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P27基因联合中药片仔癀对人骨肉瘤抑制作用观察 被引量：16
1
作者 张俐 曾启清 林建华 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期511-515,共5页
目的:观察P27基因重组腺病毒联合中药片仔癀对人骨肉瘤裸鼠移植瘤体内生长的抑制作用。方法:①用人骨肉瘤细胞株MG-63接种于裸鼠腋部皮下,连续传代3次,肿瘤生长稳定后,再用组织移植法构建人MG-63细胞裸鼠原位骨肉瘤模型;②肿瘤细胞接种... 目的:观察P27基因重组腺病毒联合中药片仔癀对人骨肉瘤裸鼠移植瘤体内生长的抑制作用。方法:①用人骨肉瘤细胞株MG-63接种于裸鼠腋部皮下,连续传代3次,肿瘤生长稳定后,再用组织移植法构建人MG-63细胞裸鼠原位骨肉瘤模型;②肿瘤细胞接种1周肿瘤长至0.7cm左右时,选择40只肿瘤体积均一的裸鼠随机分成5组:空白对照组(8只),PBS溶液注射治疗;P27基因治疗组(8只),raav-P27病毒液注射治疗;Paav-MCS空载体组(8只),raav-MCS病毒注射治疗;片仔癀组(8只),片仔癀溶液灌胃治疗;联合治疗组(8只),raav-P27病毒液注射联合片仔癀灌胃治疗。③观测指标:骨肉瘤裸鼠成瘤率、荷瘤裸鼠生活质量及毒副反应、肿瘤块的体积和肿瘤的生长抑制率。结果:①成功构建了裸鼠原位骨肉瘤模型;②单纯灌服片仔癀溶液、P27基因治疗及片仔癀、P27基因联合治疗组肿瘤的生长明显受到抑制,与空白对照组及空载体组差异显著(P<0.05),肿瘤生长抑制率分别达32.24%,55.25%与61.84%。空白对照组与空载体组相比,无显著差异(P>0.05);③荷瘤裸鼠一般情况良好,活动能力较强。结论:①腺相关病毒介导的p27基因能有效抑制人骨肉瘤MG-63的生长。②P72基因与片仔癀联合应用后,产生协同作用,其抑瘤效果与改善荷瘤裸鼠的生存情况比单用片仔癀治疗或单用P27基因治疗更明显。③中药片仔癀对提高荷瘤裸鼠的生活质量有一定的帮助。 展开更多
关键词 P27基因 片仔癀 移植瘤 人骨肉瘤 裸鼠原位骨肉瘤模型
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LJH-OS人骨肉瘤裸鼠原位移植模型的建立及其生物学特性 被引量：10
2
作者 师长宏 施新猷 朱德生 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1999年第2期102-106,共5页
用人成骨肉瘤细胞系LJH- OS的传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,未见肺转移,观察7 周无明显消瘦;而胫骨原位移植... 用人成骨肉瘤细胞系LJH- OS的传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,未见肺转移,观察7 周无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤浸润基层,无纤维包膜,且发生肺转移,7 周时有明显消瘦。原位移植的裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者。说明裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适于人骨肉瘤的浸润及转移表达,裸鼠胫骨原位移植模型的恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者的实际情况,该原位移植模型的建立为骨肉瘤的研究提供了良好的实验模型。 展开更多
关键词 胫骨 原位移植模型 裸鼠 人骨肉瘤 肺转移 皮下移植 纤维包膜 生长 生物学特性 传代
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灵芝酸A对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响（英文） 被引量：10
3
作者 邵建立 李志忠 +2 位作者 焦根龙 孙国栋 周志刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期619-624,共6页
目的探讨灵芝酸A对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法体外培养人骨肉瘤HOS和mg-63细胞与0.1、0.25和0.5 mmol/L的灵芝酸A孵育,采用CCK8检测HOS和MG-63细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞的迁移和侵袭。Western ... 目的探讨灵芝酸A对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法体外培养人骨肉瘤HOS和mg-63细胞与0.1、0.25和0.5 mmol/L的灵芝酸A孵育,采用CCK8检测HOS和MG-63细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞的迁移和侵袭。Western blot检测细胞中p-STAT3、STAT3、p-p38、p38和NF-ΚB1蛋白的表达变化。结果灵芝酸A能够显著抑制人类骨肉瘤HOS和MG-63细胞的增殖,促进细胞凋亡以及抑制细胞迁移,并且这种效应存在剂量依赖性。与0.5 mmol/L灵芝酸A孵育能够显著降低HOS和MG-63细胞中STAT3的磷酸化水平,增加p38磷酸化水平,同时增加NF-κB1的表达水平。结论灵芝酸A能够杀死人类骨肉瘤HOS和MG-63细胞,可以作为抗骨肉瘤的药物进行开发。 展开更多
关键词 灵芝酸A 人骨肉瘤 增殖 凋亡
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槲寄生素对人骨肉瘤U20S细胞的抑制及对PI3K/Akt/mTOR通路的调控作用 被引量：9
4
作者 杜兵强 张伟霞 张连平 《中医学报》 CAS 2020年第2期323-329,共7页
目的:探讨槲寄生素对人骨肉瘤U20S细胞的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt/m TOR通路的调控作用。方法:对数期生长U20S细胞分为5组:空白组,阳性组,槲寄生素低剂量组、中剂量组、高剂量组,... 目的:探讨槲寄生素对人骨肉瘤U20S细胞的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt/m TOR通路的调控作用。方法:对数期生长U20S细胞分为5组:空白组,阳性组,槲寄生素低剂量组、中剂量组、高剂量组,空白组、槲寄生素各剂量组分别用0、5、10、20 mg·L^-1槲寄生素溶液处理,阳性组用245 mg·L^-15-FU处理,干预24 h后比较各组细胞形态学变化;采用MTT法检测并对比干预24、48、72 h后细胞增殖情况;分别采用Transwell法、流式细胞术检测并对比干预48 h时穿膜细胞数、凋亡率;分别采用RT-qPCR、Western blot法检测并对比干预48 h时细胞中PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白及磷酸化Akt(pAkt)蛋白表达情况。结果:空白组细胞生长状态良好,不同干预组细胞数量减少、轮廓及遮光性变差,部分细胞变圆,呈漂浮状态,其中槲寄生素高剂量干预组生长状态最差。不同时刻各干预组MTT实验OD值从大至小、穿膜细胞数从多至少依次为:空白组>槲寄生素低剂量组>阳性组>槲寄生素中剂量组>槲寄生素高剂量组,除阳性组与槲寄生素中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他各组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);槲寄生素高剂量组48 h、72 h OD值均高于24 h(P<0.05),48 h、72 h OD值比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他各组OD值均随时间的延长呈升高趋势(P<0.05)。各干预组凋亡率从低至高依次为:空白组<槲寄生素低剂量组<阳性组<槲寄生素中剂量组<槲寄生素高剂量组,除阳性组与槲寄生素中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他各组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各干预组PI3K、mTOR mRNA和蛋白相对表达量、p Akt/Akt从高至低依次为:空白组>槲寄生素低剂量组>阳性组>槲寄生素中剂量组>槲寄生素高剂量组,除阳性组与槲寄生素中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他各组两两比� 展开更多
关键词 槲寄生素 人骨肉瘤 磷脂酰肌醇-3激酶 AKT MTOR
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TRAIL受体在人骨肉瘤组织中的表达 被引量：7
5
作者 祝少博 陈振光 +2 位作者 喻爱喜 方成 曹长军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期633-634,共2页
目的　研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)受体在骨肉瘤细胞中的表达情况。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)对 2 2例骨肉瘤组织标本、MG 63骨肉瘤细胞株、U2 5 1脑胶质瘤细胞株以及正常人外周血淋巴细胞TRAILR1 R4mRNA... 目的　研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)受体在骨肉瘤细胞中的表达情况。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)对 2 2例骨肉瘤组织标本、MG 63骨肉瘤细胞株、U2 5 1脑胶质瘤细胞株以及正常人外周血淋巴细胞TRAILR1 R4mRNA表达进行检测。结果2 2例骨肉瘤组织标本中 15例同时表达TRAILR1、 R2和 R3 ,4例同时表达TRAIL R1和 R2 ,只表达TRAIL R1或 R2者 3例 ,所有标本中均未检测到TRAIL R4表达 ;MG 63骨肉瘤细胞株、U2 5 1脑胶质瘤细胞株以及正常人外周血淋巴细胞则均检测到TRAILR1、 R2和 R3的联合表达。结论　死亡受体TRAIL R1,R2在骨肉瘤中的普遍表达 ,是TRAIL诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础 ;死亡受体和诱骗受体的差异性分布 ,并非TRAIL对选择性杀伤肿瘤细胞的关键性因素 ,可能还受其它因子调控。 展开更多
关键词 TRAIL受体 人骨肉瘤 TRAIL 外周血 淋巴细胞 检测 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
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蛋白酶体抑制剂MG132诱导骨肉瘤细胞凋亡及其对p27^(Kip1)蛋白表达的影响 被引量：5
6
作者 杨迪生 高翔 +2 位作者 叶招明 陶惠民 李伟栩 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期613-617,共5页
目的探讨蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO(MG132)对人骨肉瘤MG-63细胞诱导凋亡的作用及其对p27Kip1蛋白表达的影响。方法分别以不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG132培养p53突变型人骨肉瘤MG-63细胞、正常二倍体成纤维细胞WI-38和p53野生型人骨肉瘤U... 目的探讨蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO(MG132)对人骨肉瘤MG-63细胞诱导凋亡的作用及其对p27Kip1蛋白表达的影响。方法分别以不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG132培养p53突变型人骨肉瘤MG-63细胞、正常二倍体成纤维细胞WI-38和p53野生型人骨肉瘤U2OS细胞。通过MTT法检测不同培养时间的细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡、流式细胞仪定量检测不同时间的细胞凋亡发生率、Westernblot检测p27Kip1表达情况。结果MG132能选择性抑制人骨肉瘤MG-63和U2OS细胞生长,IC50分别为(0.92±0.06)μmol/L及(0.33±0.05)μmol/L,均低于二倍体成纤维WI-38细胞(9.13±0.12)μmol/L。1μmol/LMG132处理MG-63细胞24h后,DNA琼脂糖凝胶电泳可检测到典型的“阶梯状”DNA条带,而WI-38细胞则为基因组DNA。流式细胞仪于1μmol/LMG132作用12h后检测到明显的亚G1峰(凋亡细胞峰),且存在时效关系。Westernblot发现,处理后p27Kip1蛋白表达明显上调。结论蛋白酶体抑制剂MG132在体外可选择性诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡。p27Kip1蛋白在诱导MG-63细胞凋亡中可能起重要作用。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制药 骨肉瘤 细胞凋亡 P27KIP1蛋白 蛋白酶体抑制剂 瘤细胞凋亡 人骨肉瘤 蛋白表达 DNA琼脂糖凝胶电泳 MG-63细胞 WI-38细胞 MTT法检测
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线粒体二羧酸盐载体SLC25A10:肿瘤防治的新靶点
7
作者 方玉 周艺涵 +2 位作者 张青春 丁伟峰 张健锋 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期3138-3144,共7页
细胞代谢失调对维持癌细胞的恶性增殖至关重要,线粒体内膜中的溶质载体25(SLC25)核编码转运体家族深度参与细胞代谢,SLC25A10在多种实体肿瘤中高表达,这可能是一种新的肿瘤防治的靶点。该文将总结线粒体SLC25A10载体的相关作用,并将对... 细胞代谢失调对维持癌细胞的恶性增殖至关重要,线粒体内膜中的溶质载体25(SLC25)核编码转运体家族深度参与细胞代谢,SLC25A10在多种实体肿瘤中高表达,这可能是一种新的肿瘤防治的靶点。该文将总结线粒体SLC25A10载体的相关作用,并将对其在肿瘤中的进展及癌细胞代谢中的影响作一综述。 展开更多
关键词 SLC25A10 谷胱甘肽 肝癌 人骨肉瘤 肺癌
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人骨肉瘤9607细胞cDNA表达文库的构建和鉴定 被引量：5
8
作者 廖博 马保安 +4 位作者 张惠中 龙华 张鹏 范清宇 陈刚 《中国临床康复》 CAS CSCD 2003年第14期2038-2039,T002,共3页
目的构建骨肉瘤9607细胞cDNA表达文库,为筛选骨肉瘤特异性抗原创造条件,最终从临床角度增加患者预后质量和开辟患者康复的新途径。方法从9607细胞中提取TotalRNA,分离mRNA,反转录合成双链cDNA,末端削平,和EcoRⅠ适配子连接,磷酸化EcoR... 目的构建骨肉瘤9607细胞cDNA表达文库,为筛选骨肉瘤特异性抗原创造条件,最终从临床角度增加患者预后质量和开辟患者康复的新途径。方法从9607细胞中提取TotalRNA,分离mRNA,反转录合成双链cDNA,末端削平,和EcoRⅠ适配子连接,磷酸化EcoRⅠ适配子5’端,Sephacryl-S400柱除去小于400bpcDNA片段,和噬菌体λgt11(载体)连接,包装蛋白体外包装后形成初级cDNA文库。取适量倍比稀释后感染E.coliY1090,测定文库克隆数、重组率,用PCR法测定cDNA插入片段大小。结果建成含1.3×106重组子的骨肉瘤9607细胞cDNA表达文库,重组率93.5%,重组子插入外源片段不小于0.5kb,平均长约1.3kb。结论达到良好文库的质量标准,适合进一步筛选目的cDNA克隆,以开辟提高患者康复的途径。 展开更多
关键词 人骨肉瘤 9607细胞 cDNA表达 文库 构建 鉴定 康复
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增殖细胞核抗原短发夹状RNA对人骨肉瘤细胞生长的影响 被引量：4
9
作者 张其亮 杨述华 +1 位作者 刘红云 吴翠环 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期167-170,共4页
目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体,检测其对人骨肉瘤细胞PCNA表达、细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法体外构建PCNAshRNA表达载体pSilence2.1neo-PCNA,转染人骨肉瘤细胞系MG63,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测转染前后P... 目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体,检测其对人骨肉瘤细胞PCNA表达、细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法体外构建PCNAshRNA表达载体pSilence2.1neo-PCNA,转染人骨肉瘤细胞系MG63,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测转染前后PCNAmRNA表达,免疫组织化学(SP)法检测转染前后PCNA蛋白的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及克隆形成试验检测细胞增殖活性,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)细胞掺入试验检测细胞DNA合成,流式细胞仪检测细胞周期分布,吖啶橙染色法检测细胞凋亡情况。结果pSilence2.1neo-PCNA载体转染能显著抑制PCNAmRNA及蛋白的表达,转染后mRNA表达抑制率为80.51%、增殖指数值为空白组的25.68%。转染组48h细胞增殖抑制率为61.78%,转染组3H-TdR掺入率明显低于空白组(P<0.01)。细胞周期分析显示,siRNA转染组G0G1期细胞含量显著增加,而S期细胞含量显著减低。转染组凋亡率为16.54%。结论pSilence2.1neo-PCNA可显著抑制MG63细胞PCNA的表达及细胞增殖活性,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 转染 PCNA 瘤细胞 人骨肉瘤 表达载体 增殖细胞核抗原 细胞凋亡 短发夹状RNA 细胞DNA 克隆
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p21^(WAF1)基因表达对人骨肉瘤预后的价值 被引量：3
10
作者 张春林 廖威明 +2 位作者 李佛保 曾炳芳 曾益新 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期524-527,共4页
目的探讨骨肉瘤组织中p21WAF1基因的表达与骨肉瘤生物学特性及预后的关系。方法采用原位杂交及免疫组织化学(LSAB法)检测p21WAF1mRNA及p21蛋白在45例骨肉瘤、10例骨纤维结构不良实体瘤组织标本的表达。结果(1)p21蛋白阳性表达率在骨肉... 目的探讨骨肉瘤组织中p21WAF1基因的表达与骨肉瘤生物学特性及预后的关系。方法采用原位杂交及免疫组织化学(LSAB法)检测p21WAF1mRNA及p21蛋白在45例骨肉瘤、10例骨纤维结构不良实体瘤组织标本的表达。结果(1)p21蛋白阳性表达率在骨肉瘤中为17.7%(8/45);(2)骨肉瘤组织高分化组与低分化组的p21蛋白阳性表达率之间的差异有统计学意义(40.0%,11.4%,χ2=4.34,P<0.05);(3)p21WAF1mRNA表达阳性率在骨肉瘤中为42.2%(19/45),骨肉瘤组织高分化组与低分化组的p21WAF1mRNA阳性表达率之间的差异有统计学意义(60.0%,37.1%,χ2=20.6,P<0.01);(4)p21WAF1mRNA表达阳性者术后生存时间高于表达阴性者术后生存时间(P<0.05)。结论(1)随着骨肉瘤恶性度的升高,p21WAF1基因mRNA及p21蛋白的表达下降。(2)p21WAF1基因mRNA在骨肉瘤中的表达对评价患者的预后有一定价值。 展开更多
关键词 骨肉瘤 基因 抑制 肿瘤 预后 P21^WAF1基因 人骨肉瘤 基因表达 价值 P21蛋白 mRNA表达 基因mRNA
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miR-34a对人成骨肉瘤MG-63细胞生长增殖的影响 被引量：4
11
作者 王桂勇 方松清 《中国现代医生》 2013年第21期23-24,共2页
目的探讨miR-34a对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响。方法运用miR-34a的mimics或inhibitors分别转染人成骨肉瘤MG-63细胞,分别为实验组,脂质体2000为对照组,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞增殖情况。结果对照组吸光度值在24 h、48 h... 目的探讨miR-34a对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响。方法运用miR-34a的mimics或inhibitors分别转染人成骨肉瘤MG-63细胞,分别为实验组,脂质体2000为对照组,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞增殖情况。结果对照组吸光度值在24 h、48 h和72 h分别为(0.33±0.02)、(0.55±0.03)、(0.75±0.06);miR-34a mimics可抑制MG-63细胞增殖,其吸光度值分别降至(0.21±0.02)、(0.26±0.03)、(0.31±0.04),经统计学分析,差异有统计学意义(P<0.01);miR-34a inhibitors可使人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖活性增强,其吸光度值分别增加到(0.41±0.05)、(0.71±0.08)、(0.94±0.08),经统计学分析差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-34a可使人成骨肉瘤细胞的增殖活性下调,其在骨肉瘤的发生发展中可能发挥一个抑瘤基因的作用。 展开更多
关键词 MIR-34A 人骨肉瘤 细胞生长
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基于网络药理学和体外实验探析盐酸药根碱对人骨肉瘤的机制研究
12
作者 赵冰洁 阮英 宁志丰 《湖北科技学院学报（医学版）》 2023年第6期499-505,共7页
目的采用网络药理学、分子对接技术和细胞实验,探讨盐酸药根碱(JH)对人骨肉瘤细胞(HOS)的潜在作用靶点和对细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及作用机制。方法首先通过数据库筛选JH的成分靶点,HOS相关的疾病靶点,以此来构建药物-靶点-疾病... 目的采用网络药理学、分子对接技术和细胞实验,探讨盐酸药根碱(JH)对人骨肉瘤细胞(HOS)的潜在作用靶点和对细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及作用机制。方法首先通过数据库筛选JH的成分靶点,HOS相关的疾病靶点,以此来构建药物-靶点-疾病可视化网络和蛋白相互作用网络(PPI),然后进行GO和KEGG富集分析,采用分子对接软件对潜在的作用靶点(靶点数目最多的活性成分和蛋白相互作用中自由度最大的蛋白质)进行验证。采用不同浓度的JH处理HOS,通过MTT测定、平板克隆形成、Transwell小室侵袭与迁移实验证实JH在HOS细胞增殖中的抑制作用。结果该研究共获得JH抗HOS的靶点共有26个,富集分析提示JH通过多种信号途径发挥抗HOS的作用;分子对接显示JH与主要靶点之间具有良好的结合活性;与对照组相比,JH能显著降低HOS细胞活性;与对照组相比,JH组细胞的增殖、迁移能力显著降低。结论JH可能通过多种靶点有效抑制HOS增殖。经体外细胞实验验证表明,JH随着浓度增加,可抑制HOS的增殖、侵袭和迁移。因此,可能是一种有效的潜在抗HOS药物。 展开更多
关键词 盐酸药根碱 人骨肉瘤 增殖 网络药理学 分子对接
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Ether à go-go1通道在人骨肉瘤中的表达及其意义 被引量：3
13
作者 吴进 吴欣宇 +3 位作者 甘璐 王建勋 杨彤涛 周勇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2329-2330,共2页
骨肉瘤是青少年最常见的恶性骨肿瘤，恶性程度高，易发生转移。本实验旨在检测Ether à go-go1（EAGly在人骨肉瘤中的表达、意义及对人骨肉瘤细胞增殖和周期的影响。一。
关键词 人骨肉瘤 通道 恶性骨肿瘤 恶性程度 细胞增殖 青少年
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穿心莲内酯对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞株增殖、侵袭、迁移的影响及机制 被引量：2
14
作者 柳勋法 马凤清 张翠灵 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第5期536-541,共6页
目的探讨穿心莲内酯(AG)对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞株增殖、侵袭及迁移的影响和机制。方法取对数生长期的人骨肉瘤细胞HOS、U2OS细胞株,分别予不含AG及10、20 mmol/L AG处理72 h,采用细胞增殖实验检测各组HOS、U2OS细胞0、24、48及72 h的... 目的探讨穿心莲内酯(AG)对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞株增殖、侵袭及迁移的影响和机制。方法取对数生长期的人骨肉瘤细胞HOS、U2OS细胞株,分别予不含AG及10、20 mmol/L AG处理72 h,采用细胞增殖实验检测各组HOS、U2OS细胞0、24、48及72 h的吸光度,采用划痕试验和Transwell法分别检测各组HOS、U2OS细胞处理48 h的迁移能力和侵袭能力,采用Western blot检测各组HOS、U2OS细胞处理72 h的周期素依赖性激酶4(CDK4)和CDK6蛋白表达。结果20 mmol/L AG组HOS、U2OS细胞培养24、48及72 h的吸光度低于不含AG组和10 mmol/L AG组,差异均有统计学意义(P<0.05);20 mmol/L AG组HOS、U2OS细胞的侵袭数目及迁移率分别低于不含AG组和10 mmol/L AG组,差异均有统计学意义(P<0.05);20 mmol/L AG组HOS、U2OS细胞CDK4、CDK6蛋白水平分别低于不含AG组和10 mmol/L AG组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论AG可抑制人骨肉瘤HOS、U2OS细胞株的增殖、侵袭及迁移能力,其机制可能与调控细胞内CDK4、CDK6表达有关。 展开更多
关键词 细胞增殖 细胞运动 穿心莲内酯 人骨肉瘤 HOS细胞 U2OS细胞 侵袭
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牛蒡子苷元对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及细胞凋亡的影响 被引量：3
15
作者 顾启滨 邓立明 钟诚 《临床医学工程》 2017年第12期1670-1672,共3页
目的探讨牛蒡子苷元对人骨肉瘤MG-63细胞系增殖及凋亡的影响。方法以人骨肉瘤MG-63细胞系为研究对象,采用不同浓度(1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL)的牛蒡子苷元处理细胞。采用CCK-8法测定细胞体外增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况... 目的探讨牛蒡子苷元对人骨肉瘤MG-63细胞系增殖及凋亡的影响。方法以人骨肉瘤MG-63细胞系为研究对象,采用不同浓度(1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL)的牛蒡子苷元处理细胞。采用CCK-8法测定细胞体外增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax和VEGFR-2基因的表达水平变化。结果牛蒡子苷元能够抑制骨肿瘤细胞MG-63的增殖,促进细胞凋亡,随着药物浓度的增加能够降低Bcl-2基因的表达,升高Bax基因的表达,抑制VEGFR-2基因的表达。结论牛蒡子苷元可诱导人骨肉瘤MG-63细胞系发生凋亡,抑制其细胞增殖能力,并能抑制Bcl-2和VEGFR-2基因的表达水平,同时能够诱导促凋亡基因Bax表达水平的上升,这些结果阐明了其抗肿瘤作用中存在的作用机制。 展开更多
关键词 牛蒡子苷元 人骨肉瘤 MG-63细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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奇果菌素诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡及其机制的研究 被引量：3
16
作者 靳松 沈靖南 +4 位作者 彭建强 王晋 黄纲 李浩淼 尹军强 《中国骨与关节杂志》 CAS 2012年第2期165-168,181,共5页
目的研究奇果菌素(grifolin)诱导骨肉瘤U2OS细胞体外生长抑制及诱导凋亡的作用及其机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定奇果菌素对U2OS细胞的生长抑制实验;荧光显微镜下(Hoechst33258荧光染色)观察细胞核形态学变化;流式细胞... 目的研究奇果菌素(grifolin)诱导骨肉瘤U2OS细胞体外生长抑制及诱导凋亡的作用及其机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定奇果菌素对U2OS细胞的生长抑制实验;荧光显微镜下(Hoechst33258荧光染色)观察细胞核形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;Western blot法检测Akt、GSK3、FKHRL蛋白表达。结果奇果菌素的浓度在50μm以上时对骨肉瘤U2OS细胞具有明显的生长抑制作用,呈明显的时间和浓度效应关系;并能诱导细胞发生凋亡,出现凋亡小体,呈典型的凋亡细胞形态;随着药物浓度的增加和作用时间的延长,细胞的生长抑制率及细胞凋亡率均明显升高,50.0μm的奇果菌素作用U2OS细胞0,6,12,24h后,细胞出现不同程度的亚G_1峰,细胞凋亡率分别为1.96%、13.91%、52.6%、63.5%;Western blot法分析表明U2OS细胞经过50.0μm和100μm的奇果菌素作用24h后,U2OS细胞的Akt、FKHRL、GSK3的表达均下调,表示其表达水平及活性显著降低。结论奇果菌素能够通过诱导人骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡而发挥抑制U2OS细胞生长作用,尤其当奇果菌素的浓度>50.0μm,其对U2OS细胞增生的抑制作用呈剂量和时间依赖性,抑制Akt和GSK3的活性是奇果菌素体外诱导人骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡的重要作用机制之一。 展开更多
关键词 人骨肉瘤 奇果菌素 细胞凋亡 AKT/PKB
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人骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达 被引量：1
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作者 王义生 李月白 +3 位作者 张岩 许建中 殷力 卢中道 《中国骨肿瘤骨病》 CAS 2004年第2期125-128,共4页
目的 探讨P27和cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化S-P法检测30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤中P27和cyclinE蛋白的表达。结果 在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的P27蛋白阳性表达率分别为33.3％和80.0... 目的 探讨P27和cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化S-P法检测30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤中P27和cyclinE蛋白的表达。结果 在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的P27蛋白阳性表达率分别为33.3％和80.0％,两者差异显著(P<0.05)。而且,两组中P27蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的cyclinE蛋白阳性表达率分别为93.3％和30.0％,两者差异显著(P<0.05)。两组中cyclinE蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达强度呈显著负相关(r_s=-0.432,P<0.05)。结论 P27蛋白在骨肉瘤中低表达,cyclinE蛋白在骨肉瘤中高表达,两者有相关性,均与骨肉瘤发生、发展有关。 展开更多
关键词 人骨肉瘤 P27 CYCLINE蛋白 基因表达 肿瘤 免疫组化
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Smac在TRAIL诱导人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡中的作用 被引量：1
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作者 金军 赵健 +5 位作者 李博华 张霞 张瑞萍 李晓东 钱卫珠 郭亚军 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期87-89,共3页
目的 :初步研究 Smac在 TNF相关的凋亡诱导配体 (TNF- related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤 Saos- 2细胞凋亡中的作用。 方法 :观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析 TRAIL 作用的 Saos- 2细胞 DNA片段 ,利用流... 目的 :初步研究 Smac在 TNF相关的凋亡诱导配体 (TNF- related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤 Saos- 2细胞凋亡中的作用。 方法 :观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析 TRAIL 作用的 Saos- 2细胞 DNA片段 ,利用流式细胞术及细胞计数法比较 Smac或 Bcl- 2表达不同的细胞的凋亡程度 ,同时以 Western印迹半定量检测细胞胞质内Sm ac表达水平。结果 :Saos- 2细胞在 TRAIL 的作用下出现典型的凋亡样改变。在 TRAIL 作用 Saos- 2细胞时 ,Smac在胞质中的含量明显增加。在 TRAIL 作用 2 4 h后 ,Smac在 Saos- 2细胞中过表达 ,细胞凋亡率由 1 2 .7%增加到 31 .4 %。TRAIL 作用 Saos- 2细胞 4 8h后 ,转染 Bcl- 2的细胞与转染空载体的 Saos- 2细胞相比 ,凋亡率显著降低 (由 2 4 %降至 1 5 % ) ,且胞质中Sm ac的表达水平也明显降低。 结论 :在 TRAIL 诱导的凋亡中 Sm ac起促进作用 ,Bcl- 2可以通过阻止 Sm 展开更多
关键词 SMAC TRAIL 人骨肉瘤 SAOS-2 细胞凋亡 凋亡诱导配体
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抗人骨肉瘤单克隆抗体5D3的特异性鉴定 被引量：1
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作者 何大为 范清宇 +1 位作者 张惠中 裘秀春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期161-162,共2页
目的　　鉴定抗人骨肉瘤单克隆抗体（ｍＡｂ）　５Ｄ３的特异性。方法用免疫组化染色法检测ｍＡｂ　５Ｄ３与骨肉瘤细胞系、骨肉瘤组织、其它肿瘤组织及正常组织的反应性。结果免疫组化染色检测发现，ｍＡｂ　５Ｄ３相应抗原在部分骨源... 目的　　鉴定抗人骨肉瘤单克隆抗体（ｍＡｂ）　５Ｄ３的特异性。方法用免疫组化染色法检测ｍＡｂ　５Ｄ３与骨肉瘤细胞系、骨肉瘤组织、其它肿瘤组织及正常组织的反应性。结果免疫组化染色检测发现，ｍＡｂ　５Ｄ３相应抗原在部分骨源性肿瘤，特别是骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系呈高度表达，中度以上染色者占阳性总数的７７％以上，主要分布于细胞核上。１４种正常组织中未见阳性反应。结论ｍＡｂ　５Ｄ３具有高度特异性，为骨肉瘤的早期诊断及免疫治疗提供了可能性。 展开更多
关键词 人骨肉瘤 单克隆抗体 免疫组化染色 特异性鉴定 诊断 治疗
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骨骼
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《中国癌症防治杂志》 CAS 1994年第4期287-289,共3页
关键词 骨巨细胞瘤 骨肿瘤 脊索瘤 骨肉瘤病 术后放射治疗 人骨肉瘤 骨样组织 高倍体细胞 脆性部位 细胞遗传学研究
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