中药复方益糖康通过介导伴侣自噬和免疫平衡防治早期糖尿病肾病机制探讨 被引量：4

1

作者 曲超 石岩 +5 位作者 于嘉祥 张瀚文 霍易飞 程玥凤 安琪 张文顺 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2023年第3期159-164,共6页

糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,是糖尿病发病和死亡的主要原因之一,同时也是终末期肾病中最常见的蛋白尿和非蛋白尿形成的原因。自噬作为机体的一种防御机制,参与DKD中多种靶细胞损害的调... 糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,是糖尿病发病和死亡的主要原因之一,同时也是终末期肾病中最常见的蛋白尿和非蛋白尿形成的原因。自噬作为机体的一种防御机制,参与DKD中多种靶细胞损害的调控过程,并能有效减轻DKD的病理表现。因此,通过调控自噬途径,可能成为治疗DKD的潜在疗法、新靶点和方向。中药复方益糖康具有健脾益气养阴、活血化瘀之功,其重要化合物黄芩素之一,可通过增加结合蛋白HSP90AA1的表达,诱导分子伴侣介导的自噬,减少由自噬缺陷导致的足细胞损伤;重要化合物槲皮素可能通过促进前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)的组蛋白3赖氨酸4(histone3lysine4,H3K4)甲基化,抑制PTGS2表达,减少炎症产生,抑制Th17向Treg分化,最终实现改善DKD的作用。但仍需要进一步动物实验验证及阐释,为中医药治疗糖尿病肾病提供新的思路与方案。进一步明确中药复方益糖康通过介导伴侣自噬和免疫平衡对糖尿病肾病防治以及机制探讨具有重要意义,并为临床上治疗糖尿病肾病提供新的思路与策略。该文就益糖康通过伴侣自噬和免疫平衡防治糖尿病肾病作一简述。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 伴侣自噬 免疫平衡 中药复方益糖康 黄芩素 槲皮素

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芍药苷通过分子伴侣自噬通路保护PC12细胞 被引量：1

2

作者 张由美 张正春 《神经疾病与精神卫生》 2010年第6期597-599,共3页

目的 研究芍药苷对PC12细胞的保护作用,并探讨其对分子伴侣自噬通路的影响.方法 环境毒素MPP＋诱导PC12细胞损伤,同时给予芍药苷进行干预,检测细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率及细胞凋亡率的变化,并检测分子伴侣自噬相关蛋白Lamp2... 目的 研究芍药苷对PC12细胞的保护作用,并探讨其对分子伴侣自噬通路的影响.方法 环境毒素MPP＋诱导PC12细胞损伤,同时给予芍药苷进行干预,检测细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率及细胞凋亡率的变化,并检测分子伴侣自噬相关蛋白Lamp2a表达水平的变化.结果 MPP＋处理24h,PC12细胞的存活率降低,漏出至上清液中的LDH增多,细胞凋亡率明显升高.芍药苷（25μmol·L-1）显著提高了PC12细胞的存活率,减少了LDH的漏出,降低了细胞凋亡率.Western blot显示MPP＋导致Lamp2a的表达升高,芍药苷能够显著抑制Lamp2a的激活.结论 MPP＋导致PC12细胞损伤和分子伴侣自噬的过度激活,而芍药苷对PC12细胞具有明显的保护作用,并显著降低了分子伴侣自噬通路的活性. 展开更多

关键词 芍药苷 分子伴侣自噬 PC12细胞

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阿米洛利对PC12细胞的保护作用及其对LAMP2a表达影响

3

作者 赵长振 徐耑 +1 位作者 张润娉 孔岩 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第10期1124-1128,共5页

目的研究阿米洛利对PC12细胞的保护作用,及其对LAMP2a表达水平的影响。方法 pH 6.0的酸性培养液诱导PC12细胞损伤,同时给予阿米洛利进行干预,四甲基偶氮唑盐(MTT)、乳酸脱氢酶(LDH)和流式细胞技术检测细胞存活率、损伤程度及凋亡率,West... 目的研究阿米洛利对PC12细胞的保护作用,及其对LAMP2a表达水平的影响。方法 pH 6.0的酸性培养液诱导PC12细胞损伤,同时给予阿米洛利进行干预,四甲基偶氮唑盐(MTT)、乳酸脱氢酶(LDH)和流式细胞技术检测细胞存活率、损伤程度及凋亡率,Western blot检测LAMP2a表达水平。结果酸性培养液处理24 h,细胞存活率降低至(67.2±5.1)%,上清液中的LDH增多至(407.9±11.1)U/L,凋亡率升高至(27.8±2.6)%。阿米洛利(100μmol/L)提高PC12细胞的存活率至(84.9±2.2)%,LDH降低至(314.1±5.2)U/L,细胞凋亡率降低至(17.8±1.3)%,与pH 6.0组相比(P<0.001)。酸处理导致LAMP2a表达升高,而阿米洛利能够显著抑制LAMP2a的表达(P<0.05)。结论阿米洛利通过下调LAMP2a的表达发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 阿米洛利 LAMP2a 分子伴侣自噬 PC12细胞 帕金森病

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苯并芘在模拟缺氧环境下对分子伴侣自噬影响的分子机制

4

作者 杨帆 林楠 +8 位作者 张莎莎 张梦迪 胡玉霞 白图雅 吕晓丽 李君 肖志彬 奥敦托娅 常福厚 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2665-2673,共9页

本研究在模拟缺氧环境下观察苯并芘(benzo[α]pyrene,BaP)对分子伴侣自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)的影响,同时阐明这种影响与热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)的关系。用CoCl2构建细胞缺氧环境,检测BaP对给予HSP9... 本研究在模拟缺氧环境下观察苯并芘(benzo[α]pyrene,BaP)对分子伴侣自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)的影响,同时阐明这种影响与热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)的关系。用CoCl2构建细胞缺氧环境,检测BaP对给予HSP90抑制剂格尔德霉素(geldanamycin,GA)和沉默HSP90α的细胞中与CMA相关的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、HSP90、热休克同源蛋白70(heat shock cognate protein70,HSC70)和溶酶体相关蛋白2A(lysosomal associated protein 2A,LAMP-2A)的mRNA和蛋白表达的影响。采用碱性彗星实验、免疫荧光γ-H2AX焦点实验、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blot实验阐明不同浓度BaP对A549细胞中DNA损伤与细胞内CMA相关因子的mRNA和蛋白表达的关系。结果显示,缺氧环境可以促进A549细胞CMA相关因子的mRNA和蛋白的表达。本研究发现:在缺氧环境下,BaP对CMA有抑制作用,HSP90被抑制或沉默将增强BaP对CMA的抑制;在常氧环境下,BaP可导致DNA损伤并促进CMA。 展开更多

关键词 缺氧 苯并芘 分子伴侣自噬 缺氧诱导因子-1Α 热休克蛋白90 DNA损伤

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自噬与肝细胞癌关系的研究进展

5

作者 付立跃 姜玖良 +4 位作者 刘猛 李俊俊 刘开平 余镇宇 朱海涛 《肿瘤研究与临床》 CAS 2023年第2期150-153,共4页

自噬是细胞在溶酶体的参与下降解细胞物质或结构的过程。人类许多疾病与自噬异常有关,为人类癌症中的病理生理学提供了新的线索。但是自噬在正常肝脏生理和肝脏疾病发病过程中的作用有待进一步阐明。文章综述了目前已知的自噬在肝细胞... 自噬是细胞在溶酶体的参与下降解细胞物质或结构的过程。人类许多疾病与自噬异常有关,为人类癌症中的病理生理学提供了新的线索。但是自噬在正常肝脏生理和肝脏疾病发病过程中的作用有待进一步阐明。文章综述了目前已知的自噬在肝细胞癌发生、发展中的作用及分子机制。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 自噬 巨自噬 微自噬 伴侣介导自噬

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自噬的分子标志物 被引量：43

6

作者 朱琪 林芳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期33-38,共6页

自噬(autophagy)是真核细胞所特有的通过溶酶体降解细胞内物质成分的过程。自噬主要包括大自噬(macroautophagy)、小自噬(microautophagy)和分子伴侣介导的自噬(chaperon-mediated autophagy,CMA),此外还包括线粒体自噬(mitophagy)、聚... 自噬(autophagy)是真核细胞所特有的通过溶酶体降解细胞内物质成分的过程。自噬主要包括大自噬(macroautophagy)、小自噬(microautophagy)和分子伴侣介导的自噬(chaperon-mediated autophagy,CMA),此外还包括线粒体自噬(mitophagy)、聚集体自噬(aggrephagy)等选择性自噬。根据最新的研究进展,本文总结了大自噬、分子伴侣介导的自噬以及线粒体自噬中的一些重要的分子标志物。 展开更多

关键词 自噬 大自噬 分子伴侣介导的自噬 线粒体自噬 分子标志物

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细胞自噬的形态学特征和功能意义 被引量：28

7

作者 王海杰 谭玉珍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期844-849,共6页

目的自噬是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,最终将吞噬物在溶酶体内降解的过程。按吞噬物进入溶酶体的途径,自噬可分为巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬3类。在巨自噬,自噬前体包裹细胞质或细胞器后形成自噬体,继而自噬体... 目的自噬是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,最终将吞噬物在溶酶体内降解的过程。按吞噬物进入溶酶体的途径,自噬可分为巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬3类。在巨自噬,自噬前体包裹细胞质或细胞器后形成自噬体,继而自噬体与溶酶体结合形成自噬溶酶体,自噬体内容物被降解。在微自噬,溶酶体膜凹陷,直接吞噬细胞质、细胞器或细胞核,形成自噬体,然后被溶酶体酶降解。分子伴侣介导的自噬是通过溶酶体膜的受体将细胞质内的蛋白质转运入溶酶体。自噬从酵母至哺乳动物细胞均很保守,对于耐受饥饿和缺血,清除衰老细胞器,清除细菌和异物,维持细胞活性和延长寿命等起着重要作用。自噬活动受自噬基因的调控,自噬基因缺失或功能障碍时可导致某些疾病的发生。深入认识自噬过程以及由此产生的自噬体等结构及其功能有助于探讨自噬对于人体生理和病理作用的机制。本文综述了自噬的形态学特征及其功能意义。 展开更多

关键词 自噬 巨自噬 微自噬 分子伴侣介导的自噬 溶酶体

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人类细胞自噬研究的起源及细胞自噬的分子机制 被引量：14

8

作者 丁宇 王彦丰 +5 位作者 左夏林 艾学龙 王媛媛 王彦斌 姚翔 丁克祥 《国际老年医学杂志》 2022年第1期98-101,114,共5页

细胞自噬效应是机体自身生存、生长、发育、成熟、衰老等生物学过程中自然发生的一种主动消除多余、受损、衰老蛋白和细胞器的自身净化机制。其中,巨自噬或大自噬、微自噬或小自噬以及分子伴侣自噬是细胞自噬的3种机制。进一步了解自噬... 细胞自噬效应是机体自身生存、生长、发育、成熟、衰老等生物学过程中自然发生的一种主动消除多余、受损、衰老蛋白和细胞器的自身净化机制。其中,巨自噬或大自噬、微自噬或小自噬以及分子伴侣自噬是细胞自噬的3种机制。进一步了解自噬发生的分子机制,不仅有助于人类从分子或基因水平和亚细胞结构与代谢水平的层面了解和分析细胞复杂的生物学过程,也为当今或未来老年医学进一步阐明和揭示人体衰老和老年疾病的发生、发展、作用及临床早期干预与治疗等提供理论依据。 展开更多

关键词 细胞自噬 巨自噬 微自噬 分子伴侣介导自噬 分子机制

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基于细胞自噬研究补肾活血方抑制帕金森病模型小鼠α-突触核蛋白集聚的作用 被引量：15

9

作者 栾振先 谌盈帆 +2 位作者 秦丽 李绍旦 杨明会 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期602-607,共6页

目的探讨补肾活血方抑制1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠脑黑质内α-突触核蛋白(α-syn)集聚的作用机制。方法将36只雄性C57/BL小鼠随机分为空白组、模型组及中药组,每组12只。采取腹腔注射MPTP法制备... 目的探讨补肾活血方抑制1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠脑黑质内α-突触核蛋白(α-syn)集聚的作用机制。方法将36只雄性C57/BL小鼠随机分为空白组、模型组及中药组,每组12只。采取腹腔注射MPTP法制备亚急性PD小鼠模型。中药组在造模成功后予补肾活血方连续灌胃14天,空白组和模型组每天仅灌胃等量的生理盐水。免疫组化法检测各组小鼠脑黑质内酪氨酸羟化酶(TH)、α-syn阳性表达,并用Western Blot法检测各组小鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达。结果与空白组比较,模型组小鼠表现出明显的PD症候群特征,且行为学评分明显升高(P<0.01);与模型组比较,中药组小鼠PD症状减轻,行为学评分明显降低(P<0.01)。模型组TH和α-syn阳性表达明显低于空白组(P<0.01);中药组TH和α-syn阳性表达明显高于模型组(P<0.01)。与空白组比较,模型组Lamp2a、Hsc70、α-syn表达水平明显升高(P<0.01),TH表达水平明显降低(P<0.01)。与模型组比较,中药组Lamp2a、Hsc70、TH表达水平明显升高(P<0.01),α-syn表达水平明显降低(P<0.01)。结论补肾活血方可能通过上调Lamp2a、Hsc70水平,进而增强分子伴侣介导的自噬来抑制PD小鼠脑黑质内α-syn的集聚,从而抑制多巴胺能神经元的凋亡。 展开更多

关键词 补肾活血方 帕金森病 自噬 分子伴侣介导的自噬

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电针对帕金森病模型大鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达的影响 被引量：13

10

作者 马骏 余沛豪 +4 位作者 王述菊 王中明 王彦春 王琪 王彬 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第4期859-862,I0009,共5页

目的：观察电针对鱼藤酮诱导的帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型大鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达的影响,探讨电针治疗帕金森病的可能作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针治疗组,每组15只... 目的：观察电针对鱼藤酮诱导的帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型大鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达的影响,探讨电针治疗帕金森病的可能作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针治疗组,每组15只。采取颈背部皮下注射鱼藤酮法制备帕金森病模型,假手术组只注射不含鱼藤酮的等量葵花油乳化液。正常组、假手术组、模型组不进行任何治疗;电针治疗组在造模完成后取穴＂风府＂、＂太冲＂,连续波,频率120次/min,每次治疗20 min,每天1次,疗程为28 d。免疫组化法检测模型大鼠黑质内TH、α-syn的阳性表达,并用Western blot法检测模型大鼠黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn的表达。结果：模型组大鼠表现出明显的PD症候群特征,电针干预后模型大鼠行为学评分明显降低（P〈0.01）;免疫组化法及Westernblot检测显示电针治疗通过上调Lamp2A、Hsc70水平能抑制错误折叠蛋白α-syn的表达,提高TH的阳性表达。结论：电针可以抑制具有细胞毒性作用的α-syn的集聚,保护多巴胺能神经元,抑制帕金森病的发展,其机制可能与干预分子伴侣介导的自噬有关。 展开更多

关键词 帕金森病 电针 分子伴侣介导的自噬 Lamp2A Hsc70 α-syn

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细胞自噬与肿瘤发生发展 被引量：9

11

作者 蒋琦炜 张德宇 +3 位作者 石烟祝 葛祥伟 谢天 叶棋浓 《军事医学》 CAS 2021年第3期234-240,F0003,共8页

自噬是真核生物中一种高度保守的胞内降解途径。其主要通过溶酶体或液泡进行饥饿状态下的营养动员,清除受损蛋白质、细胞器和胞内病原体。自噬主要包括巨自噬、分子伴侣介导自噬(CMA)和微自噬。自噬已被证实与多种人类疾病相关,其在肿... 自噬是真核生物中一种高度保守的胞内降解途径。其主要通过溶酶体或液泡进行饥饿状态下的营养动员,清除受损蛋白质、细胞器和胞内病原体。自噬主要包括巨自噬、分子伴侣介导自噬(CMA)和微自噬。自噬已被证实与多种人类疾病相关,其在肿瘤发生发展中具有重要意义。近年研究中,对于自噬和肿瘤关系有了进一步的认识,该文就自噬分子机制、调控通路以及与肿瘤发生发展关系的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 自噬 肿瘤 巨自噬 分子伴侣介导自噬 微自噬

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溶酶体途径在细胞自噬过程中的功能意义 被引量：9

12

作者 王海杰 谭玉珍 《生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第8期723-729,共7页

溶酶体具有高度保守的异质性,是细胞自噬的关键细胞器。细胞质中的蛋白质和细胞器最终在溶酶体降解,故溶酶体在维持细胞结构和功能的平衡方面起着重要生理作用。通过自噬溶酶体途径,细胞可清除某些病原体并参与抗原呈递。细胞自噬与异... 溶酶体具有高度保守的异质性,是细胞自噬的关键细胞器。细胞质中的蛋白质和细胞器最终在溶酶体降解,故溶酶体在维持细胞结构和功能的平衡方面起着重要生理作用。通过自噬溶酶体途径,细胞可清除某些病原体并参与抗原呈递。细胞自噬与异噬经溶酶体密切联系。自噬过程中溶酶体功能障碍与某些疾病和衰老等相关。对细胞自噬的溶酶体途径及其功能意义作了概述。 展开更多

关键词 溶酶体 自噬 巨自噬 微自噬 分子伴侣介导的自噬

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细胞自噬研究技术进展及其应用 被引量：6

13

作者 王海杰 谭玉珍 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第7期816-821,共6页

在生理状态下,细胞通过自噬清除衰老细胞器和异常长寿蛋白质,维持自身结构和功能的衡定,参与胚胎发育、免疫调节和延长寿命。病理状态下细胞自噬水平显著升高,以耐受饥饿、缺血和凋亡。自噬功能障碍与某些慢性感染疾病、神经变性疾病、... 在生理状态下,细胞通过自噬清除衰老细胞器和异常长寿蛋白质,维持自身结构和功能的衡定,参与胚胎发育、免疫调节和延长寿命。病理状态下细胞自噬水平显著升高,以耐受饥饿、缺血和凋亡。自噬功能障碍与某些慢性感染疾病、神经变性疾病、溶酶体贮积症和肿瘤等密切相关。掌握和合理应用自噬研究技术对于提高细胞自噬研究水平有着重要意义。该文对哺乳类细胞自噬研究技术进展及其应用作了概述。 展开更多

关键词 自噬 巨自噬 微自噬 分子伴侣介导的自噬

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黄芪-当归通过调控巨自噬和分子伴侣介导的自噬缓解大鼠脑缺血/再灌注损伤

14

作者 刘璐瑶 张怡 +5 位作者 李懿航 刘一洁 葛宇欣 都宏飞 袁玟 高维娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1436-1445,共10页

目的:探究黄芪-当归复方药(HQDG)通过调控巨自噬与和分子伴侣介导的自噬(CMA)对脑缺血/再灌注(I/R)损伤7 d时大鼠脑组织的作用及机制。方法:将雄性SD大鼠随机分成假手术(sham)组、模型(model)组、HQDG组和血塞通(XST)组。液质联用技术检... 目的:探究黄芪-当归复方药(HQDG)通过调控巨自噬与和分子伴侣介导的自噬(CMA)对脑缺血/再灌注(I/R)损伤7 d时大鼠脑组织的作用及机制。方法:将雄性SD大鼠随机分成假手术(sham)组、模型(model)组、HQDG组和血塞通(XST)组。液质联用技术检测HQDG的主要化学成分。左侧改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞/再灌注模型,激光散斑血流成像仪观察脑血流变化;Zea Longa评分观察神经功能缺损情况;HE染色观察神经细胞损伤程度;透射电子显微镜观察脑组织神经血管单元和自噬小体数量的变化;免疫组织化学法检测LC3、P62、溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP-2A)、热休克蛋白70(HSP70)和肌细胞增强因子2D(MEF2D)的表达;Western blot法检测P62和LC3的表达。结果:与sham组相比,model组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P<0.01),神经细胞大量坏死,细胞核溶解,细胞排列紊乱,自噬小体数量增多,脑组织中LC3、LAMP-2A、HSP70和MEF2D蛋白表达水平升高,P62蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01);与model组相比,HQDG和XST组脑组织神经功能缺损评分显著降低(P<0.01),细胞损伤明显减轻,自噬小体进一步增多,脑组织中LAMP-2A、HSP70、MEF2D和P62蛋白表达水平降低,LC3-II/LC3-I比值升高(P<0.05或P<0.01)。结论:HQDG可通过激活巨自噬、下调CMA减轻大鼠脑I/R损伤,从而发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 黄芪-当归复方药 脑缺血/再灌注损伤 巨自噬 分子伴侣介导的自噬

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靶向蛋白质降解的新兴技术及其研究进展 被引量：4

15

作者 刘京虹 陈怡敏 蔡晓青 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期313-320,共8页

靶向蛋白质降解技术是近十年来迅速发展起来的一项干扰蛋白质功能的重要技术。目前该领域发展最为成熟的是基于泛素化-蛋白酶体系统的蛋白水解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimera,PROTAC)技术。随着降解机制和降解对象的拓展,近... 靶向蛋白质降解技术是近十年来迅速发展起来的一项干扰蛋白质功能的重要技术。目前该领域发展最为成熟的是基于泛素化-蛋白酶体系统的蛋白水解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimera,PROTAC)技术。随着降解机制和降解对象的拓展,近几年相继涌现出各类新型靶向蛋白质降解技术,包括溶酶体靶向嵌合体(lysosometargeting chimera,LYTAC)技术、自噬靶向嵌合体(autophagy-targeting chimera,AUTAC)技术、自噬小体绑定化合物(autophagosome-tethering compound,ATTEC)技术以及分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)嵌合体技术。新兴的靶向蛋白质降解技术探索真核细胞内的另一重要蛋白质降解体系——溶酶体降解系统,如内吞-溶酶体途径和自噬-溶酶体途径。本综述从各类蛋白质降解系统出发,总结各类蛋白质降解技术的作用机制和特点,重点介绍几类新兴技术的研究现状、优势和存在的问题。 展开更多

关键词 靶向蛋白质降解 蛋白水解靶向嵌合体 溶酶体靶向嵌合体 自噬靶向嵌合体 自噬小体绑定化合物 分子伴侣介导的自噬

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仙鹤草-黄连通过调控分子伴侣介导自噬抑制结直肠癌的作用机制

16

作者 何亚萍 侯敏艳 彭海燕 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期61-71,共11页

目的:观察仙鹤草-黄连药对(XHC-HL)对结直肠肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及对自噬的影响,并探讨XHC-HL通过调控分子伴侣介导自噬(CMA)抑制结直肠癌的作用机制。方法:制备XHC-HL含药血清,培养人结直肠癌细胞株HT29和LOVO,分为空白组(... 目的:观察仙鹤草-黄连药对(XHC-HL)对结直肠肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及对自噬的影响,并探讨XHC-HL通过调控分子伴侣介导自噬(CMA)抑制结直肠癌的作用机制。方法:制备XHC-HL含药血清,培养人结直肠癌细胞株HT29和LOVO,分为空白组(20%空白血清),XHC-HL组(5%、10%、20%含药血清),5-氟尿嘧啶(5-FU)组。用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测细胞活力;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测细胞增殖能力;划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测XHC-HL对自噬关键分子酵母Atg6同系物-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)及p62的影响;Western blot、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测XHC-HL对CMA相关蛋白和mRNA影响。结果:与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组均能抑制HT-29和LOVO细胞活力(P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组均能够明显抑制HT-29和LOVO细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞迁移率均显著减弱(P<0.01),迁移到下室的数量均显著减少(P<0.01),细胞侵袭个数均降低(P<0.01),细胞凋亡增多(P<0.01)。Western blot结果显示,与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中Beclin-1和LC3Ⅱ的表达明显增加(P<0.05,P<0.01),而p62的水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)、热休克同源蛋白70(HSC70)、热休克蛋白90(HSP90)蛋白表达量均有不同程度的降低,甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)表达水平显著增高(P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中LAMP2A、HSC70、HSP90 mRNA水平均下调,GAPDH mRNA表达水平显著上调(P<0.01)。结论:XHC-HL可通过抑制CMA活性,从而抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,诱导其自噬,并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 结直肠癌 仙鹤草-黄连药对 分子伴侣介导自噬 中医药治疗

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分子伴侣介导自噬发生及对疾病影响的研究进展

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作者 俞枭柯 柯美伶 +2 位作者 王令 张涛 路宏朝 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期2299-2303,共5页

自噬,即溶酶体中细胞成分的降解过程[1],它维持细胞在多种生理情况下的内稳态[2]。在这个过程中,细胞质成分被运送到溶酶体进行大量降解,以应对长时间的饥饿、环境中的营养波动、组织发育及重塑、细胞器质量控制或免疫反应[3~5]。自噬... 自噬,即溶酶体中细胞成分的降解过程[1],它维持细胞在多种生理情况下的内稳态[2]。在这个过程中,细胞质成分被运送到溶酶体进行大量降解,以应对长时间的饥饿、环境中的营养波动、组织发育及重塑、细胞器质量控制或免疫反应[3~5]。自噬可以是非选择性的,也可以是选择性的。非选择性自噬通常是由饥饿引起的应激反应,而选择性自噬能够专一的降解蛋白质或细胞器[6~9]。 展开更多

关键词 分子伴侣介导的自噬 神经退行性疾病 癌症

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分子伴侣介导的自噬对胆红素诱导的小鼠小胶质细胞损伤的影响

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作者 潘知繁 李思宇 +2 位作者 李玲 张燕 华子瑜 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期385-393,共9页

目的探讨分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)对未结合胆红素(unconjugated bilirubin,UCB)诱导的小鼠小胶质细胞BV2损伤的影响。方法BV2细胞实验分为两部分。(1)CMA激活实验分为:对照组(等体积二甲基亚砜处理)、QX77... 目的探讨分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)对未结合胆红素(unconjugated bilirubin,UCB)诱导的小鼠小胶质细胞BV2损伤的影响。方法BV2细胞实验分为两部分。(1)CMA激活实验分为:对照组(等体积二甲基亚砜处理)、QX77组(20μmol/L QX77处理24 h)、UCB组(40μmol/L UCB处理24 h)、UCB+QX77组(20μmol/L QX77和40μmol/L UCB共处理24 h)。(2)细胞转染实验分为:LAMP2A沉默对照组(等体积二甲基亚砜处理)、LAMP2A沉默对照+UCB组(40μmol/L UCB处理24 h)、LAMP2A沉默组(等体积二甲基亚砜处理)、LAMP2A沉默+UCB组(40μmol/L UCB处理24 h)。采用改良MTT法检测细胞存活率,蛋白免疫印迹法检测p65、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应法检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA相对表达量,ELISA法检测细胞培养上清液中炎症因子IL-6和TNF-α水平,免疫荧光法检测细胞内p65、NLRP3与热休克同源蛋白70的荧光共定位。结果与UCB组相比,UCB+QX77组细胞存活率升高,炎症相关蛋白p65、NLRP3、caspase-1表达水平降低,炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量降低以及IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05)。与对照组相比,UCB组和UCB+QX77组热休克同源蛋白70与p65、NLRP3存在共定位。沉默LAMP2A基因后,与LAMP2A沉默对照+UCB组相比,LAMP2A沉默+UCB组炎症相关蛋白p65、NLRP3、caspase-1蛋白表达水平升高,炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量升高以及IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05)。结论CMA在UCB诱导的BV2细胞损伤中被抑制,激活CMA可能通过降低p65和NLRP3蛋白水平,抑制炎症反应,拮抗胆红素神经毒性。 展开更多

关键词 胆红素 分子伴侣介导的自噬 神经毒性 小胶质细胞

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白藜芦醇促进分子伴侣介导的自噬减轻神经炎症改善脓毒症相关性脑病小鼠情感功能障碍

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作者 李晓勤 孟昭君 +3 位作者 何晓兰 王嘉炜 杨琳 方宗平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期481-487,共7页

目的 明确分子伴侣介导的自噬(CMA)减轻脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠情感功能障碍的作用。方法 通过盲肠结扎穿孔术(CLP)构建SAE小鼠模型,采用小鼠脓毒症严重程度评分(MSS)评估小鼠脓毒症的严重程度,并进行旷场和高架十字迷宫相关行为学... 目的 明确分子伴侣介导的自噬(CMA)减轻脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠情感功能障碍的作用。方法 通过盲肠结扎穿孔术(CLP)构建SAE小鼠模型,采用小鼠脓毒症严重程度评分(MSS)评估小鼠脓毒症的严重程度,并进行旷场和高架十字迷宫相关行为学实验检测SAE小鼠的情感功能。Western blot法检测热休克蛋白同源蛋白70(HSC70)、溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)蛋白表达水平,免疫荧光组织化学染色检测LAMP2A与神经元的共定位情况。ELISA检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放水平。同时按30 mg/kg剂量每天连续给予白藜芦醇灌胃直至第14天。结果 CLP小鼠14 d死亡率为45.83%,而幸存小鼠均存在情感功能障碍。CLP术后24 h海马神经元HSC70和LAMP2A表达水平显著降低,HMGB1表达水平以及炎症因子IL-6和TNF-α释放增加,CMA活性受损,而在灌胃给予白藜芦醇后,HSC70和LAMP2A表达水平增加,HMGB1表达水平降低,炎症因子释放减少,提示CMA活性提高且神经炎症减轻,行为学测试结果表明在给予小鼠白藜芦醇灌胃后小鼠情感功能障碍得到改善。结论 SAE小鼠海马神经元CMA活性显著降低,导致情感功能障碍;白藜芦醇能够促进CMA,从而抑制HMGB1的表达和炎症因子的释放,减轻神经炎症,从而改善SAE小鼠的情感功能障碍。 展开更多

关键词 脓毒症相关性脑病(SAE) 情感功能障碍 分子伴侣介导的自噬(CMA) 高迁移率族蛋白B1(HMGB1) 白藜芦醇

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巨自噬和分子伴侣介导自噬在内皮细胞氧化应激损伤中的特点 被引量：3

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作者 王正力 訾亚飞 +2 位作者 刘杨东 傅麒宁 王学虎 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1221-1228,共8页

目的 探究巨自噬和分子伴侣介导自噬(chaperone-mediated autophagy, CMA)这两种自噬途径在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)氧化应激损伤中特点。方法 通过不同浓度(0、20、50、100、200μg/mL)氧化... 目的 探究巨自噬和分子伴侣介导自噬(chaperone-mediated autophagy, CMA)这两种自噬途径在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)氧化应激损伤中特点。方法 通过不同浓度(0、20、50、100、200μg/mL)氧化低密度脂蛋白(oxidation low lipoprotein, OX-LDL)作用HUVECs后产生的活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平筛选诱导HUVECs氧化应激的适宜浓度。设立空白对照组(不做任何处理)、单纯抑制巨自噬组(10 mmol/L 3-MA)、氧化应激组(50μg/mL OX-LDL)和抑制巨自噬-氧化应激组(10 mmol/L 3-MA+50μg/mL OX-LDL),检测各组细胞增殖标志蛋白PCNA、凋亡标志蛋白Caspase-3、巨自噬标志蛋白Beclin-1、分子伴侣介导自噬两种标志蛋白Hsc70和Lamp-2蛋白表达,评估不同处理下HUVECs增殖、凋亡及两种自噬的变化。其中氧化应激组和抑制巨自噬-氧化应激组处理不同时间(1、3、6、12、48 h)后,采用CCK-8检测细胞增殖抑制率,Annexin-V/PI双染检测凋亡,Western blot检测两种自噬途径蛋白Beclin-1、Hsc70、Lamp-2表达,评估巨自噬抑制前后氧化应激下HUVECs的增殖、凋亡及两种自噬的时间调控特点。结果 OX-LDL诱导氧化应激下ROS浓度呈递增关系,选择50μg/mL为适宜浓度进行后续实验。与空白对照组比较,氧化应激组HUVECs Caspase-3、Beclin-1、Hsc70、Lamp-2上调,PCNA下调(P<0.05),同时随处理时间延长,48 h内细胞增殖抑制率、全期凋亡率及Lamp-2递增,Hsc70在6 h后递增,12 h内Beclin-1水平递增(P<0.05);与氧化应激组比较,抑制巨自噬-氧化应激组Caspase-3、Hsc70、Lamp-2上调,PCNA下调(P<0.05),随处理时间延长,同时段Hsc70、Lamp-2上调,且Hsc70在3 h后递增(P<0.05)。结论 巨自噬和分子伴侣介导自噬在内皮细胞氧化应激过程中先后激活,巨自噬抑制后提高分子伴侣介导自噬水平,并提前激活时间,减轻氧化应激对内皮细胞的损伤。 展开更多

关键词 分子伴侣介导自噬 巨自噬 氧化应激 人脐静脉内皮细胞

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