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猪皮Ⅰ型胶原蛋白的提取及其结构表征 被引量：46
1
作者 刘苏锐 王坤余 琚海燕 《中国皮革》 CAS 北大核心 2007年第7期43-46,49,共5页
采用酸膨胀-胃蛋白酶降解的新方法,从猪皮中提取Ⅰ型胶原蛋白。用原子力显微镜(AFM)观察了所提取的Ⅰ型胶原蛋白的形貌结构,用SDS-PAGE方法测得所提取的Ⅰ型胶原的相对分子质量为295kDa。结合紫外、红外检测和DSC分析,与市售SigmaⅠ型... 采用酸膨胀-胃蛋白酶降解的新方法,从猪皮中提取Ⅰ型胶原蛋白。用原子力显微镜(AFM)观察了所提取的Ⅰ型胶原蛋白的形貌结构,用SDS-PAGE方法测得所提取的Ⅰ型胶原的相对分子质量为295kDa。结合紫外、红外检测和DSC分析,与市售SigmaⅠ型胶原对比,证实了提取物为Ⅰ型胶原蛋白,且很好的保持了Ⅰ型胶原的3股螺旋结构。 展开更多
关键词 ⅰ型胶原 酸膨胀-酶降解 胃蛋白酶 原子力显微镜 猪皮
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淫羊藿甙对成骨细胞Smad4 mRNA作用的实验研究 被引量：37
2
作者 雪原 王沛 +3 位作者 齐清会 倪虹 马信龙 郭世绂 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期119-123,共5页
目的检测淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中Smad4mRNA的影响。方法用0、10、20、40ng/ml的淫羊藿甙刺激MC3T3-E1细胞。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况。通过四甲基噻唑蓝(MTT)法测绘细胞生长曲线和计算细胞群体倍增时间;描述刺... 目的检测淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中Smad4mRNA的影响。方法用0、10、20、40ng/ml的淫羊藿甙刺激MC3T3-E1细胞。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况。通过四甲基噻唑蓝(MTT)法测绘细胞生长曲线和计算细胞群体倍增时间;描述刺激MC3T3-E1细胞的增殖能力。用速率分光光度法测定ALP的含量,免疫组织化学法观察Ⅰ型胶原的产生,用以判断细胞的分化情况。用RT-PCR测定Smad4mRNA的数量。结果10、20ng/ml浓度淫羊藿甙可使MC3T3-E1细胞的生长曲线明显上移(P<0.01);0、10、20和40ng/ml组群体倍增时间分别为(39.37±2.35)h、(26.76±1.78)h、(29.30±2.12)h和(36.35±2.34)h,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01);0、10ng/ml可使MC3T3-E1细胞产生ALP和Ⅰ型胶原量增加,刺激ALP作用呈现时间和剂量的依赖性(P<0.01);RT-PCR显示10、20ng/ml浓度淫羊藿甙可以刺激MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的数量增加。上述作用以10ng/ml浓度最强(P<0.01)。结论淫羊藿甙刺激成骨细胞MC3T3-E1增殖与分化,可能是通过提高MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的量而产生作用。 展开更多
关键词 淫羊藿甙 SMAD4 MC3T3-E1 成骨细胞 RNA 刺激 ⅰ型胶原 浓度 显微镜观察 组群
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白藜芦醇通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路抑制肺纤维化 被引量：43
3
作者 刘理静 于小华 张平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期425-431,共7页
目的观察白藜芦醇(Res)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路起作用。方法 90只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40)... 目的观察白藜芦醇(Res)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路起作用。方法 90只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40)和Res组(n=40),后两组经气管内注入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,d 2起Res组大鼠予100 mg.kg-1Res灌胃,其余两组相同条件下给予生理盐水,模型组和Res组分别于d 7、d 14、d 28、d 56随机处死10只大鼠,而对照组于d 56全部处死作为总体对照,取出肺组织行HE染色和Masson染色,用荧光实时定量PCR和Western blot分别检测肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA及蛋白表达,分离血清,并采用酶联免疫吸附法检测血清I型前胶原羧基端前肽(PICP)和Ⅲ型前胶原氨基端前肽(PⅢNP)浓度。结果 Res组大鼠肺泡炎症和肺纤维化程度明显轻于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组肺组织ADAMTS-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmR-NA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度增加(P<0.05或0.01);相比于模型组同期,Res组各时间点ADAMTS-1mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmRNA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度则降低(P<0.05或0.01)。结论 Res通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路降解肺组织ColⅠ、ColⅢ发挥抗肺纤维化的作用。 展开更多
关键词 肺纤维化 白藜芦醇 转化生长因子-Β1 ADAMTS-1 ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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外源性Ⅰ型胶原对人胚骨膜成骨细胞生物学特性的影响 被引量：22
4
作者 杨志明 余希杰 +1 位作者 黄富国 解慧琪 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-4,共4页
目的　研究 型胶原对人胚骨膜来源成骨细胞生物学特性的影响 ,为 型胶原在组织工程人工骨中的应用提供依据。方法　在不同浓度 型胶原涂层上培养成骨细胞 ,用细胞计数法研究成骨细胞粘附情况 ,3 H- Td R掺入实验观察成骨细胞增殖能... 目的　研究 型胶原对人胚骨膜来源成骨细胞生物学特性的影响 ,为 型胶原在组织工程人工骨中的应用提供依据。方法　在不同浓度 型胶原涂层上培养成骨细胞 ,用细胞计数法研究成骨细胞粘附情况 ,3 H- Td R掺入实验观察成骨细胞增殖能力 ,通过检测成骨细胞胶原、骨钙素和碱性磷酸酶的合成情况 ,以不涂层 型胶原为对照组 ,比较骨膜来源成骨细胞成骨能力的改变。结果　 型胶原对成骨细胞发挥以下作用 :1增加粘附细胞数量 ,且在 2 5 μg/ m l浓度达最大效应 ;2减弱成骨细胞增殖能力 ,且以 12 .5 μg/ ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ;3轻度减弱成骨细胞 型胶原合成能力 ,以 2 5 μg/ ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ;4增加骨钙素合成 ,以6 .2 5 μg/ m l以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ,2 5 μg/ m l浓度达最大效应 ;5增加成骨细胞碱性磷酸酶活性 ,以 12 .5 μg/ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 )。结论　 型胶原能促进成骨细胞的粘附与分化 ;支架材料上复合 型胶原涂层可增强成骨细胞的成骨能力 ; 型胶原最佳复合浓度为 2 5 μg/ 展开更多
关键词 成骨细胞 细胞外基质 ⅰ型胶原 组织工程 生物学特性 人工骨
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生、熟地黄缓解肾间质纤维化的作用及其机制研究 被引量：42
5
作者 刘道刚 曾敏 +1 位作者 高洪燕 王琴 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2507-2510,共4页
目的:探讨生地黄和熟地黄对单侧输尿管梗阻模型(UUO)大鼠肾间质纤维化的作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为生地黄水煎液组、熟地黄水煎液组、模型对照组、假手术组,每组5只。生地黄水煎液组、熟地黄水煎液组分别按生地黄、熟地黄剂... 目的:探讨生地黄和熟地黄对单侧输尿管梗阻模型(UUO)大鼠肾间质纤维化的作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为生地黄水煎液组、熟地黄水煎液组、模型对照组、假手术组,每组5只。生地黄水煎液组、熟地黄水煎液组分别按生地黄、熟地黄剂量1.6 g/(kg·d)灌胃给药14 d,测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)。HE染色、Masson染色观察肾脏组织病理学变化,免疫印迹检测TGF-β1、α-SMA和Collagen-Ⅰ的表达。结果:与模型组比较,各给药组大鼠Scr、BUN值显著降低(P<0.05);肾小球玻璃样病变减轻,肾小管囊性扩张和空泡变性程度缓解,胶原沉积减少,肾间质纤维化程度明显改善;TGF-β1、α-SMA和Collagen-Ⅰ表达显著降低(P<0.05)。与熟地黄水煎液组比较,生地黄水煎液组的Scr、BUN值较低,胶原沉积较少,肾间质纤维化改善较明显,α-SMA表达显著减少(P<0.05)。结论:生地黄和熟地黄均能缓解肾间质纤维化,以生地黄作用较强,其作用机制可能与下调TGF-β1、α-SMA和Collagen-Ⅰ的表达有关。 展开更多
关键词 生地黄 熟地黄 肾间质纤维化 转化生长因子-Β1 肌动蛋白α ⅰ型胶原
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补骨脂素与异补骨脂素对乳鼠颅骨成骨细胞分化成熟影响的比较研究 被引量：34
6
作者 翟远坤 潘亚磊 +2 位作者 牛银波 武祥龙 梅其炳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期355-361,共7页
目的比较研究中药补骨脂中两种重要组分——补骨脂素与异补骨脂素对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞(rat cal-varial osteoblasts,ROB)分化成熟的影响。方法取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3天换液1次,铺满80%皿底后传代培养。以1... 目的比较研究中药补骨脂中两种重要组分——补骨脂素与异补骨脂素对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞(rat cal-varial osteoblasts,ROB)分化成熟的影响。方法取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3天换液1次,铺满80%皿底后传代培养。以1×10-5mol.L-1的补骨脂素和异补骨脂素对ROB的分化成熟进行药物干预,比较补骨脂素组、异补骨脂素组和不加药的对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性、碱性磷酸酶阳性克隆数(CFU-FALP)、骨钙素分泌量、钙盐沉积量以及钙化结节数量的差异,Real Time RT-PCR检测IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的基因表达情况。West-ern blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果补骨脂素和异补骨脂素均可促进ROB的分化成熟,具体表现在明显提高ROB的ALP活性,促进钙盐的沉积以及骨钙素的分泌,增加CFU-FALP和钙化结节数量,提高IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的mRNA水平,增强Ⅰ型胶原的蛋白表达,但异补骨脂素的活性明显高于补骨脂素。结论异补骨脂素促进ROB分化成熟的活性明显高于补骨脂素,提示异补骨脂素是中药补骨脂发挥抗骨质疏松活性的主要有效成分,具有开发为抗骨质疏松新药的潜力。 展开更多
关键词 补骨脂素 异补骨脂素 成骨细胞 分化 成熟 ⅰ型胶原
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日本血吸虫感染兔Ⅰ型和Ⅲ型胶原动态变化及干扰素-γ对其的作用 被引量：26
7
作者 翁红雷 蔡卫民 杨艳红 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期26-29,共4页
目的　观察感染日本血吸虫的新西兰兔肝脏Ⅰ型和Ⅲ型胶原的动态变化以及γ 干扰素 (IFN γ)对Ⅰ型和Ⅲ型胶原的降解作用。方法　日本血吸虫感染兔在感染后不同时期取 8只病兔肝脏 ,作常规石蜡切片 ,分别进行免疫组织化学α SMA染色、伊... 目的　观察感染日本血吸虫的新西兰兔肝脏Ⅰ型和Ⅲ型胶原的动态变化以及γ 干扰素 (IFN γ)对Ⅰ型和Ⅲ型胶原的降解作用。方法　日本血吸虫感染兔在感染后不同时期取 8只病兔肝脏 ,作常规石蜡切片 ,分别进行免疫组织化学α SMA染色、伊红染色和天狼红染色 ,并在偏光显微镜下观察Ⅰ型和Ⅲ型胶原分布情况 ,计算机图像分析计算胶原含量。感染 16wk后 ,给予吡喹酮治疗 ,IFN γ治疗 8wk ,停药观察 4wk。观察IFN γ对Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积的降解作用。结果　感染日本血吸虫的病兔Ⅰ型胶原在第 8周时占总面积百分比的 5 73± 3 40 ,至第2 8周时达总面积百分比的 40 14± 17 0 0 ,约增加了 7倍 ;Ⅲ型胶原则由第 8周时总面积百分比的 1 15± 1 34增加到6 80± 5 19。α SMA阳性细胞表达数则由 2 8± 1 0增加至 7 3± 1 5。自血吸虫感染 16wk开始采用IFN γ治疗 ,8wk后 ,IFN γ治疗组的Ⅰ型和Ⅲ型胶原所占面积百分比分别由原来的 18 5 1± 7 5 2和 4 63± 3 64下降为 2 4wk时的3 0 9± 1 5 4和 0 40± 0 37(P <0 0 1) ,模型对照组和吡喹酮治疗组比较差异具有显著性 (P <0 0 1)。停药 4wk后IFN γ治疗组的Ⅰ型和Ⅲ型胶原所占面积百分比均有所回升 (P <0 0 5 )。结论　IFN γ对日本血吸虫感染的新西兰兔肝纤? 展开更多
关键词 日本血吸虫 肝纤维化 Γ-干扰素 ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 日本血吸虫感染
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酒精对骨髓基质细胞成脂与成骨分化的影响 被引量：26
8
作者 李杰 李月白 +3 位作者 王义生 殷力 许建中 熊腾滨 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期493-495,共3页
目的观察酒精对小鼠骨髓基质细胞中脂肪细胞特异性基因422(aP2)和Ⅰ型胶原基因表达的影响。方法采用原代骨髓基质细胞体外培养技术,取小鼠双侧股骨骨髓细胞,通过细胞贴壁、分离,获取骨髓基质细胞。以0.09mol/L的酒精浓度作为诱导剂处理... 目的观察酒精对小鼠骨髓基质细胞中脂肪细胞特异性基因422(aP2)和Ⅰ型胶原基因表达的影响。方法采用原代骨髓基质细胞体外培养技术,取小鼠双侧股骨骨髓细胞,通过细胞贴壁、分离,获取骨髓基质细胞。以0.09mol/L的酒精浓度作为诱导剂处理细胞。采用完整细胞斑点印迹分子杂交方法检测实验组和对照组细胞中422(aP2)mRNA和Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果对实验组和对照组的422(aP2)mRNA的完整细胞斑点印迹扫描值进行比较,实验组中422(aP2)基因杂交信号明显增强,斑点印迹扫描值为7207.8±331.3,对照组斑点印迹扫描值为652.2±62.6,实验组为对照组的11倍,两组比较差异有非常显著性意义(P<0.001)。对实验组和对照组Ⅰ型胶原mRNA的完整细胞斑点印迹扫描值进行比较,实验组基因杂交信号较对照组明显减弱,斑点印迹扫描值为3 567.3±300.9,对照组斑点印迹扫描值为7487.0±488.4,为实验组的2倍,两组比较差异有非常显著性意义(P<0.001)。结论酒精能诱导骨髓基质细胞向脂肪细胞分化,而减少骨髓基质细胞向成骨细胞分化。这可能与酒精性骨坏死的发生机制有关。 展开更多
关键词 斑点印迹 对照组 骨髓基质细胞 ⅰ型胶原 实验 酒精 成骨分化 RNA 分子杂交 杂交信号
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丹酚酸A对实验性大鼠肝纤维化Ⅰ型胶原及其基因表达的影响 被引量：19
9
作者 胡义扬 王润平 +3 位作者 赵长青 顾宏图 刘成 刘平 《中国中医药科技》 CAS 1999年第4期235-236,共2页
目的:研究丹酚酸A(SA-A)抗肝损伤、肝纤维化作用及其对Ⅰ型胶原基因表达的影响。方法:采用CCl_4诱导大鼠肝损伤及肝纤维化,期间予SA-A灌胃治疗,另设秋水仙碱组、丹参组作对照,6w后进行肝组织病理学和Ⅰ型胶原免疫组化观察,肝组织羟脯氨... 目的:研究丹酚酸A(SA-A)抗肝损伤、肝纤维化作用及其对Ⅰ型胶原基因表达的影响。方法:采用CCl_4诱导大鼠肝损伤及肝纤维化,期间予SA-A灌胃治疗,另设秋水仙碱组、丹参组作对照,6w后进行肝组织病理学和Ⅰ型胶原免疫组化观察,肝组织羟脯氨酸(Hyp)、血清ALT、AST和白蛋白含量测定,并以RT-PCR法检测肝组织Ⅰ型胶原mRNA。结果:SA-A可降低血清ALT、AST水平及肝组织Hyp含量,减轻肝纤维化程度与秋水仙碱、丹参一致。此外,SA-A组肝组织Ⅰ型胶原mRNA表达明显轻于模型组。结论:丹酚酸A有显著的抗肝损伤、肝纤维化作用,对损伤肝组织Ⅰ型胶原mRNA表达有明显抑制作用。 展开更多
关键词 肝硬化 中医药疗法 丹酚酸A ⅰ型胶原 基因表达
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丹参对大鼠肝星状细胞转化生长因子β_1与Ⅰ型胶原mRNA表达的影响 被引量：20
10
作者 蔡方刚 林永堃 +2 位作者 翁山耕 石铮 刘景丰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2002年第13期17-18,21,共3页
目的 :探讨丹参抗肝纤维化的可能机制。方法 :链蛋白酶、胶原酶离体灌注大鼠肝脏 ,Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)体外培养。不同浓度的丹参处理 ,用RT -PCR法半定量检测HSC的转化生长因子 β1(TGF - β1)mRNA与Ⅰ型胶原mRN... 目的 :探讨丹参抗肝纤维化的可能机制。方法 :链蛋白酶、胶原酶离体灌注大鼠肝脏 ,Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)体外培养。不同浓度的丹参处理 ,用RT -PCR法半定量检测HSC的转化生长因子 β1(TGF - β1)mRNA与Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果 :丹参对HSC的TGF - β1与Ⅰ型胶原mRNA的表达有抑制作用。结论 :丹参抗肝纤维化作用可能与TGF - β1和Ⅰ型胶原mRNA的表达下调有关。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 ⅰ型胶原 丹参 肝星状细胞 肝纤维化 逆转录-聚合酶链反应
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淫羊藿甙对体外培养大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原表达和BGP影响的实验研究 被引量：28
11
作者 肖强兵 邹季 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2007年第9期36-38,共3页
目的:研究淫羊藿甙对体外培养的大鼠成骨细胞功能的影响,探讨淫羊藿甙促进成骨的细胞及分子机制。方法:实验分组将不同浓度的淫羊藿甙加入到其中进行共培养,其对于成骨细胞增殖和分化的影响通过MTT比色实验、BGP含量的放免法检测以及用... 目的:研究淫羊藿甙对体外培养的大鼠成骨细胞功能的影响,探讨淫羊藿甙促进成骨的细胞及分子机制。方法:实验分组将不同浓度的淫羊藿甙加入到其中进行共培养,其对于成骨细胞增殖和分化的影响通过MTT比色实验、BGP含量的放免法检测以及用荧光二抗的免疫组化实验测定Ⅰ型胶原的表达来进行。结果:淫羊藿甙能促进成骨细胞Ⅰ型胶原的表达和BGP的合成。结论:淫羊藿甙具有刺激体外培养成骨细胞增殖、分化和矿化的功能。 展开更多
关键词 淫羊藿甙 成骨细胞 ⅰ型胶原 骨钙素 免疫组化
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实验性肝纤维化时MMP-1、TIMP-1的表达与Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化的关系 被引量：23
12
作者 杨长青 胡国龄 +1 位作者 谭德明 张铮 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2000年第4期222-224,共3页
为了观察实验性肝纤维化时MMP - 1、TIMP - 1的表达与Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化之间的关系 ,本文制备了免疫性大鼠肝纤维化模型 ,运用定量RT -PCR检测肝脏内MMP - 1、TIMP - 1的表达 ,通过免疫组化检测肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。运用相... 为了观察实验性肝纤维化时MMP - 1、TIMP - 1的表达与Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化之间的关系 ,本文制备了免疫性大鼠肝纤维化模型 ,运用定量RT -PCR检测肝脏内MMP - 1、TIMP - 1的表达 ,通过免疫组化检测肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。运用相关理论作统计学分析。结果发现在肝纤维化发生时 ,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量的变化有显著相关性 ;MMP - 1的表达在肝纤维化组与正常对照组之间未见显著差异 ,与Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量变化之间也未见有相关性 ;TIMP - 1的表达在肝纤维化发生时显著增高 ,与Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化也有显著相关性。结果表明肝纤维化发生时MMP - 1的表达未见明显改变 ,而TIMP - 1的表达显著增高 ,且与Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的增高呈显著相关 ,提示TIMP - 1的表达增高在肝纤维化的发生。 展开更多
关键词 肝纤维化 基质金属蛋白酶-1 TIMP-1 ⅰ型胶原
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川芎嗪对成纤维细胞及TGF-β/Smads信号传导的影响 被引量：24
13
作者 张海啸 史载祥 +1 位作者 贾海忠 李格 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期252-255,I0002,共5页
目的研究川芎嗪对成纤维细胞和TGF-β信号传导通路的影响，探讨其抗纤维化作用的机理。方法以NIH3T3成纤维细胞为模型，通过H^3-thymidine DNA掺入量测定川芎嗪对成纤维细胞生长和增殖的影响；通过Ⅰ型胶原的免疫荧光染色实验，观察川... 目的研究川芎嗪对成纤维细胞和TGF-β信号传导通路的影响，探讨其抗纤维化作用的机理。方法以NIH3T3成纤维细胞为模型，通过H^3-thymidine DNA掺入量测定川芎嗪对成纤维细胞生长和增殖的影响；通过Ⅰ型胶原的免疫荧光染色实验，观察川芎嗪对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达的影响；并利用MvlLu-（CAGA）12-Luc稳定细胞系，探讨川芎嗪对TGF-β／Smads信号传导通路的影响。结果川芎嗪可抑制成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达。无病理因子刺激的情况下，川芎嗪在0．2～20mg／L剂量范围内对NIH3T3细胞增殖和TGF-β信号传导的影响不明显；而在TGF-β刺激的情况下，在川芎嗪浓度为20mg／L时，对NIH3T3细胞增殖出现明显的抑制作用（P〈0．05）。川芎嗪在0．2～20mg／L剂量范围内，对于正常情况下TGF-β响应的细胞荧光酶活性影响不明显；而在TGF-β（2μg／L）刺激的情况下，各剂量组都对TGF-β响应的荧光酶活性表现了明显的抑制（P〈0．05或P〈0．001）。结论川芎嗪能抑制成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达和成纤维细胞的增殖，抑制TGF-β／Smads信号传导通路，可能是其发挥抗纤维化作用的机理之一。 展开更多
关键词 川芎嗪 成纤维细胞 细胞增殖 ⅰ型胶原 TGF-β/Smads信号传导通路
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二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病细支气管壁细胞外基质重塑的影响 被引量：26
14
作者 吴珂 尚立芝 +4 位作者 谢文英 张静 王俊月 包永生 季书 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第14期122-127,共6页
目的：观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠细支气管结构重塑的作用及其机制。方法：50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组（5,10,20 g·kg^-1）,共5组,每组10只。以香烟烟熏加内毒素脂多糖... 目的：观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠细支气管结构重塑的作用及其机制。方法：50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组（5,10,20 g·kg^-1）,共5组,每组10只。以香烟烟熏加内毒素脂多糖（LPS）制备大鼠COPD模型。造模成功后,各观察组灌胃给药,检测肺功能,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肺组织中基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinases,MMP-1）,MMP-9及金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）mRNA表达,免疫组织化学法（immunohistochemistry,IHC）检测MMP-1,MMP-9,TIMP-1以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原在细支气管中的表达。结果：与正常组比较,模型组肺组织匀浆MMP-1,MMP-9,TIMP-1 mRNA表达均显著增强（P〈0.01）,细支气管壁MMP-1,MMP-9,TIMP-1,Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的表达均显著增强（P〈0.05）。与模型组比较,中、高剂量组肺组织匀浆MMP-1,MMP-9,TIMP-1 mRNA表达显著减弱（P〈0.01）,细支气管壁中、高剂量组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达明显减弱（P〈0.05）。结论：二陈汤加味对细支气管管壁细胞外基质（extracellular matrix,ECM）中的胶原有抑制作用。其机制可能与抑制MMP-1,MMP-9,并协调性抑制TIMP-1的表达,阻止细支气管ECM胶原的沉积有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病(COPD) 二陈汤 ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 细胞外基质(ECM) 基质金属蛋白酶(MMP)
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生肌化瘀方及其拆方对大鼠创面修复早期肉芽组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响 被引量：22
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作者 李斌 王振宜 +2 位作者 肖秀丽 李福伦 范斌 《中西医结合学报》 CAS 2005年第3期216-219,共4页
目的:探讨生肌化瘀方及其拆方对创面修复早期Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响。方法:将24 只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组:生肌化瘀方组、生肌方组、化瘀方组和模型组。以大鼠皮肤全层缺损创面为模型,采用免疫组化和图像分析相结合的方法,观察各组... 目的:探讨生肌化瘀方及其拆方对创面修复早期Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响。方法:将24 只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组:生肌化瘀方组、生肌方组、化瘀方组和模型组。以大鼠皮肤全层缺损创面为模型,采用免疫组化和图像分析相结合的方法,观察各组大鼠创面修复早期肉芽组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化。结果:在创面修复的第3 天,生肌方组和生肌化瘀方组的Ⅰ型胶原水平均高于模型组,化瘀方组则低于模型组(P <0.05);生肌方组、化瘀方组和生肌化瘀方组的Ⅲ型胶原水平均低于模型组(P<0.05),以化瘀方组更为明显;在创面修复的第7 天,生肌方组、生肌化瘀方组的Ⅰ型胶原水平均低于模型组(P<0.05);生肌方组和化瘀方组的Ⅲ型胶原水平均高于模型组(P<0.05)。结论:祛瘀生肌法可以促进大鼠创面修复,减少瘢痕形成。 展开更多
关键词 生肌化瘀方 创面修复 肉芽组织 ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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黄芪调控体外培养大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达 被引量：27
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作者 郭海玲 王翔 +2 位作者 徐宇 詹红生 赵咏芳 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1257-1261,共5页
背景:Ⅰ型胶原是体外培养成骨细胞所分泌的特异性胶原蛋白,所形成的网状结构也是成骨细胞矿化功能实现的前提,也是反映成骨细胞骨形成能力的重要指标。诸多报道反映了应用单味黄芪促进成骨细胞增殖的功能,但缺少有关黄芪促进Ⅰ型胶原分... 背景:Ⅰ型胶原是体外培养成骨细胞所分泌的特异性胶原蛋白,所形成的网状结构也是成骨细胞矿化功能实现的前提,也是反映成骨细胞骨形成能力的重要指标。诸多报道反映了应用单味黄芪促进成骨细胞增殖的功能,但缺少有关黄芪促进Ⅰ型胶原分泌及表达的研究。目的:观察黄芪注射液对体外培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖及分泌Ⅰ型胶原能力的影响。方法:体外分离培养大鼠成骨细胞。分为用含小牛血清的MEM培养液培养的对照组,分别加入相应体积分数黄芪注射液培养的黄芪组,于培养1,3,5,7,9d以四甲基偶氮唑盐法观察成骨细胞增殖的影响;以Real-timePCR方法检测黄芪注射液干预6h后成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白α1mRNA的表达情况,并用incellwestern方法测定培养6d时成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的分泌。结果与结论:从培养3d开始直至培养9d,与对照组比较,各体积分数的黄芪注射液均能促进成骨细胞的增殖(P<0.05),这一趋势在培养7d时达到最高峰。不同体积分数的黄芪注射液均能促进COLLα1mRNA的表达,尤其以15%的黄芪作用明显。以15%和10%的黄芪注射液培养的成骨细胞Ⅰ型胶原的表达量明显高于对照组(P<0.05)。结果证实,黄芪可以促进体外培养的成骨细胞的增殖和分泌Ⅰ型胶原的能力,但具有一定的量效趋势。 展开更多
关键词 黄芪注射液 成骨细胞 骨形成 ⅰ型胶原 骨组织工程
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雷公藤多苷对不可逆性肾小球硬化模型系膜损伤的抑制作用 被引量：23
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作者 万毅刚 孙伟 +4 位作者 清水不二雄 顾刘宝 铃木浩一 唐泽环 河内裕 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期361-365,共5页
目的观察雷公藤多苷(GTW)对不可逆性肾小球硬化模型系膜损伤的抑制作用,阐明其在体内延缓肾小球硬化的分子药理机制。方法运用2次注射单克隆抗体(mAb)1223的方法,建立大鼠不可逆性肾小球硬化模型,以经口灌胃GTW(50mg·kg-1BW)干预4... 目的观察雷公藤多苷(GTW)对不可逆性肾小球硬化模型系膜损伤的抑制作用,阐明其在体内延缓肾小球硬化的分子药理机制。方法运用2次注射单克隆抗体(mAb)1223的方法,建立大鼠不可逆性肾小球硬化模型,以经口灌胃GTW(50mg·kg-1BW)干预42d,并设立对照组。比较24h尿蛋白排泄量(Upro)、肾功能(Scr,BUN)以及肾小球形态学(LM,IF)变化,并检测(RTPCR)模型鼠肾组织中I型胶原(collagentypeI)、转化生长因子(TGFβ)mRNA表达水平。结果GTW抑制肾小球硬化模型鼠Upro和系膜增殖。肾小球总细胞数GTW组(65.67±3.43),对照组(87.02±2.41),P<0.05;细胞外基质积分GTW组(1.20±0.06),对照组(2.77±0.23),P<0.05;α平滑肌肌动蛋白积分GTW组(1.75±0.33),对照组(2.62±0.15),P<0.05;I型胶原积分GTW组(1.68±0.31),对照组(2.06±0.24),P<0.05。GTW使肾小球硬化模型鼠肾组织中collagentypeI,TGFβmRNA表达水平下调53.5%和14.7%,与对照组比较,二者差异均有显著性(P<0.05)。结论GTW抑制肾小球硬化模型鼠Upro和系膜增殖的作用是通过减少细胞因子mRNA的表达来实现的。 展开更多
关键词 肾小球硬化 对照组 雷公藤多苷 mRNA表达 抑制作用 TGF-β ⅰ型胶原 模型 不可逆性 下调
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温和灸促进肛瘘术后创面组织修复的实验研究 被引量：25
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作者 董青军 孙彦辉 +1 位作者 郭修田 曹永清 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1764-1766,共3页
目的观察温和灸促进肛瘘术后创面组织修复的效果并探讨其作用机制。方法选用54只雄性SD大鼠,随机分为三组,分别为温和灸组(A)、微波组(B)及空白组(C),每组大鼠18只,造成一个"急性、开放、渗血、感染"类似于临床肛瘘术后感染... 目的观察温和灸促进肛瘘术后创面组织修复的效果并探讨其作用机制。方法选用54只雄性SD大鼠,随机分为三组,分别为温和灸组(A)、微波组(B)及空白组(C),每组大鼠18只,造成一个"急性、开放、渗血、感染"类似于临床肛瘘术后感染性创面的动物模型。术后第2天起,温和灸组予以艾条温和灸创面治疗;微波组予以微波照射创面治疗;空白组不做任何处理。分别于术后的第3、7、14天后各处死6只,采集标本,观察大鼠创面愈合率,并测定创面肉芽组织中巨噬细胞、成纤维细胞、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量情况。结果在创面修复初、中期,温和灸能增加创面成纤维细胞含量、巨噬细胞含量、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量及提高Ⅰ、Ⅲ型胶原比例,一般在第7天达到高峰;在创面修复后期,温和灸能降低创面成纤维细胞含量、巨噬细胞含量、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量。结论①温和灸能促进创面愈合;②灸法具有双向良性的调整作用;③温和灸可促进创面愈合,并能抑制瘢痕形成,改善创面修复质量。 展开更多
关键词 温和灸 创面组织修复 巨噬细胞 成纤维细胞 ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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青蒿琥酯对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用及机制探讨 被引量：24
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作者 李战 农晓琳 +2 位作者 李佳荃 朴智 唐黎黎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期947-951,共5页
目的研究青蒿琥酯(ART)对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用及其可能机制。方法收集人皮肤增生性瘢痕标本,原代培养人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞。用0、75、150、300、600μmol·L-1ART干预24 h,MTT法检测青蒿琥酯的细胞增殖抑制作用,... 目的研究青蒿琥酯(ART)对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用及其可能机制。方法收集人皮肤增生性瘢痕标本,原代培养人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞。用0、75、150、300、600μmol·L-1ART干预24 h,MTT法检测青蒿琥酯的细胞增殖抑制作用,荧光定量RT-PCR法检测结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶1(MMP1)和Ⅰ型前胶原α2链(proCOL1A2)mRNA的表达,Western blot法检测CTGF及Ⅰ型胶原的蛋白表达。结果各测试浓度ART均可抑制成纤维细胞增殖。和对照组相比,CTGF和proCOL1A2mRNA表达降低,而MMP1表达明显升高。Western blot法检测发现CTGF及Ⅰ型胶原表达明显下调。结论 ART能抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,并下调其CTGF及Ⅰ型胶原表达,同时上调MMP1的表达;通过抑制CTGF,并促进MMP1表达而减少胶原沉积可能是ART抑制增生性瘢痕的机制之一。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 成纤维细胞 青蒿琥酯 结缔组织生长因子 基质金属蛋白酶 ⅰ型胶原 MMP1 COLLAGEN ⅰ
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外源性IGF-I对大鼠急性骨骼肌钝挫伤后骨骼肌IIb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响 被引量：17
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作者 陈世益 朱文辉 +1 位作者 任惠民 李云霞 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期554-560,共7页
目的 :观察外源性IGF -I对SD大鼠骨骼肌钝挫伤后修复过程中IIb型肌球蛋白重链(myosinheavychain ,MHC)及Ⅰ、Ⅲ型胶原(collagen-Ⅰ和Ⅲ )mRNA表达的影响。方法 :采用自制的肌肉损伤打击装置对 84只雄性SD大鼠后下肢肌群造成钝挫伤 ,然... 目的 :观察外源性IGF -I对SD大鼠骨骼肌钝挫伤后修复过程中IIb型肌球蛋白重链(myosinheavychain ,MHC)及Ⅰ、Ⅲ型胶原(collagen-Ⅰ和Ⅲ )mRNA表达的影响。方法 :采用自制的肌肉损伤打击装置对 84只雄性SD大鼠后下肢肌群造成钝挫伤 ,然后将动物随机分为两组 ,分别于损伤局部注射外源性IGF-I及生理盐水 ,然后在损伤后第 1、3、7、1 0、1 4、2 1和 2 8天分别处死大鼠并取损伤处肌肉 ,采用半定量逆转录 -聚合酶链式反应 (semi-quantitativeRT -PCR)分析IIb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果 :(1 )急性钝挫伤修复期 ,两组动物骨骼肌IIb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA表达量均显著增高 ,第 7～1 0天达到高峰 ,然后呈下降趋势。 (2 )在骨骼肌修复过程中 ,外源性IGF-I治疗组大鼠IIb型MHCmRNA表达水平的升幅显著高于生理盐水对照组 ,且达到峰值的时程早于生理盐水组 3天。 (3 )在骨骼肌修复过程中 ,外源性IGF -I治疗组大鼠Ⅲ型与Ⅰ型胶原mRNA表达水平的改变明显低于生理盐水对照组 ,但峰值时程与生理盐水对照组相同。结论 :(1 )急性骨骼肌钝挫伤修复过程中 ,外源性IGF -I能促进骨骼肌急性钝挫伤后IIb型MHCmRNA表达。 (2 )急性骨骼肌钝挫伤修复期 ,外源性IGF -I能抑制Ⅰ。 展开更多
关键词 骨骼肌钝挫伤 Ⅱb型MHC ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 外源性ICF-ⅰ 肌球蛋白重链 动物实验
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