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短双歧杆菌α-D-半乳糖苷酶的纯化及性质 被引量：9
1
作者 肖敏 刘树峰 +1 位作者 朱崇日 钱新民 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期307-311,共5页
目的　研究短双歧杆菌 (Bifidobacteriumbreve)α D 半乳糖苷酶的纯化及性质。方法　采用硫酸铵分级沉淀及柱层析法纯化酶蛋白 ,垂直板状SDS PAGE和nativegradientPAGE检查蛋白纯度。结果　nativegradientPAGE电泳后活性染色确定无细胞... 目的　研究短双歧杆菌 (Bifidobacteriumbreve)α D 半乳糖苷酶的纯化及性质。方法　采用硫酸铵分级沉淀及柱层析法纯化酶蛋白 ,垂直板状SDS PAGE和nativegradientPAGE检查蛋白纯度。结果　nativegradientPAGE电泳后活性染色确定无细胞粗酶液中含有一种α D 半乳糖苷酶 ,纯化后的酶蛋白是一个相对分子质量 (Mr)约为 15 6× 10 3 的双亚基蛋白质 ,等电点pI为 5 .3,最适反应温度为 37℃ ,在 40℃以下稳定 ,70℃时失去所有的酶活性。最适反应pH为 5 .5～ 6 .5 ,酶在pH5 .5～ 9.5范围内稳定。Hg+ 、Cu2 + 、Ag+ (各 1mmol/L)和PCMB(0 .0 1mmol/L)强烈抑制酶活性 ,Co2 + 、Mg2 + 、Ca2 + 、Mn2 + 、Zn2 + (各 1mmol/L)、EDTA和DTT(各 10mmol/L)对酶活性没有抑制。酶专一性水解α D 半乳糖苷键。酶对p 硝基苯酚 α D 半乳糖苷、m 硝基苯酚 α D 半乳糖苷和o 硝基苯酚 α D 半乳糖苷的Km分别为 0 .16 8mmol/L、1.0 7mmol/L和 0 .45 6mmol/L ,Vmax分别为 4.5 5 μmol/min、0 .378μmol/min和 0 .6 14μmol/min。结论　B .breve的α D 半乳糖苷酶与少数国外报道的其他双歧杆菌的α D 半乳糖苷酶有相似之处 ,也有不同点。其Mr 不同 ,在 6 0℃之内的热稳定性明显较好。 展开更多
关键词 双歧杆菌 α-D-半乳糖苷酶 纯化
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短双歧杆菌α-D-半乳糖苷酶基因aga1在大肠杆菌中的高效表达 被引量：4
2
作者 陆宇 赵晗 +4 位作者 王勤鹏 刘巍峰 肖敏 陈忠民 钱新民 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期241-246,共6页
短双歧杆菌 (Bifidobacteriumbreve 2 0 3)α_D_半乳糖苷酶基因 (aga1)被克隆到大肠杆菌温度诱导表达质粒pBV2 2 0中 ,构建重组质粒pBVaga1,转入大肠杆菌进行温度诱导表达 ,得到的重组酶Aga1在大肠杆菌DH5α、DH10B和BL2 1中的比活分别... 短双歧杆菌 (Bifidobacteriumbreve 2 0 3)α_D_半乳糖苷酶基因 (aga1)被克隆到大肠杆菌温度诱导表达质粒pBV2 2 0中 ,构建重组质粒pBVaga1,转入大肠杆菌进行温度诱导表达 ,得到的重组酶Aga1在大肠杆菌DH5α、DH10B和BL2 1中的比活分别为 2 8 0 8、19 4 4和 13 85U mg ,均高于短双歧杆菌α_D_半乳糖苷酶的比活 1 76U mg。重组质粒pBVaga1在E .coliBL2 1中稳定性较好。重组酶Aga1蛋白亚基分子量约 6 7kD ,最适反应温度为 4 5℃ ,酶在 4 0℃以下稳定 ,6 0℃仅剩余约 5 %的酶活性 ,70℃时酶全部失活 ;最适反应pH为 4 0～ 4 4 ,酶在pH 3 6～ 6 0范围内稳定 ;酶对p_硝基苯酚_α_半乳糖苷的Km =1 4 3mmol L ,Vmax=35 71μmol (L·min) ,对蜜二糖的Km =2 6 1mmol L ,Vmax=6 3 6 9μmol (L·min) ;酶在蜜二糖、棉子糖水解体系中不显示转糖基活性。结果说明Aga1与已经报道的一种短双歧杆菌的α_D_半乳糖苷酶不同 ,是新发现的一种短双歧杆菌的α_D_半乳糖苷酶。 展开更多
关键词 双歧杆菌 α-D-半乳糖苷酶 温度诱导表达
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皂荚种子发芽期间酶活及多糖结构与流变性质的比较研究 被引量：1
3
作者 裴滢莹 徐伟 +3 位作者 裴昕斐然 段久芳 陈殿松 蒋建新 《林产化学与工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期133-139,共7页
分别在25和35℃下模拟皂荚种子发芽过程,对比研究不同发芽时间下皂荚胚芽子叶和内胚乳内α-D-半乳糖苷酶的酶活及皂荚半乳甘露聚糖的分子质量、单糖含量和流变特性等理化性质。结果表明:25℃时皂荚内胚乳内α-D-半乳糖苷酶的酶活在3.45~... 分别在25和35℃下模拟皂荚种子发芽过程,对比研究不同发芽时间下皂荚胚芽子叶和内胚乳内α-D-半乳糖苷酶的酶活及皂荚半乳甘露聚糖的分子质量、单糖含量和流变特性等理化性质。结果表明:25℃时皂荚内胚乳内α-D-半乳糖苷酶的酶活在3.45~5.78 U/g上下波动(发芽第2~8天)后迅速增加至86.12 U/g(发芽第14天),35℃时皂荚内胚乳内α-D-半乳糖苷酶的酶活在3.31~9.24 U/g之间上下波动。皂荚胚芽子叶内α-D-半乳糖苷酶的酶活大多高于内胚乳内α-D-半乳糖苷酶的酶活。种子发芽前期,较高发芽温度(35℃)更有利于半乳甘露聚糖的降解。随着发芽时间的延长,皂荚半乳甘露聚糖的分子质量和表观黏度逐渐降低,25℃下溶液在第12天从假塑性流体转变为牛顿流体;皂荚半乳甘露聚糖中甘露糖和半乳糖的含量逐渐降低,甘露糖与半乳糖质量比值(M/G值)逐渐增加,35℃发芽第14天M/G值达到最大值为3.31,有望成为价格昂贵的刺槐豆胶半乳甘露聚糖的替代产品。 展开更多
关键词 皂荚半乳甘露聚糖 种子发芽 α-D-半乳糖苷酶 分子质量 流变特性
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短双歧杆菌(Bifidobacterium breve203)α-D-半乳糖苷酶的诱导合成及部分酶性质研究 被引量：2
4
作者 肖敏 刘树峰 +3 位作者 钱新民 田中敬子 山本宪二 熊谷英彦 《山东大学学报（自然科学版）》 CSCD 2000年第1期108-116,共9页
研究发现 2 5株所试肠道细菌中只有 6株双歧杆菌可以利用棉子糖良好生长 ,并且在棉子糖的诱导下产生α D 半乳糖苷酶 .9种不同糖中 ,Bifidobacter iumbreve 2 0 3可以利用葡萄糖、半乳糖、果糖、麦芽糖、乳糖、蜜二糖、棉子糖良好生长 ... 研究发现 2 5株所试肠道细菌中只有 6株双歧杆菌可以利用棉子糖良好生长 ,并且在棉子糖的诱导下产生α D 半乳糖苷酶 .9种不同糖中 ,Bifidobacter iumbreve 2 0 3可以利用葡萄糖、半乳糖、果糖、麦芽糖、乳糖、蜜二糖、棉子糖良好生长 ,但只有蜜二糖和棉子糖诱导α D 半乳糖苷酶的产生 .1 0mmol/L的棉子糖和蜜二糖对于α D 半乳糖苷酶的诱导合成是最佳浓度的 ,且此浓度下 ,棉子糖的诱导能力 (比活 7.1 3units/mg)是蜜二糖 (比活 3 .4 0units/mg)的 2倍以上 .B .breve 2 0 3菌株α D 半乳糖苷酶专一性水解α D 半乳糖苷键 ,不水解β D 半乳糖苷键 .酶反应的最适温度是 3 7℃ ,酶在 4 0℃以下稳定 ,60℃时剩余 80 %的酶活 ,65℃时剩余 2 0 %的酶活 ,70℃时失去所有的酶活 .酶在 pH5.5～ 9.5稳定 ,酶反应的最适pH是 5.5～ 6.5.Hg+、Cu2 +、Ag+和PCMB强烈抑制酶的活性 ,而Co2 +、Mg2 +、Ca2 +、Mn2 +、Zn2 +、EDTA和DTT对酶活性没有抑制 . 展开更多
关键词 双歧杆菌 α-D-半乳糖苷酶 诱导合成 酶性质
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联合转导人α1,3-半乳糖苷酶和α1,2-岩藻糖转移酶基因清除猪细胞表面异种抗原 被引量：6
5
作者 宫锋 章扬培 +3 位作者 贾延军 王颖丽 檀英霞 田曙光 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第22期2484-2488,共5页
猪细胞表面Galα1-3Galβ1-4GluNAc-R结构(称为αGal表位)是引起异种器官移植超急性排斥反应的主要原因,被称为主要异种抗原,由α1,3-半乳糖转移酶生成.α1,3-半乳糖苷酶特异性地水解αGal表位末端半乳糖,可清除这种主要异种抗原;α1,2... 猪细胞表面Galα1-3Galβ1-4GluNAc-R结构(称为αGal表位)是引起异种器官移植超急性排斥反应的主要原因,被称为主要异种抗原,由α1,3-半乳糖转移酶生成.α1,3-半乳糖苷酶特异性地水解αGal表位末端半乳糖,可清除这种主要异种抗原;α1,2-岩藻糖转移酶与α1,3-半乳糖转移酶竞争底物的作用也可使Galα1,3-Gal的生成量降低并阻止α1,3-半乳糖苷酶水解的产物重新生成Galα1,3-Gal,也具有清除主要异种抗原的作用.以猪胚胎成纤维细胞为靶细胞,联合转导人α1,3-半乳糖苷酶和α1,2-岩藻糖转移酶基因,获得的转基因细胞异种抗原清除率达84%,转基因细胞染色体数目和形态正常,为进一步获得低αGal抗原的体细胞克隆猪奠定了基础. 展开更多
关键词 异种器官移植 αGal抗原 α1-3半乳糖苷酶 α1-2岩藻糖转移酶
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用α-半乳糖苷酶制备可供输注的人通用型O型红细胞 被引量：18
6
作者 宫锋 吕秋霜 +10 位作者 由英 高红伟 鲍国强 高新 李素波 李立立 王颖丽 田曙光 张志欣 张评 章扬培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期313-316,共4页
研究的目的是将人群中28％的B型血改造成通用O型血,提高O型血的储存和使用比例,以缓解战争、 恐怖袭击、突发事件等紧急状态下对O型血的大量需求。用α-1.3半孔糖苷酶作为B→O血型改造的工具酶,摸索 改造一个使用单位B型血红细胞(100 ml... 研究的目的是将人群中28％的B型血改造成通用O型血,提高O型血的储存和使用比例,以缓解战争、 恐怖袭击、突发事件等紧急状态下对O型血的大量需求。用α-1.3半孔糖苷酶作为B→O血型改造的工具酶,摸索 改造一个使用单位B型血红细胞(100 ml)的最佳条件。结果实现了在密闭、无菌条件下使用50 U／ml工具酶,pH 5.6,26℃ 2小时,进行B→O的血型改造。结论:改造后的通用型O型血红细胞符合生物制品检定规程的要求, 并可在4℃存放21天。 展开更多
关键词 输血 O型红细胞 α-1.3半乳糖苷酶 血型改造 B→O血型改造
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酶在玉米—豆粕日粮中的应用研究进展 被引量：13
7
作者 张铁鹰 汪儆 《动物营养学报》 CAS CSCD 2003年第2期6-10,共5页
本文综述了NSP酶、α—半乳糖苷酶、植酸酶、淀粉酶、蛋白酶及复合酶等对玉米—豆粕日粮养分消化率和畜禽生产性能影响的研究进展。大多数的研究结果表明 ,在玉米—豆粕型日粮中添加酶能够不同程度地提高养分消化率和畜禽生产性能 ,但... 本文综述了NSP酶、α—半乳糖苷酶、植酸酶、淀粉酶、蛋白酶及复合酶等对玉米—豆粕日粮养分消化率和畜禽生产性能影响的研究进展。大多数的研究结果表明 ,在玉米—豆粕型日粮中添加酶能够不同程度地提高养分消化率和畜禽生产性能 ,但在玉米—豆粕型日粮中进一步推广应用 。 展开更多
关键词 玉米-豆粕日粮 应用 NSP酶 α-半乳糖苷酶 植酸酶 淀粉酶 蛋白酶 复合酶 养分消化率 生产性能
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对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖法测定饲用α-半乳糖苷酶(黑曲霉)活力的方法 被引量：14
8
作者 潘宝海 李德发 +1 位作者 陆文清 代建国 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期107-111,共5页
旨在建立一种适合于测定饲用α-半乳糖苷酶活力的检测方法。实验利用对硝基酚 -α- D-吡喃半乳糖(p- NPG)作为酶反应底物 ,通过 4 0 0 nm比色检测酶反应所释放的对硝基酚的量来测定饲用酶制剂中 α-半乳糖苷酶的活性。研究表明 ,反应液... 旨在建立一种适合于测定饲用α-半乳糖苷酶活力的检测方法。实验利用对硝基酚 -α- D-吡喃半乳糖(p- NPG)作为酶反应底物 ,通过 4 0 0 nm比色检测酶反应所释放的对硝基酚的量来测定饲用酶制剂中 α-半乳糖苷酶的活性。研究表明 ,反应液中所含的对硝基酚的量大于 15 μmol.m L-1时 ,吸光值超过仪器的检测范围 ;酶制剂稀释倍数对对硝基酚比色法的影响较小 ,本底占总酶活的 10 %～ 16 % ,当酶稀释 10 0倍时 ,本底对酶活的影响最小 ;在测定酶活反应时间为 6 min时 ,已经有约 10 %的对硝基酚 - α- D-吡喃半乳糖水解 ,当酶液的酶活在 2 .0 U.m L-1以内 ,测试结果较为准确。考虑到饲用酶制剂的作用环境 ,建议反应温度为 37℃、反应体系 p H 5 .0。 展开更多
关键词 对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖法 测定 α-半乳糖苷酶 黑曲霉 饲用酶制剂 检测方法 酶活力
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11个Fabry病家系的α-半乳糖苷酶A活性及GLA基因检测 被引量：17
9
作者 陈佳韵 潘晓霞 +6 位作者 吕轶伦 王朝晖 王伟铭 任红 张文 翁崎峻 陈楠 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期302-307,共6页
目的 建立Fabry病α-半乳糖苷酶A（α-gal A）酶活性及基因检测体系,并对基因型临床表型进行分析。方法 检测11个Fabry病家系先证者及家系成员外周血粒细胞α-gal A活性及GLA基因。酶活性检测采用底物荧光法,基因检测采用PCR直接测序法... 目的 建立Fabry病α-半乳糖苷酶A（α-gal A）酶活性及基因检测体系,并对基因型临床表型进行分析。方法 检测11个Fabry病家系先证者及家系成员外周血粒细胞α-gal A活性及GLA基因。酶活性检测采用底物荧光法,基因检测采用PCR直接测序法,并进行临床评估。结果 在11个Fabry病家系中检出9种GAL基因突变,包括5个错义突变（R301Q、I91T、G132R、F273L、D165Y）,2个无义突变（W236X、R342X）,1个单碱基缺失（1082delG）和1个大片段缺失（44 bp nt．1077）,其中4种为新突变（D165Y、F273L、1082delG、44 bp nt．1077）。11个家系中通过基因及酶活性检测,确诊男性半合子13例,女性杂合子12例。男性半合子α-gal A酶活性显著下降,女性杂合子α-gal A酶活性部分下降,1/4女性杂合子的α-gal A酶活性处于正常范围内。结论 确诊了11个Fabry病家系的GLA基因突变类型,并筛出所有家系中先证者以外的患者14例。外周血粒细胞α-gal A酶活性和GAL基因检测是筛查和诊断Fabry病的有效手段。 展开更多
关键词 FABRY病 GLA基因 突变 α-半乳糖苷酶A
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α-半乳糖苷酶的研究进展概况 被引量：12
10
作者 杨冠东 刘芳 李荷 《现代食品科技》 EI CAS 2006年第3期275-276,279,共3页
论述了α-半乳糖苷酶性质、应用及国内外的研究概况,并简单介绍了本实验室利用生物技术将毛霉中克隆到的α-半乳糖苷酶基因转化至酵母高效表达的研究情况。
关键词 α-半乳糖苷酶 克隆 高效表达
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血型转变 被引量：15
11
作者 章扬培 季守平 +2 位作者 杨军 宫锋 由英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期91-97,共7页
本文描述了人血红细胞表面分子结构及其基因,介绍了有关血型转变的研究进展。从绿色咖啡豆中制备的α-半乳糖苷酶可以将B型血转变为O型血。体外研究证明了转型后的红细胞的完整性,正常活存率,呈现O型血的免疫特征。人Ⅰ期临床实验证明,... 本文描述了人血红细胞表面分子结构及其基因,介绍了有关血型转变的研究进展。从绿色咖啡豆中制备的α-半乳糖苷酶可以将B型血转变为O型血。体外研究证明了转型后的红细胞的完整性,正常活存率,呈现O型血的免疫特征。人Ⅰ期临床实验证明,转型后的B型红细胞可以安全地输给A型和O型血的自愿受试者。用mPEG包裹人血红细胞制备的通用型血,也能应用于临床输血。 展开更多
关键词 输血 血型 血型转变 α-半乳糖苷酶 mPEG包裹
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豆粕和棉粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响 被引量：15
12
作者 BUN Sidoeun 呙于明 +3 位作者 张炳坤 袁建敏 胡骁飞 张立彬 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2009年第15期25-28,64,共5页
试验研究了豆粕日粮和含5%～8%棉粕的日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响及可能机制。试验Ⅰ为肉仔鸡饲养试验,选用1日龄AA商品代肉仔鸡公雏672只,随机分为4个处理,每个处理12个重复,每个重复14只鸡,试验期42d。结果表明:... 试验研究了豆粕日粮和含5%～8%棉粕的日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响及可能机制。试验Ⅰ为肉仔鸡饲养试验,选用1日龄AA商品代肉仔鸡公雏672只,随机分为4个处理,每个处理12个重复,每个重复14只鸡,试验期42d。结果表明:在棉粕和豆粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对42日龄肉仔鸡体增重分别提高了4.35%和3.49%。试验Ⅱ为排空强饲代谢试验。结果显示:豆粕日粮中添加α-半乳糖苷酶增加蛋公鸡色氨酸真消化率(P<0.001),对其他氨基酸消化率无影响。添加α-半乳糖苷酶的豆粕的,真代谢能值与不添加酶的相比,提高了4.69%(0.51MJ/kg)。本研究表明,在玉米-豆粕型日粮中添加α-半乳糖苷酶,提高了色氨酸真消化率和真代谢能,有利于提高肉仔鸡生长性能。 展开更多
关键词 α-半乳糖苷酶 生长性能 氨基酸消化率 代谢能 豆粕 棉粕 肉仔鸡
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α-半乳糖苷酶的研究进展 被引量：15
13
作者 郝桂娟 张凯 +4 位作者 王学智 张景艳 孟嘉仁 杨志强 李建喜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期149-154,共6页
α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将饲料及豆制食品中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善其营养成分。α-半乳糖苷酶在底物浓度富集的情况下还具有转半乳糖基作用,这一特点可用于低聚糖的合成及环糊精的改造。此外,该酶在... α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将饲料及豆制食品中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善其营养成分。α-半乳糖苷酶在底物浓度富集的情况下还具有转半乳糖基作用,这一特点可用于低聚糖的合成及环糊精的改造。此外,该酶在制药、增稠剂处理和造纸工业也有一定应用。现作者对α-半乳糖苷酶的研究和应用现状,以及α-半乳糖苷酶的研究方向和应用前景进行了总结和评价。 展开更多
关键词 α-半乳糖苷酶 特点 应用 研究进展
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日粮中添加α-半乳糖苷酶对黄羽肉鸡生产性能的影响及相关机理研究 被引量：15
14
作者 戴求仲 张民 《饲料工业》 北大核心 2010年第6期19-25,共7页
试验选择1日龄快长型黄羽肉鸡500只,随机分为5个处理,每处理设4个重复,每个重复25只鸡。试验设正、负对照(I、II)日粮,试验日粮分别在负对照日粮基础上每吨添加100、150和200mlα-半乳糖苷酶,目的是研究日粮添加α-半乳糖苷酶制剂对快... 试验选择1日龄快长型黄羽肉鸡500只,随机分为5个处理,每处理设4个重复,每个重复25只鸡。试验设正、负对照(I、II)日粮,试验日粮分别在负对照日粮基础上每吨添加100、150和200mlα-半乳糖苷酶,目的是研究日粮添加α-半乳糖苷酶制剂对快长型黄羽肉鸡生产性能的影响及相关机理。结果表明,日粮中添加α-半乳糖苷酶对试验鸡平均日增重、日采食量、前期料重比和全期存活率无显著影响(P>0.05),但显著降低试验鸡后期和全期料重比(P<0.05)。试验鸡屠宰率、全净膛率各组间差异不显著(P>0.05),但不加α-半乳糖苷酶的负对照组半净膛率明显较高(P<0.05),分别比正对照组、试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组高3.06%(P<0.05)、0.03%(P>0.05)、1.22%(P>0.05)、2.01%(P>0.05);正对照组腹脂率最高,分别比负对照组和试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组高8.18%(P>0.05)、20.91%(P<0.05)、47.45%(P<0.01)和23.80%(P<0.05)。加酶各组试验鸡血液中血糖浓度均高于正、负对照组,但各处理组间仅试验Ⅲ和Ⅴ组达到显著水平(P<0.05);血浆尿素氮含量以负对照组最高,而血液中T3、T4、胰岛素(INS)和生长激素(GH)浓度却以负对照组最低;与不加酶的正、负对照相比,添加不同剂量的α-半乳糖苷酶制剂均提高了肉鸡血液中分泌型免疫球蛋白IgΑ和IgM的含量。消化试验结果表明,添加α-半乳糖苷酶制剂的各组日粮干物质、蛋白质和氨基酸的消化率均有不同程度提高,但各组间差异不显著(P>0.05);与不加酶的负对照相比,添加不同剂量的α-半乳糖苷酶制剂分别提高了肉鸡能量表观代谢率2.44、2.72和3.0个百分点,即分别提高日粮代谢能0.18MJ/kg(43kcal/kg)、0.22MJ/kg(53kcal/kg)和0.26MJ/kg(62kcal/kg)。后肠微生物分析发现,日粮中添加α-半乳糖苷酶制剂显著降低了后肠大肠杆菌数(P<0.05),增加了双歧杆菌数和乳酸菌数(P<0.05),其中大肠杆菌数随α-半乳糖苷酶添加剂量的增加呈递减趋� 展开更多
关键词 α-半乳糖苷酶 生产性能 作用机理 黄羽肉鸡
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α-半乳糖苷酶对断奶仔猪生产性能、血液生化指标和营养物质消化率的影响 被引量：14
15
作者 蒋小丰 戴求仲 +2 位作者 蒋桂韬 徐运杰 方热军 《家畜生态学报》 2009年第6期44-49,共6页
在研究日粮中添加不同剂量的α-半乳糖苷酶,分析其对断奶仔猪生产性能、血液生化指标和营养物质消化率的影响。试验选用90头健康的37日龄(30日龄断奶)大约克纯种断奶仔猪,体重(11.05±1.97)kg。试验猪随机分为5个处理,Ⅰ组为对照组... 在研究日粮中添加不同剂量的α-半乳糖苷酶,分析其对断奶仔猪生产性能、血液生化指标和营养物质消化率的影响。试验选用90头健康的37日龄(30日龄断奶)大约克纯种断奶仔猪,体重(11.05±1.97)kg。试验猪随机分为5个处理,Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ为试验组,试验组分别在基础日粮中添加100 mL/t1、50 mL/t、200 mL/t2、50 mL/t的α-半乳糖苷酶。结果表明,加酶组平均日增重、平均日采食量、血清总蛋白和IgG呈现上升的趋势(P>0.05);料肉比、腹泻率和尿素氮呈下降的趋势(P>0.05);粗纤维的消化率显著提高(P<0.05),能量消化率Ⅱ组和Ⅴ组消化率显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,玉米-豆粕型日粮中添加α-半乳糖苷酶对断奶仔猪的生产性能和血液生化指标均有一定的改善作用,同时α-半乳糖苷酶能提高蛋白质的利用率,促进抗体合成,提高粗纤维、粗脂肪、粗蛋白和能量的表观消化率,添加剂量为200 mL/t时效果最好。 展开更多
关键词 α-半乳糖苷酶 玉米-豆粕型日粮 断奶仔猪 血清
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基因工程α-半乳糖苷酶的制备及其性质研究 被引量：14
16
作者 高新 杨军 +2 位作者 李素波 刘泽澎 章扬培 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期223-226,共4页
在获得可分泌表达α 半乳糖苷酶基因工程毕赤酵母菌株的基础上 ,尝试了基因工程α 半乳糖苷酶在 5L发酵罐中的表达以及从发酵液中纯化α 半乳糖苷酶的研究。在 4L无机盐培养基中接种 0 .4LpPIC9K Gal GS115培养物 ,最终得到 3 .5L发酵... 在获得可分泌表达α 半乳糖苷酶基因工程毕赤酵母菌株的基础上 ,尝试了基因工程α 半乳糖苷酶在 5L发酵罐中的表达以及从发酵液中纯化α 半乳糖苷酶的研究。在 4L无机盐培养基中接种 0 .4LpPIC9K Gal GS115培养物 ,最终得到 3 .5L发酵液。离心所得上清中总蛋白含量为 2 .1g L。根据发酵液中目的蛋白含量高、杂质少等特点 ,设计了如下的纯化流程 :离心→超滤→阳离子交换层析→脱盐→浓缩。纯化后电泳银染结果呈单一蛋白带 ,总回收率 41%。通过测定米氏常数等生化性质对重组酶进行鉴定后 ,完成了人B型红细胞的酶解实验。结果表明 ,从发酵液中纯化的α 半乳糖苷酶可将B型红细胞改造成O型红细胞。本研究同时在数量和质量上为α 半乳糖苷酶在众多领域的广泛应用奠定了基础。 展开更多
关键词 基因工程 α—半乳糖苷酶 制备 性质 血型改造 发酵
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人α-半乳糖苷酶、α-1,2-岩藻糖转移酶cDNA序列转染克服异种移植超急性排斥反应 被引量：10
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作者 贾延军 任会明 +5 位作者 高新 季守平 杨军 刘泽鹏 李素波 章扬培 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期515-519,共5页
半乳糖α 1,3 半乳糖抗原是引起异种器官移植超急性排斥反应 (hyperacuterejection ,HAR)的主要抗原 .α 半乳糖苷酶和α 1,2 岩藻糖转移酶基因可以以不同的方式降低半乳糖α 1,3 半乳糖抗原在内皮细胞表面的表达量 .将人α 半乳糖... 半乳糖α 1,3 半乳糖抗原是引起异种器官移植超急性排斥反应 (hyperacuterejection ,HAR)的主要抗原 .α 半乳糖苷酶和α 1,2 岩藻糖转移酶基因可以以不同的方式降低半乳糖α 1,3 半乳糖抗原在内皮细胞表面的表达量 .将人α 半乳糖苷酶基因和α 1,2 岩藻糖转移酶基因单独或连接在一起导入猪血管内皮细胞PEDSV .15中 ,检测细胞表面的抗原及异种天然抗体对细胞杀伤作用 .结果表明α 半乳糖苷酶基因可以将猪血管内皮细胞表面的半乳糖α 1,3 半乳糖抗原清除 74 13%,而α 1,2 岩藻糖转移酶基因也可以清除 4 7 75 %的细胞表面异种抗原 ,但二者都不能达到完全清除的目的 .当α 半乳糖苷酶和α 1,2 岩藻糖转移酶双基因在内皮细胞内共表达时 ,则可以基本清除半乳糖α 1,3 半乳糖抗原 .抗原的减少也可以相应地减弱内皮细胞对异种天然抗体介导的杀伤作用的敏感性 ,尤其是双基因共表达时细胞基本不被杀伤 .结果表明 ,α 半乳糖苷酶基因和α 1,2 岩藻糖转移酶基因可以有效地清除血管内皮细胞表面的半乳糖α 1,3 半乳糖抗原 ,克服HAR的发生 ,为下一步进行动物实验 。 展开更多
关键词 α-半乳糖苷酶 α-1 2-岩藻糖转移酶 cDNA序列转染 异种移植 超急性排斥反应
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皂荚多糖胶α-半乳糖苷酶修饰及产物性能研究 被引量：11
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作者 蒋建新 朱莉伟 +1 位作者 王磊 张卫明 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 2007年第5期44-48,共5页
皂荚多糖胶(GPG)和刺槐豆胶都属于半乳甘露聚糖型多糖胶。当多糖水溶液质量分数1%,皂荚多糖胶(半乳糖质量分数28.6%)与黄原胶的共混质量比为7∶3,其凝胶强度为103 g/cm2。刺槐豆胶(半乳糖质量分数20%)与黄原胶的共混凝胶强度最大,也是... 皂荚多糖胶(GPG)和刺槐豆胶都属于半乳甘露聚糖型多糖胶。当多糖水溶液质量分数1%,皂荚多糖胶(半乳糖质量分数28.6%)与黄原胶的共混质量比为7∶3,其凝胶强度为103 g/cm2。刺槐豆胶(半乳糖质量分数20%)与黄原胶的共混凝胶强度最大,也是价格最高的半乳甘露聚糖胶。重点研究了α-半乳糖苷酶修饰皂荚多糖胶(EMGPG)得到与刺槐豆胶相似结构的半乳甘露聚糖,酶转化反应的最适宜底物质量分数从37℃的3%提高到50℃时的35%。20.2%半乳糖含量的酶法改性皂荚多糖胶与黄原胶共混后的凝胶强度为199 g/cm2,大于刺槐豆胶与黄原胶的共混凝胶强度(193 g/cm2)。X射线衍射分析表明,酶法改性皂荚多糖胶结晶度下降。 展开更多
关键词 皂荚 多糖胶 α-半乳糖苷酶 凝胶化
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鲜地黄中α-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶的提取与初步纯化 被引量：8
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作者 赵宇 温学森 +1 位作者 崔晶 武卫红 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期137-139,共3页
目的:从鲜地黄中提取并初步纯化α-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶。方法:以总酶活为考察指标,通过正交试验确定两种酶的最佳提取条件。以酶活力和蛋白质含量为考察指标,确定两步盐析法的硫酸铵饱和度。结果:提取温度和溶剂量对α-Gal的提... 目的:从鲜地黄中提取并初步纯化α-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶。方法:以总酶活为考察指标,通过正交试验确定两种酶的最佳提取条件。以酶活力和蛋白质含量为考察指标,确定两步盐析法的硫酸铵饱和度。结果:提取温度和溶剂量对α-Gal的提取具有显著性影响,而提取溶剂对-βG lu的提取具有显著性影响,因此确定以3倍量(v/w)磷酸盐缓冲液,4℃提取4 h为两种酶的最佳提取条件。以30%和60%为两步盐析的最佳硫酸铵饱和点。结论:鲜地黄中存在α-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶,两步盐析法可以使二者得到初步纯化。 展开更多
关键词 地黄 α-半乳糖苷酶 β-葡萄糖甘酶
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α-半乳糖苷酶和木聚糖酶在断奶仔猪日粮中的应用效果评价 被引量：12
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作者 边连全 白东伟 +1 位作者 刘显军 李建涛 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期437-443,共7页
本试验旨在研究α-半乳糖苷酶和木聚糖酶对断奶仔猪生长性能和消化性能的影响。选用135头平均体重为(7.4±0.8)kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,设9个组,每组3个重复,每个重复5头猪,采用3×3两因子完全交叉试验设计,设... 本试验旨在研究α-半乳糖苷酶和木聚糖酶对断奶仔猪生长性能和消化性能的影响。选用135头平均体重为(7.4±0.8)kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,设9个组,每组3个重复,每个重复5头猪,采用3×3两因子完全交叉试验设计,设3个α-半乳糖苷酶水平(0、0.008%和0.012%)和3个木聚糖酶水平(0、0.008%和0.012%)。试验期为28d,分为前期(1～14d)和后期(15～28d)2个阶段。试验结果表明:1)添加α-半乳糖苷酶和木聚糖酶对断奶仔猪前期和全期的平均日增重、料重比和腹泻率有显著影响(P<0.05);对断奶仔猪后期的平均日增重、平均日采食量和料重比有显著影响(P<0.05);其中添加0.008%的α-半乳糖苷酶和0.008%的木聚糖酶可显著提高断奶仔猪的平均日增重和平均日采食量,显著降低料重比和腹泻率(P<0.05);2)添加α-半乳糖苷酶和木聚糖酶可以提高断奶仔猪各种养分的消化率,其中粗蛋白质、粗脂肪和粗纤维的消化率达到了显著效果(P<0.05)。由结果可知,α-半乳糖苷酶和木聚糖酶可一定程度上提高断奶仔猪生长性能和消化性能,以添加0.008%α-半乳糖苷酶和0.008%木聚糖酶的效果最好,且两者存在互作效应。 展开更多
关键词 α-半乳糖苷酶 木聚糖酶 断奶仔猪 生长性能 消化性能
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