌220株,采用三维试验筛选产β内酰胺酶(包括AmpC酶)的铜绿假单胞菌,应用多重PCR检测产AmpC酶的铜绿假单胞菌质粒携带的AmpC耐... 目的研究产AmpC酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的分子机制。方法2003—2007年从临床标本中分离到铜绿假单胞菌220株,采用三维试验筛选产β内酰胺酶(包括AmpC酶)的铜绿假单胞菌,应用多重PCR检测产AmpC酶的铜绿假单胞菌质粒携带的AmpC耐药基因,应用荧光定量RT-PCR的方法检测染色体AmpC酶基因和oprD2基因的表达情况。结果共检出40株产β内酰胺酶的菌株,其中产AmpC酶、ESBLs、金属酶(MBL)和未知酶型铜绿假单胞菌的构成比分别是62.5%(25/40)、20%(8/40)、7.5%(3/40)和10%(4/40)。25株产AmpC酶菌株均有不同程度AmpC酶基因表达量升高,其中,仅1株细菌携带DHA质粒型AmpC酶基因,12株菌oprD2基因表达量减低,这些菌株均对亚胺培南耐药,13株菌oprD2基因表达量正常,其中仅5株菌对亚胺培南耐药;7株菌(占产AmpC酶菌株的28%,不产金属酶)的酶粗提物能微弱水解IPM,这7株菌AmpC酶基因的表达量均有明显升高,其中5株菌同时伴有oprD2基因表达量降低。结论铜绿假单胞菌产生的AmpC酶可微弱水解亚胺培南,且其水解亚胺培南可能与AmpC酶产生量有一定关系;产AmpC酶铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因可能是细菌AmpC酶表达量增加和oprD2表达量减低两者共同作用的结果。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 AMPC OprD2蛋白 荧光定量反转录聚合酶链反应
下载PDF
碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵和外膜孔蛋白表达水平的研究 被引量:12
11
作者 李红玲 廖康 +2 位作者 陈亚岗 俞云松 李兰娟 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第6期414-418,共5页
目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株,琼脂稀释法测定该菌加入外... 目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株,琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙(CCCP)前后对亚胺培南和美罗培南的MIC;RT-PCR检测外排泵MexAB-OprM和孔蛋白OprD2的表达水平;十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western-blot)检测外膜孔蛋白OprD2。结果收集到的655株铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南敏感率分别为52.5%和59.2%,加入CCCP前后其对亚胺培南和美罗培南的敏感率无明显变化;52.0%(51/98)美罗培南耐药株MexAB-OprM显著高表达(P<0.05),43.7%(59/135)亚胺培南耐药株OprD2显著低表达(P<0.05),14.8%(20/135)亚胺培南耐药株OprD2表达缺失;SDS-PAGE和Western-blot显示与标准菌株PAO1相比,OprD2表达水平减低菌株ZZ20显影减低,表达缺失菌株BJ1不显影。结论MexAB-OprM表达升高和OprD2表达降低甚至缺失是我国铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南耐药的重要机制。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 外排泵 外膜孔蛋白 羟基氰氯苯腙 实时荧光定量反转录聚合酶链反应
下载PDF
血浆病毒载量检测在肾综合征出血热诊断中的作用研究 被引量:10
12
作者 陈耀锋 王雅格 《国际病毒学杂志》 2015年第2期108-111,共4页
目的 探讨血浆病毒载量检测在肾病综合症出血热诊断中的临床价值,并对疾病进展、血浆病毒载量和cGDNA水平的相关性进行分析,为该病诊断及治疗提供理论依据.方法 选取西安医学院第二附属医院门诊2012年2月-2014年2月收治的41例肾综合征... 目的 探讨血浆病毒载量检测在肾病综合症出血热诊断中的临床价值,并对疾病进展、血浆病毒载量和cGDNA水平的相关性进行分析,为该病诊断及治疗提供理论依据.方法 选取西安医学院第二附属医院门诊2012年2月-2014年2月收治的41例肾综合征出血热患者进行研究,同时选取同期健康体检者40例作为对照,通过实时定量RT-PCR的方法来检测研究对象血浆中病毒载量,采用荧光染色法检测标本中cGDNA水平,分析其与患者的血浆病毒载量之间的相关性.结果 疾病早期病毒载量和血浆cf-DNA均有升高,当病程进展到多尿期时又有所下降直至正常水平.疾病早期重型或危重型患者血浆病毒载量和cf-DNA水平高于轻型和中型患者(P<0.05),且患者血浆cf-DNA与血浆病毒载量呈正相关(r=0.76,P<0.05).结论 血浆cf-DNA水平和病毒载量可用来预测疾病进展及预后. 展开更多
关键词 病毒载量 肾综合征出血热 实时定量反转录聚合酶链反应 相关性
原文传递
沂蒙黑山羊发情周期不同阶段卵巢中FSHR和LHR基因表达规律的研究 被引量:8
13
作者 李泰云 韩小康 +3 位作者 丁彦红 王树迎 王丽 石中强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期954-959,共6页
选取健康未孕的成年沂蒙黑山羊,按发情周期(间情期、发情前期、发情期、发情后期)宰杀取卵巢,采用实时荧光定量差异显示PCR(real-time qRT-PCR)技术,以GAPDH为持家基因,对处于发情周期不同阶段的沂蒙黑山羊卵巢组织内的卵泡刺激素受体(F... 选取健康未孕的成年沂蒙黑山羊,按发情周期(间情期、发情前期、发情期、发情后期)宰杀取卵巢,采用实时荧光定量差异显示PCR(real-time qRT-PCR)技术,以GAPDH为持家基因,对处于发情周期不同阶段的沂蒙黑山羊卵巢组织内的卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)基因进行了mRNA水平上的相对定量分析。发现FSHR mRNA、LHR mRNA在黑山羊发情周期的卵巢中都有表达。FSHRmRNA的相对表达量依次为0.618 7±0.294 42、1.290 2±0.290 24、2.575 9±0.458 80、0.790 8±0.261 93,其中发情期最高,间情期最低,两者差异极显著(P<0.01)。LHR mRNA的相对表达量依次为2.284 0±0.146 22、0.508 9±0.0789 9、0.340 3±0.045 38、2.859 2±0.205 66,其中发情后期相对表达量最高,发情期最低,两者差异极显著(P<0.01)。结果表明,FSH、LH在黑山羊的整个发情周期中是相互作用、相互影响的。 展开更多
关键词 卵巢 卵泡刺激素受体 黄体生成素受体 荧光定量反转录聚合酶链反应 发情周期 沂蒙黑山羊
原文传递
两种实时定量RT-PCR方法检测miRNAs表达的技术分析 被引量:6
14
作者 闵自信 杜小云 +5 位作者 宁启兰 钟楠楠 郑悦雯 韩燕 吕社民 张蕊 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期258-262,共5页
目的比较两种实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测microRNAs(miRNAs)表达含量的技术差异,优化不同实验目的和条件下研究miRNAs表达的技术方法。方法取21d和42d两个时间点的SD大鼠关节软骨组织,采用Trizol法提取总RNA备用。选取... 目的比较两种实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测microRNAs(miRNAs)表达含量的技术差异,优化不同实验目的和条件下研究miRNAs表达的技术方法。方法取21d和42d两个时间点的SD大鼠关节软骨组织,采用Trizol法提取总RNA备用。选取rno-miR-15b、rno-miR-16、rno-miR-195、rno-miR-497作为研究对象,分别用茎环引物和试剂公司提供的试剂盒方法反转录总RNA,并应用实时定量PCR方法检测这些miRNAs的表达量。提取人血浆中总RNA,用上述两种RT-qPCR方法实时定量检测has-miR-16的表达量。结果两种方法检测这些miRNAs表达量,在大鼠21d和42d这两个时间点其表达量变化趋势相同,都呈现增高的趋势,这与我们前期Solexa测序结果相同。在血浆中的结果显示,其中茎环引物反转录方法灵敏度相对较高。结论茎环引物法在少量几个重要的miRNAs检测中具有优势,而试剂盒方法适用于大量miRNAs的筛查。 展开更多
关键词 MIRNAS 茎环引物 实时定量反转录聚合酶链反应 软骨 血浆
下载PDF
尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)在舌鳞癌中的表达及意义 被引量:6
15
作者 邬腊梅 方征宇 +4 位作者 杨宏宇 苏铭扬 张珊珊 孟玉生 王锋 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2013年第6期491-494,共4页
目的:探讨尿路上皮癌胚抗原Ⅰ(UCA1)mRNA在舌鳞状细胞癌中的表达及其与舌鳞癌病理分级和临床分期的关系。方法:采用SYBR Green II实时荧光定量反转录聚合酶链反应实验方法,从6种基因中筛选出在40对舌鳞癌组织及配对正常舌组织样本中表... 目的:探讨尿路上皮癌胚抗原Ⅰ(UCA1)mRNA在舌鳞状细胞癌中的表达及其与舌鳞癌病理分级和临床分期的关系。方法:采用SYBR Green II实时荧光定量反转录聚合酶链反应实验方法,从6种基因中筛选出在40对舌鳞癌组织及配对正常舌组织样本中表达有明显差异的基因UCA1,扩大样本量至93例,检测UCA1 mRNA在两者中的表达。应用SPSS13.0软件包分析UCA1 mRNA表达量与舌鳞癌患者临床病理学特征的关系。结果:UCA1 mRNA在93例患者的肿瘤组织中平均表达量为0.7213,在正常舌组织中为0.2756,表达量有显著差异(P<0.001);UCA1 mRNA的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),与舌鳞癌的病理分级和临床分期有显著相关性(P<0.05)。结论:UCA1 mRNA高表达与舌鳞状细胞癌密切相关,对舌鳞癌的诊断、判断病理分级和临床分期具有重要意义。 展开更多
关键词 舌鳞状细胞癌 UCA1 肿瘤分子标志物 实时荧光定量反转录聚合酶链反应
下载PDF
扩展莫尼茨绦虫烯醇化酶基因的克隆及其组织表达差异分析 被引量:4
16
作者 王利晓 薄新文 +1 位作者 张银亮 康立超 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期572-578,共7页
为了探索烯醇化酶基因在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的作用,通过基因质粒文库克隆分析了扩展莫尼茨绦虫烯醇化酶基因mRNA的全长序列,同时应用SYBRGreenreal-timeRT-PCR方法检测了该基因在虫体4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节的... 为了探索烯醇化酶基因在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的作用,通过基因质粒文库克隆分析了扩展莫尼茨绦虫烯醇化酶基因mRNA的全长序列,同时应用SYBRGreenreal-timeRT-PCR方法检测了该基因在虫体4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节的组织表达差异。序列分析结果表明,该基因全长1691bp,编码445个氨基酸,蛋白的理论分子质量为48.94ku,等电点为5.56,是含有螺旋和不规则卷曲较多的疏水性蛋白。相似性分析结果显示,其基因表达产物与肝片吸虫氨基酸的相似性达74.8%,属于磷酸丙糖异构酶磷酸盐结合蛋白家族。Real-timeRT-PCR结果表明烯醇化酶基因在虫体各发育阶段的表达丰度差异显著,其从高到低依次为成节、幼节、孕节和头节。据此推测该烯醇化酶基因在虫体寄生过程中对细胞内物质的代谢与能量的产生起关键作用。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 烯醇化基因 序列分析 实时定量反转录聚合酶链反应
原文传递
WT1基因在急性白血病患儿中的表达及其临床意义 被引量:4
17
作者 王旭莉 柴忆欢 +1 位作者 胡绍燕 岑建农 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期167-169,共3页
目的探讨WT1基因在急性白血病患儿中的表达及其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR方法检测198例急性白血病患儿(男124例,女74例;年龄1~13岁)WT1基因的表达水平。应用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果急性白血病患儿WT1基因的中位数... 目的探讨WT1基因在急性白血病患儿中的表达及其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR方法检测198例急性白血病患儿(男124例,女74例;年龄1~13岁)WT1基因的表达水平。应用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果急性白血病患儿WT1基因的中位数为932.99,对照组儿童为38.50,病例组显著高于对照组;ALL患儿WT1基因的中位数为195.73,AML患儿WT1基因的中位数为6 297.75,ALL患儿与急性髓性白血病(AML)患儿之间存在统计学差异(P〈0.01),且在AML患儿FAB分型中M3、M4表达水平相对较高(中位数分别为8 081.83和8 123.54);WT1基因在急性白血病初诊组及复发组患儿中表达水平较高(WT1基因中位数分别为932.99和2 840.54),而完全缓解组表达水平显著下降(WT1基因中位数为144.32);可进行临床疗效评估的97例急性白血病患儿中,第1个疗程后完全缓解组与未缓解组初诊WT1基因表达水平差异有统计学意义,其中位数分别为311.98和3 768.43;对3例复发患儿进行WT1基因表达水平动态监测,发现复发前WT1的表达水平均有上升趋势。结论WT1基因在各类急性白血病患儿骨髓中呈高表达水平,动态监测WT1基因的表达可了解急性白血病的发展,为疾病的复发提供依据。WT1基因作为一个"泛白血病"标志,可用于微小残留病的检测。 展开更多
关键词 WT1基因 白血病 急性 实时定量反转录聚合酶链反应 儿童
原文传递
胃癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白20及生存素基因检测的临床意义 被引量:3
18
作者 何清 焦洁茹 +2 位作者 魏旭倩 赵雅洁 吴方 《诊断学理论与实践》 2010年第1期74-78,共5页
目的:研究癌胚抗原(CEA)mRNA、细胞角蛋白20(CK20)mRNA及生存素(survivin)mRNA与胃癌患者诊断、转移的相关性,评估其检测的临床应用价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法联合检测79例胃癌、56例癌前病变及50例正常对... 目的:研究癌胚抗原(CEA)mRNA、细胞角蛋白20(CK20)mRNA及生存素(survivin)mRNA与胃癌患者诊断、转移的相关性,评估其检测的临床应用价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法联合检测79例胃癌、56例癌前病变及50例正常对照者外周血survivin、CEA、CK20基因的转录,并分析其与临床病理及预后关系。结果:正常对照组外周血未检测到CEA、CK20、survivin mRNA的转录,癌前病变患者survivin转录检测的阳性率为16.1%,平均拷贝数为1.6±0.8。胃癌外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录阳性率分别为48.1%、60.8%、87.3%,其阳性率和肿瘤的分期、淋巴结转移等相关。Survivin mRNA高转录者5年生存率显著低于低转录者。胃癌患者外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录的联合检测对肿瘤预后的判断具有较高的特异度和阳性似然比。结论:实时RT-PCR联合检测胃癌外周血中多个肿瘤标志物基因的表达,是一种较为理想的监测肿瘤复发、判断预后的方法。 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤标志物 实时定量反转录聚合酶链反应 转移 预后
下载PDF
微小RNA-125a在骨肉瘤组织的表达及其临床意义 被引量:3
19
作者 于雅丽 王雷鸣 +2 位作者 孔奕翼 王少华 王爱国 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期143-145,共3页
目的检测骨肉瘤组织及其癌旁组织中微小RNA(miRNA,miR)-125a基因表达差异,分析miR-125a表达水平差异与患者临床病理特征的相关性。方法收集郑州市骨科医院2014年10月至2015年12月20对骨肉瘤患者癌组织及其对应癌旁组织手术标本,提... 目的检测骨肉瘤组织及其癌旁组织中微小RNA(miRNA,miR)-125a基因表达差异,分析miR-125a表达水平差异与患者临床病理特征的相关性。方法收集郑州市骨科医院2014年10月至2015年12月20对骨肉瘤患者癌组织及其对应癌旁组织手术标本,提取20对标本总RNA,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测骨肉瘤组织及其癌旁组织标本中miR-125a mRNA表达差异,分析miR-125a表达与患者临床病理特征的相关性。结果20对配对骨肉瘤及其癌旁组织RT-qPCR检测结果显示,与癌旁组织比较,miR-125a在12例癌组织中呈低表达,占总体样本的73.33%(12/20),癌组织中miR-125a mRNA的相对表达量为(0.409 8±0.067 3)明显低于癌旁组织(0.932 7±0.081 6),差异有统计学意义(t=2.920,P=0.010),且两者之间的平均表达差异达2.28倍。临床资料分析结果显示,miR-125a在骨肉瘤组织中的表达差异与骨肉瘤患者病理分期(χ2=23.375,P=0.000)、是否规律化疗(χ2=4.444,P=0.035)及有无肺转移(χ2=4.469,P=0.043)关系密切;与年龄、性别无关(χ2=0.317,P=1.000)。结论miR-125a在骨肉瘤组织中的表达明显低于其相应的癌旁组织;miR-125a与骨肉瘤的Enneking外科分期、有无肺转移及是否规律化疗显著相关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 微小RNA-125a 实时定量反转录聚合酶链反应
原文传递
肠癌患者外周血中肿瘤标志物联合检测的临床研究 被引量:3
20
作者 吴方 魏旭倩 +3 位作者 孙璟 楼谷音 王学锋 焦洁茹 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期353-357,共5页
背景与目的:肠癌患者的生存期与是否存在转移密切相关,外周血中肿瘤标志物的检测有助于对肿瘤发生转移的判断,但单个检测指标尚难于判断。本实验旨在研究多种肿瘤标志物与肠癌患者生存期的关系,并评估其同时检测的临床应用价值。方法:... 背景与目的:肠癌患者的生存期与是否存在转移密切相关,外周血中肿瘤标志物的检测有助于对肿瘤发生转移的判断,但单个检测指标尚难于判断。本实验旨在研究多种肿瘤标志物与肠癌患者生存期的关系,并评估其同时检测的临床应用价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)方法联合检测92例肠癌、68例肠癌前病变及50例正常对照者外周血生存素(survivin)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白20(CK20)基因的转录,并分析其与临床病理因素及预后关系。结果:正常对照组外周血中未检测到CEA、CK20及survivin mRNA的转录;良性病变患者survivin转录的检测阳性率为7.35%,平均拷贝数为(2.5±0.9)。肠癌外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录的阳性率分别为41.3%、47.8%、72.8%,其阳性率与疾病的分期、淋巴结转移等相关。survivin mRNA高转录者4年生存率显著低于低转录者。肠癌患者外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录的联合检测对肿瘤预后判断具有较高的特异性和阳性似然比。结论:Real-time RT-PCR联合检测肠癌外周血中多个肿瘤标志物基因的表达,是一种较为理想的监测肿瘤复发、判断预后的方法。 展开更多
关键词 肠癌 肿瘤标志物 实时定量反转录聚合酶链反应 转移 预后
下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部