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巢式PCR法在早期梅毒诊断中的应用评价 被引量：5
1
作者 雷震山 杜剑强 +2 位作者 吴少琴 张勤国 尹云华 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第23期4529-4531,4590,共4页
目的:评价巢式PCR(nPCR)法在早期梅毒诊断中的临床应用价值,以提高早期梅毒诊断的灵敏度和特异性。方法:选择2010年10月至2011年11月来我院就诊,经临床综合分析为一期梅毒的患者195例和同期就诊的120例非梅毒患者为研究对象,采用nPCR法... 目的:评价巢式PCR(nPCR)法在早期梅毒诊断中的临床应用价值,以提高早期梅毒诊断的灵敏度和特异性。方法:选择2010年10月至2011年11月来我院就诊,经临床综合分析为一期梅毒的患者195例和同期就诊的120例非梅毒患者为研究对象,采用nPCR法对棉拭子标本和血液标本中梅毒螺旋体特异性基因tpp47进行扩增检测,所有标本同时做暗视野镜检和Tp-ELISA血清学检测。结果:nPCR法共检测出阳性标本176例,其灵敏度和特异性分别为90.3%和100%,明显高于暗视野镜检和Tp-ELISA法,差异有统计学意义。结论:nPCR法在早期梅毒诊断中具有较高灵敏度和特异性,可以作为暗视野镜检和血清学检测的补充试验。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体 巢式PCR 早期梅毒 tpp47
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梅毒螺旋体膜蛋白Tpp47对血管内皮细胞黏附功能影响的实验研究 被引量：3
2
作者 张瑞丽 王千秋 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期328-332,共5页
目的探讨梅毒螺旋体膜蛋白Tpp47对血管内皮细胞的作用。方法利用基因工程技术重组合成的梅毒螺旋体膜蛋白rrpp47及脂多糖分别刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC），ELISA检测上清中细胞间黏附分子1（ICAM-1）及E选择素的水平；荧光定量PCR检... 目的探讨梅毒螺旋体膜蛋白Tpp47对血管内皮细胞的作用。方法利用基因工程技术重组合成的梅毒螺旋体膜蛋白rrpp47及脂多糖分别刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC），ELISA检测上清中细胞间黏附分子1（ICAM-1）及E选择素的水平；荧光定量PCR检测HUVEC中ICAM-1及E选择素mRNA的转录水平；M1Tr法检测HUVEC增殖水平；将重组蛋白Tpp47及脂多糖预处理的HUVEC与钙黄绿素AM标记的THP-1细胞共培养，荧光倒置显微镜下观察HUVEC与THP-1细胞的黏附情况。结果梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47刺激HUVEC后，其分泌的黏附分子ICAM-1（1．28±0．03）及E选择素（0．51±0．01）水平显著提高，与空白对照组（0．90±0．01与0．13±0．03）比较，差异均有统计学意义（t值分别为18．28和18．19，均P〈0．05）；将重组蛋白Tpp47刺激24h后的HUVEC与THP-1细胞共培养，HUVEC与THP-1细胞的黏附率为56．1％±1．9％，较空白对照组（16．3％±2．1％）明显提高，差异有统计学意义（r=12．65，P〈0．05）。M1Tr试验结果显示，重组蛋白Tpp47刺激HUVEC后，其增殖率（19．5％±1．7％）高于空白对照组（10．0％±3．1％），差异有统计学意义（X^2=3．92，P〈0．05）；较脂多糖低（41．2％±3．7％），差异有统计学意义（X^2=10．42，P〈0．05）。结论梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47可体外上调HUVEC与THP-1的黏附能力及促进HUVEC增殖，可能在梅毒的发病中起一定作用。 展开更多
关键词 密螺旋体 苍白 细胞黏附分子 E选择素 tpp47 人脐静脉内皮细胞 THP-1细胞
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梅毒螺旋体膜蛋白Tpp17和Tpp47引起的免疫反应及信号通路 被引量：3
3
作者 孙冉 连石 +1 位作者 朱威 张海萍 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期573-575,共3页
梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)是引起梅毒的病原体。Tp外膜不含有脂多糖(LPS),但含有丰富的脂蛋白。研究表明外膜脂蛋白Tpp17、Tpp47具有高度免疫原性。该文就Tpp17和Tpp47的免疫反应及信号通路作一综述。
关键词 梅毒螺旋体 tpp17 tpp47
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梅毒螺旋体膜蛋白Tpp47通过RhoA／ROCK信号通路调控血管内皮细胞通透性 被引量：1
4
作者 张瑞丽 王千秋 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期21-25,共5页
目的 探讨梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47对血管内皮细胞通透性影响的调控机制。 方法 用人脐静脉内皮细胞（HUVEC）构建细胞单层模型，重组蛋白Tpp47（rTpp47）直接与HUVEC单层模型混合培养，或RhoA/ROCK信号通路特异性抑制剂Y-27632预处... 目的 探讨梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47对血管内皮细胞通透性影响的调控机制。 方法 用人脐静脉内皮细胞（HUVEC）构建细胞单层模型，重组蛋白Tpp47（rTpp47）直接与HUVEC单层模型混合培养，或RhoA/ROCK信号通路特异性抑制剂Y-27632预处理后再用rTpp47刺激HUVEC单层模型，以煮沸灭活的rTpp47处理HUVEC单层模型为阴性对照组，采用ELISA检测各组培养1、4 h时辣根过氧化物酶（HRP）流量，培养12 h用荧光染料罗丹明-鬼笔环肽染色细胞骨架系统，共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F肌动蛋白排列变化。用Western 印迹检测rTpp47与煮沸灭活的rTpp47分别处理HUVEC单层模型后细胞RhoA的表达水平。 结果 rTpp47刺激HUVEC单层模型1 h时HRP流量（0.81 ± 0.10）高于阴性对照组（0.39 ± 0.09），差异有统计学意义（P 〈 0.05），而此时Y-27632预处理组HRP流量（0.51 ± 0.10）与单用rTpp47刺激组及阴性对照组相比，差异无统计学意义（均P 〉 0.05）。培养4 h时，单用rTpp47刺激组HRP流量显著增加（2.31 ± 0.14），且高于Y-27632预处理组（1.21 ± 0.12）及阴性对照组（0.73 ± 0.12），差异有统计学意义（均P 〈 0.05），而Y-27632预处理组与阴性对照组之间差异无统计学意义。rTpp47刺激HUVEC后，与煮沸灭活的rTpp47作用HUVEC相比，细胞中RhoA表达增加。同时，rTpp47刺激细胞中骨架蛋白F肌动蛋白重排，在胞质中形成应力纤维，抑制剂Y-27632可部分抑制F肌动蛋白重排。 结论 梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47可通过RhoA/ROCK信号转导通路调控血管内皮细胞通透性。 展开更多
关键词 苍白密螺旋体 内皮 血管 通透性 脐静脉 肌动蛋白 tpp47 RhoA/ROCK信号通路
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两种巢氏PCR方法检测二期梅毒血液标本的比较 被引量：1
5
作者 肖勇健 刘卓然 +2 位作者 李蓓 刘斌 彭菁 《实用预防医学》 CAS 2016年第8期904-907,共4页
目的比较两种巢氏PCR方法在检测二期梅毒患者血液标本中的价值。方法针对tpp47和pol A,分别建立两个巢氏PCR扩增全血中的梅毒螺旋体DNA。结果在353例梅毒阳性全血中,n PCR-tpp47和n PCR-pol A分别检出142例(40.2%)和132例(37.4%),结果... 目的比较两种巢氏PCR方法在检测二期梅毒患者血液标本中的价值。方法针对tpp47和pol A,分别建立两个巢氏PCR扩增全血中的梅毒螺旋体DNA。结果在353例梅毒阳性全血中,n PCR-tpp47和n PCR-pol A分别检出142例(40.2%)和132例(37.4%),结果差异有统计学意义(χ2=5.79,P<0.05);两种巢氏PCR在血清学试验高滴度(RPR≥1:8或TPPA≥1:2 560)组的检出率明显高于低滴度组(RPR<1:8或TPPA<1:2 560)。结论在检测二期梅毒全血标本Tp DNA时,n PCR-tpp47优于n PCR-pol A;巢氏PCR方法可作为梅毒血清学试验的补充试验。 展开更多
关键词 巢氏PCR 二期梅毒 全血 tpp47 POL A
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