目的:观察糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGEs)对人肾系膜细胞(hum an renal m esangial cell,HRMC)基质金属蛋白酶-2(m atrix m etalloprote inase,MMP-2)表达的影响。方法:运用糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA...目的:观察糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGEs)对人肾系膜细胞(hum an renal m esangial cell,HRMC)基质金属蛋白酶-2(m atrix m etalloprote inase,MMP-2)表达的影响。方法:运用糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)干预体外培养的HRMC,W estern b lot检测系膜细胞MMP-2蛋白表达。结果:HRMC的MMP-2蛋白表达水平随AGE-BSA浓度增加和干预时间延长而降低(P<0.01)。结论:MMP-2可能参与AGEs所致的糖尿病肾病的发生发展。展开更多
目的:观察肾素前体(prorenin)能否激活体外培养的人肾系膜细胞(HRMCs)膜表面的肾素(前体)受体[(P)RR],从而活化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路。方法:体外培养HRMCs。以血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)阻断剂olmsartan和血管紧张素Ⅱ...目的:观察肾素前体(prorenin)能否激活体外培养的人肾系膜细胞(HRMCs)膜表面的肾素(前体)受体[(P)RR],从而活化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路。方法:体外培养HRMCs。以血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)阻断剂olmsartan和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)阻断剂PD123319孵育细胞,再以prorenin刺激细胞,并用ERK1/2抑制剂PD98059和HRP(handle region peptide)干预。用免疫蛋白印迹方法(Western blotting)和酶标记免疫吸附测定方法(ELISA)测定目的蛋白水平,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定mRNA水平。结果:Prorenin作用于体外培养的HRMCs后,在阻断AT1和AT2受体时,能激活(P)RR使ERK1/2磷酸化增强、转化生长因子(TGF-β)水平增高。这种ERK1/2信号通路的激活是(P)RR激活后效应,并可被ERK1/2信号通道阻断剂PD98059阻断。HRP不能阻断(P)RR激活所致的ERK1/2磷酸化,不能使TGF-β表达降低。结论:在体外培养的HRMCs中,prorenin能够激活(P)RR,使ERK1/2信号通道活化导致TGF-β水平增高。而HRP不能阻断(P)RR激活后ERK1/2的磷酸化及TGF-β表达的增多。展开更多
文摘目的:观察糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGEs)对人肾系膜细胞(hum an renal m esangial cell,HRMC)基质金属蛋白酶-2(m atrix m etalloprote inase,MMP-2)表达的影响。方法:运用糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)干预体外培养的HRMC,W estern b lot检测系膜细胞MMP-2蛋白表达。结果:HRMC的MMP-2蛋白表达水平随AGE-BSA浓度增加和干预时间延长而降低(P<0.01)。结论:MMP-2可能参与AGEs所致的糖尿病肾病的发生发展。
文摘目的:观察肾素前体(prorenin)能否激活体外培养的人肾系膜细胞(HRMCs)膜表面的肾素(前体)受体[(P)RR],从而活化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路。方法:体外培养HRMCs。以血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)阻断剂olmsartan和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)阻断剂PD123319孵育细胞,再以prorenin刺激细胞,并用ERK1/2抑制剂PD98059和HRP(handle region peptide)干预。用免疫蛋白印迹方法(Western blotting)和酶标记免疫吸附测定方法(ELISA)测定目的蛋白水平,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定mRNA水平。结果:Prorenin作用于体外培养的HRMCs后,在阻断AT1和AT2受体时,能激活(P)RR使ERK1/2磷酸化增强、转化生长因子(TGF-β)水平增高。这种ERK1/2信号通路的激活是(P)RR激活后效应,并可被ERK1/2信号通道阻断剂PD98059阻断。HRP不能阻断(P)RR激活所致的ERK1/2磷酸化,不能使TGF-β表达降低。结论:在体外培养的HRMCs中,prorenin能够激活(P)RR,使ERK1/2信号通道活化导致TGF-β水平增高。而HRP不能阻断(P)RR激活后ERK1/2的磷酸化及TGF-β表达的增多。