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甘蔗根癌农杆菌介导转化海藻糖合酶基因获得抗渗透胁迫能力增强植株 被引量：42
1
作者 王自章 张树珍 +1 位作者 杨本鹏 李杨瑞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期140-146,共7页
由双拷贝CaMV35S启动子驱动担子菌灰树花 (Grifolafrondosa)的海藻糖合酶基因 (TSase)构建植物表达载体 pBBBT ,通过三亲交配法将 pBBBT导入根癌农杆菌EHA10 5菌株 ,经根癌农杆菌介导转化甘蔗 (Saccha rumhybrid)栽培品种 ,以增强甘蔗... 由双拷贝CaMV35S启动子驱动担子菌灰树花 (Grifolafrondosa)的海藻糖合酶基因 (TSase)构建植物表达载体 pBBBT ,通过三亲交配法将 pBBBT导入根癌农杆菌EHA10 5菌株 ,经根癌农杆菌介导转化甘蔗 (Saccha rumhybrid)栽培品种 ,以增强甘蔗的抗旱能力。结果表明 ,甘蔗胚性愈伤组织对EHA10 5菌株敏感 ,甘蔗外植体开始大量形成胚性愈伤组织时是感染的适宜时期 ,用膦丝菌素 (PPT)筛选 ,抗性植株发生频率平均为 4 .5 %。经PCR及dot Southern检测证明 ,TSase已经整合到甘蔗基因组中。部分转化植株根叶畸形、株型异常、生长缓慢。移栽到含PEG80 0 0 17.4 % (w/v)的MS培养基后 。 展开更多
关键词 甘蔗 根癌 农杆菌介导转化 海藻糖合酶基因 抗渗透胁迫能力 增强植株
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苎麻再生体系的建立及抗虫转基因苎麻的获得 被引量：26
2
作者 易自力 李祥 +2 位作者 蒋建雄 王志成 刘清波 《中国麻业》 2006年第2期61-66,共6页
建立了以下胚轴切段为外植体的高效苎麻再生体系,并通过农杆菌介导法将Bt毒蛋白基因导入到苎麻体内,获得了16株独立来源的转化植株。经点杂交分析和PCR-Southern分析,结果表明有12株苎麻转化植株的基因组中整合有外源Bt基因。
关键词 苎麻 农杆菌介导转化 BT基因
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农杆菌介导高羊茅遗传转化体系的建立 被引量：15
3
作者 吴关庭 胡张华 +5 位作者 郎春秀 陈笑芸 王伏林 金卫 陈锦清 夏英武 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期340-346,共7页
为建立农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导高羊茅(Festuca arundinaceaSchreb.)遗传转化体系,以草坪型高羊茅品种凌志的胚性愈伤组织为受体材料,通过gus基因瞬时表达检测,研究了多种因素对农杆菌介导转化的影响。结果表明,农杆菌介... 为建立农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导高羊茅(Festuca arundinaceaSchreb.)遗传转化体系,以草坪型高羊茅品种凌志的胚性愈伤组织为受体材料,通过gus基因瞬时表达检测,研究了多种因素对农杆菌介导转化的影响。结果表明,农杆菌介导高羊茅胚性愈伤组织转化的适宜条件为:愈伤组织在含BAP和NAA各0.5mg/L的培养基上预培养3d;菌液浓度OD600值0.7,感染时间15min;农杆菌预培养基和悬浮培养基以及共培养基中添加100μmol/L的乙酰丁香酮;共培养温度23℃,共培养时间3d,共培养基pH值5.2。不同浓度潮霉素筛选效果试验表明,采用低浓度(50mg/L)潮霉素连续筛选,再生获得的转基因植株数最多,因此是最为可取的筛选方式。 展开更多
关键词 高羊茅 农杆菌 遗传转化 影响因素 筛选效果 农杆菌介导转化 草坪型高羊茅 遗传转化体系 胚性愈伤组织 菌液浓度
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油菜下胚轴农杆菌介导法转化影响因素探讨 被引量：14
4
作者 王景雪 杜建中 +2 位作者 荣二花 李晓灿 孙毅 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期12-15,共4页
利用甘蓝型油菜下胚轴为外植体,对油菜农杆菌介导转化中的主要因素进行了研究,并由此建立了油菜下胚轴农杆菌介导的遗传转化体系。研究发现,在农杆菌介导的油菜下胚轴转化中,较好的转化体系是:外植体在农杆菌侵染前进行3d的预培养。农... 利用甘蓝型油菜下胚轴为外植体,对油菜农杆菌介导转化中的主要因素进行了研究,并由此建立了油菜下胚轴农杆菌介导的遗传转化体系。研究发现,在农杆菌介导的油菜下胚轴转化中,较好的转化体系是:外植体在农杆菌侵染前进行3d的预培养。农杆菌的浸染浓度为OD600=0.2～0.4。共培养时的pH值为5.2。在转化后的分化培养基中附加30μmol/LAgNO3。 展开更多
关键词 下胚轴 农杆菌介导法 农杆菌介导转化 遗传转化体系 甘蓝型油菜 分化培养基 外植体 预培养 pH值 共培养 MOL 侵染
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提高农杆菌介导转化水稻效率的因素 被引量：15
5
作者 李双成 王世全 +4 位作者 尹福强 邹良平 起登风 江洪 李平 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期231-237,共7页
以3个籼稻品种和2个粳稻品种为对象,对农杆菌转化水稻过程中影响转化效率的因素进行了研究。结果表明,菌株AGL1和EHA105按一定比例混合共转化和转化前菌体重悬对抗性愈伤率有显著影响;琼脂粉加倍和超净工作台上风干4h的方法因能明显提... 以3个籼稻品种和2个粳稻品种为对象,对农杆菌转化水稻过程中影响转化效率的因素进行了研究。结果表明,菌株AGL1和EHA105按一定比例混合共转化和转化前菌体重悬对抗性愈伤率有显著影响;琼脂粉加倍和超净工作台上风干4h的方法因能明显提高抗性愈伤率和分化率而被认为是最适合的干燥培养方式;分化培养基中加入二甲基亚砜(DMSO)或脯氨酸(Pro)可以提高分化率;壮苗时加入适量的NAA有利于壮根并提高移栽成活率。应用此农杆菌转化系统,获得了一批经PCR和点杂交鉴定的转基因植株。 展开更多
关键词 农杆菌介导转化 水稻 农杆菌转化系统 二甲基亚砜 分化培养基 移栽成活率 转基因植株 粳稻品种 籼稻品种 转化效率 比例混合 培养方式 杂交鉴定 分化率 对抗性 共转化 高抗性 工作台 脯氨酸 NAA PCR 愈伤 体重 适量 壮苗
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农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程育种中的应用 被引量：10
6
作者 吕彦 王平荣 +3 位作者 孙业盈 董春林 陈德西 邓晓建 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第4期543-549,共7页
随着生物技术的发展,水稻基因工程育种在水稻育种中发挥着越来越重要的作用。在诸多的转基因方法中,农杆菌作为一种天然的植物基因转化系统,以其独特优点而倍受重视。本文概述了农杆菌介导转化水稻的原理,农杆菌介导转化水稻的优点并且... 随着生物技术的发展,水稻基因工程育种在水稻育种中发挥着越来越重要的作用。在诸多的转基因方法中,农杆菌作为一种天然的植物基因转化系统,以其独特优点而倍受重视。本文概述了农杆菌介导转化水稻的原理,农杆菌介导转化水稻的优点并且介绍了农杆菌菌株、受体材料和培养基成分的不同对农杆菌介导转化水稻的影响。另外对农杆菌介导遗传转化在水稻抗虫基因工程育种、抗病基因工程育种、抗逆基因工程育种、优质基因工程育种、耐除草剂基因工程育种及提高水稻光合效率和延缓衰老方面的研究进展进行了综述。最后对农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程育种中存在的问题和发展前景做了简要说明。 展开更多
关键词 基因工程育种 遗传转化 农杆菌介导转化 应用 基因转化系统 转基因方法 培养基成分 生物技术 水稻育种 受体材料 研究进展 延缓衰老 光合效率 耐除草剂 发展前景 抗虫 抗病 抗逆 优质
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农杆菌在单子叶植物上的研究进展 被引量：4
7
作者 蒋玉宝 于元杰 《中国农学通报》 CSCD 2005年第10期47-52,共6页
在植物基因工程中,农杆菌质粒介导的遗传转化是比较完善与有效的基因转移方法,但在单子叶植物上应用较少。在此,对农杆菌介导植物的机理与特点、影响农杆菌转化单子叶植物的因素、农杆菌介导转化单子叶植物的研究进展及其应用前景进行... 在植物基因工程中,农杆菌质粒介导的遗传转化是比较完善与有效的基因转移方法,但在单子叶植物上应用较少。在此,对农杆菌介导植物的机理与特点、影响农杆菌转化单子叶植物的因素、农杆菌介导转化单子叶植物的研究进展及其应用前景进行了较全面分析。 展开更多
关键词 农杆菌 单子叶植物 基因转化技术 农杆菌介导转化 单子叶植物 植物基因工程 基因转移方法 农杆菌转化 遗传转化 质粒介导 应用
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根癌农杆菌介导的白腐丝状真菌——黄孢原毛平革菌的转化 被引量：7
8
作者 李维 张义正 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期784-787,共4页
利用农杆菌介导的方法成功地对黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)进行了遗传转化。将含有潮霉素磷酸转移酶融合基因的双元质粒pCH6-1300转入根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)208中,然后用该转化菌分别感染黄孢原毛平革... 利用农杆菌介导的方法成功地对黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)进行了遗传转化。将含有潮霉素磷酸转移酶融合基因的双元质粒pCH6-1300转入根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)208中,然后用该转化菌分别感染黄孢原毛平革菌的分生孢子和原生质体,获得16株可能的转化子,经复筛,共获得6株潮霉素抗性水平为100μg/mL的稳定转化子,分生孢子和原生质体的转化频率没有明显差别。PCR检测结果显示,抗性基因已导入黄孢原毛平革菌细胞中;Southern杂交表明,T-DNA以单拷贝形式整合到黄孢原毛平革菌基因组中。其中的一个转化子菌落形态与原野生型菌株相比有所不同,菌丝稀薄,分生孢子较少。利用分生孢子转化更为简便易行,无需特殊的设备和制备原生质体,此方法为深入开展该菌的遗传转化研究奠定了基础。 展开更多
关键词 黄孢原毛平革菌 农杆菌介导转化 Hgyr转化子 SOUTHERN杂交
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农杆菌介导的高羊茅遗传转化体系的优化 被引量：7
9
作者 胡繁荣 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第3期375-380,共6页
以高羊茅品种猎狗5号的胚性愈伤组织作为受体材料,通过gus基因瞬时表达检测,探讨预培养培养基、预培养时间、菌液浓度、感染时间、乙酰丁香酮浓度、共培养条件等不同因素对农杆菌介导转化的影响,结果表明,高羊茅品种猎狗5号遗传转化优... 以高羊茅品种猎狗5号的胚性愈伤组织作为受体材料,通过gus基因瞬时表达检测,探讨预培养培养基、预培养时间、菌液浓度、感染时间、乙酰丁香酮浓度、共培养条件等不同因素对农杆菌介导转化的影响,结果表明,高羊茅品种猎狗5号遗传转化优化条件为胚性愈伤组织先在预培养培养基(MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L)预培养5d;然后用农杆菌菌液(OD600=0.5),感染时间10～20min,在23￣25℃的温度下,共培养基(MS+蔗糖30g/L+葡萄糖10g/L+CA0.5g/L+Glu0.5g/L+2,4-D1.5mg/L+AS150滋mol/L+agar8g/L,pH5.2～5.6)上共培养3d。在共培养基中添加AS150滋mol/L有助于提高gus基因瞬时表达率。 展开更多
关键词 遗传转化体系 高羊茅 胚性愈伤组织 农杆菌介导转化 GUS基因 感染时间 乙酰丁香酮 培养基 预培养 受体材料 瞬时表达 培养时间 菌液浓度 培养条件 优化条件 mol 葡萄糖 共培养 表达率 猎狗 品种 添加
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一种基于农杆菌介导的拟南芥瞬时转化技术优化 被引量：14
10
作者 郭勇 王玉成 王智博 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期41-44,83,共5页
利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的拟南芥瞬时转化体系影响因素来确定最佳转化条件。以生长15日龄的拟南芥幼苗为试验材料,以转化p CAMBIA1301空载体的根癌农杆菌EHA105为目的菌株进行瞬时转化。研究了吐温20、菌液OD值... 利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的拟南芥瞬时转化体系影响因素来确定最佳转化条件。以生长15日龄的拟南芥幼苗为试验材料,以转化p CAMBIA1301空载体的根癌农杆菌EHA105为目的菌株进行瞬时转化。研究了吐温20、菌液OD值、乙酰丁香酮(AS)及转化时间等对拟南芥瞬时转化效率的影响。结果表明:以体积分数为0.05%的吐温、菌液OD_(600)值为1.0和120μmol/L的AS侵染拟南芥2.5 h后,再共培养72 h,能够得到高瞬时转化效果。 展开更多
关键词 拟南芥 GUS基因 瞬时表达 实时定量 农杆菌介导转化
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番茄HP1和HP2基因RNA共干涉载体的构建及遗传转化 被引量：13
11
作者 刘继恺 高永峰 +1 位作者 牛向丽 刘永胜 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期591-595,共5页
番茄HP1和HP2是色素积累的负调控因子,在光形态建成和色素积累调控中起着重要作用.将番茄HP1、HP2基因片段导入到植物表达载体pBI121,用番茄果实特异表达的TMF7基因的启动子替换原有的CaMV 35S启动子,构建果实特异表达HP1、HP2双基因RN... 番茄HP1和HP2是色素积累的负调控因子,在光形态建成和色素积累调控中起着重要作用.将番茄HP1、HP2基因片段导入到植物表达载体pBI121,用番茄果实特异表达的TMF7基因的启动子替换原有的CaMV 35S启动子,构建果实特异表达HP1、HP2双基因RNA共干涉植物表达载体pBI121-TMF7-HP1HP2.通过根癌农杆菌介导转入番茄子叶,经组织培养成功获得转基因植株.半定量RT-PCR分析显示,转基因植株果实内HP1、HP2的表达量均明显低于野生型植株果实.转基因植株果实叶绿素含量比野生型明显升高,而叶片中的叶绿素含量无明显差异.该研究结果为采用基因工程的方法改善番茄果实营养品质作出了新的尝试和提出了新的思路. 展开更多
关键词 HP1 HP2 RNA干涉 果实特异启动子 农杆菌介导转化 叶绿素 番茄
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青菜的高效再生和农杆菌介导B.t.及CpTI基因的转化 被引量：3
12
作者 徐淑平 卫志明 黄健秋 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期253-260,共8页
分别对培养基中适宜的激素组成和AgNO3 添加浓度进行研究 ,建立了青菜下胚轴和子叶外植体的高效再生系统 ,青菜品种“矮抗青”的最高芽分化频率下胚轴可达 6 5 % ,子叶为 5 2 %左右。在此基础上 ,对影响转化频率的不同因素进行了探讨 ,... 分别对培养基中适宜的激素组成和AgNO3 添加浓度进行研究 ,建立了青菜下胚轴和子叶外植体的高效再生系统 ,青菜品种“矮抗青”的最高芽分化频率下胚轴可达 6 5 % ,子叶为 5 2 %左右。在此基础上 ,对影响转化频率的不同因素进行了探讨 ,共获 94株卡那霉素抗性植株。对转基因植株总DNA的Southernblot ting分析证明 ,B .t .基因和CpTI基因已整合到青菜植株的细胞核基因组中。经过抗虫性筛选试验 ,从转基因植株的T3 代筛选到 7个转B .t.基因的抗虫纯合株系和 5个转CpTI基因的抗虫纯合株系 。 展开更多
关键词 青菜 下胚轴 高效再生 农杆菌介导转化 B.t.基因 CPTI基因 转基因植株
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表达bar基因的抗除草剂转基因甘薯的获得 被引量：13
13
作者 臧宁 翟红 +3 位作者 王玉萍 于波 何绍贞 刘庆昌 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第4期475-479,共5页
用农杆菌介导法将bar基因导入甘薯主栽品种徐薯18的胚性悬浮细胞中,获得了抗除草剂的转基因植株。农杆菌菌株EHA105携带的双元载体pCAMBIA3300上含有bar基因。来自于徐薯18胚性悬浮细胞的直径为0.7～1.3mm的280个胚性细胞团用于遗传转... 用农杆菌介导法将bar基因导入甘薯主栽品种徐薯18的胚性悬浮细胞中,获得了抗除草剂的转基因植株。农杆菌菌株EHA105携带的双元载体pCAMBIA3300上含有bar基因。来自于徐薯18胚性悬浮细胞的直径为0.7～1.3mm的280个胚性细胞团用于遗传转化。共培养3d后,首先在含有2mg/L2,4-D、100mg/LCarb的液体MS培养基中培养1周,然后将胚性细胞团转移到添加2mg/L2,4-D、100mg/LCarb和0.3mg/LPPT的固体MS培养基上进行选择培养。选择8周后,将获得的37个PPT抗性愈伤组织转移到添加1mg/LABA、100mg/LCarb和0.3mg/LPPT的固体MS培养基上,其中的34个愈伤组织诱导得到体细胞胚并发芽形成小植株,共获得了164株拟转基因植株。PCR分析表明,其中的123株为转基因植株。Southernblot和Northernblot分析表明,bar基因稳定整合到转基因植株的基因组中并正确表达。除草剂喷洒试验结果表明,转基因植株具有高度除草剂抗性。 展开更多
关键词 甘薯(Ipomoea batatas(L.)Lam.) 农杆菌介导转化 胚性悬浮细胞 除草剂 转基因植株
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农杆菌介导AFP1基因转化小麦获得转基因植株 被引量：5
14
作者 支大英 徐春晖 +3 位作者 薛哲勇 刘庆忠 姜鸿鸣 夏光敏 《山东农业科学》 2004年第3期14-16,19,共4页
以nptⅡ基因为筛选基因,利用农杆菌转化系统向普通小麦品种核生3号和99P的愈伤组织中转入白粉病抗性基因Rs-AFP1;获得抗生素抗性克隆数目分别为27个和24个,其中再生绿苗的克隆分别为2个和8个;PCR分析检测所得nptⅡ阳性植株分别为2株和6... 以nptⅡ基因为筛选基因,利用农杆菌转化系统向普通小麦品种核生3号和99P的愈伤组织中转入白粉病抗性基因Rs-AFP1;获得抗生素抗性克隆数目分别为27个和24个,其中再生绿苗的克隆分别为2个和8个;PCR分析检测所得nptⅡ阳性植株分别为2株和6株,AFP1基因阳性植株分别为1株和4株。 展开更多
关键词 普通小麦 农杆菌介导转化 转基因植株 Rs-AFP1
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转Bt-CpTI-GNA基因棉花的研究(英文) 被引量：10
15
作者 吴霞 王娇娟 +5 位作者 朱祯 上官小霞 张林水 李波 杜春芳 李燕娥 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期353-359,共7页
采用农杆菌介导法将外源三价抗虫基因(Bt-CpTI-GNA)导入常规棉花品种中,获得转基因再生株,分子检测表明外源基因已在棉花体内表达,并遗传给后代材料。PCR分子检测与转化的标记基因和外源目的基因抗性三者极有规律性。其所携带的基因在... 采用农杆菌介导法将外源三价抗虫基因(Bt-CpTI-GNA)导入常规棉花品种中,获得转基因再生株,分子检测表明外源基因已在棉花体内表达,并遗传给后代材料。PCR分子检测与转化的标记基因和外源目的基因抗性三者极有规律性。其所携带的基因在转基因棉花中有分离现象,这可能是外源基因整合到受体棉株体内“基因沉默”而引起所致。 展开更多
关键词 棉花 农杆菌介导转化 Bt-CpTI-GNA 抗虫性 标记基因
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棉花黄萎病菌致病的分子机理 被引量：11
16
作者 汪敏 焦睿 +2 位作者 邢小萍 房卫平 李洪连 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期272-278,共7页
阐述了大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)产生的细胞壁降解酶、蛋白酶和毒素在致病中的作用及微菌核形成机制,全面分析了基因组学途径、RNA干涉和农杆菌介导的转化等真菌功能基因组学技术在大丽轮枝菌致病分子机理研究上的进展。
关键词 棉花 大丽轮枝菌 致病机理 基因组学途径 RNA干涉 农杆菌介导转化
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棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建及其表型分析 被引量：11
17
作者 贾培松 丁丽丽 +2 位作者 周邦军 郭惠珊 高峰 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期62-70,共9页
以棉花强致病力黄萎病菌株V592为材料,利用农杆菌介导的T-DNA插入技术构建了一个含15000个转化子的突变体库,对突变体的生物学特性、致病力及T-DNA插入拷贝数进行研究,结果显示:(1)突变体的菌落形态分为菌核型、中间型、菌丝型和菌膜型... 以棉花强致病力黄萎病菌株V592为材料,利用农杆菌介导的T-DNA插入技术构建了一个含15000个转化子的突变体库,对突变体的生物学特性、致病力及T-DNA插入拷贝数进行研究,结果显示:(1)突变体的菌落形态分为菌核型、中间型、菌丝型和菌膜型,分别占92.12%,4.54%,3.19%和0.15%;(2)菌核型、中间型和菌丝型菌株,在菌落生长速度和孢子大小方面无明显差异;而在产孢量方面,菌核型普遍强于中间型和菌丝型;(3)致病性测定显示,菌核型的致病力普遍强于中间型和菌丝型;(4)Southern杂交显示,T-DNA单拷贝数插入的突变体比率约为70.99%,而菌核型的单插入率为80.00%,明显高于中间型(69.23%)和菌丝型(64.71%)。以上结果表明,农杆菌介导转化技术可用于棉花黄萎病菌突变体库的快速构建,突变体的菌落表型与其产孢能力、致病力及T-DNA插入拷贝数等之间存在一定的相关性。 展开更多
关键词 棉花黄萎病菌 农杆菌介导转化 突变体库 菌落表型 致病力
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胡萝卜根特异表达水通道蛋白基因DcRB7的分离及其启动子功能分析 被引量：4
18
作者 刘燕 郭长安 +1 位作者 任海波 陈凡 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第21期2187-2192,共6页
从胡萝卜胚cDNA文库中分离得到一条完整的cDNA片段,序列分析表明属于水通道家族新成员,并与烟草根特异性表达TobRB7基因高度同源,因此命名为DcRB7.Northern杂交分析表明DcRB7在根中特异性表达.利用反向PCR技术,分离获得了DcRB7基因上游... 从胡萝卜胚cDNA文库中分离得到一条完整的cDNA片段,序列分析表明属于水通道家族新成员,并与烟草根特异性表达TobRB7基因高度同源,因此命名为DcRB7.Northern杂交分析表明DcRB7在根中特异性表达.利用反向PCR技术,分离获得了DcRB7基因上游约650bp的片段.将此片段与含有GUS报告基因表达载体进行重组构建后,以农杆菌介导转化烟草获得相应的转基因植株.在对转基因烟草的GUS表达特性进行了组织化学鉴定和荧光定量分析后发现,该调控区段能指导GUS基因在烟草根中优势表达,并表现出干旱诱导的特性. 展开更多
关键词 GUS基因 水通道蛋白 特异性表达 分离 荧光定量分析 启动子 诱导 胡萝卜 烟草 农杆菌介导转化
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农杆菌介导大豆不同外植体遗传转化研究 被引量：10
19
作者 刘翠 李喜焕 +2 位作者 常文锁 张春锋 张彩英 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期35-40,共6页
以MYB转录因子GmPHR1为目的基因,冀豆12、冀豆16和绥农14为转化受体,比较农杆菌介导大豆不同外植体的遗传转化技术,为大豆转基因育种提供技术支撑。结果表明,以茎尖转化系统的不定芽诱导率、植株再生率和转化效率最高,且对基因型的依赖... 以MYB转录因子GmPHR1为目的基因,冀豆12、冀豆16和绥农14为转化受体,比较农杆菌介导大豆不同外植体的遗传转化技术,为大豆转基因育种提供技术支撑。结果表明,以茎尖转化系统的不定芽诱导率、植株再生率和转化效率最高,且对基因型的依赖性最小,但由于对抗生素的敏感性较差,因而存在一定程度的假阳性;其次,以胚尖转化系统的不定芽诱导率、植株再生率和转化效率较高,对基因型的依赖性较小,同时对抗生素的敏感性较强,因而是一种较为理想的转化系统。而子叶节、下胚轴转化系统则表现出不定芽诱导率、植株再生率和转化效率均较低,且存在较强的基因型依赖性等不足。同时,利用上述4种转化系统,获得了3个供试大豆品种的转基因T1植株。 展开更多
关键词 大豆 农杆菌介导转化 外植体类型 转基因
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农杆菌介导一个内源HMG-box转录因子fvhom1转化金针菇 被引量：10
20
作者 施乐乐 van Peer A.F. +5 位作者 郭丽 陈仁良 王威 严俊杰 邓优锦 谢宝贵 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1268-1274,共7页
利用本实验室金针菇(Flammulina velutipes)基因组、转录组数据对一个内源HMG-box转录因子fvhom1进行了基因结构和表达量分析。通过根癌农杆菌介导转化的方法,以金针菇菌丝球为受体材料转入含该内源HMG-box转录因子的过表达载体,并获得... 利用本实验室金针菇(Flammulina velutipes)基因组、转录组数据对一个内源HMG-box转录因子fvhom1进行了基因结构和表达量分析。通过根癌农杆菌介导转化的方法,以金针菇菌丝球为受体材料转入含该内源HMG-box转录因子的过表达载体,并获得了一个稳定的转化子。该转化子的潮霉素抗性筛选及潮霉素磷酸转移酶基因的PCR扩增结果均证明该过表达载体已整合到金针菇的基因组中。在无选择压力的的PDA固体培养基上继代培养培养5次后仍检测到潮霉素磷酸转移酶基因的存在,表明转入的质粒片段在转基因金针菇中稳定遗传。对该转化子菌丝生长速度测定结果表明,突变体的菌丝生长速度比野生型金针菇菌株显著变慢。实时荧光定量PCR结果表明,突变体中该转录因子表达量与野生型金针菇菌株相比显著上调了100倍左右。该转化子的获得为下一步深入研究金针菇HMG-box转录因子的功能提供了数据支持。 展开更多
关键词 金针菇 HMG-box转录因子 农杆菌介导转化
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