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抗冷冻蛋白基因遗传转化草菇的研究 被引量：34
1
作者 郭丽琼 林俊芳 +1 位作者 熊盛 陈守才 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期39-43,共5页
采用RT PCR技术从瑞典的北极云杉卷叶蛾幼虫中扩增出抗冷冻蛋白基因 ,利用基因枪法遗传转化草菇。PCR检测和Southern杂交结果证明 ,抗冷冻蛋白基因已整合进草菇基因组。低温胁迫试验结果表明 ,转基因草菇具有较强的耐低温能力。转基因... 采用RT PCR技术从瑞典的北极云杉卷叶蛾幼虫中扩增出抗冷冻蛋白基因 ,利用基因枪法遗传转化草菇。PCR检测和Southern杂交结果证明 ,抗冷冻蛋白基因已整合进草菇基因组。低温胁迫试验结果表明 ,转基因草菇具有较强的耐低温能力。转基因草菇生物学特性观测结果显示 ,大多数草菇转化子的生长速率明显地慢于对照的宿主菌株 ,多数转化子的菌丝也明显地比宿主菌丝细弱。转化子筛选结果表明 ,采用三轮的转化子筛选程序 ,即第一轮在固体培养基上筛选、第二轮和第三轮在液体培养基中筛选 ,有利于获得真实转化子和淘汰假转化子。转基因草菇一代低温胁迫结果证明 ,转基因草菇后代仍然具有较强的低温耐受能力 。 展开更多
关键词 草菇 抗冷冻蛋白基因 转化 基因枪法
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基因枪法向甘蓝型油菜转移反义FAD2基因的研究 被引量：17
2
作者 熊兴华 官春云 +4 位作者 李栒 江巨鳌 邬克彬 王学军 周小云 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期188-191,共4页
为了获得高油酸油菜品种,以湘油15号子叶柄为受体材料,用基因枪法,将反义油酸脱饱和酶FAD2基因连在种子特异表达载体上后导入油菜,使用可裂膜压力7700kPa,样品室真空度9.5×104Pa,质粒质量浓度为1.0μg/μL,靶距9cm,通过对子叶柄的... 为了获得高油酸油菜品种,以湘油15号子叶柄为受体材料,用基因枪法,将反义油酸脱饱和酶FAD2基因连在种子特异表达载体上后导入油菜,使用可裂膜压力7700kPa,样品室真空度9.5×104Pa,质粒质量浓度为1.0μg/μL,靶距9cm,通过对子叶柄的预处理48h,高渗处理1h,获得8株再生植株.经PCR与PCR-Southern杂交检测,其中有2株为转化株,证明反义FAD2基因已整合到湘油15号基因组中. 展开更多
关键词 油酸脱饱和酶基因 转化 油菜 基因枪
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玉米自交系Ⅱ型胚性愈伤组织诱导及遗传转化初报 被引量：23
3
作者 杜娟 余云舟 +2 位作者 张领兵 季静 王罡 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期41-44,共4页
以玉米自交系 340芽尖、4112未成熟幼胚为试验材料 ,诱导出良好的Ⅱ型胚性愈伤组织 ;用这 2种材料的Ⅱ型胚性愈伤组织为受体 ,通过基因枪轰击法将Bar基因转入玉米细胞 ,然后用GUS基因检测 ,结果为阳性。
关键词 玉米 愈伤组织 基因枪 BAR基因 培养配方
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基因枪法转化小麦的金粉用量及转基因植株表型特征分析 被引量：17
4
作者 安海龙 卫志明 黄健秋 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 2001年第1期21-27,T001,共8页
研究了不同金粉用量对小麦幼胚瞬间及稳定转化频率的影响 ,结果表明此实验系统的金粉用量以每枪 5 0 0 μg金粉为佳。对获得的T0 及T1代植株的PCR及Southern分析证实了外源bar基因片段已经稳定整合至小麦基因组中 ;对T1代植株的L PPT涂... 研究了不同金粉用量对小麦幼胚瞬间及稳定转化频率的影响 ,结果表明此实验系统的金粉用量以每枪 5 0 0 μg金粉为佳。对获得的T0 及T1代植株的PCR及Southern分析证实了外源bar基因片段已经稳定整合至小麦基因组中 ;对T1代植株的L PPT涂抹实验表明转化植株对该除草剂的抗性水平较低 ;分析了T0 、T1及T2 代植株的表型特征 ,结果表明T0 代植株生长矮小。 展开更多
关键词 基因枪 小麦 遗传转化 表型特征 金粉 转基因植株
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农杆菌介导法与基因枪轰击法结合在植物遗传转化上的应用 被引量：16
5
作者 耿立召 刘传亮 李付广 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期205-210,共6页
根癌农杆菌介导法 Agrobacterium-mediatedtransformation 和基因枪轰击法 particlebombardmenttransformation 是植物遗传转化的主要方法.两种方法各有优缺点,农杆菌介导法是一种天然的植物遗传转化系统,外源基因在转基因植物中的拷贝... 根癌农杆菌介导法 Agrobacterium-mediatedtransformation 和基因枪轰击法 particlebombardmenttransformation 是植物遗传转化的主要方法.两种方法各有优缺点,农杆菌介导法是一种天然的植物遗传转化系统,外源基因在转基因植物中的拷贝数低,遗传稳定性好;基因枪转化法不受材料基因型的限制.通过结合两种方法的优点,发展了3种农杆菌介导和基因枪轰击法相结合的遗传转化方法,分别为农杆枪法、基因枪轰击/农杆菌感染法、金粉或钨粉包裹菌体细胞作为微弹轰击法.对3种结合转化方法的技术途径、原理、转化受体及研究进展等方面进行了综述. 展开更多
关键词 农杆菌介导法 基因枪轰击法 农杆枪法 遗传转化
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适于基因枪转化的棉花茎尖培养及筛选体系初探 被引量：21
6
作者 于娅 刘传亮 +1 位作者 马峙英 李付广 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期274-278,共5页
将棉花种仁无菌培养40～60h,制备茎尖分生组织,培养在无激素MSB培养基上,直接再生完整植株。植株再生率与品种基因型差异较小,与再生培养基的成分相关。棉花茎尖分生组织制备的优劣与基因枪转化率密切相关。筛选培养过程中,卡那霉素的... 将棉花种仁无菌培养40～60h,制备茎尖分生组织,培养在无激素MSB培养基上,直接再生完整植株。植株再生率与品种基因型差异较小,与再生培养基的成分相关。棉花茎尖分生组织制备的优劣与基因枪转化率密切相关。筛选培养过程中,卡那霉素的起始时间和浓度梯度等因素对转化率有直接影响。还描述了非转化植株的表现,探讨了抗生素最高筛选压的确定等问题。 展开更多
关键词 基因枪 遗传转化 棉花 茎尖培养 筛选体系 茎尖分生组织 植株再生率 品种基因型
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大豆规模化转基因技术体系的构建及其应用 被引量：28
7
作者 侯文胜 林抗雪 +4 位作者 陈普 贾志伟 周扬 于洋 刘雁华 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期4198-4210,共13页
大豆是最早进行转基因品种大面积商业化种植的作物,也是目前转基因品种种植面积最大的作物,在食品、营养、工业和医药领域发挥着重要作用。1996—2012年的17年间,全球共累计种植转基因大豆76 310万公顷,给种植户带来了约370亿美元的收益... 大豆是最早进行转基因品种大面积商业化种植的作物,也是目前转基因品种种植面积最大的作物,在食品、营养、工业和医药领域发挥着重要作用。1996—2012年的17年间,全球共累计种植转基因大豆76 310万公顷,给种植户带来了约370亿美元的收益。2013年,共有11个国家种植了8 450万公顷转基因大豆,约占全球转基因作物种植面积的48%,大豆种植面积的79%。尽管抗除草剂转基因大豆已在全球市场占据了主导地位,但长期以来大豆的转基因技术体系一直未能实现重大突破,高效、稳定的转基因技术体系仍是开展转基因品种选育和基因功能研究的瓶颈因素。根癌农杆菌介导的子叶节转化系统和基因枪介导的体细胞胚转化系统是目前最为常用的大豆转基因技术体系。自1988年采用这两种方法几乎同时获得了首批可育转基因大豆植株以来,大量的研究工作者对其开展了改良和优化研究,实现了转化效率的提升和再生方式向胚性悬浮细胞等的拓展,在大豆农艺性状改良和基因功能研究中发挥了作用。文章综述了大豆转基因技术的主要研究进展和问题,比较了大豆不定芽器官发生再生途径、体细胞胚再生途径和原生质体再生途径的特点;归纳了根癌农杆菌和基因枪介导的大豆转基因体系构建研究的典型案例,总结了其在大豆基因型选用、外植体选材、再生方式、筛选策略等技术参数和转化效率。分析认为:尽管通过多年努力,目前,可用于大豆转化的基因型、外植体类型等均有了很大拓展,转化效率也得到了显著提高,在多个报道中获得了超过10%的转化效率,甚至出现了转化效率高达30%以上的研究报道。但这些转化效率数据多数是在样本量较小的试验中获得的,而且在同一研究报道中,不同转化操作重复间的转化效率差异往往很大;在单因素对比试验中获得的高转化效率,往往在 展开更多
关键词 大豆 转基因体系 转化效率 根癌农杆菌 基因枪
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提高水稻基因枪转化效率的研究 被引量：21
8
作者 郑宏红 何锶洁 +2 位作者 戴顺洪 李良材 田文忠 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期116-120,共5页
在转化前将受体材料转移到高渗培养基上，即用含有一定浓度的甘露醇和山梨醇的培养基对受体材料进行处理。基因枪轰击后把受体材料转出，结果表明，这样做明显提高了瞬时表达（ＧＵＳ基因的表达）效果，用可筛选的标记基因（潮霉素磷酸... 在转化前将受体材料转移到高渗培养基上，即用含有一定浓度的甘露醇和山梨醇的培养基对受体材料进行处理。基因枪轰击后把受体材料转出，结果表明，这样做明显提高了瞬时表达（ＧＵＳ基因的表达）效果，用可筛选的标记基因（潮霉素磷酸转移酶基因，ＨＰＴ）试验表明，经高渗处理后，稳定转化的效率也有提高。用基因枪将带有ＨＴＰ基因的粒子轰击其盾片，经过筛选及植株再生，获得了转基因植株。 展开更多
关键词 水稻 基因枪转化 瞬时表达频率 成熟胚
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基因枪法转化香蕉薄片外植体的参数优化 被引量：13
9
作者 王鸿鹤 黄霞 +3 位作者 邱国华 黄学林 谭兆平 黄伟如 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期87-91,共5页
采用果用香蕉（Ｍｕｓａ ｓｐｐ．）的薄片外植体作为转化受体；通过对ＧＵＳ基因瞬间表 达的研究，找出了较适合的轰击条件和外植体培养条件．研究表明，高渗处理对转化的影响 较大，轰击前后对外植体进行高渗处理的瞬间表达率（１４... 采用果用香蕉（Ｍｕｓａ ｓｐｐ．）的薄片外植体作为转化受体；通过对ＧＵＳ基因瞬间表 达的研究，找出了较适合的轰击条件和外植体培养条件．研究表明，高渗处理对转化的影响 较大，轰击前后对外植体进行高渗处理的瞬间表达率（１４．１１％）是对照（３．６８％）的３．８６ 倍。预培养外植体转化的瞬间表达率（１７．５％～４２．１１％）普遍高于没有预培养的外植体 （１２．２０％），并以预培养６ｄ为好．最适压力和射程分别为７．５８４ ＭＰａ，９ｃｍ．ＤＮＡ沉淀剂的组成以ＣａＣｌ_２和亚精胺同时存在较佳、对不同ｐＨ（５．０，１０．０）下的Ｃａ ＮＯ_３）_２或ＣａＣｌ_２对瞬间表 达率的影响进行研究发现正常ｐＨ（５．０）的ＣａＣｌ_２优于其他组合．利用最佳条件组合，瞬间表达率可达４８．７２％，初步建立了果用香蕉薄片培养的转化体系。 展开更多
关键词 基因枪法 香蕉 薄片外植体
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籼稻基因枪转化的研究 被引量：12
10
作者 郑宏红 戴顺洪 +2 位作者 何锶洁 田文忠 李良材 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1996年第4期286-292,共7页
对国内外１７个籼稻品种进行了基因枪转化，研究了有利于籼稻愈伤组织诱导和生长的培养条件和筛选程序，１５个品种获得了潮霉素抗性愈伤组织，５个品种再生了植株，包括当前国际上推广的ＩＲ系统及国内的优良品种和恢复系，分子生物学... 对国内外１７个籼稻品种进行了基因枪转化，研究了有利于籼稻愈伤组织诱导和生长的培养条件和筛选程序，１５个品种获得了潮霉素抗性愈伤组织，５个品种再生了植株，包括当前国际上推广的ＩＲ系统及国内的优良品种和恢复系，分子生物学证据证明潮霉素基因已经整合入籼稻的基因组。最高植株转化频率接近一般粳稻水平，多数低于粳稻水平。这为建立籼稻的转化系统打下了基础。 展开更多
关键词 水稻 籼稻 基因枪转化
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棉花茎尖分生组织在微粒轰击法基因转化中的应用 被引量：15
11
作者 朱卫民 吴敬音 +3 位作者 佘建明 蔡小宁 朱祯 李向辉 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1998年第2期74-78,共5页
利用棉花茎尖分生组织易于再生成完整植株的特点，结合使用基因枪轰击法将ＣＰＴＩ基因导入棉花茎尖分生组织。经过再生、筛选等培养过程已获得若干卡那霉素抗性株。棉花品种、棉株茎尖的发育天数及茎尖附带的下胚轴长度等对转化效果都... 利用棉花茎尖分生组织易于再生成完整植株的特点，结合使用基因枪轰击法将ＣＰＴＩ基因导入棉花茎尖分生组织。经过再生、筛选等培养过程已获得若干卡那霉素抗性株。棉花品种、棉株茎尖的发育天数及茎尖附带的下胚轴长度等对转化效果都有不同程度的影响。筛选的起始时间、培养基的转换时间及卡那霉素的浓度梯度等因素对筛选效果有明显影响。 展开更多
关键词 棉花 茎法分生组织 基因转化 微粒轰击
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小麦类甜蛋白基因的转化及转基因植株的抗病性分析 被引量：18
12
作者 邢莉萍 王华忠 +4 位作者 蒋正宁 倪金龙 曹爱忠 于玲 陈佩度 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期349-354,共6页
目前已克隆出许多类甜蛋白基因并成功转化马铃薯、水稻和小麦等植物,均可引起植株抗病性的提高。在以往的研究中我们从小麦中克隆了一个类甜蛋白基因(Ta-Tlp),该基因在高抗白粉病的小麦6VS/6AL易位系中能够高水平表达,推测它与白粉病抗... 目前已克隆出许多类甜蛋白基因并成功转化马铃薯、水稻和小麦等植物,均可引起植株抗病性的提高。在以往的研究中我们从小麦中克隆了一个类甜蛋白基因(Ta-Tlp),该基因在高抗白粉病的小麦6VS/6AL易位系中能够高水平表达,推测它与白粉病抗性密切相关。为进一步研究该基因的功能,本研究构建了包含在ubi强启动子控制下的Ta-Tlp基因的表达载体pAHC-TlP,用基因枪将其导入小麦品种扬麦158的幼胚愈伤组织,在含除草剂的选择培养基上经两轮筛选和分化,获得再生抗性植株。对T0、T1和T2代植株进行PCR、Southern杂交与RT-PCR分析,结果表明Ta-Tlp基因已整合进受体基因组并且能够表达。对T0代及其衍生的T1代(来自6个T0代阳性株系的183个单株)和T2代(来自6个T0代阳性株系的241个单株)转化植株进行白粉病抗性鉴定,Ta-Tlp基因超量表达的转基因植株,能延缓白粉病发病进程,其白粉病抗性有一定提高。对T2代阳性转化植株进行赤霉病抗性鉴定表明,其抗性与受体对照相比无显著差异。 展开更多
关键词 小麦类甜蛋白基因 基因枪 遗传转化 白粉病 抗性鉴定
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小麦基因枪法转化技术的改进 被引量：11
13
作者 周淼平 沈晓蓉 +3 位作者 章静娟 黄益洪 任丽娟 陆维忠 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1999年第1期62-64,共3页
对小麦进行基因工程改良一直倍受关注。由于小麦上尚缺乏类似农杆菌的优良转化系统，其转基因的方法还是以ＤＮＡ直接导入为主，基因枪［１］、花粉管通道［２］、ＰＥＧ介导［３］等方法都成功地获得了转基因植株。而目前比较成熟、应... 对小麦进行基因工程改良一直倍受关注。由于小麦上尚缺乏类似农杆菌的优良转化系统，其转基因的方法还是以ＤＮＡ直接导入为主，基因枪［１］、花粉管通道［２］、ＰＥＧ介导［３］等方法都成功地获得了转基因植株。而目前比较成熟、应用比较广泛的还是基因枪法，Ｂｌｅｃ... 展开更多
关键词 小麦 基因枪 幼胚 盾片
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一种强启动子的分离与功能 被引量：10
14
作者 谢迎秋 朱祯 +3 位作者 吴茜 徐鸿林 孟蒙 刘玉乐 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第1期50-54,共5页
以棉花曲叶病毒 (CLCuV)侵染的番茄叶片组织总DNA为模板 ,通过PCR反应扩增CLCuV双向启动子片段并插入克隆载体。序列分析和同源性比较表明 ,克隆的启动子长 436bp ,与目前发现的 4类CLCuV分离物的启动子序列的同源性最高为 99.32 %。将... 以棉花曲叶病毒 (CLCuV)侵染的番茄叶片组织总DNA为模板 ,通过PCR反应扩增CLCuV双向启动子片段并插入克隆载体。序列分析和同源性比较表明 ,克隆的启动子长 436bp ,与目前发现的 4类CLCuV分离物的启动子序列的同源性最高为 99.32 %。将启动子片段分别以不同方向与gus报告基因和nos终止子融合 ,构建了瞬时表达载体。通过基因枪法将质粒载体导入烟草 (NicotianatabacumL .)和棉花 (GossypiumhirsutumL .)叶片细胞中进行瞬时表达 ,结果表明 ,互补链基因方向启动子属强启动子 ,在叶肉及维管组织中均有较高的活性 ;病毒链基因方向启动子表达活性较低。初步证实分离的互补链基因启动子可作为新型强启动子应用于双子叶植物尤其是棉花的遗传转化。 展开更多
关键词 双牛病毒 启动子 棉花 烟草 基因枪 CLCuV
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拟南芥ats1A基因启动子的克隆和功能分析 被引量：10
15
作者 王利军 范三红 郭蔼光 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第10期1856-1860,共5页
通过PCR扩增,从拟南芥中克隆出ats1A基因启动子(包括叶绿体转运肽),将此启动子与GUS基因相连构建植物瞬时表达载体,用基因枪法将之导入烟草进行瞬时表达。GUS基因检测分析表明,ats1A基因启动子能特异的启动GUS基因在烟草叶片中高效表达。
关键词 拟南芥 atslA基因启动子 叶绿体转运肽 烟草 微弹轰击
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影响谷子愈伤组织基因枪转化的因素 被引量：14
16
作者 刁现民 陈振玲 +3 位作者 段胜军 刘玉乐 赵连元 孙敬三 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1999年第3期31-36,共6页
通过 Ｇｕｓ 基因 在谷子 胚性愈伤 组织中 的瞬时表 达检测， 分析 了影 响谷 子愈 伤组 织基 因枪转化效 率的几个 因素。钨 粉的包 被质粒 Ｄ Ｎ Ａ 用量以 ３ μｇ／ ｍ ｇ 钨粉 ， Ｃａ Ｃｌ２ 浓度１５ ｍ ｏｌ／ Ｌ，亚 ... 通过 Ｇｕｓ 基因 在谷子 胚性愈伤 组织中 的瞬时表 达检测， 分析 了影 响谷 子愈 伤组 织基 因枪转化效 率的几个 因素。钨 粉的包 被质粒 Ｄ Ｎ Ａ 用量以 ３ μｇ／ ｍ ｇ 钨粉 ， Ｃａ Ｃｌ２ 浓度１５ ｍ ｏｌ／ Ｌ，亚 精胺浓度４０ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ 为最 佳，过高 的 Ｄ Ｎ Ａ 、 Ｃａ Ｃｌ２ 和亚精 胺加入量 均显著降 低转 化率 ； Ｊ Ｑ７００ 基因 枪样品室高度 ７ ｃ ｍ ，轰 击速 度 ４００ ～４５０ ｍ ／ｓ 转 化， 较其 它 速度 和样 品 室高 度下 转 化 Ｇｕｓ 基因 表 达率高；每 次转化的 愈伤组织 用量对 转化效率 也有影 响， 以１ ～２ ｇ Ｇｕｓ 基 因表 达斑 最多； 玉米 ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ启动子 较 Ｃａ Ｍ Ｖ３５ Ｓ 启动子 的瞬时表 达显著增 强。 展开更多
关键词 谷子 基因枪 转化 瞬时表达 愈伤组织
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基因枪及其与农杆菌相结合的茶树外源基因转化条件优化 被引量：17
17
作者 吴姗 梁月荣 +1 位作者 陆建良 黎昊雁 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期255-264,共10页
以GUS为报告基因,对基因枪介导的转化茶树愈伤的有关参数进行优化。比较了不同的预培养条件,含有PVP的培养基可提高转化频率。渗透处理不仅不能提高GUS的表达率,反而使愈伤再生困难。每枪DNA和钨粉的用量分别为0.25μg,125μg时,可得到... 以GUS为报告基因,对基因枪介导的转化茶树愈伤的有关参数进行优化。比较了不同的预培养条件,含有PVP的培养基可提高转化频率。渗透处理不仅不能提高GUS的表达率,反而使愈伤再生困难。每枪DNA和钨粉的用量分别为0.25μg,125μg时,可得到较高的转化率。在轰击压力7MPa,射程5cm的条件下轰击一次,不论对GUS表达还是愈伤的再生都是较为适合的轰击条件。比较了农杆菌法(AGR),基因枪法(BOM)及农杆菌与基因枪结合(BTA,BPA和BOA)等方法对茶树遗传转化效率的影响。瞬间表达的结果及抗性愈伤筛选的结果都显示,农杆菌与基因枪结合使用比两种方法单独使用更有助于提高茶树转化的效率。 展开更多
关键词 茶树 遗传转化 基因枪 农杆菌
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铁皮石斛外源lea3基因的转化及耐盐性分析 被引量：18
18
作者 杨雪飞 王瑛 罗建平 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期622-626,共5页
利用基因枪法将来源于大麦(Hordeum vulgare L.)的抗旱耐盐基因lea3导入铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)的类原球茎(PLBs)中,经膦丝菌素类除草剂PPT筛选2次获得抗性PLBs,于无选择压下分化获得不定芽,再经PPT筛选和生根壮... 利用基因枪法将来源于大麦(Hordeum vulgare L.)的抗旱耐盐基因lea3导入铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)的类原球茎(PLBs)中,经膦丝菌素类除草剂PPT筛选2次获得抗性PLBs,于无选择压下分化获得不定芽,再经PPT筛选和生根壮苗培养获得转化植株.对转化植株进行除草剂PPT叶片涂抹检测和lea3基因的PCR检测,表明lea3基因已整合到6个株系7株铁皮石斛转化植株基因组中,转化频率为1.05%.与对照相比,获得的转基因植株的耐盐胁迫能力明显增强,表明遗传转化lea3基因可用于石斛抗旱耐盐新品种的选育. 展开更多
关键词 铁皮石斛 类原球茎(PLBs) lea3基因 基因枪 转化 耐盐性
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茶树农杆菌转化系统和基因枪转化系统的优化 被引量：16
19
作者 吴姗 梁月荣 +2 位作者 陆建良 金惠淑 吴颖 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期6-10,共5页
在用农杆菌浸染前,将茶树外植体预培养在含有PVP(polyvinylpyrrolidone,16g/L)的预培养基上2-3d可提高转化频率.优化后的茶树基因枪转化体系,即制弹程序:60 mg/1ml钨粉悬浮液10 μl中加入1.6 μl质粒DNA(1 μg/μl),再分别加入0.1 mol/... 在用农杆菌浸染前,将茶树外植体预培养在含有PVP(polyvinylpyrrolidone,16g/L)的预培养基上2-3d可提高转化频率.优化后的茶树基因枪转化体系,即制弹程序:60 mg/1ml钨粉悬浮液10 μl中加入1.6 μl质粒DNA(1 μg/μl),再分别加入0.1 mol/L的亚精胺4 μl,2.5 mol/L 的CaCl2 15 μl,最后定容至48 μl;每次轰击上样量为8-10 μl.基因枪转化后抗性筛选2个月,抗性愈伤组织存活率为5.0%～12.1%. 展开更多
关键词 茶树 农杆菌转化系统 基因枪转化系统 优化 预培养处理
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影响基因枪转化小麦的几个因素 被引量：11
20
作者 赵虹 李名扬 +2 位作者 裴炎 郭余龙 董玉梅 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期570-574,共5页
对影响基因枪转化小麦的主要参数进行优化 ,结果表明 ,包裹子弹的沉淀剂用PEG40 0 0和Ca(NO3 ) 2 分别代替亚精胺和CaCl2 ,可显著地提高GUS基因的瞬时表达 .幼穗的最佳预培养时间为 1d ,轰击距离为 9cm ,而幼胚分别为 14d和 12cm .对预... 对影响基因枪转化小麦的主要参数进行优化 ,结果表明 ,包裹子弹的沉淀剂用PEG40 0 0和Ca(NO3 ) 2 分别代替亚精胺和CaCl2 ,可显著地提高GUS基因的瞬时表达 .幼穗的最佳预培养时间为 1d ,轰击距离为 9cm ,而幼胚分别为 14d和 12cm .对预培养 14d的幼胚 ,采用 0 2 5 μgDNA和 12 5 展开更多
关键词 基因枪 小麦 GUS瞬时表达 GUS基因 再生能力 转化频率 遗传转化法
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