期刊文献+
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
人血清及神经生长因子对成人鼻黏膜嗅鞘细胞体外增殖的影响 被引量:7
1
作者 张志强 沈铁城 +4 位作者 黄永辉 黄秋生 杨勇 龚爱华 张志坚 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2007年第1期28-30,共3页
目的:观察人血清及神经生长因子对成人鼻黏膜嗅鞘细胞体外增殖的影响。方法:取成人(自愿者)鼻腔嗅黏膜,制成细胞悬液,分别用DF12培养基(对照组)、10 ng/m l NGF+DF12培养基、10%胎牛血清的DF12培养基、10 ng/m l NGF+10%胎牛血清的DF12... 目的:观察人血清及神经生长因子对成人鼻黏膜嗅鞘细胞体外增殖的影响。方法:取成人(自愿者)鼻腔嗅黏膜,制成细胞悬液,分别用DF12培养基(对照组)、10 ng/m l NGF+DF12培养基、10%胎牛血清的DF12培养基、10 ng/m l NGF+10%胎牛血清的DF12培养基、10%人血清的DF12培养基和10 ng/m lNGF+10%人血清的DF12培养基培养细胞,并用差时贴壁法纯化嗅鞘细胞。采用MTT法观察上述各种培养液对嗅鞘细胞增殖的影响。结果:加入与不加入NGF培养液组之间的光密度无统计学意义(P>0.05);胎牛血清组、人血清组与对照组之间的光密度有显著统计学意义(P<0.01);胎牛血清组和人血清组之间的光密度无统计学意义(P>0.05)。结论:人嗅鞘细胞的体外培养对血清具有依赖性,人自体血清培养可替代胎牛血清用于嗅鞘细胞的体外培养、扩增。本研究结果为人嗅鞘细胞的自体移植治疗脊髓损伤提供了可行性基础。 展开更多
关键词 MTT法 细胞培养 黏膜 嗅鞘细胞
下载PDF
人胚胎嗅球嗅鞘细胞的制备 被引量:2
2
作者 肖娟 王洪美 +5 位作者 陈琳 任玉水 姜晓荣 黄红云 李莹 赵艳秀 《解剖科学进展》 CAS 2011年第3期276-279,共4页
目的探讨人胚胎嗅鞘细胞(OECs)培养与纯化的优化方法。方法取3~5个月流产胚胎,无6菌条件下取出嗅球,解剖镜下仔细剥离嗅球表面的软膜组织和血管,消化后用条件培养基制成密度为10个细胞/ml细胞悬液,利用差速贴壁法结合阿糖胞苷抑制法进... 目的探讨人胚胎嗅鞘细胞(OECs)培养与纯化的优化方法。方法取3~5个月流产胚胎,无6菌条件下取出嗅球,解剖镜下仔细剥离嗅球表面的软膜组织和血管,消化后用条件培养基制成密度为10个细胞/ml细胞悬液,利用差速贴壁法结合阿糖胞苷抑制法进行无血清纯化液细胞纯化培养,对不同培养时期进行观察75和行PNGFR(低亲和力神经营养因子受体)和FBN(纤维粘连蛋白)免疫荧光染色鉴定。结果此制备法可以有效去除成纤维细胞,获得纯度90%嗅鞘细胞,显微镜下观察嗅鞘细胞有卵圆形的胞体和细长的突触,细胞多呈75为双极或多极形,免疫荧光染色NGFRP阳性细胞百分数为80%-90%。结论本培养纯化方法可行,可获得符合临床细胞移植治疗要求细胞制剂。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 纯化 培养 低亲和力神经营养因子受体 纤维粘连蛋白
原文传递
纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘形成相关蛋白表达的影响
3
作者 陈静 黄秋生 +6 位作者 窦毅 宗海洋 崔颜宏 庄琴 孙湘兰 龚爱华 张志坚 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2009年第2期98-101,I0001,共5页
目的:探讨纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘相关蛋白表达的影响。方法:将体外培养的成人鼻粘膜嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架,用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照底物,培养14天后用扫描电镜观察细胞的形态学变化并对细胞内髓鞘形成相关蛋白2,3-... 目的:探讨纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘相关蛋白表达的影响。方法:将体外培养的成人鼻粘膜嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架,用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照底物,培养14天后用扫描电镜观察细胞的形态学变化并对细胞内髓鞘形成相关蛋白2,3-环核苷3-磷酸二酯酶(2′,3′cyclic nucleotide 3′phosphodiesterase,CNPase)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)进行免疫荧光染色定位和免疫印迹半定量测定,分析纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞CNPase和MBP表达的影响。结果:人嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架后,其形态为长条带状,细胞成束排列,方向一致。细胞内CNPase和MBP表达水平明显高于对照组。结论:纤维蛋白支架与人嗅鞘细胞具有很好的生物相容性并可促进细胞表达髓鞘相关蛋白CNPase和MBP;将该组织工程支架用于移植治疗脊髓损伤,有利于再生神经纤维的髓鞘形成。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 组织工程支架 纤维蛋白(原) 2 3环-核苷3-磷酸二酯酶 碱性蛋白
下载PDF
再生丝素蛋白膜作为人嗅鞘细胞移植支架的研究 被引量:1
4
作者 龚爱华 陈静 +6 位作者 王穆彬 杨勇 陶燕 崔颜宏 张志坚 李明忠 杨吉成 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期632-636,共5页
探讨再生丝素蛋白膜对人嗅鞘细胞(hOECs)生物学特性的影响。人嗅鞘细胞接种在再生丝素蛋白膜上,取不同时相的细胞做下列实验。72 h固定,用免疫荧光染色技术观察人嗅鞘细胞的标志蛋白NT-3、S-100、GFAP、NGFRp75,用电子显微镜观察细胞在... 探讨再生丝素蛋白膜对人嗅鞘细胞(hOECs)生物学特性的影响。人嗅鞘细胞接种在再生丝素蛋白膜上,取不同时相的细胞做下列实验。72 h固定,用免疫荧光染色技术观察人嗅鞘细胞的标志蛋白NT-3、S-100、GFAP、NGFRp75,用电子显微镜观察细胞在再生丝素蛋白膜上的生长状况;分别于48、72、96 h提取总蛋白,用免疫印迹法分析人嗅鞘细胞标志蛋白的表达情况;用MTT法分析细胞在再生丝素蛋白膜上的生长曲线。hOECs在再生丝素蛋白膜上能够很好地附着、铺展、生长,嗅鞘细胞的形态大多为梭形,嗅鞘细胞标志蛋白NT-3、NGFRp75、S-100及GFAP均呈免疫反应阳性,且免疫印迹结果与形态学结果一致;电镜结果显示,再生丝素蛋白膜的表面微纳结构适于细胞贴附、铺展;嗅鞘细胞在再生丝素蛋白膜上的生长曲线与培养板上无明显差异。再生丝素蛋白膜适合人嗅鞘细胞的贴附、增殖、生长,再生丝素蛋白膜与hOECs有较好的相容性,可以作为hOECs生长的候选组织工程支架用于修复神经损伤。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 再生丝素蛋白膜 神经损伤
下载PDF
干细胞标志蛋白在成人鼻黏膜嗅鞘细胞的表达
5
作者 黄秋生 陆汉强 +6 位作者 周月鹏 贺清华 孙湘兰 陈谦 龚爱华 姜平 张志坚 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 2012年第12期649-652,共4页
目的建立成人鼻黏膜嗅鞘细胞的体外培养方法,探讨干细胞标志蛋白在人嗅鞘细胞的表达及其意义,为嗅鞘细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤提供可行性研究资料。方法用鼻内镜自成人(鼻中隔偏曲伴黏膜肥厚者)鼻腔活体钳取部分嗅区黏膜,经胰... 目的建立成人鼻黏膜嗅鞘细胞的体外培养方法,探讨干细胞标志蛋白在人嗅鞘细胞的表达及其意义,为嗅鞘细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤提供可行性研究资料。方法用鼻内镜自成人(鼻中隔偏曲伴黏膜肥厚者)鼻腔活体钳取部分嗅区黏膜,经胰酶消化制成细胞悬液。细胞接种于玻璃培养瓶,用含10%胎牛血清的F12培养基培养、传代、扩增。用免疫细胞化学或免疫荧光染色和免疫印迹方法检测SOX-2、SOX-10、Nestin、NCAM、NGFRp75和S100-β在第7代嗅鞘细胞的表达。结果成人嗅黏膜细胞经过多次传代培养后,嗅鞘细胞逐渐成为优势细胞,该细胞高表达干细胞标志蛋白和嗅鞘细胞标志蛋白。结论成人嗅黏膜细胞体外培养可获得高产量的许旺细胞(Schwann cells,Scs)样嗅鞘细胞,该细胞具有干细胞特性(stemness)和很强的增殖能力,可作为自体细胞移植治疗中枢神经系统损伤的种子细胞。 展开更多
关键词 黏膜 细胞培养技术 嗅鞘细胞 细胞特性
下载PDF
人胚嗅鞘细胞不同取材及培养方法对纯度的影响 被引量:12
6
作者 吴卫江 惠国桢 +1 位作者 陆华 吕然博 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期841-844,共4页
目的通过对多种方法的比较获得较为理想的取材和纯化嗅鞘细胞的措施。方法应用3种不同的取材方法各获取20份样本,对取材引起的细胞损伤以及同一条件下培养10d后细胞纯度进行对照;在将细胞接种密度统一调整到106/ml后应用3种纯化方法各... 目的通过对多种方法的比较获得较为理想的取材和纯化嗅鞘细胞的措施。方法应用3种不同的取材方法各获取20份样本,对取材引起的细胞损伤以及同一条件下培养10d后细胞纯度进行对照;在将细胞接种密度统一调整到106/ml后应用3种纯化方法各对20份样本处理并作纯度比较;同样密度和接种数量的原代细胞各取10份种植于3种不同培养皿,对细胞贴壁速度和最终纯度进行检验;对3种常用的细胞接种密度104/ml、105/ml、106/ml统一其他培养条件后作比较。结果我们从中筛选出最佳取材方法为直接挤压法,其获得的细胞纯度为82.56%,明显高于传统分离法(66.24%)和机械过滤法(61.35%);最好的纯化嗅鞘细胞方法为免疫吸附法,其细胞纯度达到94.66%,而差速贴壁法(81.59%)和化学试剂法(76.45%)均由于损失细胞太多不可取;同时发现包被培养皿对纯化细胞意义重大,P75包被组不仅培养细胞的纯度最高(87.69%),而且还有利于OECS的快速贴壁;高密度接种细胞对提高细胞的最终纯度也是非常有利,3组(接种密度分别为104/ml、105/ml、106/ml)培养10d后的p75阳性细胞率差异巨大,分别为34.61%,49.39%,71.55%。结论应用最佳取材及培养方法收获大量嗅鞘细胞将对其进一步的基础研究以及将来应用于临床奠定基础。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 取材 培养方法 纯度 机械过滤法 细胞培养
原文传递
人胚胎嗅鞘细胞与神经干细胞联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的研究 被引量:8
7
作者 尹国栋 汤逊 +2 位作者 林月秋 徐永清 周田华 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期680-682,719,F0005,共5页
目的:探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)与神经干细胞(hNSCs)联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法:制作Wistar大鼠脊髓全横断模型,9—10d后,分别将取材自人胎脑的hOECs和hNSCs移植到脊髓损伤处(联合移植组),并设hOECs移植组、hNSCs... 目的:探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)与神经干细胞(hNSCs)联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法:制作Wistar大鼠脊髓全横断模型,9—10d后,分别将取材自人胎脑的hOECs和hNSCs移植到脊髓损伤处(联合移植组),并设hOECs移植组、hNSCs移植组和对照组,移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能评分,取材行荧光化学(Hoechst33342)和免疫组织化学染色(P75、NF-200、GFAP、Synaptophysin)观察。结果:术后4—10周,hNSCs组、hOECs组和联合移植组的BBB评分较对照组明显提高(P<0.05),其中,联合移植组的运动功能改善更显著。免疫组化染色显示,hNSCs可以在损伤脊髓内存活10周以上,并分化为神经元或星形胶质细胞,联合移植组和hOECs组P75染色呈阳性反应,hOECs与hNSCs联合移植可促进神经突触的形成,恢复神经元之间的联系。结论:hOECs和hNSCs联合移植可促进脊髓全横断损伤大鼠神经突触的再生,改善其肢体运动功能。 展开更多
关键词 脊髓损伤 胚胎嗅鞘细胞 胚胎神经干细胞 BBB评分
下载PDF
人胚胎嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓全横断损伤 被引量:5
8
作者 尹国栋 汤逊 +2 位作者 林月秋 徐永清 周田华 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期1093-1095,i0002,共4页
[目的]探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。[方法]分离、培养并鉴定人胚嗅鞘细胞,24只Wistar大鼠,随机分为实验组和对照组,均行T10节段脊髓全横断。术后第9~10d,实验组、对照组分别移植Hoechst33342... [目的]探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。[方法]分离、培养并鉴定人胚嗅鞘细胞,24只Wistar大鼠,随机分为实验组和对照组,均行T10节段脊髓全横断。术后第9~10d,实验组、对照组分别移植Hoechst33342标记的hOECs 5μl(2.5×10^5个细胞)、DMEM—F12培养基5μl。移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能评分,取材行荧光化学(Hoechsd3342)和免疫组织化学染色(P75、NF-200、Synaptophysin)。双盲条件下进行数据统计。[结果]移植的hOECs可以在损伤脊髓内存活10周以上,可向损伤脊髓头尾两端迁移;术后4~10周实验组的BBB运动功能评分明显高于对照组(P〈0.01);P75染色实验组呈阳性反应;NF-200和Synaptophysin免疫组化染色,实验组神经纤维、突触数目和密度都较对照组高。[结论]hOECs移植对脊髓全横断损伤大鼠运动功能恢复具有促进作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 胚胎嗅鞘细胞 细胞移植 BBB评分
下载PDF
用于临床移植的不同时期人胚胎嗅鞘细胞的形态学变化 被引量:3
9
作者 吕然博 杨天明 +3 位作者 惠国帧 吴卫江 苗宗宁 王玲 《中国临床康复》 CSCD 2004年第2期242-243,T004,共3页
目的:建立体外培养纯化人胚嗅鞘细胞的模型,观察不同时期人胚嗅鞘细胞形态学变化。方法:采用无血清培养技术,差速贴壁+免疫吸附的纯化方法,培养并纯化取自3~7个月人胚嗅球的嗅鞘细胞。根据GFAP免疫组化染色结果统计培养所得嗅鞘细胞纯... 目的:建立体外培养纯化人胚嗅鞘细胞的模型,观察不同时期人胚嗅鞘细胞形态学变化。方法:采用无血清培养技术,差速贴壁+免疫吸附的纯化方法,培养并纯化取自3~7个月人胚嗅球的嗅鞘细胞。根据GFAP免疫组化染色结果统计培养所得嗅鞘细胞纯度。结果:此培养方法可获得大量、高纯度的嗅鞘细胞。结论:成功培养了人胚嗅鞘细胞,为进一步临床移植应用研究提供纯度较高的人胚嗅鞘细胞。 展开更多
关键词 移植手术 胚胎嗅鞘细胞 形态学 中枢神经系统 治疗
下载PDF
人胚胎嗅鞘细胞植入鼠半横断脊髓的初步观察(英文) 被引量:7
10
作者 王学文 唐勇 +4 位作者 吴燕峰 殷德振 杨睿 黄霖 沈慧勇 《中国临床康复》 CSCD 2003年第23期3174-3175,T003,共3页
目的观察人胚胎嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)移植对成鼠脊髓轴突再生的影响。方法将分离、纯化、培养2周的人胚胎OECs,移植于10只成年SD大鼠半横断胸髓(T10)的两端;对照组10只同样方法给予等量的DMEM培养液。6周后组织切片... 目的观察人胚胎嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)移植对成鼠脊髓轴突再生的影响。方法将分离、纯化、培养2周的人胚胎OECs,移植于10只成年SD大鼠半横断胸髓(T10)的两端;对照组10只同样方法给予等量的DMEM培养液。6周后组织切片,行HE染色、嗜银染色以及髓鞘碱性蛋白(MBP)和抗神经生长因子受体抗体(NGFR)免疫组化检查。结果OECs移植组6周后脊髓大体标本显示初步愈合现象;组织学观察,OECs呈NGFR阳性表达,显示OECs仍然存活,且与宿主组织整和良好;部分再生轴突长入断端间组织,呈MBP阳性表达。结论人胚胎OECs对成鼠胸髓损伤后的轴突再生有促进作用。 展开更多
关键词 胚胎嗅鞘细胞植入 半横断脊髓 观察 组织切片 嗜银染色 碱性蛋白 免疫组化 脊髓轴突再生 神经再生
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部