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美洲大蠊提取物CII-3体内外抗HSV-2实验研究 被引量：23
1
作者 普小菲 罗亦佳 +4 位作者 彭丽 李娇 曾菁 牛春丽 彭芳 《大理学院学报（综合版）》 CAS 2014年第10期5-9,共5页
目的:研究美洲大蠊提取物CII-3抗HSV-2作用。方法:通过MTT法和CPE法测定美洲大蠊提取物CII-3抗HSV-2活性,计算其TC50、IC50及TI。以雌性小鼠生殖器疱疹为动物模型,在小鼠阴道内注射50μL HSV-2病毒原液,1次/d,连续7 d造模。以ACV为阳性... 目的:研究美洲大蠊提取物CII-3抗HSV-2作用。方法:通过MTT法和CPE法测定美洲大蠊提取物CII-3抗HSV-2活性,计算其TC50、IC50及TI。以雌性小鼠生殖器疱疹为动物模型,在小鼠阴道内注射50μL HSV-2病毒原液,1次/d,连续7 d造模。以ACV为阳性对照,采用灌胃给药治疗10 d。应用ELISA试剂盒检测小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2的水平变化;称量小鼠免疫器官重量,计算脏器指数。结果:美洲大蠊提取物CII-3有抑制HSV-2致细胞病变的作用,其TC50值为190.55μg/m L,IC50值为28.71μg/m L,TI值为6.64μg/m L;美洲大蠊提取物CII-3能够提高小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2的水平,同时能够使小鼠的免疫器官重量增加。结论:美洲大蠊提取物CII-3有抗HSV-2作用,其抗病毒作用可能是通过提高机体免疫功能来实现。 展开更多
关键词 美洲大蠊提取物 ⅱ型单纯疱疹病毒 抗病毒作用
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中药黄白液抑制Ⅱ型单纯疱疹病毒复制的实验研究 被引量：10
2
作者 杨志波 欧阳恒 +1 位作者 欧柏生 谭金华 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2003年第3期308-310,共3页
目的 :探讨黄白液治疗预防复发性生殖器疱疹的作用。方法 :采用体外细胞培养技术观察黄白液对Ⅱ型单纯疱疹病毒 (HSV 2 )复制的抑制作用 ,并与环胞苷、阿昔洛韦作比较。结果 :黄白液对HSV 2的复制有明显抑制作用 ,其最小有效浓度为2 .5g... 目的 :探讨黄白液治疗预防复发性生殖器疱疹的作用。方法 :采用体外细胞培养技术观察黄白液对Ⅱ型单纯疱疹病毒 (HSV 2 )复制的抑制作用 ,并与环胞苷、阿昔洛韦作比较。结果 :黄白液对HSV 2的复制有明显抑制作用 ,其最小有效浓度为2 .5g·L- 1 ,治疗指数为 3 ,黄白液 2 .5g·L- 1 对HSV 2的抑制作用不亚于环胞苷 ,两者抑毒指数为 2 .83 ,阿昔洛韦抗HSV 2作用较强 ,抑制指数为 5 .3 1。结论 :黄白液可治疗复发性生殖器疱疹 ,与其抑制HSV 展开更多
关键词 中药 黄白液 ⅱ型单纯疱疹病毒 实验 复发性生殖器疱疹 预防
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山东省胶州市暗娼HIV、梅毒和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染状况分析 被引量：8
3
作者 李峥 李东民 +3 位作者 刘慧鑫 姜珍霞 朱琳 汪宁 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1099-1104,共6页
目的：了解山东省胶州市暗娼HIV、梅毒、Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）感染状况以及相关影响因素。方法采用方便抽样法招募山东省胶州市暗娼人群，通过匿名现场问卷调查收集相关信息，采集血样进行HIV、梅毒和HSV-2检测，并以梅毒螺旋体EL... 目的：了解山东省胶州市暗娼HIV、梅毒、Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）感染状况以及相关影响因素。方法采用方便抽样法招募山东省胶州市暗娼人群，通过匿名现场问卷调查收集相关信息，采集血样进行HIV、梅毒和HSV-2检测，并以梅毒螺旋体ELISA检测与HSV-2抗体ELISA检测均为阳性定义为双重感染。结果共调查460名暗娼，其中HIV感染率为0.22%，梅毒感染率为5.9%，HSV-2感染率为43.0%，梅毒/HSV-2双重感染率为11.7%。22.8%的暗娼承认吸食过新型毒品，吸食新型毒品暗娼的梅毒感染率为12.4%，HSV-2感染率为55.2%，梅毒/HSV-2双重感染率为22.9%。多因素分析显示：梅毒感染的危险因素有吸食新型毒品（OR＝3.61，95%CI：1.62～8.06）、第一次商业性行为年龄＞20岁（OR＝2.80，95%CI：1.15～6.85）、最近1个月性服务场所数≥2个（OR＝4.37，95%CI：0.83～22.83）；而HSV-2感染的危险因素为吸食新型毒品（OR＝2.30，95%CI：1.43～3.70）、来自低档场所（OR＝2.61，95%CI：1.66～4.10）、在本地工作≥1年（OR＝2.01，95%CI：1.28～3.14）、第一次商业性行为年龄＞20岁（OR＝1.77，95%CI：1.16～2.69）、文化程度为文盲或小学（OR＝2.27，95%CI：1.18～4.36）；梅毒/HSV-2双重感染的危险因素有吸食新型毒品（OR＝3.95，95%CI：2.09～7.44）、文化程度为文盲或小学（OR＝2.43，95%CI：1.10～5.36）、年龄为21～30岁（OR＝2.95，95%CI：1.08～8.03）和≥31岁（OR＝7.05，95%CI：2.48～20.01）。结论胶州市暗娼梅毒、HSV-2及其重复感染率较高，特别是吸食新型毒品暗娼，应针对感染人群、吸毒人群进行有效的健康教育和行为干预。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 梅毒 ⅱ型单纯疱疹病毒 暗娼
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HIV阳性MSM HSV-2感染及危险因素调查 被引量：7
4
作者 魏宏屹 徐俊杰 +5 位作者 胡清海 姜拥军 耿文清 刘静 李咏泽 尚红 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期357-358,共2页
Ⅱ型单纯疱疹病毒（herpessimplexvirus2，HSV-2）是引起生殖器疱疹（genitalherpes，GH）的主要病原体。男男性行为者（menwhohavesexwithmen，MSM）的HSV-2感染率始终保持在较高水平，
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 男男性行为者 HIV感染者 感染率
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靶向UL27shRNA抑制Ⅱ型单纯疱疹病毒在HEK293细胞中的复制 被引量：7
5
作者 吕延成 潘晓瑜 +2 位作者 周丹丹 袁俊杰 黄畅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期759-766,共8页
按照shRNA(small hairpin RNA)设计原则,针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type2,HSV-2)的UL27基因序列保守区域筛选设计、合成4条干扰靶序列并构建表达UL27序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pGPU6/GFP/Neo.... 按照shRNA(small hairpin RNA)设计原则,针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type2,HSV-2)的UL27基因序列保守区域筛选设计、合成4条干扰靶序列并构建表达UL27序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pGPU6/GFP/Neo.通过脂质体介导重组表达载体转染HEK293细胞(human embryonic kidney 293 cell)再接种HSV-2.采用实时荧光定量PCR(real-timefluorescent quantitative PCR)技术检测UL27各组的mRNA转录水平,终点滴定法检测细胞上清液中的病毒滴度,四甲基偶氮唑盐(four methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率,Western印迹法检测蛋白表达效果.结果显示,UL27shRNA75组对UL27基因mRNA表达抑制效果最佳,同时能显著抑制感染细胞的CPE(cytopathic effect,CPE),降低上清液中的病毒感染滴度,提高细胞的生存率,抑制UL27基因的蛋白表达.提示本研究构建的pGPU6/GFP/Neo-UL27表达载体能在细胞水平上不同程度地干扰HSV-2 UL27基因表达,抑制HSV-2在HEK293细胞中复制. 展开更多
关键词 RNA干扰 ⅱ型单纯疱疹病毒 UL27基因
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实时荧光定量PCR检测HSV-2方法的建立 被引量：5
6
作者 刘微 周艳 +3 位作者 赵东海 张华飞 项玥 李艳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第5期397-400,共4页
目的建立一种快捷、灵敏、特异的Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus 2,HSV-2)实时荧光定量PCR检测体系。方法设计HSV-2糖蛋白E基因特异性引物,PCR扩增gE基因片段,并与pGEM-T-easy载体连接,构建pGEM-T-easy-gE2重组质粒。以连续10... 目的建立一种快捷、灵敏、特异的Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus 2,HSV-2)实时荧光定量PCR检测体系。方法设计HSV-2糖蛋白E基因特异性引物,PCR扩增gE基因片段,并与pGEM-T-easy载体连接,构建pGEM-T-easy-gE2重组质粒。以连续10倍稀释的浓度梯度制备PCR体系标准品质粒,应用SYBR Green法建立gE2real-time PCR方法并优化引物浓度、Mg2+浓度、退火温度和循环程序等条件,绘制标准曲线,并验证方法的敏感性、特异性和稳定性;用该方法检测HSV-2感染小鼠生殖道拭子标本。结果 gE2real-time PCR的标准品线性关系良好(r2=0.997),其他妇科常见病原体无特异扩增;方法的最低检测质粒浓度为3.85×101 copy/μl,试验的变异系数<1%,检测30份小鼠HSV-2感染生殖道拭子标本的阳性率为96.7%,高于常规PCR方法(80.0%)。结论gE2real-time PCR法检测HSV-2具有灵敏、特异、重复性好,可用于HSV-2定性分析和病毒载量检测。 展开更多
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 实时荧光定量PCR
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云南省某县HIV感染者Ⅱ型单纯疱疹病毒感染及高危性行为研究 被引量：4
7
作者 傅卓华 高眉扬 +3 位作者 陈莉 康永然 杨建华 何纳 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1139-1142,共4页
目的了解云南省某县HIV感染者中Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）感染率、HSV-2感染相关因素及高危性行为情况。方法从常规随访的HIV感染者中招募研究对象，问卷调查收集人口学、行为学信息，采集血标本检测HSV-2抗体和CD4^＋T淋巴细胞计数。... 目的了解云南省某县HIV感染者中Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）感染率、HSV-2感染相关因素及高危性行为情况。方法从常规随访的HIV感染者中招募研究对象，问卷调查收集人口学、行为学信息，采集血标本检测HSV-2抗体和CD4^＋T淋巴细胞计数。结果共招募研究对象300人，其中105人检测为HSV-2抗体阳性，感染率为35．0％。多因素logistic回归模型显示，傣族（OR=0．300，95％CI：0．152—0．593）和景颇族（OR=0．376，95％CI：0．167～0．850）HIV感染者HSV-2感染风险低于汉族；经性途径感染HIV者HSV-2感染风险高于经注射吸毒感染HIV者（OR=4．244，95％CI：1．924～9．364）。105人合并感染HIV和HSV-2，其中60人最近3月内有性行为，未坚持使用或不使用安全套者占有性行为者的41．7％，主要见于婚内性行为。结论HIV感染者中HSV-2感染率较高,HIV／HSV-2合并感染者中有不安全性行为者比例高。 展开更多
关键词 艾滋病病毒感染 ⅱ型单纯疱疹病毒 高危性行为
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嘉定区性病门诊就诊者HIV,HSV-2,HPV,梅毒感染率及性行为特征分析 被引量：4
8
作者 沈鸿 石国政 +1 位作者 殷方兰 项明玉 《中国医学文摘（皮肤科学）》 2011年第2期73-75,共3页
目的了解HIV,HPV,HSV-2和梅毒的感染情况其影响因素。方法选择上海市嘉定区3个性病门诊的就诊者,由经过培训的调查员面对面地进行匿名问卷调查,并抽取5mL静脉血分离血清进行检测。结果共调查419例就诊者,梅毒RPR阳性率为14.30%,HIV阳性... 目的了解HIV,HPV,HSV-2和梅毒的感染情况其影响因素。方法选择上海市嘉定区3个性病门诊的就诊者,由经过培训的调查员面对面地进行匿名问卷调查,并抽取5mL静脉血分离血清进行检测。结果共调查419例就诊者,梅毒RPR阳性率为14.30%,HIV阳性率为0.24%,HSV-2感染率为22.50%,HPV阳性率为21.20%,其中女性就诊者的梅毒、HSV-2和HPV感染率较高。最近一次商业性行为中安全套使用率59.70%,最近一次与固定性伴的性行为中安全套使用率33.50%。结论预防HIV/STD感染应继续大力推广安全套,提高安全套使用率,减少危险性行为的发生。要特别关注女性、无业人群。 展开更多
关键词 性病门诊就诊者 艾滋病 ⅱ型单纯疱疹病毒 梅毒 人乳头瘤病毒
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马齿苋提取物体外抗Ⅱ型单纯疱疹病毒的活性评价 被引量：4
9
作者 苏会霞 刘翠玲 +2 位作者 周莹君 马艳玲 周沙 《中国中医药现代远程教育》 2010年第22期155-156,共2页
目的利用体外细胞培养技术初步筛选马齿苋抗Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）的有效部位。方法以选择性指数（Selectivity-Index,SI）为活性评价指标,通过细胞毒实验及抗病毒活性评价实验,对马齿苋的不同提取部位进行了体外抗HSV-2病毒活性的... 目的利用体外细胞培养技术初步筛选马齿苋抗Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）的有效部位。方法以选择性指数（Selectivity-Index,SI）为活性评价指标,通过细胞毒实验及抗病毒活性评价实验,对马齿苋的不同提取部位进行了体外抗HSV-2病毒活性的筛选研究。结果马齿苋50%乙醇提取部位显示了潜在的抗HSV-2病毒活性,IC50值为120μg/mL,SI值为15;水提取物以醋酸纤维素膜分离后的粗多糖部位则显示了较强的抗HSV-2病毒活性,IC50值为55μg/mL,SI值为34。结论马齿苋抗HSV-2病毒活性成分为多糖类成分。 展开更多
关键词 马齿苋 ⅱ型单纯疱疹病毒 体外筛选
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临床关于HSV_(-Ⅱ)四种实验室检测方法的比较 被引量：4
10
作者 何君 徐明茹 +1 位作者 李贵春 王谊军 《现代医学》 2003年第4期229-231,共3页
目的　评价四种实验室检测Ⅱ型单纯疱疹病毒 (HSV Ⅱ)感染方法的灵敏度和特异度 ,寻找一种实验室检测HSV-Ⅱ 快而准的方法。方法　采用直接免疫荧光法 (DIFA)检测生殖器疱疹 (GH)患者患处分泌物中的HSV-Ⅱ 抗原 ,用酶免疫法 (EIA)检测G... 目的　评价四种实验室检测Ⅱ型单纯疱疹病毒 (HSV Ⅱ)感染方法的灵敏度和特异度 ,寻找一种实验室检测HSV-Ⅱ 快而准的方法。方法　采用直接免疫荧光法 (DIFA)检测生殖器疱疹 (GH)患者患处分泌物中的HSV-Ⅱ 抗原 ,用酶免疫法 (EIA)检测GH患者患处分泌物中的HSV-Ⅱ 抗原和血清中的HSV-ⅡIgM抗体 ,并将以上检验结果与细胞培养法比较。结果　DIFA法、EIA法检测HSV-Ⅱ 抗原 ,EIA法测HSV-ⅡIgM抗体 ,细胞培养法分离HSV-Ⅱ ,4种检测方法的灵敏度分别为 75 8% ,83 9% ,17 7%和 71 8% ;特异度分别为 95 % ,97% ,85 %和 10 0 %。与细胞培养法相比较 ,DIFA法灵敏度、特异度均无显著性差异 (均P >0 0 5 ) ;EIA法检测HSV-Ⅱ 抗原灵敏度高于细胞培养法 (P <0 .0 5 ) ,而特异度相比较 ,无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;EIA法检测HSV-ⅡIgM抗体灵敏度和特异度均显著低于细胞培养法 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论　EIA法检测HSV-Ⅱ 抗原灵敏度和特异度均较高 ,是目前临床实验室检测HSV-Ⅱ 展开更多
关键词 生殖器疱疹 ⅱ型单纯疱疹病毒 实验室检测 直接免疫荧光法 酶免疫法 细胞培养法
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一种实时荧光定量PCR检测Ⅱ型单纯疱疹病毒检测方法的研究 被引量：4
11
作者 刘微 罗晓华 +4 位作者 项玥 侯婷 赵文静 纪莉婷 王会岩 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期3114-3118,共5页
建立SYBR Green实时荧光定量PCR方法,用于快速、准确检测Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）。设计特异性引物,PCR扩增糖蛋白G（g G）片段,构建p EASY-T1-g G2重组质粒作为标准品,绘制标准曲线,同时考察该方法的稳定性、灵敏性和特异性,并利用... 建立SYBR Green实时荧光定量PCR方法,用于快速、准确检测Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）。设计特异性引物,PCR扩增糖蛋白G（g G）片段,构建p EASY-T1-g G2重组质粒作为标准品,绘制标准曲线,同时考察该方法的稳定性、灵敏性和特异性,并利用此方法检测HSV-2血清学确诊的生殖器疱疹临床样本。本实验获得的标准曲线R^2=0.997,相关性良好,灵敏度是普通PCR的1 000倍。用本方法检测HSV-2血清学确诊的生殖器疱疹临床样本均为阳性,符合率为100%,且每份样品检测结果的变异系数均小于2%。本研究建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法可用于临床HSV-2感染的检测。 展开更多
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 糖蛋白G 实时荧光定量PCR
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荧光定量PCR和酶联免疫吸附法检测生殖器疱疹病毒的对比研究 被引量：3
12
作者 尹兴平 张海平 +1 位作者 曹蕾 金城 《中国实验诊断学》 2012年第7期1260-1261,共2页
生殖器疱疹（GH）是由Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-Ⅱ）感染引起的、以生殖器部位水疱、溃疡等为主要表现的一种性传播性疾病,需与其他表现为生殖器溃疡的疾病如龟头炎、宫颈炎和梅毒等鉴别。目前本病的诊断主要以临床经验为主,因此对一些不... 生殖器疱疹（GH）是由Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-Ⅱ）感染引起的、以生殖器部位水疱、溃疡等为主要表现的一种性传播性疾病,需与其他表现为生殖器溃疡的疾病如龟头炎、宫颈炎和梅毒等鉴别。目前本病的诊断主要以临床经验为主,因此对一些不典型病例容易出现漏诊或误诊, 展开更多
关键词 生殖器疱疹病毒 酶联免疫吸附法 荧光定量PCR ⅱ型单纯疱疹病毒 性传播性疾病 生殖器溃疡 检测 HSV-ⅱ
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shRNA表达载体对HSV-2 ICP4基因的干扰效应 被引量：3
13
作者 袁俊杰 吕延成 《遵义医学院学报》 2013年第1期21-24,共4页
目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,We... 目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,Western blot检测ICP4蛋白的表达情况,终点滴定法测定病毒的滴度。结果与对照组相比,干扰组对mRNA抑制率为71%,使蛋白表达减少71.81%,并且病毒滴度也明显降低(P<0.05)。结论构建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重组质粒表达载体能在体外细胞水平上干扰HSV-2 ICP4的基因表达,抑制HSV-2在细胞中复制。 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹RNA 质粒载体 ⅱ型单纯疱疹病毒 ICP4基因
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上海市农贸市场外来男性摊主商业性行为与Ⅱ型单纯疱疹病毒感染研究 被引量：3
14
作者 钟羽西 何纳 +1 位作者 Roger Detels 尹跃平 《中国预防医学杂志》 CAS 2008年第2期91-94,共4页
目的了解上海市农贸市场外来男性摊主Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)感染率,并分析其影响因素。方法选择上海市某社区的6个农贸市场外来男性摊主进行面对面的定量问卷调查,收集调查对象的社会人口学特征,性病艾滋病知识,性行为等情况。采集血... 目的了解上海市农贸市场外来男性摊主Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)感染率,并分析其影响因素。方法选择上海市某社区的6个农贸市场外来男性摊主进行面对面的定量问卷调查,收集调查对象的社会人口学特征,性病艾滋病知识,性行为等情况。采集血液标本进行检测,估计HSV-2感染情况。结果共调查401名外来男性摊主,采集血标本398份。平均年龄(34.7±8.6)岁。94.5%有性交史,其中有4%来上海后发生过商业性行为。HSV-2感染率为7.8%,商业性行为与HSV-2感染之间存在关联。结论通过健康教育与行为干预以减少商业性行为是预防外来男性商贩HSV-2感染的重要措施。 展开更多
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 商业性行为 安全套使用 外来人口
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四黄虎胶囊体外抗Ⅱ型单纯疱疹病毒作用的实验研究 被引量：3
15
作者 李振洁 张毅 +4 位作者 张奉学 刘妮 朱宇同 朱慧兰 张莉 《岭南皮肤性病科杂志》 2008年第5期260-261,264,共3页
目的:探讨四黄虎胶囊体外对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)的作用。方法:采用体外细胞培养技术观察四黄虎胶囊对病毒所致细胞病变(CPE)的抑制作用、对病毒感染的预防、直接杀伤和阻止其复制的作用;阳性对照药物阿昔洛韦(ACV)。结果:四黄虎胶... 目的:探讨四黄虎胶囊体外对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)的作用。方法:采用体外细胞培养技术观察四黄虎胶囊对病毒所致细胞病变(CPE)的抑制作用、对病毒感染的预防、直接杀伤和阻止其复制的作用;阳性对照药物阿昔洛韦(ACV)。结果:四黄虎胶囊在浓度为7.8 mg/mL时对HSV-2具有抑制细胞病变作用;7.8 mg/mL,3.9 mg/mL浓度时对病毒感染有预防作用,同时具有降低HSV的感染力、抑制病毒增殖的作用。ACV的抑制浓度为3.12μg/mL。结论:四黄虎胶囊体外具有较好的抗HSV-2作用。 展开更多
关键词 四黄虎胶囊 细胞培养 ⅱ型单纯疱疹病毒
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TOPO定向克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段 被引量：2
16
作者 王书崎 尹跃平 +4 位作者 余艳华 赖伟红 蒋明军 陈强 陈祥生 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期288-290,共3页
目的通过基因工程技术,克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段。方法以PCR法扩增HSV-2的gG基因的免疫优势表位片段;将PCR产物与TOPO定向表达载体连接;然后鉴定含有目的基因的重组表达载体;并转化BL21StarTM菌株诱导表达... 目的通过基因工程技术,克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段。方法以PCR法扩增HSV-2的gG基因的免疫优势表位片段;将PCR产物与TOPO定向表达载体连接;然后鉴定含有目的基因的重组表达载体;并转化BL21StarTM菌株诱导表达目的蛋白;以免疫印迹法检测表达的目的蛋白。结果PCR法扩增出616bp的DNA片段;通过PCR法及测序法证实重组质粒中含有616bp的DNA片段,其中99.5%序列与目的基因序列一致。SDS-PAGE结果显示重组蛋白在3h时的表达产量最高。免疫印迹法通过抗gG的单克隆抗体,证实重组蛋白在大肠杆菌中的表达。结论Ⅱ型单纯疱疹病毒的gG免疫优势表位基因片段的成功表达,为制备国产的HSV-2血清诊断试剂提供资料。 展开更多
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 G基因 表位 定向克隆 TOPO HSV-2 免疫印迹法 DNA片段 基因工程技术 PCR法 重组表达载体 重组蛋白 PCR产物 单克隆抗体 目的基因 BL21 诱导表达 重组质粒 基因序列 表达产量 PAGE 大肠杆菌 基因片段 诊断试剂
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Ⅱ型单纯疱疹病毒培养及gG-2基因特异片段的克隆 被引量：3
17
作者 高建 黄宇烽 +2 位作者 曹晶 王浩洋 陆金春 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期223-227,共5页
目的:通过培养和扩增Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)并提取其全基因组,从而克隆包膜糖蛋白gG-2全长基因及其保守性较高、抗原性较强的特异片段。方法:将HSV-2病毒感染Hela细胞获得大量病毒液,用酚-氯仿法提取病毒全长基因组,并以此为模板扩增... 目的:通过培养和扩增Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)并提取其全基因组,从而克隆包膜糖蛋白gG-2全长基因及其保守性较高、抗原性较强的特异片段。方法:将HSV-2病毒感染Hela细胞获得大量病毒液,用酚-氯仿法提取病毒全长基因组,并以此为模板扩增编码gG-2的US4基因,再根据氨基酸序列比对结果,选取其特异片段,设计带酶切位点的引物克隆gG-2基因特异片段。结果:成功地获得了大量HSV-2病毒液并提取了病毒基因组,克隆了gG-2全长基因以及特异片段,测序证实,两者均与GenBank中报道的序列相一致。结论:对于遗传特性相对稳定的HSV-2来说,通过病毒感染细胞的方法短时期内获得大量病毒液,并从病毒全基因组中克隆gG-2特异基因片段的方法是可行的,从而为进一步构建gG-2特异片段相关载体、表达相应蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 gG-2 病毒感染
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上海市VCT门诊就诊人群HSV-2感染率及其影响因素研究 被引量：3
18
作者 钟羽西 刘瑛 +4 位作者 张宇艳 刘仲苓 李朋 高眉扬 何纳 《中国艾滋病性病》 CAS 2010年第1期32-35,55,共5页
目的研究上海市艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊就诊人群,Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)感染率及其影响因素。方法对2007年3月至11月,自愿前往上海市闸北区和普陀区疾病预防控制中心(CDC)VCT门诊就诊者,进行面对面的匿名问卷调查,并抽取5ml静脉... 目的研究上海市艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊就诊人群,Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)感染率及其影响因素。方法对2007年3月至11月,自愿前往上海市闸北区和普陀区疾病预防控制中心(CDC)VCT门诊就诊者,进行面对面的匿名问卷调查,并抽取5ml静脉血分离血清检测HSV-2、艾滋病病毒(HIV)抗体。结果研究期间共有291人自愿接受艾滋病咨询检测,其中男性占81.8%,女性占18.2%。HSV-2抗体阳性者27人,感染率为9.3%,HIV抗体阳性者1人,阳性率为0.3%。研究对象的安全套使用率不高,近3个月性生活中每次都使用安全套的比例为37.5%。与固定性伴和非固定性伴的安全套使用差异无统计学意义。女性研究对象报告的安全套使用率明显低于男性。女性、较低文化程度者HSV-2感染率较高。结论上海市有必要在VCT门诊中同时开展HSV-2的检测和咨询。提高女性自我保护意识和安全套使用率,仍然是性病艾滋病防治工作的重点。 展开更多
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 自愿咨询检测(VCT) 安全套使用 艾滋病
原文传递
苏州某医院皮肤性病门诊患者4种常见性传播疾病病原体感染状况及原因分析 被引量：2
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作者 吴敏娟 胥萍 +4 位作者 李晋 陈慧 朱晓燕 范婷婷 吴敏智 《检验医学与临床》 CAS 2020年第7期884-887,共4页
目的了解某院皮肤性病门诊患者泌尿生殖器Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)、解脲脲原体(UU)、沙眼衣原体(CT)、淋病奈瑟菌(NG)的感染情况,为临床防治提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)法对298例疑似HSV-Ⅱ感染者和126例疑... 目的了解某院皮肤性病门诊患者泌尿生殖器Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)、解脲脲原体(UU)、沙眼衣原体(CT)、淋病奈瑟菌(NG)的感染情况,为临床防治提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)法对298例疑似HSV-Ⅱ感染者和126例疑似UU、CT、NG感染者进行脱氧核糖核酸(DNA)检测。结果在298例疑似HSV-Ⅱ感染者中,131例HSV-ⅡDNA检测阳性,阳性检出率为43.96%;其中男性阳性检出率为42.61%,女性为48.53%,男女性阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。<20岁组、20~<40岁组、40~<60岁组、≥60岁组就诊者阳性检出率分别为28.57%、43.02%、47.37%、41.18%,组间比较,差异无统计学意义(χ2=1.239,P>0.05)。126例疑似UU、CT、NG感染者分别进行DNA检测,检出UU阳性65例(51.59%),CT阳性9例(7.14%)和NG阳性10例(7.94%)。不同性别的UU阳性检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05);而不同性别的NG和CT阳性检出率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。<20岁组、20~<40岁组、40~<60岁组、≥60岁组UU+CT+NG阳性检出率分别为71.43%、75.00%、32.00%、83.33%,4组间比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论该院皮肤性病门诊就诊者HSV-Ⅱ、UU、CT、NG阳性检出率较高,而病原体检测可辅助临床进行早诊断、早治疗,并为性传播疾病的流行病学研究提供可靠依据。 展开更多
关键词 ⅱ型单纯疱疹病毒 解脲脲原体 沙眼衣原体 淋病奈瑟菌
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靶向UL5小干扰RNA对Ⅱ型单纯疱疹病毒的抑制 被引量：2
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作者 潘晓瑜 吕延成 +3 位作者 王志勇 樊俊 周丹丹 袁俊杰 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第37期6931-6936,共6页
背景:解旋酶-引发酶复合体是Ⅱ型单纯疱疹病毒进行复制的必需基因,UL5基因为Ⅱ型单纯疱疹病毒解旋酶-引发酶复合体的组成单位之一。目的:应用RNA干扰技术分析特异性小干扰RNA对Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因的干扰作用。方法:以Ⅱ型单纯疱疹... 背景:解旋酶-引发酶复合体是Ⅱ型单纯疱疹病毒进行复制的必需基因,UL5基因为Ⅱ型单纯疱疹病毒解旋酶-引发酶复合体的组成单位之一。目的:应用RNA干扰技术分析特异性小干扰RNA对Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因的干扰作用。方法:以Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因为靶目标,设计、合成5对特异性小干扰RNA。通过LipofeCtamine 2000脂质体将特异性小干扰RNA转染HEK293细胞。48h后行荧光定量RT-PCR检测UL5基因转录水平,终点滴定法测定干扰后病毒滴度,观察其干扰效果。结果与结论:小干扰RNA成功转染入细胞内。荧光定量RT-PCR结果显示,siRNA722、siRNA2394、siRNA2513和siRNA2627均可不同程度降低靶mRNA表达,病毒滴度检测结果显示siRNA722、siRNA2394、siRNA2513和siRNA2627均可不同程度降低上清液中病毒感染滴度,阴性对照组和siRNA374对病毒感染滴度无影响。针对UL5基因的有效小干扰RNA可以特异性降低Ⅱ型单纯疱疹病毒的复制水平。 展开更多
关键词 小干扰RNA ⅱ型单纯疱疹病毒 UL5 RNA干扰 RT-PCR 组织工程
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