生物素─链霉亲和素系统在检测巨细胞病毒抗体中的应用 被引量：8

1

作者 朱晴晖 朱平 +1 位作者 章谷生 邵济钧 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1994年第5期283-286,共4页

本文用自制ＣＭＶ抗原和生物素－链霉亲和素系统试剂，通过最适条件的对比，建立了检测人血清中抗巨细胞病毒ＩｇＭ、ＩｇＡ类抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ，并与普通ＥＬＩＳＡ作比较，结果表明，ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ的非特异性吸附明显低... 本文用自制ＣＭＶ抗原和生物素－链霉亲和素系统试剂，通过最适条件的对比，建立了检测人血清中抗巨细胞病毒ＩｇＭ、ＩｇＡ类抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ，并与普通ＥＬＩＳＡ作比较，结果表明，ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ的非特异性吸附明显低于普通ＥＬＩＳＡ，与普通ＥＬＩＳＡ相比，抗体效价分别提高５和７倍，阳性率分别提高６８％和１５３．５％。在实际工作中曾用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测临床样品１６５份，就所得结果进行分析。表明ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶＩｇＭ和ＩｇＡ可提高特异性和灵敏度，值得推广应用。 展开更多

关键词 生物素链霉 亲和素系统 巨细胞病毒 抗体

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生物素—亲和素系统在生物传感器中的应用 被引量：5

2

作者 方华丰 周宜开 《化学传感器》 CAS 1997年第3期173-183,共11页

在生物传感器的研究过程中寻求稳定的、高灵敏度的酶固定技术受到人们极大的关注。常用的酶的固定化技术有物理吸附、共价结合、包埋等,然而每一种方法都有一些需要解决的问题,例如:降低了酶的活性或响应较慢等。这些问题与酶的构象、... 在生物传感器的研究过程中寻求稳定的、高灵敏度的酶固定技术受到人们极大的关注。常用的酶的固定化技术有物理吸附、共价结合、包埋等,然而每一种方法都有一些需要解决的问题,例如:降低了酶的活性或响应较慢等。这些问题与酶的构象、酶层和电极的几何结构、酶和支撑物之间的联结有关。为了解决这些问题,人们试图合成出许多不同构象、不同化学结构的多功能分子,发展新型的制膜技术,在分子水平上进行设计和制造出按人们预想的次序排列的分子组合体系。亲和素—生物素系统的应用开辟了一类新的酶的固定化技术,本文就亲和素—生物素系统在酶的固定及生物传感器方面的应用进行综述。 展开更多

关键词 生物传感器 生物素 亲和素系统

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生物素—亲和素系统检测食品中黄曲霉毒素B_1的研究 被引量：2

3

作者 余礼碧 张坐奎 +1 位作者 张伯玲 陈宁蓉 《中国卫生检验杂志》 CAS 1991年第2期90-93,共4页

建立了ABC—ELISA检测食品中AFB_1的方法,最小检测值0.01ng/孔,灵敏度比普通ELISA高10倍,检测时间缩短1h。方法灵敏、特异、简便、快速,样品提取液可直接用于测定。对抗体标记生物素的方法、溶剂影响、反应时间等作了较详细的讨论。对3... 建立了ABC—ELISA检测食品中AFB_1的方法,最小检测值0.01ng/孔,灵敏度比普通ELISA高10倍,检测时间缩短1h。方法灵敏、特异、简便、快速,样品提取液可直接用于测定。对抗体标记生物素的方法、溶剂影响、反应时间等作了较详细的讨论。对3类食品(83份样品)加标回收率为70-100％,变异系数为7.7 17.3％。将本法测得的12个玉米样品中AFB-1值与国家标准检测法测得的值作配对资料的t检验,P>0.05,说明两种方法测得结果间的差异无显著性。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B₁ 酶联免疫吸附试验 生物素 亲和素系统

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固相亲和素制备技术及初步鉴定 被引量：1

4

作者 宋世平 唐国忠 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期305-308,共4页

将亲和素（Ａｖ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）通过偶合试剂连接制成联接物，利用活化后ＢＳＡ的改性使联接物一步包被到疏水固相上形成更加易于定量的固相亲和素。实验鉴定证明，这种固相亲和素具有良好的生物活性，初步应用效果良好，可... 将亲和素（Ａｖ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）通过偶合试剂连接制成联接物，利用活化后ＢＳＡ的改性使联接物一步包被到疏水固相上形成更加易于定量的固相亲和素。实验鉴定证明，这种固相亲和素具有良好的生物活性，初步应用效果良好，可推广应用于生物素－亲和素系统的免疫分析。 展开更多

关键词 固相亲和素 生物素 亲和素系统 放射免疫分析

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生物素/亲和素系统用于活体分子成像现状 被引量：1

5

作者 叶靖 许乙凯 《国外医学（临床放射学分册）》 2005年第4期193-195,共3页

生物素/亲和素系统由于具有高的亲和力以及多级放大作用,已成为近年来进展迅速的一门生物学技术,已应用于医学影像学的多个领域。对生物素/亲和素系统的分子结构及其在分子影像学中的应用进展进行综述。

关键词 亲和素系统 生物素 分子成像 活体 生物学技术 医学影像学 分子影像学 放大作用 分子结构 亲和力

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生物素化壳聚糖微球的体外抗癌活性 被引量：32

6

作者 方华丰 周宜开 任恕 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期385-388,共4页

目的　研究一套有预定位及肿瘤导向作用的药物载体系统。方法　以生物素化无唾液酸胎球蛋白为分子识别系统 ,与肝癌细胞特异性结合 ,将包封有 5 Fu的壳聚糖微球生物素化 ,作为药物载体 ,通过生物素 亲和素系统将二者桥连 ,用“三步法... 目的　研究一套有预定位及肿瘤导向作用的药物载体系统。方法　以生物素化无唾液酸胎球蛋白为分子识别系统 ,与肝癌细胞特异性结合 ,将包封有 5 Fu的壳聚糖微球生物素化 ,作为药物载体 ,通过生物素 亲和素系统将二者桥连 ,用“三步法”研究微球体外抗肿瘤作用。结果　亲和素 生物素化受体介导的生物素化壳聚糖微球能与体外培养的肝癌细胞特异结合并有显著的抗癌作用。结论　生物素化微球 亲和素 生物素化受体 (或单克隆抗体 )系统可望在体内有预定位及肿瘤靶向作用 ,有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 生物素-亲和素系统 壳聚糖 微球 靶向治疗 肿瘤

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EV71抗原BA-ELISA检测方法的建立及应用 被引量：19

7

作者 龙润乡 谢忠平 +5 位作者 杨蓉 李华 白惠株 董承红 刘龙丁 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1230-1232,共3页

目的建立EV71抗原生物素-亲和素酶联免疫(BA-ELISA)检测方法,并进行验证及初步应用。方法以抗EV71抗体为包被抗体,利用生物素-亲和素系统建立双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、特异性、准确性及精密性进行验证。采用该方法检测组织培养... 目的建立EV71抗原生物素-亲和素酶联免疫(BA-ELISA)检测方法,并进行验证及初步应用。方法以抗EV71抗体为包被抗体,利用生物素-亲和素系统建立双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、特异性、准确性及精密性进行验证。采用该方法检测组织培养及临床样品中EV71抗原的含量。结果所建立的BA-ELISA法在EV71蛋白含量625～156.25ng/ml之间线性关系最佳,R2达0.9976,灵敏度为78.125～156.25ng;与包括CoxA16在内的42种肠道病毒及相关病毒均无交叉反应;检测10份EV71阳性样品和10份阴性样品,结果符合率均为100%;检测EV71原液和高、中浓度样品的变异系数分别为3.09%、6.69%和6.43%;可检出约103～104CCID50的活病毒及手足口病患者的大便悬液和部分咽拭子悬液中的病毒。结论用生物素标记EV71抗体与亲和素系统建立的双抗体夹心ELISA法具有较高的特异性、灵敏度、准确性和精密性,为临床检验及抗原分析提供了参考。 展开更多

关键词 手足口病 EV71抗原 酶联免疫检测法 生物素-亲和素系统

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生物素化壳聚糖微球用于体外肿瘤靶向治疗 被引量：6

8

作者 方华丰 周宜开 任恕 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第4期301-303,共3页

生物素 -亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早期诊断、治疗研究的热点。将包封有 TNFα的壳聚糖微球生物素化 ,以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统 ,采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明 :生物素化壳聚糖微... 生物素 -亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早期诊断、治疗研究的热点。将包封有 TNFα的壳聚糖微球生物素化 ,以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统 ,采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明 :生物素化壳聚糖微球对体外培养的肝癌细胞 SMMC- 772 1有显著的抑制作用 (抑制率为 6 0 .8% ,P<0 .0 1)。 展开更多

关键词 靶向治疗 壳聚糖微球 生物素-亲和素系统 肿瘤

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生物素-亲和素系统在压电免疫传感器中质量放大作用研究 被引量：2

9

作者 裴仁军 胡继明 +2 位作者 刘栗加 胡毅 曾云鹗 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第6期879-880,共2页

生物素－亲和素系统（ＢｉｏｔｉｎＡｖｉｄｉｎＳｙｓｔｅｍ，ＢＡＳ）是７０年代后期迅速发展起来的一种新型生物放大系统，具有高灵敏度、高特异性以及简便、经济、快速等优点，在现代生物免疫学领域中已得到广泛的应用［１］．我们... 生物素－亲和素系统（ＢｉｏｔｉｎＡｖｉｄｉｎＳｙｓｔｅｍ，ＢＡＳ）是７０年代后期迅速发展起来的一种新型生物放大系统，具有高灵敏度、高特异性以及简便、经济、快速等优点，在现代生物免疫学领域中已得到广泛的应用［１］．我们首次将生物素－亲和素系统用于压电免... 展开更多

关键词 压电免疫传感器 生物素-亲和素系统 质量放大免疫检测 检测信号放大

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应用SPR生物传感器检测酸菜发酵液中大肠杆菌 被引量：8

10

作者 张文浩 郑先哲 初国超 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期117-121,共5页

应用SPR传感器可以快速检测酸菜发酵液中的大肠杆菌,以便检测和控制酸菜发酵液中的亚硝酸盐含量,保证发酵食品安全。采用生物素-亲和素系统增大SPR传感器折射信号,获得了传感器的折射率与大肠杆菌浓度的回归方程,实现了对酸菜发酵液中... 应用SPR传感器可以快速检测酸菜发酵液中的大肠杆菌,以便检测和控制酸菜发酵液中的亚硝酸盐含量,保证发酵食品安全。采用生物素-亲和素系统增大SPR传感器折射信号,获得了传感器的折射率与大肠杆菌浓度的回归方程,实现了对酸菜发酵液中大肠杆菌浓度快速,精确检测,提高大肠杆菌检测限到104cfu·mL-1。 展开更多

关键词 等离子共振生物传感器 酸菜发酵液 大肠杆菌 生物素-亲和素系统 检测限

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二步法预定位技术对荷人肝癌裸鼠模型的MR免疫成像研究 被引量：6

11

作者 许乙凯 刘岘 叶靖 《中华放射学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期357-361,共5页

目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二... 目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二步法预定位组8只,先静脉注射生物素化单克隆抗体600μg,24h后再给予钆喷替酸葡甲胺链霉亲和素(Gd DTPA streptavidin,Gd DTPA SA);HAb18单克隆抗体Gd DTPA组6只,经尾静脉注射Gd DTPA HAb18;Gd DTPA对照组6只,静脉注射Gd DTPA。对实验动物行MR扫描,测量SET1WI平扫及增强后10、30、60min及3、6、12、24、48h图像内肿瘤的信号强度,绘制信号强度时间曲线,并计算肿瘤强化率及对比度噪声比(contrast to noiseratio,CNR)。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。二步法预定位组内,肿瘤信号强度缓慢升高,增强后第6小时,肿瘤的强化率、CNR达到最大值,与其他两组相比较差异有统计学意义。48h后,肿瘤的强化仍肉眼可辨。单克隆抗体组内,肿瘤表现为缓慢轻度强化,增强后24h的强化率达13.5%,肿瘤信号强度、CNR与平扫比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Gd DTPA对照组内,肿瘤表现为快进快出特点的强化特点。结论二步法预定位技? 展开更多

关键词 预定位技术 二步法 成像研究 裸鼠模型 生物素-亲和素系统 单克隆抗体 HAB18 抗原结合活性 钆喷替酸葡甲胺 强度-时间曲线 DTPA 生物素化 system 信号强度 对比度噪声比 人肝癌细胞 人肝细胞癌 链霉亲和素 尾静脉注射 分子生物素

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钛种植体表面固定生物素的实验研究 被引量：7

12

作者 杜明亮 钱海燕 +1 位作者 吴明月 李全利 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期463-466,共4页

目的利用生物素-亲和素系统,将生物素共价键合在钛基材表面,为钛种植体表面接枝生物活性分子提供新的实验方法。方法使用3-氨丙基膦酸(APP)对钛基材表面进行酸蚀处理并使其获得游离氨基,由碳二亚胺(EDC)介导,通过与羧基反应形成酰胺键... 目的利用生物素-亲和素系统,将生物素共价键合在钛基材表面,为钛种植体表面接枝生物活性分子提供新的实验方法。方法使用3-氨丙基膦酸(APP)对钛基材表面进行酸蚀处理并使其获得游离氨基,由碳二亚胺(EDC)介导,通过与羧基反应形成酰胺键以实现生物素-亲和素系统在钛种植体表面的固定。结果通过环境扫描电镜、傅立叶变换红外光谱、X射线光电子能谱、免疫荧光等检测方法对样品进行表征,证实钛基材表面已成功接枝生物素。结论采用生物素-亲和素系统,可以在氨基化的钛基材表面成功接枝生物素,为钛种植体表面生物化修饰的研究提供新的方法和思路。 展开更多

关键词 钛种植体 3-氨丙基膦酸 生物素-亲和素系统 共价键合

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基于纳米颗粒的赭曲霉毒素A高灵敏酶联免疫检测方法的建立及应用 被引量：7

13

作者 章先 何珂 +4 位作者 黄志伟 单颖 曹统 谢珲 宋厚辉 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期599-609,共11页

赭曲霉毒素(ochratoxins)主要是由青霉菌Penicillium和曲霉菌Aspergillus产生的有毒次级代谢产物,常见于发霉或发酵的农产品中,其中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)毒性最强且最为普遍。OTA是粮食作物和饲料的重要污染物,在加工、储存或... 赭曲霉毒素(ochratoxins)主要是由青霉菌Penicillium和曲霉菌Aspergillus产生的有毒次级代谢产物,常见于发霉或发酵的农产品中,其中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)毒性最强且最为普遍。OTA是粮食作物和饲料的重要污染物,在加工、储存或运输过程中均可产生,具有肾毒性和免疫毒性,可通过蓄积作用发挥毒性效应,对人类和动物健康造成严重威胁。本研究通过将OTA单克隆抗体包被于纳米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs)表面,获得具有免疫活性的磁珠抗体复合物(MNPs-Anti OTA),并制备生物素标记的偶联抗原OTA-BSA-Bio,后续采用链酶亲和素标记的纳米金颗粒(Strep-HRP-AuNPs)催化底物进行信号检测,最终建立了OTA高灵敏检测方法(MNPs-bs-AuNPs-ELISA)。在最优条件下,经计算该方法检测下限(IC10)为0.01ng/mL,检测区间(IC20-IC80)为0.02-0.73ng/mL,半数抑制率(IC50)为0.13ng/mL。与OTA类似物OTB、OTC交叉反应性为4.3%和8.1%,对其他常见真菌毒素AFB1、ZEN、FB1、DON、CIT和PAT均无交叉反应。玉米、面粉和大豆样本中的加标回收率可达85.6%-115.7%,对天然样本中OTA含量的检测结果表明,该方法与LC-MS/MS相关性良好。本研究建立的MNPs-bs-AuNPs-ELISA可满足谷物及饲料样本中OTA的快速、高灵敏度定量检测,成本较低,具有很好的应用前景。 展开更多

关键词 赭曲霉毒素A 纳米磁珠 纳米金 生物素-亲和素系统 定量检测

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量子点标记链霉亲和素荧光免疫分析测定雌三醇 被引量：6

14

作者 钱建瑞 赵艳伟 +2 位作者 梁艳 李立华 王术皓 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期104-107,共4页

以生物素化羊抗兔免疫球蛋白和量子点标记链霉亲和素为荧光探针，采用竞争免疫分析模式，建立了一种灵敏度高、选择性好的检测雌三醇的荧光免疫分析方法。对几种测量参数如温育时间和温度、缓冲溶液pH、试剂浓度等进行了优化；方法的线... 以生物素化羊抗兔免疫球蛋白和量子点标记链霉亲和素为荧光探针，采用竞争免疫分析模式，建立了一种灵敏度高、选择性好的检测雌三醇的荧光免疫分析方法。对几种测量参数如温育时间和温度、缓冲溶液pH、试剂浓度等进行了优化；方法的线性范围为0．01～1000ng/mL，检出限0．0029ng／mL，血清样品加标回收率在91％-117％之间。 展开更多

关键词 量子点 荧光免疫分析 雌三醇 生物素-亲和素系统

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两种甲型肝炎病毒抗原快速检测方法的建立 被引量：4

15

作者 龙润乡 杨蓉 +4 位作者 李华 杨婷 罗芳宇 王俊 谢忠平 《微生物学免疫学进展》 2013年第1期39-41,共3页

目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使用辣根过氧化物酶标记HAV-Ab作放大... 目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使用辣根过氧化物酶标记HAV-Ab作放大系统建立双抗体夹心甲型肝炎病毒抗原ELISA检测试剂,对比两种检测方法的特异性、灵敏度及实际应用效果。结果用生物素标记甲型肝炎病毒抗体-辣根过氧化物酶标记亲和素作放大系统建立的甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法,较双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度高1～2个稀释度;两种检测法均对10余种病毒无交叉,P/N值BA-ELISA检测法较高。结论甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法是一种灵敏度高,特异性好,方便快捷的检测方法,可广泛应用于甲型肝炎病毒研究及临床检测中。而甲型肝炎病毒抗原双抗体夹心ELISA检测法,检测灵敏度适中,操作简单,更适用于甲肝疫苗生产检定。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 酶联免疫检测 生物素-亲和素系统

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外源性生物素对基于生物素-链霉亲和素化学发光技术干扰的研究进展 被引量：4

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作者 刘栋 仝慧 +3 位作者 陈斌 张宁 胡健 王晓琴 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第3期161-164,共4页

基于生物素-链霉亲和素系统的化学发光技术被广泛应用,但外源性生物素会对其产生干扰,这种干扰与多种因素相关,如反应模式、检测平台、检测项目和反应体系中的相关要素等。这些因素任何一种发生改变都将对干扰产生不同程度的影响。及时... 基于生物素-链霉亲和素系统的化学发光技术被广泛应用,但外源性生物素会对其产生干扰,这种干扰与多种因素相关,如反应模式、检测平台、检测项目和反应体系中的相关要素等。这些因素任何一种发生改变都将对干扰产生不同程度的影响。及时准确的识别干扰有助于减少临床误诊和漏诊。该文对国内外所报道的影响干扰的因素进行综述,为临床实验室人员提供借鉴。 展开更多

关键词 生物素 生物素-亲和素系统 化学发光免疫分析技术 干扰

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静电吸附法与生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向纳米微泡的对比实验研究 被引量：4

17

作者 李浪 郭燕丽 +2 位作者 张淼 范校周 童海鹏 《临床超声医学杂志》 2013年第12期809-812,共4页

目的比较静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体靶向纳米微泡的物理特性和靶向黏附率。方法分别应用静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向的纳米微泡,检测其物理性状;光镜下观察两种微泡与前列... 目的比较静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体靶向纳米微泡的物理特性和靶向黏附率。方法分别应用静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向的纳米微泡,检测其物理性状;光镜下观察两种微泡与前列腺癌细胞LNCaP和C4-2的靶向能力,并与胃癌细胞MKN45对照;对比分析两种靶向纳米微泡的粒径、浓度及与前列腺癌细胞结合能力。结果两种靶向纳米微泡均呈圆形,表面光滑,大小均匀,分散度好,无聚集,粒径均<1000 nm。静电吸附法制备的靶向纳米微泡平均粒径为(702.96±66.65)nm,平均浓度为(3.46±0.30)×108/ml,与前列腺癌细胞LNCaP黏附率(77.2±3.19)%,与C4-2细胞黏附率(61.00±4.47)%;生物素-亲和素桥联法制备的靶向纳米微泡平均粒径为(609.90±37.40)nm,平均浓度约(4.52±0.19)×108/ml,与前列腺癌细胞LNCaP黏附率(96.60±1.14)%,与C4-2细胞黏附率(94.00±1.58)%。两种靶向纳米微泡的粒径、浓度及与前列腺癌细胞黏附率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);与胃癌细胞MKN45均无黏附。结论生物素-亲和素桥联法是一种高效、灵敏、稳定、特异性强的PSMA抗体靶向微泡制备方法,较静电吸附法具有更大的优势。 展开更多

关键词 靶向微泡 前列腺特异性膜抗原 静电吸附法 生物素-亲和素系统

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应用于RPA nfo反应产物结果可视化的胶体金试纸条制备与评价

18

作者 杨晨 薛俊欣 +5 位作者 林雅娟 王小妹 蒋蔚 张曼玉 王权 孙卫东 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第12期41-49,共9页

旨在利用6-羧基荧光素(6-FAM)与6-FAM单克隆抗体、生物素与链霉亲和素之间的特异性结合,制备可用于nfo酶切割探针的重组酶聚合酶(RPA)反应产物结果可视化的胶体金侧向免疫层析试纸条(GICS)。通过杂交瘤法和诱生腹水法制备了高亲和力的6-... 旨在利用6-羧基荧光素(6-FAM)与6-FAM单克隆抗体、生物素与链霉亲和素之间的特异性结合,制备可用于nfo酶切割探针的重组酶聚合酶(RPA)反应产物结果可视化的胶体金侧向免疫层析试纸条(GICS)。通过杂交瘤法和诱生腹水法制备了高亲和力的6-FAM单克隆抗体(亲和力常数为5.38×10~9 L/mol),再运用高浓度NaCl破坏试验,确定了胶体金与6-FAM抗体的最佳标记pH值为8.0,最佳抗体标记量为12μg/mL,并使用模拟样本确定了最佳检测(T)线包被缓冲液为0.2 mol/L(pH值5.0)。然后使用RPA nfo反应产物作为实际样本,观察条带的深浅,最终确定在层析液为0.1 mol/L PB(pH值7.4)、T线包被1 mg/mL SA、反应液用量5μL及金标抗体用量10μL条件下,能实现试纸条最佳检测性能。自主研发的胶体金侧向免疫层析试纸条在加样5 min后能出现清晰的条带,与目前商品化试纸条的可视化判定结果一致,能替代现有的商品化试纸条,降低检测成本、缩短检测时间,对建立RPA nfo-GICS及RPA-CRISPR Cas12a-GICS检测方法奠定了基础。 展开更多

关键词 6-FAM单克隆抗体 生物素-链霉亲和素系统 RPA nfo 胶体金侧向免疫层析试纸条

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氯霉素的BAS-时间分辨荧光免疫分析 被引量：3

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作者 张艺 黄飚 +3 位作者 王柯 张珏 王雪 金坚 《食品科技》 CAS 北大核心 2009年第12期311-314,共4页

采用基于生物素-亲和素系统(BAS)的时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)建立高灵敏的氯霉素(CAP)全自动检测方法。以亲和素包被板,生物素-CAP-OVA与游离CAP竞争限量抗CAP多克隆抗体,用铕标记的羊抗兔IgG示踪。该方法的灵敏度为0.018ng/mL,效... 采用基于生物素-亲和素系统(BAS)的时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)建立高灵敏的氯霉素(CAP)全自动检测方法。以亲和素包被板,生物素-CAP-OVA与游离CAP竞争限量抗CAP多克隆抗体,用铕标记的羊抗兔IgG示踪。该方法的灵敏度为0.018ng/mL,效应点ED20、ED50、ED80分别为0.092、1.339、39.275ng/mL,与甲砜氯霉素、青霉素、诺氟沙星的交叉反应率均小于0.1%,批内和批间的变异系数分别为4.4%和11.8%。向蜂蜜和鸡蛋样品添加0.1～10ng/mL浓度的CAP,平均回收率分别为110.3%和92.8%。检测结果与ELISA试剂盒有良好的相关性。结果表明,CAPBAS-TRFIA法灵敏度高、特异性好、操作简便,适于大样本筛查,有良好的应用前景。 展开更多

关键词 氯霉素 时间分辨荧光免疫分析法 生物素-亲和素系统

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肿瘤导向治疗研究进展 被引量：1

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作者 孔丽君 王清明 陈惠鹏 《生物技术通讯》 CAS 2002年第6期459-461,465,共4页

特异性地杀伤肿瘤细胞并降低对正常细胞的毒副作用是各种导向治疗方法的共同目标。本文综述了前体药物疗法、免疫毒素、基因疗法、以肿瘤增殖转移过程中的关键分子为靶的导向治疗、生物素-亲和素系统等导向治疗的研究进展。

关键词 肿瘤 导向治疗 研究进展 前体药物 抗体 生物素-亲和素系统 基因治疗 免疫毒素

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