目的:观察高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)对急性髓系白血病细胞株(human leukemiacell line,K562)自噬及化学治疗(化疗)耐药的影响,并探讨其相关的分子机制。方法:体外培养K562细胞,分为化疗药物处理组、化疗药物处...目的:观察高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)对急性髓系白血病细胞株(human leukemiacell line,K562)自噬及化学治疗(化疗)耐药的影响,并探讨其相关的分子机制。方法:体外培养K562细胞,分为化疗药物处理组、化疗药物处理对照组、HMGB1纯化蛋白预处理组、HMGB1纯化蛋白预处理对照组、HMGB1si RNA转染组和HMGB1 si RNA转染对照组,其中化疗药物处理组又分为长春新碱(v incristine,VCR)、足叶乙甙(etoposide,VP-16)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside,Ara-C)、阿霉素(adriamycin,ADM)和三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)处理组。细胞计数试剂盒-8检测细胞活性;Western印迹检测HMGB1,微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associate protein1light chain3,LC3),腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin,m-TOR)磷酸化蛋白表达水平;ELISA法检测细胞上清液HMGB1蛋白含量;单丹磺酰尸胺染色和透射电镜观察细胞自噬状态。结果:与相应对照组比较,各化疗药物处理组(VCR,VP-16,Ara-C,ADM和As2O3)的细胞活性均显著降低,HMGB1蛋白表达均显著上调(均P<0.05)。与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白预处理组的细胞活性显著增加(P<0.05),HMGB1蛋白表达显著上调(P<0.05)。与HMGB si RNA转染对照组比较,HMGB1si RNA转染组的细胞活性显著降低(P<0.05),HMGB1蛋白表达显著下调(P<0.05);与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白处理组中LC3-II表达明显增强(P<0.05),光镜下观察到自噬小体和自噬泡数量明显增加。同时,与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白处理组p-AMPKa的蛋白表达明显增强,而p-m TOR表达明显减弱(均P<0.05)。结论:HMGB1可能通过AMPK/m-TOR信号通路增强K562细胞自噬发挥化疗耐药性。展开更多
目的探讨驱动蛋白家族成员2C(kinesin family proteins 2C,KIF2C)与卵巢癌化学药物治疗(以下简称化疗)耐药的相关性。方法选取2010年1月至2020年12月于首都医科大学附属北京同仁医院接受手术治疗的上皮性卵巢癌患者151例。其中铂类化疗...目的探讨驱动蛋白家族成员2C(kinesin family proteins 2C,KIF2C)与卵巢癌化学药物治疗(以下简称化疗)耐药的相关性。方法选取2010年1月至2020年12月于首都医科大学附属北京同仁医院接受手术治疗的上皮性卵巢癌患者151例。其中铂类化疗敏感患者98例,铂类化疗耐药患者53例。利用免疫组化染色法检测KIF2C在化疗敏感及化疗耐药卵巢癌组织中的表达情况。结果卵巢癌化疗耐药组织中KIF2C明显低表达。KIF2C及病理分期ⅢC期是影响卵巢癌化疗耐药的危险因素。结论KIF2C有可能成为预测卵巢癌患者化疗敏感性的指标,并可能成为治疗化疗耐药卵巢癌患者的新型治疗靶点。展开更多
文摘目的:观察高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)对急性髓系白血病细胞株(human leukemiacell line,K562)自噬及化学治疗(化疗)耐药的影响,并探讨其相关的分子机制。方法:体外培养K562细胞,分为化疗药物处理组、化疗药物处理对照组、HMGB1纯化蛋白预处理组、HMGB1纯化蛋白预处理对照组、HMGB1si RNA转染组和HMGB1 si RNA转染对照组,其中化疗药物处理组又分为长春新碱(v incristine,VCR)、足叶乙甙(etoposide,VP-16)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside,Ara-C)、阿霉素(adriamycin,ADM)和三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)处理组。细胞计数试剂盒-8检测细胞活性;Western印迹检测HMGB1,微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associate protein1light chain3,LC3),腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin,m-TOR)磷酸化蛋白表达水平;ELISA法检测细胞上清液HMGB1蛋白含量;单丹磺酰尸胺染色和透射电镜观察细胞自噬状态。结果:与相应对照组比较,各化疗药物处理组(VCR,VP-16,Ara-C,ADM和As2O3)的细胞活性均显著降低,HMGB1蛋白表达均显著上调(均P<0.05)。与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白预处理组的细胞活性显著增加(P<0.05),HMGB1蛋白表达显著上调(P<0.05)。与HMGB si RNA转染对照组比较,HMGB1si RNA转染组的细胞活性显著降低(P<0.05),HMGB1蛋白表达显著下调(P<0.05);与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白处理组中LC3-II表达明显增强(P<0.05),光镜下观察到自噬小体和自噬泡数量明显增加。同时,与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白处理组p-AMPKa的蛋白表达明显增强,而p-m TOR表达明显减弱(均P<0.05)。结论:HMGB1可能通过AMPK/m-TOR信号通路增强K562细胞自噬发挥化疗耐药性。
文摘目的探讨驱动蛋白家族成员2C(kinesin family proteins 2C,KIF2C)与卵巢癌化学药物治疗(以下简称化疗)耐药的相关性。方法选取2010年1月至2020年12月于首都医科大学附属北京同仁医院接受手术治疗的上皮性卵巢癌患者151例。其中铂类化疗敏感患者98例,铂类化疗耐药患者53例。利用免疫组化染色法检测KIF2C在化疗敏感及化疗耐药卵巢癌组织中的表达情况。结果卵巢癌化疗耐药组织中KIF2C明显低表达。KIF2C及病理分期ⅢC期是影响卵巢癌化疗耐药的危险因素。结论KIF2C有可能成为预测卵巢癌患者化疗敏感性的指标,并可能成为治疗化疗耐药卵巢癌患者的新型治疗靶点。
