WalK(S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用 被引量：7

1

作者 饶一凡 毛旭虎 +2 位作者 彭华刚 尚伟龙 饶贤才 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期219-228,共10页

目的探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA)毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-q... 目的探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA)毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-qPCR检测菌株毒力基因的表达变化,溶血实验比较菌株的溶血能力。采用同源重组技术在金葡菌中引入WalK(S221P)突变,E-test检测菌株的耐药性。凝胶阻滞实验(EMSA)检测WalKR对靶基因调控区的结合能力。结果转录组测序结果显示,K65中多种重要毒力因子基因的表达上调(P<0.01),调控系统Agr的活性增强,溶血能力恢复。将WalK(S221P)突变引入USA300菌株后,其耐药性升高,毒力因子表达水平及溶血活性降低;EMSA证实WalKR对金葡菌Agr有直接调控作用;敲除agrA基因后,引入WalK(S221P)突变仍可使USA300agrA对万古霉素的耐药性升高,但毒力基因的表达水平及溶血活性改变不显著。结论 WalK(S221P)突变影响VISA毒力是通过Agr实现的,该突变导致WalKR的活性降低,激活Agr的能力下降,最终影响VISA菌株的毒力。 展开更多

关键词 万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌 二元调控系统 WalKR WalK(S221P)突变 毒力

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二元调控系统在铜绿假单胞菌耐药机制中的作用 被引量：2

2

作者 林小静 张瑞凌 刘书花 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2011年第1期205-208,共4页

铜绿假单胞菌是革兰阴性条件性人类致病菌,在环境中广泛存在,并且能引起严重的医院内感染。二元调控系统能够感受多种环境刺激并且做出恰当而快速的适应性生理反应,二元调控系统也参与了细菌的抗生素耐药性形成机制。主要的二元调控系... 铜绿假单胞菌是革兰阴性条件性人类致病菌,在环境中广泛存在,并且能引起严重的医院内感染。二元调控系统能够感受多种环境刺激并且做出恰当而快速的适应性生理反应,二元调控系统也参与了细菌的抗生素耐药性形成机制。主要的二元调控系统包括PhoP-PhoQ,PmrA-PmrB,CzcR-CzcS,CopR-CopS,GacA-GacS,RetS,LadS等,本文总结了目前已经发现的二元调控系统调节铜绿假单胞菌抗生素耐药性的机制,为解决抗生素耐药问题提供了新的治疗靶点。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 二元调控系统 耐药性 PhoP—PhoQ

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布鲁菌二元调控系统研究进展 被引量：1

3

作者 董浩 吴清民 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第8期80-83,共4页

布鲁菌是一种缺乏典型毒力因子的胞内寄生菌,可以抵御宿主细胞内酸性、缺氧、强氧化性以及营养匮乏等多种不利环境,是形成布鲁菌致病力的重要原因。布鲁菌的二元调控系统可以对这些环境信号进行感应、传递并做出相应的适应。论文对布鲁... 布鲁菌是一种缺乏典型毒力因子的胞内寄生菌,可以抵御宿主细胞内酸性、缺氧、强氧化性以及营养匮乏等多种不利环境,是形成布鲁菌致病力的重要原因。布鲁菌的二元调控系统可以对这些环境信号进行感应、传递并做出相应的适应。论文对布鲁菌二元调控系统的研究现状及二元调控系统在布鲁菌病防控中的应用进行了系统的介绍。 展开更多

关键词 布鲁菌 二元调控系统 细菌毒力

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二元调控系统中的TcfSR在布鲁菌胞内存活过程中的作用及其调控基因的转录分析

4

作者 李爽 李志强 +9 位作者 张辉 付强 史慧君 李天森 王震 王勇 郭飞 王远志 张俊波 陈创夫 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期35-39,共5页

为分析二元调控系统TcfSR在布鲁菌胞内存活中的调控作用,本研究采用同源重组和抗性替换的方法,利用卡那基因替换TcfSR启动子,构建布鲁菌16M株的突变株16MΔTcfSR,并利用亲本株和突变株侵染小鼠巨噬细胞,比较两者在宿主细胞内的生存能力... 为分析二元调控系统TcfSR在布鲁菌胞内存活中的调控作用,本研究采用同源重组和抗性替换的方法,利用卡那基因替换TcfSR启动子,构建布鲁菌16M株的突变株16MΔTcfSR,并利用亲本株和突变株侵染小鼠巨噬细胞,比较两者在宿主细胞内的生存能力及其胞内存活相关毒力基因的转录情况。同时在各种逆环境下刺激亲本株和突变株,比较两者在逆环境中的存活能力。结果显示16MΔTcf SR在小鼠巨噬细胞和逆环境中的存活能力均比亲本株下降,并且突变株的胞内存活相关毒力基因的转录水平较亲本株具有差异。表明TcfSR在布鲁菌胞内存活过程中具有重要的调控作用。本研究初步阐明了TCRS Tcf SR的调控机制,为进一步研究TCRS在布鲁菌致病过程中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 布鲁菌 二元调控系统 TcfSR 转录调控

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万古霉素中介金黄色葡萄球菌及其相关二元调控系统

5

作者 丁丁 马筱玲 鲁怀伟 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第4期452-454,共3页

金黄色葡萄球菌是一种在环境中普遍存在的革兰阳性球菌，致病力强，可引起局部化脓、肺炎、关节炎、心包炎，甚至败血症、脓毒症等严重感染。近年来，金黄色葡萄球菌的耐药性逐年增加，其中最严重的是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MR—SA... 金黄色葡萄球菌是一种在环境中普遍存在的革兰阳性球菌，致病力强，可引起局部化脓、肺炎、关节炎、心包炎，甚至败血症、脓毒症等严重感染。近年来，金黄色葡萄球菌的耐药性逐年增加，其中最严重的是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MR—SA）。临床治疗MRSA感染以万古霉素为首选，然而随着万古霉素用量的增加，敏感性逐渐降低。金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药主要分为三个类型：万古霉素耐药金黄色葡萄球菌（VRSA）、万古霉素中介金黄色葡萄球菌（VISA）和异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌（hVISA）。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 二元调控系统 耐药性 综述

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一株万古霉素中介耐药溶血葡萄球菌全基因组测序

6

作者 杨壁瑕 钟天 +3 位作者 林舒楠 唐晓华 吴斌 袁文常 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期2094-2098,共5页

目的对分离自血液样本的一株万古霉素中介耐药溶血葡萄球菌进行全基因组测序分析,探讨细菌对万古霉素中介耐药的可能机制。方法通过第三代测序技术对一株万古霉素中介耐药溶血葡萄球菌临床分离株SH-1进行全基因组测序分析,进一步运用Bl... 目的对分离自血液样本的一株万古霉素中介耐药溶血葡萄球菌进行全基因组测序分析,探讨细菌对万古霉素中介耐药的可能机制。方法通过第三代测序技术对一株万古霉素中介耐药溶血葡萄球菌临床分离株SH-1进行全基因组测序分析,进一步运用Blast对耐药基因和万古霉素耐药相关基因进行分析。VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统分析SH-1的药物敏感性,E-test法检测SH-1对万古霉素的敏感性。结果溶血葡萄球菌SH-1对青霉素、苯唑西林、替考拉宁等抗菌药物耐药,对万古霉素中介耐药。E-test检测结果显示SH-1对万古霉素最低抑菌浓度(MIC)值为8μg/ml。SH-1全基因组大小为2622719 bp,GC含量有32.85%,含有2556个编码序列,63个tRNA编码基因,以及16个rRNA基因编码的操纵子。SH-1属于ST97型耐甲氧西林溶血葡萄球菌,SH-1中有18个基因发生了突变,其中万古霉素耐药相关二元调控系统WalK(N70K)、WalK(R280Q)发生了点突变。结论通过全基因组测序初步分析了一株溶血葡萄球菌SH-1菌株基因组特征,研究了SH-1基因突变情况,二元调控系统WalK(N70K)、WalK(R280Q)发生了点突变可能是引起SH-1对万古霉素中介耐药的重要原因。 展开更多

关键词 溶血葡萄球菌 耐药基因 万古霉素 全基因组测序 二元调控系统 WALK

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亚抑菌浓度茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌毒力因子表达的抑制作用初步研究 被引量：16

7

作者 钱静漪 王梦茹 +5 位作者 张宁宁 石祚琴 秦冕 王巧丽 郦雪艳 邵世和 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第5期408-411,433,共5页

目的探索亚抑菌浓度茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)毒力因子如α溶血素等表达的抑制作用及其机制。方法采用微量肉汤稀释法测定茅苍术挥发油对4株金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration... 目的探索亚抑菌浓度茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)毒力因子如α溶血素等表达的抑制作用及其机制。方法采用微量肉汤稀释法测定茅苍术挥发油对4株金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);吸光度测量等方法体外检测亚抑菌浓度茅苍术挥发油作用下金黄色葡萄球菌毒力因子产量的变化;采用Real-Time PCR法检测亚抑菌浓度挥发油对AgrA和Hla mRNA表达的影响。结果茅苍术挥发油可抑制金黄色葡萄球菌生长并呈现浓度依赖性,标准菌株ATCC25923的MIC为0.0625%(v/v),临床菌株的MIC为0.03125%(v/v)。亚抑菌浓度茅苍术挥发油作用后4株菌株凝固酶的分泌受到抑制,标准菌株ATCC25923的凝固酶效价只有对照组的1/4,差异有统计学意义(P<0.05),临床菌株的凝固酶效价都只有对照组的1/8,差异有统计学意义(P<0.05)。亚抑菌浓度茅苍术挥发油减弱了四株菌株的粘附能力,ATCC25923、SA1.5、SA2.3和SA4.12的粘附能力分别只有对照组的(53.71±6.56)%(P<0.01)、(53.10±9.39)%(P<0.01)、(74.70±9.00)%(P<0.01)和(45.62±21.22)%(P<0.01)。标准菌株ATCC25923和SA2.3的溶血活力受到亚抑菌浓度挥发油的显著抑制,溶血活力分别只有对照组的(18.48±23.88)%(P<0.01)和(1.63±4.18)%(P<0.01)。α-溶血素毒力基因Hla及其调控基因AgrA的表达受到了亚抑菌浓度挥发油的抑制,其表达水平分别只有对照组的(6.17±2.23)%(P<0.01)和(24.79±9.19)%(P<0.01)。结论茅苍术挥发油能抑制金黄色葡萄球菌的生长,并且对多种毒力因子的表达有抑制作用。 展开更多

关键词 茅苍术挥发油 金黄色葡萄球菌 毒力因子 agr二元调控系统

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芦荟苷对金黄色葡萄球菌生长抑制作用及对溶血毒素表达的影响 被引量：6

8

作者 王晔 狄瑜 +1 位作者 朱琳琦 邵世和 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第4期259-262,共4页

目的研究芦荟苷体外对金黄色葡萄球菌生长抑制作用以及对溶血素表达的影响。方法采用肉汤倍比稀释法检测芦荟苷水溶物对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(MIC);琼脂打孔法观察芦荟苷对金黄色葡萄球菌的抑菌圈大小;试管法检测芦荟苷作用下金... 目的研究芦荟苷体外对金黄色葡萄球菌生长抑制作用以及对溶血素表达的影响。方法采用肉汤倍比稀释法检测芦荟苷水溶物对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(MIC);琼脂打孔法观察芦荟苷对金黄色葡萄球菌的抑菌圈大小;试管法检测芦荟苷作用下金黄色葡萄球菌凝固酶的产生变化;检测芦荟苷作用下金黄色葡萄球菌溶血素活性变化;采用实时荧光定量PCR检测芦荟苷水溶物作用于金黄色葡萄球菌后对hla和agr A基因表达的影响。结果芦荟苷水溶物可抑制金黄色葡萄球菌生长并呈现浓度依赖性,作用于ATCC 25923和临床菌株SA1.5后的抑菌圈直径和MIC分别为21.5 mm、12.5 mg/m L和17mm、15 mg/m L;与对照组凝固酶效价32比较,1/2MIC组、MIC和2MIC组芦荟苷作用ATCC 25923后的凝固酶效价分别降为16、4和2;与对照组相比,1/2MIC组、MIC组及2MIC组芦荟苷水溶物降低ATCC 25923溶血活性,溶血率分别为(77.4±3.41)%、(42.2±2.4)%和(38.7±2.4)%;1/2MIC组、MIC组和2MIC组芦荟苷作用ATCC 25923后hla表达量分别为0.020 3(0.019 6,0.028 8)、0.011 6(0.010 6,0.013 1)和0.033 7(0.020 2,0.042 9),3组间差异有统计学意义(H=16.807,P<0.05);agr A表达量分别为0.074 6(0.066 2,0.098 2)、0.020 8(0.012 2,0.032 6)和0.021 3(0.010 2,0.029 6),3组间差异有统计学意义(H=16.320,P<0.05)。结论芦荟苷可抑制金黄色葡萄球菌生长,并对α-溶血素表达有抑制作用。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 芦荟苷 α-溶血素 agr二元调控系统

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二元调控系统PhoP-PhoQ在细菌中的调控作用 被引量：2

9

作者 秦珑 杨瑞馥 《生物技术通讯》 CAS 2006年第3期402-404,共3页

PhoP-PhoQ是一种二元调控系统,它调控着细菌的毒力,参与细菌对Mg2+限制性生长环境的适应,而且还调节几种革兰阴性细菌的许多细胞活性。本文对PhoP-PhoQ感知Mg2+浓度的变化、与靶基因的启动子区结合引起靶基因的上调和下调,尤其是对脂质... PhoP-PhoQ是一种二元调控系统,它调控着细菌的毒力,参与细菌对Mg2+限制性生长环境的适应,而且还调节几种革兰阴性细菌的许多细胞活性。本文对PhoP-PhoQ感知Mg2+浓度的变化、与靶基因的启动子区结合引起靶基因的上调和下调,尤其是对脂质A的结构修饰和细菌毒力的调控作用作一介绍。 展开更多

关键词 PhoP-PhoQ二元调控系统 转录调控 MG^2+ 脂质A 毒力

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利用基因芯片筛选禽致病性大肠杆菌中与phoP/Q二元调控系统相关的耐药基因 被引量：4

10

作者 薛媚 祁克宗 +2 位作者 薛挺 涂健 王惠珂 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期672-674,共3页

为筛选禽致病性大肠杆菌(APEC)中与phoP/Q二元调控系统相关的耐药基因表达谱情况并对耐药相关基因进行分析,本实验采用基因芯片技术对APEC野生株和△phoP/Q基因缺失突变株进行转录组的差异性比较,结果检测到713个差异表达基因,其中403... 为筛选禽致病性大肠杆菌(APEC)中与phoP/Q二元调控系统相关的耐药基因表达谱情况并对耐药相关基因进行分析,本实验采用基因芯片技术对APEC野生株和△phoP/Q基因缺失突变株进行转录组的差异性比较,结果检测到713个差异表达基因,其中403个基因的表达水平上调,310个基因的表达水平下调。这些基因涉及生物过程、细胞组分、蛋白质分类及调控通路等功能,本研究着重从上述差异基因中筛选出了aphA、parE等耐药相关的功能基因。本研究对phoP/Q二元调控系统与APEC耐药调控的相关性进行了探索与分析,为进一步深入探寻APEC耐药性的调控机制提供了新的切入点与研究靶标。 展开更多

关键词 基因芯片 phoP/Q二元调控系统 禽致病性大肠杆菌 耐药基因

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基于RNA-Seq筛选APEC及其PhoP/Q缺失株感染雏鸡肠道免疫相关基因 被引量：3

11

作者 徐柳柳 祁克宗 +3 位作者 涂健 宋祥军 薛媚 王琦 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期159-164,共6页

本研究以禽致病性大肠杆菌(APEC)及其PhoP/Q缺失株感染雏鸡小肠为模型,以分析其免疫相关基因的表达变化为目的,采用转录组测序(RNA-Seq)技术对感染APEC及其PhoP/Q缺失株的雏鸡小肠样本RNA进行测序,分析免疫相关基因的表达变化,结果为野... 本研究以禽致病性大肠杆菌(APEC)及其PhoP/Q缺失株感染雏鸡小肠为模型,以分析其免疫相关基因的表达变化为目的,采用转录组测序(RNA-Seq)技术对感染APEC及其PhoP/Q缺失株的雏鸡小肠样本RNA进行测序,分析免疫相关基因的表达变化,结果为野生株攻毒组与对照组相比、野生株攻毒组与缺失株攻毒组相比、缺失株攻毒组与对照组相比,分别筛选出131、105、172个差异表达基因(fold change≥2, FDR≤0.05),GO功能分类结果显示分别有87、99、159个基因得到注释,这些基因主要富集到氧化还原过程、脂蛋白转运、血管内皮细胞迁移、免疫反应、凋亡过程负调控、肝素结合、铁离子结合、CCR趋化因子受体结合等功能,得出APEC及其PhoP/Q缺失株感染雏鸡后引起机体肠道免疫相关基因变化的结论,根据GO功能注释筛选出PTPRC、LCP1、YFV等免疫相关基因,为深入研究雏鸡肠道免疫提供依据。 展开更多

关键词 禽致病性大肠杆菌 PhoP/PhoQ二元调控系统 雏鸡小肠 转录组测序 免疫相关基因

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牛角地黄汤对金葡菌外毒素分泌的影响及调控作用 被引量：2

12

作者 张亚飞 栗云鹏 +1 位作者 穆祥 孙英健 《北京农学院学报》 2018年第1期64-68,共5页

牛角地黄汤是用于清热解毒、凉血化瘀的基础方剂,由水牛角、地黄、赤芍、丹皮等主要成分组成。【目的】本研究旨在探讨牛角地黄汤对金黄色葡萄球菌外毒素分泌的影响。【方法】将亚抑菌剂量的牛角地黄汤水煎液与金黄色葡萄球菌共同培养,... 牛角地黄汤是用于清热解毒、凉血化瘀的基础方剂,由水牛角、地黄、赤芍、丹皮等主要成分组成。【目的】本研究旨在探讨牛角地黄汤对金黄色葡萄球菌外毒素分泌的影响。【方法】将亚抑菌剂量的牛角地黄汤水煎液与金黄色葡萄球菌共同培养,用Western blotting检测培养液上清中外毒素蛋白的表达,用RT-q-PCR法检测细菌相关基因mRNA表达水平。【结果】牛角地黄汤水煎液在40.0mg/mL以上剂量对金黄色葡萄球菌的增殖有明显抑制作用。亚抑菌剂量的牛角地黄汤水煎液能抑制金葡菌毒素蛋白HLα、SEA、SPA的转录和蛋白分泌。同时抑制金葡菌agr系统和SarA调控系统相关基因的表达。【结论】牛角地黄汤在亚抑菌剂量下能抑制金葡菌毒力因子的转录和蛋白表达。其作用机制可能与牛角地黄汤剂抑制金葡菌agr二元调控系统及SarA蛋白家族中毒素相关的调控子转录表达有关。 展开更多

关键词 牛角地黄汤 金黄色葡萄球菌 agr二元调控系统 SarA蛋白家族

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金黄色葡萄球菌SaeRS二元调控系统促进细菌凝集和生物被膜形成

13

作者 胡刘平 刘倩 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第23期2817-2821,2829,共6页

目的探讨金黄色葡萄球菌SaeRS二元调控系统在人血浆蛋白调控细菌凝集和生物被膜形成中的作用机制。方法收集金黄色葡萄球菌感染常见的临床克隆菌株,Newman(NM)菌株中由于SaeS第一个跨膜区点突变(L18P)导致SaeRS二元调控系统处于持续活... 目的探讨金黄色葡萄球菌SaeRS二元调控系统在人血浆蛋白调控细菌凝集和生物被膜形成中的作用机制。方法收集金黄色葡萄球菌感染常见的临床克隆菌株,Newman(NM)菌株中由于SaeS第一个跨膜区点突变(L18P)导致SaeRS二元调控系统处于持续活化状态,为了探索不同菌株中SaeRS系统的调控功能,本研究分别以USA300和NM菌株为背景,构建SaeRS二元调控系统敲除菌株USA300Δsae和NMΔsae,在含有乏血小板血浆(PPP)和富血小板血浆(PRP)条件下分别检测不同菌株凝集和生物被膜形成的能力。采用反转录-聚合酶链反应检测不同菌株在PPP作用后其SaeRS二元调控系统调控的靶基因表达水平。结果人血浆PPP可促进金黄色葡萄球菌不同临床分离菌株凝集,人血浆PPP和PRP均可促进金黄色葡萄球菌不同临床分离菌株生物被膜形成,但不同菌株之间存在差异,如人血浆蛋白促进NM菌株凝集能力明显强于USA300菌株,提示NM菌株中SaeRS系统的高度活化状态可能参与血浆蛋白促进细菌的凝集过程。进一步研究发现,人血浆蛋白不能促进sae敲除菌株的凝集和生物被膜形成能力;sae敲除菌株中互补表达SaeRS和高度活化状态的SaeRS L18P均可回复人血浆蛋白促进细菌凝集活性;USA300菌株中SaeRS通过调控凝固酶coa表达促进金黄色葡萄球菌凝集和生物被膜形成,而在NM菌株中,高度活化的SaeRS二元调控系统通过调节多个基因(coa、eap、clfb、emp)的表达发挥功能。结论人血浆蛋白可促进金黄色葡萄球菌凝集和生物被膜形成,SaeRS二元调控系统单个氨基酸位点突变改变该系统的调控网络。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 SaeRS二元调控系统 细菌凝集 生物被膜

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禽致病性大肠埃希菌及其PhoP/Q缺失株对鸡小肠内AvBD6的诱导表达

14

作者 李少参 王惠珂 +5 位作者 祁克宗 张煜 薛挺 涂健 周秀红 刘红梅 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第2期44-48,55,共6页

【目的】分析雏鸡感染禽致病性大肠埃希菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)及其PhoP/Q缺失株后β-防御素6(AvBD6)在小肠内的分布和表达规律。【方法】将14日龄雏鸡随机分为对照组、APEC攻毒组和PhoP/Q缺失株攻毒组,其中对照组... 【目的】分析雏鸡感染禽致病性大肠埃希菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)及其PhoP/Q缺失株后β-防御素6(AvBD6)在小肠内的分布和表达规律。【方法】将14日龄雏鸡随机分为对照组、APEC攻毒组和PhoP/Q缺失株攻毒组,其中对照组雏鸡腿肌注射生理盐水0.5mL/只,APEC和PhoP/Q缺失株攻毒组雏鸡腿肌分别接种相同剂量1×106 CFU/mL的菌液,分别于攻毒后0,6,12,24,36和48h采集各组鸡小肠样品,用荧光定量PCR(FQPCR)方法对各组织内AvBD6mRNA的表达量进行检测,同时采用免疫组化(IHC)技术对AvBD6蛋白分布进行观察。【结果】FQ-PCR结果显示,感染后24~48h,APEC攻毒组雏鸡十二指肠、空肠、回肠的AvBD6mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),于48h达到峰值且显著高于0h(P<0.05);在同一时间下,PhoP/Q缺失株攻毒组AvBD6mRNA的表达量显著高于APEC攻毒组(P<0.05)。IHC结果显示,AvBD6主要分布于各小肠段的绒毛上皮细胞和肠腺部分。【结论】APEC能够诱导雏鸡肠道内AvBD6的表达,且PhoP/Q可能参与APEC调控AvBD6的抗感染作用。 展开更多

关键词 禽致病性大肠埃希菌 PhoP/Q二元调控系统 雏鸡小肠 β-防御素6

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2型猪链球菌RevS基因敲除突变株生物学特征及致病性研究

15

作者 孙雯 郑峰 《安徽大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第1期86-93,共8页

比较2型猪链球菌(S.suis 2)ΔRevS突变株和05ZY/H33野生株生物学特性及致病性的差异.首先,通过吸光值测定和革兰染色比较△RevS突变株和05ZY/H33野生株的生长速度和菌体形态.分别对Balb/c及ICR(CD1)小鼠腹腔注射109 CFU·mL^(-1)的0... 比较2型猪链球菌(S.suis 2)ΔRevS突变株和05ZY/H33野生株生物学特性及致病性的差异.首先,通过吸光值测定和革兰染色比较△RevS突变株和05ZY/H33野生株的生长速度和菌体形态.分别对Balb/c及ICR(CD1)小鼠腹腔注射109 CFU·mL^(-1)的05ZY/H33菌液,评估两种品系小鼠对S.suis 2的易感性.分别对Balb/c小鼠腹腔注射2.5×10~9,5.0×10~8,1.0×108,2.0×10~7,4.0×10~6 CFU·mL^(-1)的05ZY/H33菌液,采用Reed法计算半数致死量.对Balb/c小鼠腹腔注射5.0×108 CFU·mL^(-1)的ΔRevS突变株和05ZY/H33野生株菌液,观察野生株和突变株对小鼠的影响.对仔猪耳缘静脉注射10~9 CFU·mL^(-1)的05ZY/H33野生株和ΔRevS突变株菌液,观察野生株和突变株对仔猪的影响.体外生物学特征分析表明,与野生株相比,突变株的生长速率和形态染色并未发现显著变化;Balb/c小鼠对S.suis 2 05ZY/H33的敏感性高于ICR(CD1)小鼠,05ZY/H33对Balb/c小鼠的LD50为4.2×10~7 CFU·mL^(-1).Balb/c小鼠攻毒试验结果显示,ΔRevS对小鼠的致病性明显减弱.仔猪攻毒试验结果显示,野生株和突变株都引发仔猪全部死亡,但ΔRevS引发仔猪死亡时间较晚.△RevS突变株保持了菌株的基本生物学特征,但对小鼠和仔猪两种动物模型的致病作用差异较大. 展开更多

关键词 猪链球菌2型(S.suis 2) 二元调控转导系统 生长曲线 动物模型 半数致死量

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