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人小细胞肺癌细胞H446及其MDR细胞H446/DDP受顺铂冲击后乳酸代谢与活性氧产生情况 被引量:9
1
作者 梁丽峰 李佩佩 +4 位作者 常蕊静 南岩东 戢福云 钱桂生 金发光 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2013年第2期30-33,共4页
目的通过检测人小细胞肺癌(SCLC)细胞H446及其获得性多药耐药(MDR)细胞H446/DDP受顺铂(DDP)冲击后乳酸代谢与活性氧(ROS)水平的变化,了解SCLC获得性MDR细胞的分子生物学变化,为逆转耐药提供理论和实验依据。方法体外常规培养SCLC细胞H44... 目的通过检测人小细胞肺癌(SCLC)细胞H446及其获得性多药耐药(MDR)细胞H446/DDP受顺铂(DDP)冲击后乳酸代谢与活性氧(ROS)水平的变化,了解SCLC获得性MDR细胞的分子生物学变化,为逆转耐药提供理论和实验依据。方法体外常规培养SCLC细胞H446及H446/DDP细胞,经相同浓度(0.5μg/ml)、不同时间点的顺铂刺激后,分别应用干化学方法和激光共聚焦显微镜法检测乳酸浓度和ROS水平。结果顺铂刺激24h内,H446细胞和H446/DDP细胞乳酸浓度没有差异,但随着时间的延长,H446细胞乳酸产量显著性高于H446/DDP细胞。此外,顺铂刺激40min内,H446/DDP细胞ROS产量呈衰减趋势,而H446细胞ROS产量随着时间的延长而增加,15min时达到峰值,随后逐渐降低,并伴随细胞皱缩这一现象。结论较强的抗氧化损伤能力可能是SCLC获得性MDR抵御顺铂损伤的重要因素。 展开更多
关键词 细胞肺癌 多药耐药 乳酸代谢 活性氧水平
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联合新型Bcl-2反义核酸与足叶乙苷抑制人小细胞肺癌细胞的增殖 被引量:5
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作者 林芸秀 吕联煌 +1 位作者 林振兴 陈英玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期58-60,共3页
目的 研究一种新型Bcl 2反义寡核苷酸 F95 1在与足叶乙苷 (VP16 )联合使用时 ,对人小细胞肺癌细胞增殖的影响。方法 分别单独及联合应用F95 1、VP16于人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6 ,通过MTT法检测细胞存活率 ,通过集落形成法检测集... 目的 研究一种新型Bcl 2反义寡核苷酸 F95 1在与足叶乙苷 (VP16 )联合使用时 ,对人小细胞肺癌细胞增殖的影响。方法 分别单独及联合应用F95 1、VP16于人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6 ,通过MTT法检测细胞存活率 ,通过集落形成法检测集落生存率 ,按Welander法计算联合应用组的预测值 ,通过实测值与预测值的比较进行效应分析。结果 细胞存活率 (MTT法 )和集落生存率 (集落形成法 )均显示联合应用F95 1、VP16组的实测值明显低于预测值。结论 联合应用F95 1与VP16对人小细胞肺癌细胞的增殖有协同的抑制作用。 展开更多
关键词 F951(Bcl-2反义硫代磷酸寡核苷酸) 细胞肺癌 细胞增殖 协同效应
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人小细胞肺癌细胞H446 Snail基因表达及其在顺铂耐药中的作用 被引量:6
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作者 况里杉 周向东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1197-1199,共3页
目的观察锌指转录因子snail在耐顺铂(cisplatin,CDDP)的人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞中的表达情况,探讨snail表达在人SCLC顺铂耐药中的作用。方法培养H446细胞系和H446/CDDP细胞系,采用MTT法检测H446/CDDP... 目的观察锌指转录因子snail在耐顺铂(cisplatin,CDDP)的人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞中的表达情况,探讨snail表达在人SCLC顺铂耐药中的作用。方法培养H446细胞系和H446/CDDP细胞系,采用MTT法检测H446/CDDP的耐药指数;分别提取人SCLC顺铂耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的mRNA及总蛋白,应用sybgreen实时荧光RT-PCR、Western blot方法检测snail mRNA及蛋白表达水平。结果 H446/CDDP细胞snail蛋白及mRNA表达水平较H446细胞显著性升高(P<0.05)。结论 SCLC的顺铂耐药性可能与snail表达水平增高有关。 展开更多
关键词 细胞肺癌 顺铂耐药 SNAIL real time RT-PCR WESTERN BLOT
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人小细胞肺癌多药耐药细胞H446/CDDP基因组DNA甲基化状态的变化 被引量:4
4
作者 郭芮伶 吴国明 +4 位作者 李海东 潘峰 李文碧 戢福云 钱桂生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期2533-2535,共3页
目的探讨基因组DNA甲基化状态与人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞获得性多药耐药的关系。方法分别提取人SCLC多药耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的基因组DNA,应用甲基化敏感性随机引物PCR(MS-AP-PCR)方法检... 目的探讨基因组DNA甲基化状态与人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞获得性多药耐药的关系。方法分别提取人SCLC多药耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的基因组DNA,应用甲基化敏感性随机引物PCR(MS-AP-PCR)方法检测其甲基化状态。结果 H446/CDDP细胞经酶解后的扩增谱带较H446细胞明显增多,且荧光强度较强,表明其基因组DNA甲基化水平较亲代细胞明显增高。结论 H446/CDDP细胞多药耐药性的获得可能与其基因组DNA甲基化水平增高有关。 展开更多
关键词 细胞肺癌 多药耐药 DNA甲基化 甲基化敏感性随机引物PCR法
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鸦胆子油软胶囊对裸鼠移植人小细胞肺癌LTEP-SML抑瘤作用 被引量:3
5
作者 吴泽榕 孔焕宇 +1 位作者 刘朝阳 朱佳 《药品评价》 CAS 2006年第6期436-437,439,共3页
目的观察鸦胆子油软胶囊的抑瘤活性、疗效及量效关系。方法以鸦胆子油口服乳液为阳性对照药,通过建立裸鼠移植人小细胞肺癌LTEP-SML模型,观察鸦胆子油软胶囊对裸鼠肿瘤体积的抑制情况并计算抑瘤率。结果鸦胆子油软胶囊对LTEP-SML具有明... 目的观察鸦胆子油软胶囊的抑瘤活性、疗效及量效关系。方法以鸦胆子油口服乳液为阳性对照药,通过建立裸鼠移植人小细胞肺癌LTEP-SML模型,观察鸦胆子油软胶囊对裸鼠肿瘤体积的抑制情况并计算抑瘤率。结果鸦胆子油软胶囊对LTEP-SML具有明显抑瘤活性,抑瘤率分别为43.02%、33.08%,与空白对照组比较差异显著(P<0.05)。结论鸦胆子油软胶囊体内对人小细胞肺癌LTEP-SML具有明显抑瘤活性,抑瘤效应与剂量间具有量-效关系。与鸦胆子油口服乳液体内对人小细胞肺癌LTEP-SML的疗效相似。 展开更多
关键词 鸦胆子油 软胶囊 细胞肺癌 抑瘤活性 裸鼠
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抗人小细胞肺癌单抗2F7(ab’)_2的^(99m)Tc放射免疫预定位显像初步研究 被引量:1
6
作者 沈胜德 钟高仁 +3 位作者 陈捷 章英剑 赵丽琛 朱惠娟 《上海医学影像》 2001年第1期11-12,29,共3页
目的 提高抗人小细胞肺癌单抗片段2F7(ah’)_2的放免显像效果。方法 应用生物素化单抗片段和.TC标记的SA二步法给药,在注射放射性标记物后2小时对荷瘤裸小鼠作前位静态显像。结果 二步法在2小时已见肿瘤部位放射性浓聚,4小时显像清楚。... 目的 提高抗人小细胞肺癌单抗片段2F7(ah’)_2的放免显像效果。方法 应用生物素化单抗片段和.TC标记的SA二步法给药,在注射放射性标记物后2小时对荷瘤裸小鼠作前位静态显像。结果 二步法在2小时已见肿瘤部位放射性浓聚,4小时显像清楚。而直接法组和对照组无明显浓聚。结论 二步法预定位放免显像能缩短显像时间,有利于^(99)mTc短半衰期核素的应用。 展开更多
关键词 生物素-亲和素 单克隆抗 放射免疫显像 细胞肺癌
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肺肿瘤
7
《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 2002年第5期132-134,共3页
0218318 肺小细胞癌以粒细胞集落刺激因子治疗中诱发牛皮癣样皮疹1例[日]/ 米井敏郎//日呼吸会志.-2001,39(6).-438~441 冀医情0218319 肺癌检诊的阅片辅助系统[日]/山本真司//新医疗.-2001,(9).-50~53
关键词 细胞肺癌 细胞集落刺激因子 细胞肺癌 细胞 肺癌 辅助系统 牛皮癣 肺肿瘤 医科 检诊
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肺肿瘤
8
《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 1997年第6期116-117,共2页
9721457 第二次原发肺癌/Antakli T//Ann Thorac Surg.-1995,59(4).-863867 湘医图9721458 增强动态计算机体层对小外围型肺癌的探测:放射与病理方面的联系/Yamashita K//Radiology.-1995,96(2).-401~408
关键词 肺癌诊断 晚期非细胞肺癌 计算机体层 肺肿瘤 细胞肺癌 重要性 原发 肺腺癌 增强 探测
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肺肿瘤
9
《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 2002年第7期156-157,共2页
0226770 α链蛋白、β链蛋白和γ链蛋白表达减少与非小细胞肺癌时高度的细胞增生活性和分化不良有关/Pirinen R T//JClin Pathol.-2001,54(5).-391~395医科图0226771
关键词 细胞肺癌 医科 增生活性 细胞肺癌 蛋白表达 肺肿瘤 磷酸盐 肺癌危险 肺腺癌 维生素
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人小细胞肺癌细胞株中CNDP2的检测及意义
10
作者 林星谷 陈迎春 +2 位作者 韦艳萍 龙骏 姚姿婷 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1367-1371,共5页
为了研究胞浆非特异性肽酶2(CNDP2)在人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用,我们检测了29株人SCLC细胞株CNDP2的拷贝数和部分细胞株CNDP2的m RNA表达水平,并构建了CNDP2全长(CPGL)及可变剪切体(CPGL-B)过表达SCLC细胞稳转... 为了研究胞浆非特异性肽酶2(CNDP2)在人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用,我们检测了29株人SCLC细胞株CNDP2的拷贝数和部分细胞株CNDP2的m RNA表达水平,并构建了CNDP2全长(CPGL)及可变剪切体(CPGL-B)过表达SCLC细胞稳转株,初步分析了CPGL及CPGL-B对SCLC细胞生长和克隆形成的影响。结果表明,SCLC细胞株普遍存在CNDP2基因缺失和CPGL-B的m RNA表达水平降低的现象,CPGL和CPGL-B表达上调可抑制SCLC细胞克隆形成能力。可见,CNDP2在人小细胞肺癌中可能起着抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 细胞肺癌 胞浆非特异性肽酶2 过表达
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山奈酚对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响 被引量:7
11
作者 廖峥嵘 沈永青 +3 位作者 赵娟 吕品 王忠海 雷宇华 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2011年第5期510-514,共5页
研究山奈酚诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡的作用及可能的作用机制.采用MTT法检测山奈酚对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;采用DAPI染色检测经山奈酚处理后细胞凋亡的形态变化;采用RT-PCR和Western-blot技术检测山奈酚处理前后H446细... 研究山奈酚诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡的作用及可能的作用机制.采用MTT法检测山奈酚对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;采用DAPI染色检测经山奈酚处理后细胞凋亡的形态变化;采用RT-PCR和Western-blot技术检测山奈酚处理前后H446细胞p53,bax,bcl-2 mRNA和蛋白的表达.结果显示,不同浓度的山奈酚能抑制人小细胞肺癌H446细胞生长,且随浓度增加抑制作用增强;H446细胞在山奈酚诱导下出现典型的凋亡形态;20μmol/L以上浓度的山奈酚处理后,p53,bax mRNA和相应蛋白表达均升高,而bcl-2 mRNA和蛋白表达降低.研究表明,山奈酚对H446细胞增殖有抑制作用,并能促进其凋亡.p53,bax和bcl-2在山奈酚诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡中起重要作用. 展开更多
关键词 山奈酚 细胞肺癌H446 p53 BAX BCL-2 细胞凋亡
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低剂量X射线照射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响 被引量:7
12
作者 姜宏宇 王冠军 丁艳华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1373-1375,共3页
目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA... 目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平。结果D1(75 mGy)、D2(4Gy)照射后,小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达呈上升趋势,Bcl-2的mRNA表达呈下降趋势,但与假照组(0 mGy)比较,无明显差异;D1+D2组的p53、Bax的mRNA表达明显增多,Bcl-2 mRNA表达显著下降,与假照组(0 mGy)比较有统计学差异(P<0.05)。结论LDR在一定程度上可能上调了小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达,下调了Bcl-2 mRNA的表达,同时对其后的大剂量照射有协同作用。 展开更多
关键词 低剂量照射 细胞肺癌NCI-H446细胞 凋亡 原位杂交
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尼美舒利对人小细胞肺癌细胞株NCL-H446增殖的抑制作用 被引量:1
13
作者 刘英杰 马远方 +1 位作者 刘广超 吴雄文 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期408-410,475,共4页
目的研究尼美舒利对人小细胞肺癌细胞株NCL-H446增殖的抑制作用,为临床治疗提供实验室依据。方法常规培养人小细胞肺癌细胞株NCL-H446,MTT法检测尼美舒利的细胞毒性作用;倒置显微镜与Hoechst33258荧光染色观察细胞形态学变化;流式细胞术... 目的研究尼美舒利对人小细胞肺癌细胞株NCL-H446增殖的抑制作用,为临床治疗提供实验室依据。方法常规培养人小细胞肺癌细胞株NCL-H446,MTT法检测尼美舒利的细胞毒性作用;倒置显微镜与Hoechst33258荧光染色观察细胞形态学变化;流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率。结果MTT显示尼美舒利呈剂量与时间依赖性抑制人小细胞肺癌细胞株NCL-H446的增殖;倒置显微镜下可见细胞变小、变圆、皱缩、部分细胞脱落飘浮于培养基中。荧光显微镜下可见细胞核染色质致密浓缩、荧光强度增强、染色质边集、核破碎,凋亡小体形成等。FCM检测结果表明尼美舒利既可诱导NCL-H446细胞凋亡,又可引起坏死,400μmol/L的尼美舒利作用细胞24h后,细胞早期凋亡率为7.65%,晚期凋亡率为29.76%,细胞坏死占23.9%。结论尼美舒利对体外培养的人小细胞肺癌细胞株NCL-H446有较显著的抑制作用,该作用与诱导细胞凋亡与坏死有关。 展开更多
关键词 细胞肺癌细胞 NCL-H446 尼美舒利 细胞凋亡
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低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡的影响 被引量:2
14
作者 邵明柏 姜宏宇 王冠军 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期297-299,共3页
目的探讨低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCIH446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用TUNEL(末端脱氧核甘酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记)检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织细胞凋亡的... 目的探讨低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCIH446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用TUNEL(末端脱氧核甘酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记)检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织细胞凋亡的情况。结果D1组(75mGy)照射后,细胞凋亡指数(AI)呈增加趋势,但与假照组(0mGy)比差异不显著(P>0.05)。D2组(4Gy)、D1+D2组细胞凋亡指数均明显增加,与假照组(0mGy)比差异显著(P<0.010。而D1+D2组与D2组比较,D1+D2组细胞凋亡指数增加更为明显,有统计学差异(P<0.05)。结论75mGy照射对小细胞肺癌可能有一定的促细胞凋亡作用;大剂量照射及低剂量联合大剂量照射对小细胞肺癌均有促细胞凋亡作用,低剂量辐射与大剂量辐射有协同促小细胞肺癌细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 低剂量辐射 细胞肺癌(NCI—H446) 凋亡
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丹参酮ⅡA诱导人小细胞肺癌细胞凋亡及其分子机制 被引量:1
15
作者 王江峰 陈晟 《医学研究杂志》 2017年第10期84-87,共4页
目的了解丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌细胞(H446细胞)的凋亡诱导作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用MTT法检测不同浓度丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌H446细胞增殖的影响结果;Hoechst 33258法检测不同浓度丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌H446细胞凋... 目的了解丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌细胞(H446细胞)的凋亡诱导作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用MTT法检测不同浓度丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌H446细胞增殖的影响结果;Hoechst 33258法检测不同浓度丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响;q PCR法检测不同浓度丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌H446细胞凋亡基因的影响;Westen blot法检测不同浓度丹参酮ⅡA对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响。结果不同药物浓度的丹参酮ⅡA(0.3、0.6、1.25、2.5、5和10μg/ml)抑制人小细胞肺癌H446细胞增殖且呈浓度和时间依赖性;随着药物浓度的提高,人小细胞肺癌H446细胞凋亡小体的形成数量增加,高浓度组差异有统计学意义(P<0.05);高浓度组丹参酮ⅡA促进凋亡基因(Bax,caspase-9、caspase-3)的表达,抑制凋亡抑制基因(Akt,Bcl-2)的表达且差异有统计学意义(P<0.05);高浓度组丹参酮ⅡA促进凋亡蛋白(Bax,caspase-9,caspase-3)的表达,抑制凋亡抑制蛋白(Akt,Bcl-2)的表达且差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA可能是通过Akt-Bax/bcl-2-caspase9-caspase3信号通路诱导人小细胞肺癌H446细胞的凋亡。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA细胞肺癌 细胞增殖 凋亡基因
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抗人小细胞肺癌单抗4B3重、轻链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析
16
作者 林琳 杨瑶琴 赵新泰 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期382-384,共3页
目的 获得抗人小细胞肺癌单抗 4B3的重 ,轻链可变区基因。方法 根据小鼠免疫球蛋白可变区骨架区的保守序列分别设计了 4B3单抗重 ,轻链的可变区基因体外扩增的两对引物 ,从体外培养的 4B3杂交瘤细胞中提取总RNA ,反转录成cD NA ,以cDN... 目的 获得抗人小细胞肺癌单抗 4B3的重 ,轻链可变区基因。方法 根据小鼠免疫球蛋白可变区骨架区的保守序列分别设计了 4B3单抗重 ,轻链的可变区基因体外扩增的两对引物 ,从体外培养的 4B3杂交瘤细胞中提取总RNA ,反转录成cD NA ,以cDNA为模板 ,分别用设计的两对引物进行PCR扩增 ,扩增出的重 ,轻链基因片段 ,分别插入载体 pT Adv中 ,筛选出阳性克隆 ,并测序、分析。结果 重链可变区基因全长 345bp ,编码 115个氨基酸 ,轻链可变区基因全长 315bp ,编码 10 5个氨基酸。结论 上述研究为 4B3单抗的进一步改造和利用提供了实验基础。 展开更多
关键词 体外扩增 序列分析 细胞肺癌 单抗4B3 免疫球蛋白 可变区基因 PCR扩增 克隆
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抗人小细胞肺癌单抗2F7人-鼠嵌合Fab片段基因的构建和表达
17
作者 林琳 鲁驰 +2 位作者 朱明洁 胡晶莹 赵新泰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-176,共4页
目的 :通过基因工程抗体改造获得具有与人小细胞肺癌有特异性反应的人 鼠嵌合抗体 2F7Fab片段。方法 :采用RT PCR技术从抗人小细胞肺癌单克隆抗体 2F7杂交瘤中克隆该抗体的重、轻链可变区基因 ,将 2F7单抗的重、轻链可变区基因装入带... 目的 :通过基因工程抗体改造获得具有与人小细胞肺癌有特异性反应的人 鼠嵌合抗体 2F7Fab片段。方法 :采用RT PCR技术从抗人小细胞肺癌单克隆抗体 2F7杂交瘤中克隆该抗体的重、轻链可变区基因 ,将 2F7单抗的重、轻链可变区基因装入带有人恒定区基因的表达载体pSW1 Fab中 ,构建得到pSW1 2F7Fab ,转化受体菌E .coilXL1 Blue ,IPTG诱导表达 ,经Westernblot和ELISA鉴定表达蛋白的活性。结果 :从抗人小细胞肺癌单克隆抗体 2F7杂交瘤中克隆获得了抗体重、轻链可变区基因。测序证实 2F7单抗的重链 (VH)可变区基因全长 36 2bp ,编码 12 0个氨基酸 ;轻链 (VL)可变区基因全长 319bp ,编码10 5个氨基酸。构建的 2F7人 鼠嵌合Fab表达载体诱导后获得了目的蛋白的表达 ,主要分泌在菌液的上清中 ,表达量较高且稳定 ,具有与NCI H1 2 8细胞特异性结合的活性。结论 :构建和表达了抗人小细胞肺癌单抗 2F7人 鼠嵌合Fab片段 ,表达产物具有与抗原结合的特异性 ,为进一步研究和应用打下了基础。 展开更多
关键词 细胞肺癌单抗 -鼠嵌合抗体 FAB片段 基因工程
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低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响
18
作者 姜宏宇 付军 +2 位作者 李红艳 王冠军 林贞花 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1075-1077,共3页
目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法35只荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠,随机分为7个实验组,假照组(0 mGy);D1组(75 mGy);D2组(4 Gy);D1-12 h+D2组(D1照射后12 h予... 目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法35只荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠,随机分为7个实验组,假照组(0 mGy);D1组(75 mGy);D2组(4 Gy);D1-12 h+D2组(D1照射后12 h予以D2);D1-24 h+D2组(D1照射后24 h予以D2);D1-48 h+D2组(D1照射后48 h予以D2);D1-72 h+D2组(D1照射后72 h予以D2)。各实验组不同方式照射后4 d,荷瘤裸鼠全部处死,采用免疫组化技术检测荷瘤组织的P53、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平。结果D1组照射后,小细胞肺癌细胞的p53、Bcl-2的蛋白表达呈下降趋势,Bax蛋白表达呈上升趋势,但与假照组比较,无明显差异(P>0.05);D2组、D1+D2组的p53、Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达明显增多,与假照组比较差异显著(P<0.05);而D1+D2组与D2组比较,差异显著(P<0.05),以D1+D2组p53、Bcl-2蛋白的表达减少、Bax蛋白的表达增多更为明显。结论低剂量辐射可能在一定程度上下调了小细胞肺癌细胞的p53、Bcl-2的蛋白表达,上调了Bax蛋白的表达,同时对其后的大剂量照射有协同作用。 展开更多
关键词 低剂量照射 细胞肺癌(NCI-H446) 凋亡 免疫组化
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金花茶有效部位抑制表皮生长因子受体(EGFR)抗非小细胞肺癌的作用机制研究 被引量:17
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作者 王梓灵 郭瑜婕 +5 位作者 朱芸芸 陈乐 吴婷 刘大会 黄必胜 杜鸿志 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期5362-5371,共10页
探究金花茶4个有效部位(金花茶叶总皂苷、金花茶叶总多酚、金花茶花总皂苷、金花茶花总多酚)抑制表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抗非细小细胞肺癌细胞增殖和迁移作用及其分子作用机制。采用MTT实验检测金花茶... 探究金花茶4个有效部位(金花茶叶总皂苷、金花茶叶总多酚、金花茶花总皂苷、金花茶花总多酚)抑制表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抗非细小细胞肺癌细胞增殖和迁移作用及其分子作用机制。采用MTT实验检测金花茶4个有效部位对非小细胞肺癌NCI-H1975与HCC827细胞活力的影响;通过细胞划痕实验与Transwell小室迁移实验考察金花茶4个有效部位给药后对非小细胞肺癌细胞迁移能力的影响;基于酶活检测,测定金花茶4个有效部位对EGFR酶活性的影响;采用药物分子对接实验,探究金花茶有效部位代表性成分与EGFR蛋白的直接作用能力与作用位点;利用Western blot检测金花茶4个有效部位对EGFR下游信号通路相关蛋白的表达水平的影响。结果发现金花茶4个有效部位在50、100、150、200μg·mL-1均能显著性抑制人非小细胞肺癌NCI-H1975与HCC827细胞的活力并呈时间与浓度依赖性;划痕实验与Transwell小室迁移实验显示金花茶4个有效部位作用于NCI-H1975与HCC827细胞均能显著性抑制非小细胞肺癌细胞的迁移能力;蛋白激酶活力测定实验结果表明,EGFR的酶活被金花茶4个有效部位显著性抑制;分子对接实验结果证实,金花茶4个有效部位化合物中多种药效成分与EGFR酶有较强的结合作用;Western blot实验结果确证,金花茶4个有效部位能下调非小细胞肺癌细胞EGFR及其下游信号通路蛋白表达水平。结果表明,金花茶4个有效部位均能抑制非小细胞肺癌,且其作用机制可能与EGFR及其下游信号通路相关。该研究为金花茶有效成分治疗非小细胞肺癌提供科学依据,对金花茶抗肿瘤作用机制的深入研究具有一定的参考意义。 展开更多
关键词 金花茶 细胞肺癌 增殖 迁移 EGFR通路
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丹参酮ⅡA通过自噬诱导肺癌A549细胞周期阻滞的作用研究 被引量:16
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作者 温文浩 侯雪楠 +5 位作者 崔赛男 沈崇坤 叶然 崔永飞 林慧媛 白莎莎 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期539-545,共7页
目的观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TⅡA)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,探讨TⅡA诱导A549细胞自噬与细胞周期阻滞的关系。方法采用CCK8法检测TⅡA(0.5、1、2、4、8μmol·L^-1)对A549细胞增殖的抑制作用;利用流式细胞术检测T... 目的观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TⅡA)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,探讨TⅡA诱导A549细胞自噬与细胞周期阻滞的关系。方法采用CCK8法检测TⅡA(0.5、1、2、4、8μmol·L^-1)对A549细胞增殖的抑制作用;利用流式细胞术检测TⅡA(1、2、4μmol·L^-1)对A549细胞周期分布的影响;采用Western Blot法检测TⅡA(1、2、4μmol·L^-1)对A549细胞周期相关蛋白Cyclin D1和自噬相关蛋白p62、LC3B表达的影响;分别采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA;0.25μmol·L^-1)+TⅡA(2μmol·L^-1)或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA,5 mmol·L^-1)+TⅡA(2μmol·L^-1)培养处理A549细胞,然后采用Western Blot法检测细胞Cyclin D1、p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布。结果与对照组比较,TⅡA不同浓度组对A549细胞均具有明显的增殖抑制作用(P<0.05,P<0.01),且呈时间-剂量依赖关系;药物作用12、24 h后,TⅡA的IC50值分别为7.82、2.04μmol·L^-1。与对照组比较,TⅡA能降低A549细胞Cyclin D1的表达量(P<0.01),使细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05,P<0.01),且呈剂量依赖性;TⅡA能够升高A549细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(P<0.05,P<0.01),降低p62表达(P<0.01),诱导细胞发生自噬。与TⅡA组比较,3-MA+TⅡA组A549细胞中的LC3-Ⅱ/LC3-I比值明显降低(P<0.01),p62及Cyclin D1表达水平明显上调(P<0.01),停滞于G0/G1期的细胞比例明显减少(P<0.05)。结论TⅡA可能通过上调人非小细胞肺癌A549细胞自噬诱导细胞周期阻滞,从而抑制细胞增殖,发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 细胞肺癌 A549细胞 自噬 细胞周期 Cyclin D1 P62 LC3B
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