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敲除Fto基因对糖尿病小鼠主动脉平滑肌收缩及钙调控异常的作用研究
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作者 郑燕湘 蔡泳江 +4 位作者 王梓帆 邝素娟 杨慧 饶芳 邓春玉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期204-212,共9页
目的:探讨脂肪质量和肥胖相关基因(fat mass and obesity-associated gene,Fto)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠主动脉平滑肌收缩功能异常的影响及其钙调控的作用机制。方法:利用Cre-loxP重组技术制备平滑肌特异性Fto基因敲除(smoot... 目的:探讨脂肪质量和肥胖相关基因(fat mass and obesity-associated gene,Fto)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠主动脉平滑肌收缩功能异常的影响及其钙调控的作用机制。方法:利用Cre-loxP重组技术制备平滑肌特异性Fto基因敲除(smooth muscle-specific Fto gene knockout,Fto^(SMKO))小鼠。实验分3组:野生型(wild-type,WT)组、DM模型组和Fto^(SMKO-DM)组,每组各15只。Fto^(SMKO-DM)组和DM组小鼠通过腹腔注射链脲佐菌素制备1型DM模型;WT组小鼠注射等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。应用离体血管环张力测定技术,观察不同药物对3组小鼠主动脉平滑肌收缩反应的影响;采用Western blot技术检测小鼠主动脉组织FTO蛋白的表达水平。结果:(1)DM小鼠主动脉FTO蛋白的表达显著升高(P<0.01)。(2)平滑肌特异性敲除Fto后,FTO蛋白基本不表达(P<0.01);DM组与WT组相比,空腹血糖水平显著升高(P<0.01),体重显著下降(P<0.05);Fto^(SMKO-DM)组与DM组相比,小鼠的体重和空腹血糖水平无显著差异(P>0.05)。(3)DM组与WT组相比,苯肾上腺素诱导的主动脉平滑肌收缩反应性增强;其中,非L型钙通道和钙库操纵性钙通道(store-operated calcium channels,SOCC)介导的血管平滑肌收缩反应增强;1,4,5-三磷酸肌醇受体(inositol 1,4,5-trisphosphate receptors,IP3R)介导肌浆网钙释放引起的血管平滑肌收缩反应增强;咖啡因激活兰尼碱受体(ryanodine receptors,RyR)介导肌浆网钙释放诱导的血管平滑肌收缩反应减弱(P<0.05)。(4)Fto^(SMKO-DM)组与DM组相比,苯肾上腺素诱导的主动脉平滑肌收缩反应性显著降低;其中,非L型钙通道和SOCC介导钙内流诱导的血管平滑肌收缩反应显著降低(P<0.05);咖啡因激活RyR介导肌浆网钙释放诱导的血管平滑肌收缩反应显著上升(P<0.05),而IP3R介导肌浆网钙释放诱导的血管平滑肌收缩反应不受影响(P>0.05)。结论:特异性敲除平滑肌Fto基因可降低DM小鼠主动脉平滑肌收缩高反� 展开更多
关键词 Fto基因 1型糖尿病 主动脉 钙库操纵性钙通道 肌浆网钙释放
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钙库调控钙离子通道在瑞芬太尼诱发切口痛觉过敏中的作用 被引量:6
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作者 周珍辉 茆梦 朱伟 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期403-408,共6页
目的探讨钙库调控钙离子通道(SOCC)在瑞芬太尼诱发的切口痛觉过敏中的作用。方法雄性SD大鼠36只,2~3个月龄,体重360~380 g,采用随机数字表法分为四组:对照组(C组,n=8)、切口痛组(I组,n=9)、切口痛+瑞芬太尼组(IR组,n=9)、切口痛+瑞芬太... 目的探讨钙库调控钙离子通道(SOCC)在瑞芬太尼诱发的切口痛觉过敏中的作用。方法雄性SD大鼠36只,2~3个月龄,体重360~380 g,采用随机数字表法分为四组:对照组(C组,n=8)、切口痛组(I组,n=9)、切口痛+瑞芬太尼组(IR组,n=9)、切口痛+瑞芬太尼+SOCC抑制剂(YM-58483)组(Y组,n=10)。IR组和Y组尾静脉泵注瑞芬太尼1μg·kg^(-1)·min^(-1),持续60 min;C组和I组尾静脉泵注生理盐水0.1 ml·kg^(-1)·min^(-1),持续60 min。I组、IR组和Y组于给药后10 min于右后足底做一切口,于给药前24 h(T 0)、给药后2 h(T_(1))、6 h(T_(2))、24 h(T_(3))、48 h(T_(4))测定大鼠热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足阈值(MWT)。Y组于每次行为学测试前2 h鞘内注射10μl浓度为1000μmol/L的SOCC抑制剂YM-58483,其余各组注射等容量溶剂PEG300。取L 4-6节段脊髓,采用免疫荧光组织化学法检测脊髓背角SOCC主要蛋白基质相互作用分子1(STIM1)和Orai1阳性细胞计数,采用Western blot法检测脊髓背角STIM1和Orai1以及磷酸化的钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱα(p-CaMKⅡα,CaMKⅡα的激活状态)蛋白含量。结果与C组比较,T_(1)—T_(4)时IR组TWL明显缩短、MWT明显降低(P<0.05),I组、IR组和Y组脊髓背角STIM1和Orai1阳性信号细胞数、STIM1和Orai1蛋白含量、脊髓p-CaMKⅡα蛋白含量明显增加(P<0.05)。与I组比较,IR组和Y组脊髓背角STIM1和Orai1阳性信号细胞数、STIM1和Orai1蛋白含量、IR组脊髓p-CaMKⅡα蛋白含量明显增加(P<0.05)。与IR组比较,Y组T_(1)—T_(4)时TWL明显延长(P<0.05),T_(2)—T_(4)时MWT明显升高(P<0.05),Y组脊髓p-CaMKⅡα蛋白含量明显减少(P<0.05)。结论SOCC蛋白含量增加参与了瑞芬太尼诱发切口痛觉过敏的形成,鞘内注射SOCC抑制剂YM-58483明显减少了p-CaMKⅡα蛋白含量,改善了大鼠由瑞芬太尼诱发的切口痛觉过敏,提示脊髓中SOCC通路通过磷酸化CaMKⅡα参与了瑞芬太尼诱发切口痛觉过敏的形成。 展开更多
关键词 瑞芬太尼 痛觉过敏 钙库调控钙离子通道 钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱα
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Polydatin attenuated food allergy via store-operated calcium channels in mast cell 被引量:4
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作者 Bo Yang Jian-Jie Li +4 位作者 Ji-Juan Cao Cheng-Bin Yang Jie Liu Qiong-Mei Ji Zhi-Gang Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2013年第25期3980-3989,共10页
AIM: To investigate the effect of polydatin (PD), a resveratrol glucoside, on mast cell degranulation and antiallergic activity. METHODS: After the rats were orally sensitized with ovalbumin (OVA) for 48 d and underwe... AIM: To investigate the effect of polydatin (PD), a resveratrol glucoside, on mast cell degranulation and antiallergic activity. METHODS: After the rats were orally sensitized with ovalbumin (OVA) for 48 d and underwent PD treatment for 4 d, all the rats were stimulated by 100 mg/mL OVA for24 h and then sacrificed for the following experiments. The small intestines from all the groups were prepared for morphology examination by hematoxylin and eosin staining. We also used a smooth muscle organ bath to evaluate the motility of the small intestines. The OVA-specific immunoglobulin E (IgE) production and interleu-kin-4 (IL-4) levels in serum or supernatant of intestinal mucosa homogenates were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Using toluidine blue stain, the activation and degranulation of isolated rat peritoneal mast cells (RPMCs) were analyzed. Release of histamine from RPMCs was measured by ELISA, and regulation of PD on intracellular Ca 2+ mobilization was investigated by probing intracellular Ca 2+ with fluo-4 fluo-rescent dye, with the signal recorded and analyzed. RESULTS: We found that intragastric treatment with PD significantly reduced loss of mucosal barrier integrity in the small intestine. However, OVA-sensitization caused significant hyperactivity in the small intestine of allergic rats, which was attenuated by PD administration by 42% (1.26 ± 0.13 g vs OVA 2.18 ± 0.21 g, P < 0.01). PD therapy also inhibited IgE production (3.95 ± 0.53 ng/mL vs OVA 4.53 ± 0.52 ng/mL, P < 0.05) by suppressing the secretion of Th2-type cytokine, IL-4, by 34% (38.58 ± 4.41 pg/mLvs OVA 58.15 ± 6.24 pg/mL, P < 0.01). The ratio of degranulated mast cells, as indicated by vehicles (at least five) around the cells, dramatically increased in the OVA group by 5.5 fold (63.50% ± 15.51% vs phosphate-buffered saline 11.15% ± 8.26%, P < 0.001) and fell by 65% after PD treatment (21.95% ± 4.37% vs OVA 63.50% ± 15.51%, P < 0.001). PD mediated attenuation of mast cell degranulation was further confirmed b 展开更多
关键词 POLYDATIN Food ALLERGY MAST cells store-operated calcium channels CA2+
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钙感受器STIM1参与主动脉平滑肌细胞衰老的作用研究 被引量:3
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作者 曾鹏 秦晓玥 +6 位作者 王义蓉 李穗敏 陈淑贞 邝素娟 杨慧 饶芳 邓春玉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期577-583,共7页
目的:探讨钙感受器基质相互作用分子1(STIM1)参与主动脉平滑肌细胞衰老的作用研究。方法:采用过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人主动脉平滑肌细胞建立细胞衰老模型,并用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老变化;利用Cre-loxP基... 目的:探讨钙感受器基质相互作用分子1(STIM1)参与主动脉平滑肌细胞衰老的作用研究。方法:采用过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人主动脉平滑肌细胞建立细胞衰老模型,并用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老变化;利用Cre-loxP基因重组技术,制备平滑肌特异性STIM1基因敲除(sm-STIM1-KO)小鼠;体内及体外干预STIM1表达,观察主动脉平滑肌细胞衰老变化。结果:在200μmol/L H_(2)O_(2)诱导的主动脉平滑肌细胞衰老模型中,SA-β-Gal染色细胞阳性率显著升高,同时钙库操纵性钙通道相关蛋白STIM1和ORAI1的表达显著下调(P<0.05)。另外,成功构建了sm-STIM1-KO小鼠,该小鼠主动脉的衰老相关蛋白p53、p21及p16表达上调(P<0.05)。用STIM1 siRNA敲减主动脉平滑肌细胞STIM1,衰老相关蛋白p21和p16显著上调(P<0.05)。在衰老细胞模型中,用腺病毒过表达STIM1则衰老相关蛋白p21和p16显著下调(P<0.01)。结论:钙感受器STIM1下调可加速血管平滑肌细胞的衰老,并参与血管老化的进展。 展开更多
关键词 基质相互作用分子1 基因敲除 细胞衰老 主动脉平滑肌细胞 钙库操纵性钙通道
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基质相互作用蛋白分子1在肿瘤发生发展和临床应用中的研究进展 被引量:1
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作者 胡金萌 王健 《天津医药》 CAS 北大核心 2018年第6期657-660,共4页
基质相互作用蛋白分子1(STIM1)与肿瘤的发生发展密切相关,其参与多种癌症细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的调节过程。阻断或敲除STIM1可以显著抑制癌细胞的增殖和迁移。阐明STIM1在癌症细胞中的调节机制,将有助于新的治疗靶点的确定。本文... 基质相互作用蛋白分子1(STIM1)与肿瘤的发生发展密切相关,其参与多种癌症细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的调节过程。阻断或敲除STIM1可以显著抑制癌细胞的增殖和迁移。阐明STIM1在癌症细胞中的调节机制,将有助于新的治疗靶点的确定。本文对STIM1分子在不同肿瘤中的作用机制及临床应用前景作一综述。 展开更多
关键词 基质相互作用蛋白分子1 钙离子 钙池操纵性钙通道 钙池操纵性钙内流 钙释放激活钙通道 Orai蛋白
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脂氧素A_4通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道电流而抑制其激活和增殖 被引量:3
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作者 熊维 李天 +5 位作者 张临洪 张力 吴萍 周晓燕 李咏生 叶笃筠 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1081-1086,共6页
目的通过研究脂氧素A4(LXA4)对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化、钙池操纵的钙通道电流(Isoc)及细胞激活和增殖的影响,初步探讨其对T细胞的调节作用及机制。方法钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,用激光共聚焦扫描显微镜技... 目的通过研究脂氧素A4(LXA4)对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化、钙池操纵的钙通道电流(Isoc)及细胞激活和增殖的影响,初步探讨其对T细胞的调节作用及机制。方法钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,用激光共聚焦扫描显微镜技术动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化;全细胞膜片钳技术记录Isoc;ELISA测IL-2水平;3^H-TdR掺入法测细胞增殖情况,并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果(1)用含钙细胞外液时,LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度,而用无钙细胞外液时则无显著差异;(2)LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵的钙通道(SOC)激活剂thapsigargin(TG)引起Jurkat T细胞内游离钙浓度的增高,100nmol/L LXA4也能抑制anti-CD3或植物血凝素(PHA)引起的细胞内钙离子浓度的增高,SOC阻滞剂2-aminoethoxydiphenylborate(2-APB)能显著抑制TG引起的钙内流;(3)膜片钳结果显示,LXA4抑制正常Jurkat T细胞Isoc,TG能显著增大Isoc,而LXA4呈剂量依赖性抑制TG引起的Isoc的升高;(4)LXA4剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28诱导的Jurkat T细胞IL-2表达及细胞增殖,细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由GI1期进入S期,降低S期细胞比例。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞Isoc引起的胞质内游离钙离子浓度的升高而抑制其激活和增殖。 展开更多
关键词 脂氧素A4 JURKAT T细胞 钙池操纵的钙通道 膜片钳 细胞激活和增殖
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Orai1在载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块形成中的表达 被引量:3
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作者 田晋帆 葛长江 +2 位作者 吕树铮 苑飞 赵康 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期357-362,共6页
目的探讨Orai1在载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中的表达。方法选取7~8周龄雄性Apo E-/-小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个时点处死动物。取主动脉制备连续切片,HE、Masson染色计算机... 目的探讨Orai1在载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中的表达。方法选取7~8周龄雄性Apo E-/-小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个时点处死动物。取主动脉制备连续切片,HE、Masson染色计算机图像分析仪测定斑块面积占管腔面积百分比,及胶原成分占斑块面积百分比;油红O染色分析斑块中脂质含量;免疫组织化学染色测定平滑肌细胞阳性表达Orai1的百分比;Western Blot定量分析Orai1在易损斑块形成过程中的动态表达。结果与同周龄C57BL/6J小鼠相比,Apo E-/-小鼠主动脉Orai1表达增高,且随着其周龄增加,Orai1在Apo E-/-小鼠主动脉的表达动态升高(P<0.05)。结论 Orai1参与动脉粥样硬化斑块形成的病理过程,在其形成过程中其表达上调。 展开更多
关键词 Orai1 钙库操作性钙通道 动脉粥样硬化斑块 载脂蛋白E基因敲除小鼠 血管平滑肌细胞
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钙通道抑制剂对人肝细胞钙池操纵钙通道电流的影响 被引量:2
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作者 黄昌州 张辉 +2 位作者 赵中辛 张宗明 裘法祖 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期821-822,共2页
目的探讨钙池操纵钙通道(SOC)抑制剂(2-APB)对人肝细胞SOC电流(Isoc)的影响。方法应用全细胞膜片钳记录技术测定人肝细胞Isoc,并观察2-APB对该电流的影响。结果(1)培养的人肝细胞记录到Isoc,从其电流-电压(Ⅰ~Ⅴ)曲线可以看出该Isoc的... 目的探讨钙池操纵钙通道(SOC)抑制剂(2-APB)对人肝细胞SOC电流(Isoc)的影响。方法应用全细胞膜片钳记录技术测定人肝细胞Isoc,并观察2-APB对该电流的影响。结果(1)培养的人肝细胞记录到Isoc,从其电流-电压(Ⅰ~Ⅴ)曲线可以看出该Isoc的反转电位为+3.0 mV左右。在钳制电位为-100 mV时,该Isoc为(-682.83±171.40)pA(n=8);(2)60、80μmol/L的2-APB分别使Isoc由给药前的(-682.83±171.40)pA下降至给药后的(-359.54±201.85)、(252.15±158.81)pA,给药前后差异有统计学意义(n=8,P<0.05或P<0.01);2-APB的抑制作用呈浓度依赖性增强,其EC_(50)为(63.36±9.57)μmol/L。结论2-APB对培养的人肝细胞Isoc具有显著的抑制作用。 展开更多
关键词 钙通道 膜片钳技术 肝细胞
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钙池操纵的钙通道抑制剂对大鼠肝细胞钙池操纵的钙通道电流的影响 被引量:2
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作者 黄昌州 张宗明 裘法祖 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期311-312,共2页
目的探讨钙池操纵的钙通道(SOC)抑制剂(2APB)对大鼠肝细胞SOC电流(Isoc)的影响。方法急性分离大鼠肝细胞,应用全细胞膜片钳记录技术测定大鼠肝细胞Isoc,并观察2APB对该电流的影响。结果在急性分离的大鼠肝细胞记录到Isoc,从其电流电压(... 目的探讨钙池操纵的钙通道(SOC)抑制剂(2APB)对大鼠肝细胞SOC电流(Isoc)的影响。方法急性分离大鼠肝细胞,应用全细胞膜片钳记录技术测定大鼠肝细胞Isoc,并观察2APB对该电流的影响。结果在急性分离的大鼠肝细胞记录到Isoc,从其电流电压(IV)曲线可以看出该Isoc的反转电位为-2.5mV左右。在钳制电位为-100mV时,该Isoc为(-664.52±140.44)pA(n=8);20、40、60、80、100μmol/L的2APB分别使Isoc由给药前的(-664.52±140.44)pA下降至给药后的(-564.80±111.01)、(-490.11±73.97)、(-362.01±55.91)、(-295.64±50.03)、(-232.12±46.47)pA,给药前后比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);2-APB的抑制作用呈浓度依赖性增强,其EC50为(64.63±10.56)μmol/L。结论2APB对急性分离的大鼠肝细胞Isoc具有显著的抑制作用,这对于进一步深入进行肝细胞钙超载的发生机制和防治具有重要意义。 展开更多
关键词 大鼠肝细胞 急性分离 钙通道电流 给药 抑制剂 影响 抑制作用 记录 依赖性
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氧自由基对血管内皮细胞钙电流的影响及山莨菪碱的干预作用 被引量:2
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作者 郑洁芳 汪进益 +3 位作者 忻元峰 洪暄 范慧敏 刘中民 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2008年第4期49-52,共4页
目的观察山莨菪碱(anisodamine,Ani)在氧自由基(oxygen free radical,OFR)作用体外培养人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)后对其钙池操纵的Ca2+通道电流(store-operated Ca2+currents,Isoc)的影响... 目的观察山莨菪碱(anisodamine,Ani)在氧自由基(oxygen free radical,OFR)作用体外培养人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)后对其钙池操纵的Ca2+通道电流(store-operated Ca2+currents,Isoc)的影响。方法利用全细胞膜片钳记录技术,应用快速加药灌流装置将0.5、1.0、1.5 mmol/L三种不同浓度的Ani对OFR作用HUVECs后ISOC的影响。结果OFR能增强HUVECs的ISOC,而Ani对OFR作用HUVECs后所引起ISOC的增大作用具有抑制效应。当膜电位钳制于-100 mV时,1.5 mmol/L Ani可使ISOC的峰值电流从(-388.59±58.66)pA下降至(-287.37±23.03)pA,抑制率为(25.013±9.49)%;OFR作用后,1.5 mmol/LAni可使ISOC的峰值电流从(-577.04±93.69)pA下降至(-302.38±35.13)pA,抑制率为(47.24±3.82)%。各组间及与对照组相比均有显著的统计学差异(P<0.01,n=6)。结论Ani具有明显抑制HUVECs细胞ISOC的作用,对OFR所致的血管内皮损伤确有保护作用。 展开更多
关键词 山莨菪碱 氧自由基 钙池操纵的Ca^2+通道 血管内皮细胞 膜片钳记录技术
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钙库活化的钙通道和受体活化的钙通道参与人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导的钙内流和NO生成
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作者 赵慧 梁霄 +2 位作者 钟华 张春军 何芳 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期553-561,共9页
为了探讨钙库活化的钙通道(store-operated calcium channels,SOC)和受体活化的钙通道(receptor-operated calcium channels,ROC)在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)钙敏感受体(Ca^(2+)-sensing receptor... 为了探讨钙库活化的钙通道(store-operated calcium channels,SOC)和受体活化的钙通道(receptor-operated calcium channels,ROC)在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)钙敏感受体(Ca^(2+)-sensing receptor,CaR)介导的钙内流及NO生成中的作用和机制,本实验通过分别或联合使用SOC阻断剂、非选择性的阳离子通道阻断剂、ROC激动剂和ROC阻断剂,采用Fura-2/AM检测细胞内钙离子浓度(intracellular Ca^(2+)concentration,[Ca^(2+)]_i)变化,NO荧光探针DAF-FM DA测定细胞内内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)活性和NO生成的变化。结果显示,与对照组(Spermine+Ca^(2+)组,激活CaR)相比,单独阻断SOC或ROC,HUVEC中[Ca^(2+)]_i、eNOS活性和NO含量均降低(P<0.05),而ROC激动剂可部分取消ROC阻断剂的阻断作用(P<0.05),SOC和ROC联合阻断可进一步加强上述抑制作用(P<0.05)。上述结果表明,在Spermine刺激激活CaR介导[Ca^(2+)]_i、eNOS活性和NO的生成过程中,SOC和ROC以协同的方式参与了CaR介导的钙内流及NO生成。 展开更多
关键词 内皮细胞 钙敏感受体 钙信号 NO 钙库活化的钙通道 受体活化的钙通道
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钙库操纵性钙通道蛋白在环磷酰胺诱导的膀胱过度活动症大鼠模型膀胱组织中的表达 被引量:1
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作者 熊志 郝晓杰 高宏飞 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第3期226-229,共4页
目的制备膀胱过度活动症(overactive bladder,OAB)大鼠模型,探讨钙库操纵性钙通道蛋白在OAB大鼠膀胱组织中的表达。方法30只健康雌性SD大鼠,随机分为模型组和对照组各15只。模型组单次腹腔注射环磷酰胺200mg/kg制备OAB模型,对照组腹腔... 目的制备膀胱过度活动症(overactive bladder,OAB)大鼠模型,探讨钙库操纵性钙通道蛋白在OAB大鼠膀胱组织中的表达。方法30只健康雌性SD大鼠,随机分为模型组和对照组各15只。模型组单次腹腔注射环磷酰胺200mg/kg制备OAB模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。2组腹腔注射后24h行尿流动力学检查,观察排尿间期、排尿阈值、基础膀胱压力和平均逼尿肌压力。尿流动力学检查后立即处死大鼠,取膀胱组织,采用Western blot法检测膀胱组织钙释放激活钙通道蛋白1(calcium release-activated calcium channel protein 1,Oria1)、基质交联分子1(stromal interacting molecule 1,STIM1)蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测Oria1mRNA、STIM1mRNA相对表达量。结果对照组储尿期及排尿期逼尿肌收缩平稳、未见明显不稳定收缩,模型组在储尿期出现明显不稳定收缩;模型组排尿间期[(217.8±176.7)s]短于对照组[(412.8±276.4)s](P<0.05),排尿阈值[(10.0±2.6)cm H_(2)O]低于对照组[(14.3±2.7)cm H_(2)O](P<0.05),基础膀胱压[(11.4±3.7)cm H_(2)O]高于对照组[(7.5±2.6)cm H_(2)O](P<0.05),平均逼尿肌压力[(54.8±20.7)cm H_(2)O]与对照组[(43.2±8.2)cm H_(2)O]比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组膀胱组织Orai1蛋白(0.36±0.21)及STIM1蛋白(0.63±0.46)相对表达量、Orai1mRNA(1.92±0.80)及STIM1mRNA(0.42±0.22)相对表达量均高于对照组(0.21±0.13、0.44±0.31、0.59±0.06、0.16±0.02)(P<0.05)。结论环磷酰胺诱导的OAB大鼠模型膀胱组织中钙库操纵性钙通道相关蛋白Orai1及STIM1表达升高。 展开更多
关键词 膀胱过度活动症 大鼠 环磷酰胺 钙库操纵性钙通道蛋白 钙释放激活钙通道蛋白1 基质交联分子1
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钙池操纵性钙通道与细胞增殖关系的研究进展
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作者 庞春秀 林德馨 《医学综述》 2012年第14期2162-2164,共3页
Ca2+是维持细胞正常生理功能的重要离子,参与细胞信息传递并调控一系列生命过程。钙池操纵性钙通道(SOCC)是细胞膜钙通道的一种。许多细胞内Ca2+主要通过SOCC机制影响正常细胞和肿瘤细胞的生长增殖。不同类型的细胞,SOCC通道相关蛋白的... Ca2+是维持细胞正常生理功能的重要离子,参与细胞信息传递并调控一系列生命过程。钙池操纵性钙通道(SOCC)是细胞膜钙通道的一种。许多细胞内Ca2+主要通过SOCC机制影响正常细胞和肿瘤细胞的生长增殖。不同类型的细胞,SOCC通道相关蛋白的表达量及其相互作用存在差异,从而影响细胞内Ca2+浓度,造成细胞的增殖、凋亡和迁移等生物学功能的改变。 展开更多
关键词 钙池操纵性钙通道 细胞增殖 肿瘤
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钙库操纵性钙通道在人循环纤维细胞中的表达及功能 被引量:1
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作者 钟金男 兰兰 +3 位作者 何光珍 黄革 杨炯 高亚东 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期733-737,744,共6页
目的:研究钙库操纵性钙通道(store-operated calcium channels,SOCC)相关功能蛋白ORAI1-3和STIM1-2在人循环纤维细胞(circulating fibrocytes)中的表达及SOCC对人循环纤维细胞分化的影响。方法:采集健康人外周静脉血,分离出单个核细胞,... 目的:研究钙库操纵性钙通道(store-operated calcium channels,SOCC)相关功能蛋白ORAI1-3和STIM1-2在人循环纤维细胞(circulating fibrocytes)中的表达及SOCC对人循环纤维细胞分化的影响。方法:采集健康人外周静脉血,分离出单个核细胞,体外培养分化为循环纤维细胞。采用RT-PCR和real-time PCR检测循环纤维细胞中ORAI1-3及STIM1-2的mRNA表达情况,并检测SOCC抑制剂对循环纤维细胞分化的影响。结果:Realtime PCR检测结果显示ORAI1-3和STIM1-2 mRNA在循环纤维细胞中有较高的表达水平,并且SOCC抑制剂SKF-96365对循环纤维细胞分化具有明显的抑制作用。结论:SOCC表达于循环纤维细胞中,并且影响循环纤维细胞的分化。 展开更多
关键词 循环纤维细胞 钙库操纵性钙通道 ORAI1-3 STIM1-2
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瞬时感受器电位香草酸受体1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞内钙升高中的作用
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作者 王跃秀 王辰 +2 位作者 王丛 刘杰 王军 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期167-171,共5页
目的观察记录低氧条件培养的人肺动脉平滑肌细胞中瞬时感受器电位香草酸受体1(transient potential vanilloid receptor1,TRPV1)对细胞内Ca2+浓度(用340nm/380nm的荧光强度比值表示)的影响,探讨TRPV1在低氧性肺动脉平滑肌细胞增生中的... 目的观察记录低氧条件培养的人肺动脉平滑肌细胞中瞬时感受器电位香草酸受体1(transient potential vanilloid receptor1,TRPV1)对细胞内Ca2+浓度(用340nm/380nm的荧光强度比值表示)的影响,探讨TRPV1在低氧性肺动脉平滑肌细胞增生中的作用。方法应用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色、流式细胞周期测定以及细胞内Ca2+浓度测定的方法检测细胞增生及细胞内Ca2+浓度变化。结果低氧能明显促进人肺动脉平滑肌细胞的增生,升高人肺动脉平滑肌细胞内静息Ca2+浓度,显著加强环并偶氮酸(cyclopiazonic acid,CPA)诱发的库容性Ca2+内流(capacitative Ca2+entry,CCE),上述效应均可被TRPV1阻断剂Capsazepine(CPZ)所抑制。结论在人肺动脉平滑肌细胞中,TRPV1可能是低氧所致细胞内Ca2+浓度增加、CCE增强和细胞过度增生的重要途径或调制因素。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 瞬时感受器电位香草酸受体1 钙库操控性通道
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模拟微重力效应对骨细胞SOC通道功能的影响 被引量:2
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作者 杜婉婷 杨肖 +1 位作者 樊瑜波 孙联文 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期277-282,共6页
目的探究模拟微重力效应下骨细胞钙池操纵Ca^2+通道(store-operated calcium channels,SOC)的活性变化以及其可能机制,阐明失重性骨丢失的发生机制。方法以小鼠骨细胞(MLO-Y4)为对象,分为回转模拟微重力效应组(simulated microgravity, ... 目的探究模拟微重力效应下骨细胞钙池操纵Ca^2+通道(store-operated calcium channels,SOC)的活性变化以及其可能机制,阐明失重性骨丢失的发生机制。方法以小鼠骨细胞(MLO-Y4)为对象,分为回转模拟微重力效应组(simulated microgravity, SM)和正常重力组(control, CON)。分别旋转培养24、48 h后,激光共聚焦显微镜检测毒胡萝卜素引发细胞内质网钙库耗竭后胞内Ca^2+浓度水平,以反映SOC通道的活性;免疫荧光染色法观察膜骨架spectrin和内质网膜蛋白IP3R的分布情况,研究SOC通道功能变化的可能机制。结果在内质网钙库释放Ca^2+时期,24、48h SM组的胞内Ca^2+浓度水平与CON组相比均无显著差异,而在胞外Ca^2+经SOC通道内流时期,24h SM组只在前4min比CON组有显著性下降,48h SM组在整个时期均比CON组有显著性下降。与CON组相比,SM组膜骨架spectrin向细胞边缘聚集,而ER膜蛋白IP3R则向ER核被膜区域聚集,且48h组更为显著。结论模拟微重力效应可抑制骨细胞SOC通道活性。骨细胞膜骨架spectrin以及内质网膜上蛋白IP3R位置分布变化,可能影响SOC通道激活过程中蛋白间的构象耦合,进而降低骨细胞SOC通道的活性。 展开更多
关键词 微重力 骨细胞 SOC通道
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钙贮库调控的钙通道的药理与分子生物学特征 被引量:11
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作者 车艳 Simon Potocnik +1 位作者 李春光 王振纲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期365-369,共5页
钙贮库调控的钙通道 (store operatedcalciumchannel,SOCC)是指位于细胞膜上的钙离子内流通道 ,当细胞内钙贮库排钙后 ,SOCC被激活开放。目前 ,虽然对SOCC机制以及分子生物学特点等的认识还非常初浅 ,但是 ,由于SOCC广泛地分布于兴奋性... 钙贮库调控的钙通道 (store operatedcalciumchannel,SOCC)是指位于细胞膜上的钙离子内流通道 ,当细胞内钙贮库排钙后 ,SOCC被激活开放。目前 ,虽然对SOCC机制以及分子生物学特点等的认识还非常初浅 ,但是 ,由于SOCC广泛地分布于兴奋性和非兴奋性细胞中 ,并且直接参与钙信息传递、基因表达和细胞功能调节等重要过程 ,它的生理和病理意义不容忽视。开发和研制具有高度选择性的SOCC调节药物 ,不仅可以促进实验研究的深入 。 展开更多
关键词 钙贮库调控 钙通道 药理 分子生物学 胞内钙离子装运
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钙库调控的钙离子通道对大鼠膀胱平滑肌收缩性调控的研究 被引量:5
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作者 赵滨 白新宇 +3 位作者 董兴有 王青青 李龙坤 宋波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1178-1182,共5页
目的分析胞内钙库调控的钙离子通道(store operated calcium channels,SOCCs)在大鼠膀胱平滑肌中的功能。方法 RT-PCR检测SOCCs相关蛋白基因表达;使用SOCCs的激动剂CPA(10μmol/L)以及抑制剂SKF-96365(10μmol/L),采用离体肌条的方法观... 目的分析胞内钙库调控的钙离子通道(store operated calcium channels,SOCCs)在大鼠膀胱平滑肌中的功能。方法 RT-PCR检测SOCCs相关蛋白基因表达;使用SOCCs的激动剂CPA(10μmol/L)以及抑制剂SKF-96365(10μmol/L),采用离体肌条的方法观察其肌肉的收缩,全细胞膜片钳技术观察膀胱平滑肌细胞电流,激光共聚焦显微镜观察其膀胱平滑肌细胞内钙离子变化。结果 RT-PCR检测到TRPC3、TRPC4和STIM1基因表达。加入CPA激活SOCCs后,离体肌条实验结果显示膀胱平滑肌离体肌条收缩频率为(5.937 5±1.108 0)/min,比加入CPA前明显增加(P<0.05),收缩幅度为(0.067 1±0.027 0)g,比加入CPA前明显降低(P<0.05);膜片钳实验结果显示钙电流较加入CPA前显著增加,-80 mV电流密度为(-3.127 1±0.908 7)pA/pF,20 mV电流密度为(1.048 1±0.322 5)pA/pF(P<0.05);激光共聚焦显微镜实验结果显示钙离子相对荧光(1.150 7±0.212 1)较加入CPA前显著增加(P<0.05)。加入抑制剂SKF-96365抑制SOCCs后,离体肌条收缩频率为(5.081 3±1.129 5)/min,较加入CPA后显著减缓(P<0.05),收缩幅度为(0.079 0±0.033 0)g,较加入CPA后显著增加(P<0.05);膜片钳显示钙电流较加入CPA后显著减少,-80 mV电流密度为(-2.678 1±0.804 4)pA/pF,20 mV电流密度为(0.907 7±0.346 2)pA/pF(P<0.05);激光共聚焦显微镜实验结果显示细胞内钙离子相对荧光(1.028 9±0.204 7)较加入CPA后显著减少(P<0.05)。结论膀胱平滑肌中可以表达SOCCs相关的通道,膀胱平滑肌的收缩性受到SOCCs的影响。 展开更多
关键词 钙库调控的钙离子通道 膀胱平滑肌 钙离子
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蛋白质酪氨酸磷酸化和氯通道参与瞬时受体电位蛋白介导钙池耗竭引起的钙内流 被引量:2
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作者 丘钦英 杨晓茹 +3 位作者 贺华 李劲梁 王雪融 关永源 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期172-178,共7页
目的 探讨蛋白质酪氨酸磷酸化与Cl-通道对瞬时受体电位 (TRP)蛋白参与的Ca2 + 池耗竭引起的Ca2 + 内流(SOC)的调控作用。方法 采用脂质体转染和Fura 2 /AM荧光光度法 ,测定胞浆游离Ca2 +浓度 ( [Ca2 + ]i) ,比较转染人源性TRP1 (hTRP... 目的 探讨蛋白质酪氨酸磷酸化与Cl-通道对瞬时受体电位 (TRP)蛋白参与的Ca2 + 池耗竭引起的Ca2 + 内流(SOC)的调控作用。方法 采用脂质体转染和Fura 2 /AM荧光光度法 ,测定胞浆游离Ca2 +浓度 ( [Ca2 + ]i) ,比较转染人源性TRP1 (hTRP1 )和人源性TRP3 (hTRP3 )cDNA对毒胡罗卜素 (TG)引起的Ca2 + 内流的作用 ,并观察酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮、Cl-通道阻断剂呋塞米和 4,4 二异硫氰基芪 2 ,2 二磺酸 (DIDS)对其的影响。结果 HEK2 93细胞转染hTRP1cDNA后 ,TG引起的Ca2 + 内流显著增加 ;转染hTRP3cDNA则无明显影响。 5~ 3 0 μmol·L-1染料木黄酮、1~ 8μmol·L-1呋塞米、0 .5~ 1μmol·L-1DIDS对转染hTRP1cDNA细胞的TG诱发的Ca2 + 内流均有抑制作用。结论 hTRP1蛋白可能是HEK2 93细胞SOC的物质基础 ;酪氨酸激酶和Cl-通道均参与HEK2 93细胞SOC的调控 。 展开更多
关键词 钙通道 钙池耗竭引起的钙内流 瞬时受体电位蛋白 蛋白质酪氨酸激酶 氯通道 染料木黄酮 呋塞米 4 4-二异硫氰基芪-2 2-二磺酸
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