微藻三酰甘油合成途径及其最新研究进展 被引量：7

1

作者 何思思 王元丽 +3 位作者 高保燕 万凌琳 李爱芬 张成武 《生命科学》 CSCD 2014年第9期979-990,共12页

三酰甘油(triacylglycerols,TAGs)是动物、植物、微生物和微藻细胞主要的储藏性脂类,它可应用于食品、轻工业和生物燃料等方面,是一种新型可再生能源——生物柴油生产的重要原料。与高等油料作物相比,微藻具有光合作用效率高、生长速度... 三酰甘油(triacylglycerols,TAGs)是动物、植物、微生物和微藻细胞主要的储藏性脂类,它可应用于食品、轻工业和生物燃料等方面,是一种新型可再生能源——生物柴油生产的重要原料。与高等油料作物相比,微藻具有光合作用效率高、生长速度快、油脂产量高、不占用农业耕地和适应多种生长环境等优势,是一种潜在的新型生物柴油生产原料。然而,目前人们对有机体,尤其是微藻细胞内TAG合成与积累的分子机制及细胞的代谢调控机制还知之甚少。对TAG合成的一系列重要过程,包括脂肪酸的合成,TAG生物合成的主要途径和旁路途径,以及与TAG合成相关的关键酶和重要基因等进行了综述,特别对微藻细胞中与TAG合成相关的关键基因的最新研究进展进行了总结,旨在更好地了解油脂代谢的调控途径,为最大限度地供应生物柴油的生产原料提供理论基础。 展开更多

关键词 生物柴油 三酰甘油 乙酰CoA羧化酶 二酰甘油酰基转移酶 磷脂 二酰甘油酰基转移酶

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油葵含油量相关基因在烟草中的表达 被引量：3

2

作者 孙黎 寇尚龙 +2 位作者 欧阳超 喻川 陈放 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期886-892,共7页

采用RT-PCR和RACE技术从油葵（Helianthus annuus L.）种子中克隆了DGAT基因的cDNA全长序列,命名为HaD1（GenBank登录号为HM 015632）.将HaD1与CaMV 35S组成型启动子融合,构建植物表达载体pBI-HaD1,通过根癌农杆菌介导转化烟草.对转基... 采用RT-PCR和RACE技术从油葵（Helianthus annuus L.）种子中克隆了DGAT基因的cDNA全长序列,命名为HaD1（GenBank登录号为HM 015632）.将HaD1与CaMV 35S组成型启动子融合,构建植物表达载体pBI-HaD1,通过根癌农杆菌介导转化烟草.对转基因植株进行GUS及PCR检测,同时采用气相色谱-质谱法（GC-MS）分析转基因烟草叶片中脂肪酸各成分的含量.结果表明：HaD1基因cDNA全长1 936 bp,最大开放阅读框为1 524 bp,编码507个氨基酸;推测的氨基酸序列与其它植物已报道的DGAT1基因的氨基酸序列一致性为70%~80%,具有DGAT1蛋白保守的二酰甘油结合基序HKWIVRHLYFP＂,因此HaD1基因属于DGAT1基因家族.GUS活性染色及PCR检测均证明外源HaD1整合到烟草基因组并成功表达.转基因烟草叶片脂肪酸含量测定发现,油酸、软脂酸和硬脂酸的含量得到提高,推测HaD1是植物油脂合成相关的重要基因. 展开更多

关键词 油葵 二酰甘油酰基转移酶1 烟草 转基因 脂肪酸含量

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植物二酰甘油酰基转移酶及其编码基因研究进展 被引量：1

3

作者 王婷婷 马晓林 +2 位作者 李凤兰 郭惠红 陈发菊 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期127-130,共4页

三酰甘油(TAG)是植物的主要储藏脂类,二酰甘油酰基转移酶(DGATs)催化TAG生物合成的最后一步乙酰化反应,使二酰甘油加上一个脂肪酰基形成TAG。因此,DGATs被认为是TAG生物合成过程中最关键的限速酶。重点介绍了植物DGATs及其编码基因的分... 三酰甘油(TAG)是植物的主要储藏脂类,二酰甘油酰基转移酶(DGATs)催化TAG生物合成的最后一步乙酰化反应,使二酰甘油加上一个脂肪酰基形成TAG。因此,DGATs被认为是TAG生物合成过程中最关键的限速酶。重点介绍了植物DGATs及其编码基因的分类、结构以及在植物油脂合成中的作用及应用的最新研究进展,以期为应用基因工程等技术提高植物油脂(如种子油)含量或改善油脂品质提供参考。 展开更多

关键词 二酰甘油酰基转移酶 编码基因 研究进展

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雨生红球藻HaeDGAT2-3的分子克隆和生物信息学分析 被引量：1

4

作者 张宏江 赵春超 +3 位作者 许文鑫 杭伟 崔红利 李润植 《山西农业科学》 2020年第5期669-676,共8页

雨生红球藻被认为是天然虾青素的理想来源,虾青素主要储存于富含虾青素酯和三酰甘油(TAGs)的油体中,而二酰甘油酰基转移酶(DGAT)作为三酰甘油及虾青素酯生物合成的限速酶,在雨生红球藻中尚未见报道。试验通过同源克隆与RACE扩增技术相... 雨生红球藻被认为是天然虾青素的理想来源,虾青素主要储存于富含虾青素酯和三酰甘油(TAGs)的油体中,而二酰甘油酰基转移酶(DGAT)作为三酰甘油及虾青素酯生物合成的限速酶,在雨生红球藻中尚未见报道。试验通过同源克隆与RACE扩增技术相结合的方法获得了2型二酰甘油酰基转移酶(DGAT2-3)的cDNA序列全长,其中,HaeDGAT2-3序列编码区全长为1149 bp,共编码383个氨基酸;BLASTp分析结果显示,HaeDGAT2-3与衣藻来源的DGAT2相似性达到54.02%;保守功能域分析表明,HaeDGAT2-3蛋白包含DGAT2家族典型的LPLAT超基因家族;多序列比对及系统进化分析结果表明,HaeDGAT2-3蛋白中包括7个保守的功能基序,说明其可能属于DGAT2家族。研究首次从雨生红球藻中克隆得到编码DGAT2的基因序列,生物信息学分析结果对进一步了解雨生红球藻虾青素酯化机制具有重要意义。 展开更多

关键词 二酰甘油酰基转移酶 三酰甘油 多序列比对 系统进化 雨生红球藻

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Fe^(3+)胁迫对假微型海链藻中性脂累积及DGAT表达的影响 被引量：1

5

作者 蒋瑜 严小军 +2 位作者 朱鹏 周成旭 周迎松 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期87-94,共8页

二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是脂类合成途径中的关键酶,其表达水平的高低影响着脂类含量的高低。微量元素Fe3+对于微藻的生长不可或缺,且影响着微藻中油脂的累积。本实验以假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana)为研究对象,分析了铁限制... 二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是脂类合成途径中的关键酶,其表达水平的高低影响着脂类含量的高低。微量元素Fe3+对于微藻的生长不可或缺,且影响着微藻中油脂的累积。本实验以假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana)为研究对象,分析了铁限制(0.000 03mmol/L)和高铁胁迫(0.3 mmol/L)2种Fe3+胁迫条件下,不同种群生长期中性脂累积及二酰甘油酰基转移酶(DGAT)的基因表达受到的影响。结果显示:铁限制条件下,微藻种群生长及其中性脂的合成受到抑制,DGAT的表达量下降;高铁胁迫条件下,高浓度Fe3+可促进中性脂合成与DGAT的表达,但抑制微藻种群生长。因此,富铁条件下更利于总脂的收集。 展开更多

关键词 假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana) FE3+ 中性脂 二酰甘油酰基转移酶

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洋甘菊总黄酮对肝脏脂肪变性的改善作用 被引量：1

6

作者 阿曼古丽·艾则孜 王莹 兰卫 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期101-107,共7页

目的:探究洋甘菊总黄酮对肝脏脂肪变性的改善作用及机制。方法:采用高脂饲料建立ApoE^(-/-)小鼠高脂血症模型。以C57BL/6J小鼠为正常对照组,ApoE^(-/-)小鼠分成模型对照组、LCQ-9086 mg/kg组、洋甘菊总黄酮88、176、352 mg/kg组,连续灌... 目的:探究洋甘菊总黄酮对肝脏脂肪变性的改善作用及机制。方法:采用高脂饲料建立ApoE^(-/-)小鼠高脂血症模型。以C57BL/6J小鼠为正常对照组,ApoE^(-/-)小鼠分成模型对照组、LCQ-9086 mg/kg组、洋甘菊总黄酮88、176、352 mg/kg组,连续灌胃给药干预8 w。8 w后小鼠处死,检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;另外用油酸和棕榈酸联合诱导HepG2细胞产生脂肪变性,分为空白对照组、模型对照组、LCQ-9084.55μg/mL组、洋甘菊总黄酮100、150、200μg/mL组;各组给药干预24 h后检测TG含量;油红染色法观察洋甘菊总黄酮对小鼠肝组织和HepG2细胞脂滴形成的影响;免疫组织化学法、免疫荧光法、Western blot法检测小鼠肝组织和HepG2细胞二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,ApoE^(-/-)模型对照组小鼠血清TC、TG、LDL-C含量显著升高(P<0.01)、HDL-C含量显著降低(P<0.01);HepG2模型对照组细胞TG含量显著升高(P<0.01);油红染色结果显示,模型对照组ApoE^(-/-)小鼠和HepG2细胞脂肪变性情况明显加重,DGAT1蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型对照组相比,洋甘菊总黄酮88、176、352 mg/kg组小鼠血清TG、TC、LDL-C含量显著降低(P<0.01),HDL-C含量显著升高(P<0.01);洋甘菊总黄酮100、150、200μg/mL组细胞TG含量显著降低(P<0.01);洋甘菊总黄酮88、176、352 mg/kg组和洋甘菊总黄酮100、150、200μg/mL组脂肪变性情况均有所改善;免疫组化、免疫荧光试验结果显示,与模型对照组相比,灌胃洋甘菊总黄酮88、176、352 mg/kg ApoE^(-/-)小鼠和给予洋甘菊总黄酮100、150、200μg/mL HepG2细胞各组DGAT1蛋白表达显著下调(P<0.01)。Western Blot试验结果显示,与模型对照组相比,洋甘菊总黄酮176、352 mg/kg组肝组织DGAT1蛋白表达显著下调(P<0.01);洋甘菊总黄酮100、150、200μg/mL组HepG2细胞DGAT1蛋 展开更多

关键词 洋甘菊总黄酮 脂肪变性 ApoE^(-/-)小鼠 HEPG2细胞 二酰甘油酰基转移酶1

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亚硫酸钠对人正常二倍体肝细胞内二酰甘油酰基转移酶1和载脂蛋白E mRNA和蛋白表达的影响 被引量：1

7

作者 王幼萍 白剑英 +3 位作者 雷佩玉 闫丹丹 梁瑞峰 赵五红 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期5-8,F0003,共5页

目的通过研究亚硫酸钠对人正常二倍体肝(HL-7702)细胞内二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)和载脂蛋白E(apoE)mRNA和蛋白表达的影响,探讨亚硫酸钠诱发肝细胞脂肪积累效应及作用途径。方法将处于对数生长期的HL-7702细胞株分别暴露于终浓度为0(... 目的通过研究亚硫酸钠对人正常二倍体肝(HL-7702)细胞内二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)和载脂蛋白E(apoE)mRNA和蛋白表达的影响,探讨亚硫酸钠诱发肝细胞脂肪积累效应及作用途径。方法将处于对数生长期的HL-7702细胞株分别暴露于终浓度为0(阴性对照)、10、2.5、0.5、0.1 mmol/L的亚硫酸钠溶液,并设立阳性对照(1.0 mmol/L油酸)组。分别于染毒24、48 h时,采用油红O染色法观察肝细胞内脂滴沉积,采用免疫沉淀和Western Blot法检测细胞内apoE和DGAT1蛋白的表达水平,采用qRT-PCR法检测肝细胞内apoE和DGAT1 mRNA的表达水平。结果与阴性对照组比较,仅10 mmol/L亚硫酸钠染毒24 h时HL-7702肝细胞内DGAT1 mRNA表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较,染毒24h、48 h时,10 mmol/L亚硫酸钠染毒组HL-7702肝细胞内DGAT1蛋白表达水平以及各浓度亚硫酸钠染毒组HL-7702肝细胞内apoE蛋白表达水平均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。阳性对照组可见明显的脂滴沉积,但亚硫酸钠染毒组均未见明显脂滴。结论一定剂量的亚硫酸钠可引起肝细胞内DGAT1、apoE蛋白表达增高,导致肝细胞内甘油三酯分泌增加,从而引起肝细胞的脂肪蓄积。 展开更多

关键词 亚硫酸钠 载脂蛋白E 二酰甘油酰基转移酶1 免疫沉淀

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天然来源的二酰甘油酰基转移酶抑制剂的研究进展

8

作者 熊大玺 崔龙 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第13期4074-4081,共8页

二酰甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase,DGAT)是三酰甘油合成最后一步的催化酶,也是唯一的限速酶。该酶与脂肪代谢、脂类在组织中沉积有很大关系。天然产物因其存在许多结构新颖,活性强,毒副作用小的化合物成为抑制剂的首... 二酰甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase,DGAT)是三酰甘油合成最后一步的催化酶,也是唯一的限速酶。该酶与脂肪代谢、脂类在组织中沉积有很大关系。天然产物因其存在许多结构新颖,活性强,毒副作用小的化合物成为抑制剂的首选。为了寻找有效的天然来源的DGAT抑制剂,对天然产物中含有较好DGAT抑制活性的化合物种类进行综述。 展开更多

关键词 天然产物 二酰甘油酰基转移酶 构效关系 肥胖 糖尿病

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油棕DGAT2基因启动子克隆及表达的组织特异性研究

9

作者 李思雨 袁怡君 +1 位作者 郑育声 李东栋 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期835-841,共7页

以油棕(Elaeis guineensis Jacq.)叶片基因组DNA为模板,克隆获得长度为1035 bp的二酰甘油酰基转移酶基因(DGAT2)的启动子区序列。序列分析结果表明,DGAT2基因启动子含有大量光反应元件、激素响应元件及部分转录因子结合位点。本研究同... 以油棕(Elaeis guineensis Jacq.)叶片基因组DNA为模板,克隆获得长度为1035 bp的二酰甘油酰基转移酶基因(DGAT2)的启动子区序列。序列分析结果表明,DGAT2基因启动子含有大量光反应元件、激素响应元件及部分转录因子结合位点。本研究同时构建了DGAT2基因启动子和GUS基因植物融合表达载体,通过蘸花法侵染拟南芥(Arabidopsis thaliana L.),并对转基因拟南芥中GUS基因表达的特异性进行了分析。结果显示,GUS基因在拟南芥各组织中均有表达,但没有明显的组织特异性;荧光定量PCR分析结果表明DGAT2在油棕不同器官中的转录水平存在明显差异。 展开更多

关键词 油棕 二酰甘油酰基转移酶 启动子 功能元件 GUS基因

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大豆PDAT基因的鉴定、表达与进化分析 被引量：9

10

作者 胡利宗 郭婕 +3 位作者 乔琳 王红星 侯湘婵 朱自学 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期677-686,共10页

PDAT酶催化磷脂和二脂酰甘油反应,生成溶血磷脂和三脂酰甘油,在三脂酰甘油合成过程中扮演着重要作用。为探明大豆PDAT基因的起源与进化关系,本研究利用生物信息学手段剖析了大豆PDAT基因的序列、表达以及进化关系。系统进化关系分析显示... PDAT酶催化磷脂和二脂酰甘油反应,生成溶血磷脂和三脂酰甘油,在三脂酰甘油合成过程中扮演着重要作用。为探明大豆PDAT基因的起源与进化关系,本研究利用生物信息学手段剖析了大豆PDAT基因的序列、表达以及进化关系。系统进化关系分析显示,除低等植物外,大豆与其他被子植物PDAT基因被分为4种类群,每一个类群内基因结构与保守基序组成模式均高度保守。基于滑动窗口与位点模型检测选择压力,结果显示大豆PDAT基因均受到功能限制,受控于负选择;但位点-分枝模型发现大豆与其他植物类群Ⅰ和Ⅱ的祖先分支发生了适应性进化。表达分析表明,大豆PDAT基因具有多样化的转录模式,且同源基因对之间存在分化。这些结果为进一步功能分析大豆PDAT基因提供了帮助。 展开更多

关键词 大豆 磷脂:二酰甘油酰基转移酶 选择压力 表达 适应性进化

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种子特异表达异源DGAT1基因提高大豆种子含油量和营养品质 被引量：7

11

作者 张飞 高秀清 +4 位作者 张靖洁 刘宝玲 张红梅 薛金爱 李润植 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1478-1490,共13页

为提高大豆Glycine max种子含油量和营养品质,文中以二酰甘油酰基转移酶1(Diacylglycerol acyltransferase 1,DGAT1)基因为遗传修饰靶标。将来自高油植物斑鸠菊Vernonia galamensis L.编码DGAT1酶蛋白的c DNA克隆Vg DGAT1A在大豆种子特... 为提高大豆Glycine max种子含油量和营养品质,文中以二酰甘油酰基转移酶1(Diacylglycerol acyltransferase 1,DGAT1)基因为遗传修饰靶标。将来自高油植物斑鸠菊Vernonia galamensis L.编码DGAT1酶蛋白的c DNA克隆Vg DGAT1A在大豆种子特异超表达。连续选择获得高代(T7)Vg DGAT1A转基因大豆株系。转基因株系表型鉴定显示,在大豆种子发育中期(30–45 DAF),Vg DGAT1A高表达,相应地DGAT酶活性是非转基因野生型和空载体转化对照的7.8倍。转基因成熟种子含油量比对照提高了5.1%,淀粉含量比对照减少2%–3%,蛋白质含量与对照无显著差异。此外,转基因大豆种子百粒重(14.5 g)和种子萌发率(95.6%)与对照亦无明显差异。种子油脂脂肪酸成分分析显示,转基因大豆种子油中抗氧化的油酸(C18:1Δ9)含量比对照提高8.2%,相应地易氧化的亚油酸(C18:2Δ9,12)和亚麻酸(C18:3Δ9,12,15)分别减少6%和2%。这些数据表明,种子特异超表达外源Vg DGAT1A基因,打破了大豆种子含油量和蛋白质含量的负连锁,显著提高种子含油量且未导致蛋白含量降低。转基因大豆种子重量和萌发率亦未显负效应,而且种子油脂抗氧化性和营养品质得以改善。研究表明应用这一高酶活性Vg DGAT1A的基因工程是提高种子含油量和改善油脂品质的一条有效途径。 展开更多

关键词 大豆 斑鸠菊 种子营养品质 二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1) 种子特异表达 脂肪酸和油脂含量

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特色油料作物油莎豆CeDGAT1基因的鉴定及表达分析 被引量：2

12

作者 高宇 陈莹 +4 位作者 孙岩 王晓清 高慧玲 薛金爱 李润植 《山西农业科学》 2020年第6期831-835,841,共6页

二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)是催化三酰甘油酯(TAG)合成最后一步反应的限速酶,对油料作物种子油脂合成和积累极为重要。油莎豆地下块茎能积累30%的油脂,其块茎油脂生物合成机制还未解析。分析油莎豆块茎转录组数据,结果发现一条编码DGAT... 二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)是催化三酰甘油酯(TAG)合成最后一步反应的限速酶,对油料作物种子油脂合成和积累极为重要。油莎豆地下块茎能积累30%的油脂,其块茎油脂生物合成机制还未解析。分析油莎豆块茎转录组数据,结果发现一条编码DGAT1的cDNA序列(CeDGAT1),并应用生物信息学工具解析了CeDGAT1酶蛋白的理化性质、高级结构及系统发育等特征,通过qRT-PCR检测CeDGAT1的时空表达谱。结果显示,CeDGAT1编码的蛋白长度为502个氨基酸,理论等电点为9.08,属于MBOAT蛋白超家族,是一个疏水性蛋白,含有8个跨膜结构;二级结构由α-螺旋(46.06%)、无规则卷曲(35.43%)、延伸链(12.40%)和β-折叠(6.10%)组成;油莎豆CeDGAT1蛋白与模式植物拟南芥AtDGAT1的亲缘关系较远,而与禾本科的单子叶植物高粱和野生水稻的DGAT1同源性较高;CeDGAT1主要在发育块茎中高表达,在块茎播种后90 d时达峰值,表明CeDGAT1在油莎豆块茎油脂合成积累中行使重要功能。研究结果可为深入解析块茎等营养器官油脂生物合成机制及油莎豆油脂产量和品质的遗传改良提供科学依据。 展开更多

关键词 油莎豆 富油块茎 油脂合成 二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1) 生物信息学分析 基因表达

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续随子ElPDAT1基因生物信息学及表达特性分析 被引量：2

13

作者 任国鹏 葛丽萍 +1 位作者 孙超超 唐露 《山西农业科学》 2019年第5期710-714,718,共6页

磷脂:二酰甘油酰基转移酶1(PDAT1)是不依赖于脂酰-CoA催化二酰甘油(DAG)合成三酰甘油(TAG)的关键酶,在种子油脂代谢过程中起关键作用。为了研究ElPDAT1基因在续随子种子油脂合成过程中的调控作用,对ElPDAT1进行了生物信息学分析,并采用q... 磷脂:二酰甘油酰基转移酶1(PDAT1)是不依赖于脂酰-CoA催化二酰甘油(DAG)合成三酰甘油(TAG)的关键酶,在种子油脂代谢过程中起关键作用。为了研究ElPDAT1基因在续随子种子油脂合成过程中的调控作用,对ElPDAT1进行了生物信息学分析,并采用qRT-PCR技术研究了该基因在续随子不同器官中的表达特性。结果表明,ElPDAT1基因c DNA全长2 968 bp,其中,开放阅读框为2 037 bp,共编码678个氨基酸,预测等电点和相对分子质量分别是5.94,75.38 ku。ElPDAT1蛋白二级结构的主要结构元件是α-螺旋(34.81%)和无规则卷曲(43.95%)。ElPDAT1基因系统进化树分析表明,续随子与同科植物蓖麻、木薯、麻疯树的亲缘关系较近。qRT-PCR研究发现,ElPDAT1基因在各个器官中均有表达,且在种子中的表达量明显高于其他器官;ElPDAT1基因在种子发育中期表达量达到最大,其表达量为叶的5.82倍,说明ElPDAT1基因可能在续随子种子油脂合成过程中起调控作用。研究结果可为揭示该基因的生物学功能及全面解析续随子油脂合成机制提供科学依据。 展开更多

关键词 续随子 磷脂:二酰甘油酰基转移酶1 生物信息学 实时荧光定量PCR 基因表达

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雨生红球藻磷脂-二酰甘油酰基转移酶基因的鉴定与表达分析 被引量：1

14

作者 赵春超 张宏江 +2 位作者 臧敦秀 崔红利 李润植 《山西农业科学》 2022年第3期319-326,共8页

单细胞光自养雨生红球藻富集虾青素(AST)和三酰甘油(TAG)的合成调控机制目前还未得到解析。以雨生红球藻-797株系为试验材料,克隆编码磷脂-二酰甘油酰基转移酶(HpPDAT)的基因、鉴定酶蛋白理化特征和分析不同光质下的表达谱。结果显示,... 单细胞光自养雨生红球藻富集虾青素(AST)和三酰甘油(TAG)的合成调控机制目前还未得到解析。以雨生红球藻-797株系为试验材料,克隆编码磷脂-二酰甘油酰基转移酶(HpPDAT)的基因、鉴定酶蛋白理化特征和分析不同光质下的表达谱。结果显示,基于雨生红球藻转录组数据,鉴定获得一条编码HpPDAT的cDNA序列,全长3138 bp,编码978个氨基酸,蛋白的分子式为C_(4437)H_(6997)O_(1396)N_(1289)S_(38),分子质量为101.95 ku,理论等电点为6.15。多序列比对结果显示,HpPDAT具有LCAT家族典型保守域。系统发育分析显示,HpPDAT与微藻中的PDATs亲缘关系较近,而与高等植物的PDATs亲缘关系较远。不同光质(白光、高白光、高蓝光、紫外和白光+紫外)条件下HpPDAT基因的表达谱分析揭示,与黑暗条件下的藻细胞相比,所测光质条件下藻细胞HpPDAT基因的表达均上调,特别是高蓝光(10000 lx)显著促进了HpPDAT基因的表达,表达量达到黑暗条件下的9.6倍;不同光质条件下的细胞脂质合成发现,光照处理的总脂积累量要明显高于黑暗处理。HpPDAT的表达量与总脂的积累量呈现出一致性,在高蓝光处理下获得了最高的总脂积累量(27%),是黑暗处理的1.9倍。 展开更多

关键词 磷脂-二酰甘油酰基转移酶 基因鉴定 表达 光诱导 雨生红球藻

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用于治疗肥胖和糖尿病的二酰甘油酰基转移酶抑制剂研究进展 被引量：1

15

作者 王吉超 孙宏斌 《药学进展》 CAS 2012年第2期57-64,共8页

人体内的二酰甘油酰基转移酶是催化三酰甘油最终合成的关键酶,其基因缺失或酶活受抑时,机体不会因高脂饮食而发生肥胖,且对胰岛素的敏感性增强,因此该酶可作为肥胖和糖尿病治疗药物的靶点。综述二酰甘油酰基转移酶的功能研究以及天然来... 人体内的二酰甘油酰基转移酶是催化三酰甘油最终合成的关键酶,其基因缺失或酶活受抑时,机体不会因高脂饮食而发生肥胖,且对胰岛素的敏感性增强,因此该酶可作为肥胖和糖尿病治疗药物的靶点。综述二酰甘油酰基转移酶的功能研究以及天然来源和合成的二酰甘油酰基转移酶抑制剂的药理活性和构效关系。 展开更多

关键词 二酰甘油酰基转移酶抑制剂 三酰甘油 2型糖尿病 肥胖

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续随子ElDGAT1基因的克隆、序列分析及表达特性 被引量：1

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作者 孙超超 葛丽萍 +1 位作者 任国鹏 李润植 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期953-960,共8页

二酰甘油酰基转移酶(Diacylglycerol acyltransferase,DGAT)是植物三酰甘油(TAG)合成最后一步反应的关键酶和限速酶,属于酰基转移酶超家族。为探究续随子(Euphorbia lathyrisL.)中二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)对于调控种子油脂合成的作... 二酰甘油酰基转移酶(Diacylglycerol acyltransferase,DGAT)是植物三酰甘油(TAG)合成最后一步反应的关键酶和限速酶,属于酰基转移酶超家族。为探究续随子(Euphorbia lathyrisL.)中二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)对于调控种子油脂合成的作用机理,依据续随子转录组数据,采用RT-PCR技术分离和鉴定出一个DGAT1基因(命名为ElDGAT1),运用生物信息学方法对获得的序列进行分析,通过qPCR技术研究ElDGAT1基因在续随子不同器官中的表达特性。结果表明:从续随子中克隆获得ElDGAT1基因的cDNA序列,编码区长为1530bp,共编码509个氨基酸;预测ElDGAT1蛋白定位于内质网上,且为疏水性膜结合蛋白;其二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,编码的蛋白含有9个典型的跨膜螺旋区。基于DGAT1蛋白的系统发育分析表明:续随子与乌桕的亲缘关系最近,与橡胶树和木薯的同源性次之。qPCR检测结果发现,ElDGAT1基因在续随子根中表达量最低,种子中的表达量相对较高,在花后15d、30d、45d的表达量呈递增趋势。研究结果为进一步分析续随子种子油脂合成积累的调控机理及ElDGAT1基因的生物学功能提供依据。 展开更多

关键词 续随子 二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1) 基因克隆 表达特性

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大豆GmPDAT1参与油脂合成和非生物胁迫应答的功能分析

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作者 苗淑楠 高宇 +5 位作者 李昕儒 蔡桂萍 张飞 薛金爱 季春丽 李润植 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期96-106,共11页

解析大豆GmPDAT1在油脂合成和非生物胁迫应答中的功能,为大豆油脂改良和抗逆性分子育种提供新的科学参考。应用组学工具鉴定GmPDAT1,运用实时荧光定量PCR分析GmPDAT1在大豆不同组织和3种非生物胁迫的表达模式。使用酵母(Saccharomyces c... 解析大豆GmPDAT1在油脂合成和非生物胁迫应答中的功能,为大豆油脂改良和抗逆性分子育种提供新的科学参考。应用组学工具鉴定GmPDAT1,运用实时荧光定量PCR分析GmPDAT1在大豆不同组织和3种非生物胁迫的表达模式。使用酵母(Saccharomyces cerevisiae)TAG缺陷型突变体H1246检测GmPDAT1酶活性。结果表明,全基因组鉴定获得6个大豆GmPDAT1基因家族成员(GmPDAT1-A-GmPDAT1-F),除GmPDAT1-F具有8个外显子,其余5个GmPDAT1基因含6个外显子。GmPDAT1启动子区存在多个逆境胁迫响应顺式元件。GmPDAT1编码的蛋白序列长度介于582-668 aa,等电点(pI)为5.91-8.59。GmPDAT1蛋白均具有PLN02517超家族蛋白结构域,为膜结合蛋白,二级结构主要元件为α-螺旋和无规则卷曲。6个GmPDAT1蛋白聚类分为3个亚组,分别与花生AhPDAT1、小桐子JcPDAT1和蓖麻RcPDAT1-2亲缘关系较近。GmPDAT1基因家族成员具有组织特异性表达特性,其中GmPDAT1-B在不同组织均表达,且在发育种子表达量最高。推测GmPDAT1-B可能参与大豆种子TAG合成。酵母(Saccharomyces cerevisiae)TAG缺陷型突变体H1246进行功能互补测试证明,GmPDAT1-B具有催化TAG合成的酶活性。在低温、干旱和盐胁迫处理下,GmPDAT1基因家族成员呈现了不同的表达模式,预示它们可差异化参与大豆不同胁迫应答。尤其是GmPDAT1-B可介导3种不同逆境胁迫的响应。GmPDAT1-B可能具有促进大豆油脂合成和胁迫抗性的双重功能。 展开更多

关键词 大豆 磷脂:二酰甘油酰基转移酶1(PDAT1) 表达分析 TAG合成 非生物胁迫

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高山被孢霉中二酰甘油酰基转移酶2同源基因的克隆、表达和活性分析

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作者 李俊 曹珺 +3 位作者 唐鑫 张灏 陈卫 陈海琴 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期4600-4611,共12页

【背景】高山被孢霉(Mortierella alpina)是一种可积累大量花生四烯酸(Arachidonic Acid,AA)的产油丝状真菌,其所产脂肪酸主要被组装到甘油骨架上以三酰甘油(Triacylglycerol,TAG)形式存在。二酰甘油酰基转移酶(Diacylglycerol Acyltran... 【背景】高山被孢霉(Mortierella alpina)是一种可积累大量花生四烯酸(Arachidonic Acid,AA)的产油丝状真菌,其所产脂肪酸主要被组装到甘油骨架上以三酰甘油(Triacylglycerol,TAG)形式存在。二酰甘油酰基转移酶(Diacylglycerol Acyltransferase,DGAT)是TAG生物合成途径的关键酶,对于高山被孢霉TAG的生产具有重要意义。【目的】通过探究高山被孢霉DGAT2在TAG生物合成方面的功能特点,以期为提高产油真菌的TAG产量及改善TAG的脂肪酸组成提供参考。【方法】利用序列比对在高山被孢霉ATCC 32222基因组中筛选出2个编码DGAT2的候选基因MaDGAT2A/2B,在酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)中异源表达后进行功能分析,并在外源添加AA条件下通过检测TAG产量进一步分析MaDGAT2A/2B的活性,最后在高山被孢霉中同源过表达MaDGAT2A/2B,通过检测重组菌总脂肪酸产量及组分以分析MaDGAT2A/2B的体内活性。【结果】MaDGAT2A在S.cerevisiae中异源表达时,重组酵母菌TAG的产量达到细胞干重的3.06%,为对照组的4.91倍;而MaDGAT2B未明显提高重组酵母菌TAG的产量。在外源添加AA时,MaDGAT2A/2B均可显著促进重组酵母菌中TAG合成,表达MaDGAT2A的重组酵母菌TAG含量为对照组的3.67倍,表达MaDGAT2B的重组酵母菌TAG含量为对照组的2.61倍。MaDGAT2A/2B在高山被孢霉中过表达对其总脂肪酸产量无显著影响,但可显著提高总脂肪酸中AA的含量,AA占总脂肪酸比例最高达到39.15%,相比对照组提高16.14%。【结论】MaDGAT2A/2B可以参与TAG的生物合成,表明2个候选基因编码的蛋白具有DGAT活性,并且可提高高山被孢霉脂肪酸中AA的含量,对于改善产油真菌的脂肪酸组成从而提高其应用价值具有重要意义。 展开更多

关键词 二酰甘油酰基转移酶2 高山被孢霉 三酰甘油 产油真菌 花生四烯酸

原文传递

DGAT1在腮腺腺淋巴瘤组织中的表达及其临床意义

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作者 乔雪 白杨 +3 位作者 张美丽 闫茹茜 窦林波 张彦聪 《兰州大学学报（医学版）》 2024年第6期22-28,共7页

目的 探讨二酰甘油O-酰基转移酶1 (DGAT1)在腮腺腺淋巴瘤组织中的表达及其临床意义。方法 回顾性分析山东大学齐鲁医院德州医院2012年1月—2021年12月腮腺腺淋巴瘤患者的临床资料,包括年龄、性别、单双侧发病、有无吸烟史、肿瘤位置、... 目的 探讨二酰甘油O-酰基转移酶1 (DGAT1)在腮腺腺淋巴瘤组织中的表达及其临床意义。方法 回顾性分析山东大学齐鲁医院德州医院2012年1月—2021年12月腮腺腺淋巴瘤患者的临床资料,包括年龄、性别、单双侧发病、有无吸烟史、肿瘤位置、肿瘤直径和血脂水平。分别选取腮腺腺淋巴瘤、多形性腺瘤和正常腮腺的组织标本各5例,通过逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法检测DGAT1在各组织中的表达情况。选取30例患者的病理切片免疫组织化学染色,检测DGAT1在腮腺腺淋巴瘤和正常腮腺组织中的表达差异。结果 111例腮腺腺淋巴瘤患者的年龄为25~84岁,平均年龄为(62.08±10.61)岁;男性92例(82.9%);有吸烟史者79例(71.2%),吸烟时间8~50年;单侧发病者103例(92.8%);肿瘤位于腮腺尾部者62例(55.9%);肿瘤直径为0.5~6.2 cm,平均直径为(2.998±1.083) cm,肿瘤直径为2.0~4.0 cm者76例(68.5%)。RT-qPCR、蛋白质印迹法结果显示DGAT1在腮腺腺淋巴瘤表达显著高于多形性腺瘤和正常腮腺组织。免疫组织化学结果显示DGAT1在腮腺腺淋巴瘤中高表达。结论 腮腺腺淋巴瘤多发于吸烟的中老年男性,病变位于腮腺后下极居多,肿瘤直径多为2.0~4.0 cm。DGAT1在腮腺腺淋巴瘤中高表达,显著高于正常腺体组织,提示DGAT1高表达与腮腺腺淋巴瘤发生密切相关,有望成为腮腺腺淋巴瘤诊断的新型标志物。 展开更多

关键词 腮腺腺淋巴瘤 临床特点 二酰甘油O-酰基转移酶1 血脂异常

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甘蓝型油菜磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnPDAT1)表达特性研究 被引量：3

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作者 谭太龙 冯韬 +3 位作者 罗海燕 彭烨 刘睿洋 官春云 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期12-18,共7页

为探究甘蓝型油菜中BnaPDAT1基因表达特性与油脂合成之间的关系。选用2个含油量具有显著差异的甘蓝型油菜双低品系855(49. 72%)和868(35. 06%),以qRT-PCR方法检测BnaPDAT1各拷贝在两品系油菜中的表达规律,同时以薄层层析(TLC)和气相色谱... 为探究甘蓝型油菜中BnaPDAT1基因表达特性与油脂合成之间的关系。选用2个含油量具有显著差异的甘蓝型油菜双低品系855(49. 72%)和868(35. 06%),以qRT-PCR方法检测BnaPDAT1各拷贝在两品系油菜中的表达规律,同时以薄层层析(TLC)和气相色谱(GC)检测两品系油菜中TAG的积累规律。结果表明:授粉后种子中BnaPDAT1基因及其3个拷贝表达量均呈先升高后降低的趋势,花、叶片中均有BnaPDAT1表达,三拷贝表达存在差异,但表现整体调控的特点。两品系油菜叶(Bna A10. PDAT1除外)和授粉后20 d的种子中BnaPDAT1及其3个拷贝表达量具有极显著差异,其余各时期两品系间表达差异规律不明显,BnaPDAT1在高含油量品系855中授粉后20 d表达量为全生育期最高值(11. 100 9),是868的5. 07倍;叶中表达量8. 858 6,为868的7. 34倍,表达特性与Bna C09. PDAT1相似。两品系油菜种子TAG含量变化均呈S型,授粉20 d后油脂合成进入快速增长阶段,授粉后35 d进入缓慢增长期;授粉后30 d以前TAG含量品系间差异不大,授粉后35 d开始出现差异,授粉后40 d差异进一步扩大并趋于稳定。BnaPDAT1基因表达和种子TAG含量变化没有明显的直接关系,但高含油品系中BnaPDAT1基因表达值明显高于低含油品系。 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnaPDAT1) 基因 表达特性

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