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雌激素对正常人肠系膜血管平滑肌细胞自发性瞬时外向电流的作用 被引量:3
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作者 程俊 曾晓荣 +4 位作者 刘智飞 周文 周云刚 裴杰 杨艳 《四川医学》 CAS 2008年第7期797-799,共3页
目的研究雌激素(estrogen,E)对正常人肠系膜血管平滑肌细胞自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)的作用,探讨雌激素对该细胞上大电导钙激活钾通道(Large-conductance Ca2+-activated potassiumchannels,BK... 目的研究雌激素(estrogen,E)对正常人肠系膜血管平滑肌细胞自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)的作用,探讨雌激素对该细胞上大电导钙激活钾通道(Large-conductance Ca2+-activated potassiumchannels,BKCa)的作用机制。方法用急性酶分离方法分离人肠系膜血管平滑肌细胞,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录该细胞上的自发性瞬时外向电流。结果雌激素可浓度依赖性地激活正常人肠系膜血管平滑肌细胞上的STOCs,当雌激素浓度从0μM增加到10、70、200、300μM时,其幅度和频率都增加,其中幅度分别增加了(68.15±10.82)%(n=10,P<0.01)、(131.63±35.33)%(n=10,P<0.01)、(192.02±57.85)%(n=10,P<0.01)、(269.34±70.64)%(n=10,P<0.01);频率分别增加了(29.30±8.61)%(n=10,P<0.01)、(89.17±21.76)%(n=10,P<0.01)、(164.33±43.51)%(n=10,P<0.01)、(205.09±62.49)%(n=10,P<0.01)。结论雌激素可直接激活正常人肠系膜血管平滑肌细胞自发性瞬时外向电流,是通过增加其幅度和频率而激活的,为进一步探讨雌激素对大电导钙激活钾通道的作用机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 雌激素 人肠系膜血管平滑肌细胞 自发性瞬时外向电流 大电导钙激活钾通道 膜片钳技术
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一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法 被引量:3
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作者 程俊 曾晓荣 +4 位作者 刘智飞 李鹏云 李妙龄 裴杰 杨艳 《泸州医学院学报》 2010年第3期225-228,共4页
目的:探讨一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜所造成的封接不稳定。方法:以人肠系膜动脉平滑肌细胞为研究对象,采用穿孔全细胞膜片钳技术... 目的:探讨一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜所造成的封接不稳定。方法:以人肠系膜动脉平滑肌细胞为研究对象,采用穿孔全细胞膜片钳技术,记录人肠系膜动脉平滑肌细胞上大电导钙激活钾通道(big-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)宏观电流以及自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到人肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa和STOCs。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究提供实验基础。 展开更多
关键词 平滑肌细胞 大电导钙激活钾通道 自发性瞬时外向电流 穿孔全细胞膜片钳
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平滑肌肌浆网Ca^(2+)释放与STOCs相关性的研究进展 被引量:1
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作者 李鹏云 曾晓荣 杨艳 《医学综述》 2006年第2期67-70,共4页
平滑肌细胞肌浆网(SR)上存在两种不同类型的钙释放通道:三磷酸肌醇敏感的钙释放通道(IP3R)和ryanodine敏感的钙释放通道(RyRs)。肌浆网产生的局部瞬时钙释放如钙火花或Ca2+puffs激活邻近胞膜上的钙激活钾通道产生自发性瞬时外向电流(STO... 平滑肌细胞肌浆网(SR)上存在两种不同类型的钙释放通道:三磷酸肌醇敏感的钙释放通道(IP3R)和ryanodine敏感的钙释放通道(RyRs)。肌浆网产生的局部瞬时钙释放如钙火花或Ca2+puffs激活邻近胞膜上的钙激活钾通道产生自发性瞬时外向电流(STOCs)。近来研究表明IP3Rs和RyRs都参与肌浆网内钙的调节和平滑肌的舒张。这两种释放通道是否存在协同作用,以及如何影响STOCs,进而调控平滑肌的舒缩活动,不同组织存在很大差异。本文就此方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 平滑肌 肌浆网 敏感的钙释放通道 自发性瞬时外向电流
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有氧运动抑制衰老大鼠脑动脉平滑肌STOC/BK_(Ca)功能下调 被引量:2
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作者 刘雨佳 李娜 石丽君 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期649-656,共8页
目的探讨有氧运动训练对衰老大鼠脑动脉平滑肌细胞全细胞K+电流、自发瞬时外向电流及大电导钙激活钾通道生物物理特性的影响。方法 19~21月龄雄性Wistar大鼠12只(老年组),随机分为安静组和有氧运动组,并选用2月龄Wistar大鼠安静处理... 目的探讨有氧运动训练对衰老大鼠脑动脉平滑肌细胞全细胞K+电流、自发瞬时外向电流及大电导钙激活钾通道生物物理特性的影响。方法 19~21月龄雄性Wistar大鼠12只(老年组),随机分为安静组和有氧运动组,并选用2月龄Wistar大鼠安静处理作为青年对照组。12周后取脑动脉,急性分离动脉平滑肌细胞。分别采用膜片钳全细胞模式、穿孔膜片钳模式和单通道内面向外模式观察运动对全细胞K+电流、自发瞬时外向电流和大电导钙激活钾通道门控特性的影响。结果安静组全细胞K+电流密度及对Iberiotoxin敏感性降低;安静组自发瞬时外向电流幅值降低,频率无明显变化;安静组大电导钙激活钾通道平均开放概率和平均开放时间显著低于青年对照组,而平均关闭时间高于青年对照组;电压依赖性和钙敏感性亦显著下降;与安静组相比,有氧运动可以增加全细胞K+电流密度、自发瞬时外向电流幅值及大电导钙激活钾通道平均开放概率、电压依赖性和钙敏感性来实现对大鼠脑动脉平滑肌自发瞬时外向电流/大电导钙激活钾通道功能的保护作用。结论长期规律有氧运动可以减弱衰老所致的大鼠脑动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道功能下调,这可能是有氧运动改善衰老动脉功能的重要机制之一。 展开更多
关键词 有氧运动 自发瞬时外向电流 大电导钙激活钾通道 脑动脉 衰老
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雌激素对高血压人体肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用研究 被引量:2
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作者 程俊 曾晓荣 +4 位作者 李鹏云 李妙龄 谭晓秋 周文 杨艳 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第5期375-381,共7页
目的 研究雌激素(E)对非高血压(NH)及原发性高血压(EH)人体肠系膜动脉平滑肌细胞(HMASMC)大电导钙激活钾通道(BKCa channels)及自发性瞬时外向电流(STOCs)的作用,探讨雌激素在NH及EH下对该通道作用的差异性.方法 急性酶分... 目的 研究雌激素(E)对非高血压(NH)及原发性高血压(EH)人体肠系膜动脉平滑肌细胞(HMASMC)大电导钙激活钾通道(BKCa channels)及自发性瞬时外向电流(STOCs)的作用,探讨雌激素在NH及EH下对该通道作用的差异性.方法 急性酶分离法分离获取单个HMASMC,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录该细胞上的BKCa和STOCs.结果 雌激素可明显激活NH组HMASMC上的BKCa和STOCs,在测试电压范围内,雌激素使膜电位从0到+60 mV时BKCa的电流密度均显著性增加,在0和+60 mV时其电流密度分别从(1.95±0.39)pA/pF、(15.40±4.27)pA/pF增加到(2.81±0.84)pA/pF(P<0.05,25例)、(26.55±6.24)pA/pF(P<0.01,25例),其中0 mV时增加了0.44倍,+60 mV时增加了0.72倍;电位为-20 mV时STOCs的幅度和频率分别从(7.920±2.031)pA、(3.15±0.79)Hz增加到(12.92±3.41)pA(P<0.05,25例)、(4.41±0.96)Hz(P<0.01,25例),其中幅度增加了0.63倍,频率增加了0.40倍.而EH组在测试的-60到+50 mV电压范围,雌激素没有这种显著性激活作用,在0和+60 mV时其电流密度分别从(1.34±0.43)pA/pF、(4.91±1.40)pA/pF增加到(1.53±0.55)pA/pF(P>0.05,14例)、(8.04±2.0)pA/pF(P<0.05,14例),其中0 mV时增加了0.14倍,+60 mV时增加了0.63倍;在电位为-20 mV时STOCs的幅度和频率分别从(5.39±1.93)pA、(0.75±0.37)Hz增加到(6.70±1.06)pA(P>0.05,14例)、(2.34±0.98)Hz(P<0.05,14例),其中幅度增加了0.24倍,频率增加了2.12倍.结论 雌激素对NH组HMASMC上的BKCa和STOCs有明显的激活作用,而在EH组这种激活作用显著降低,由此推测EH组HMASMC对雌激素的反应性较NH组低,这种差异性将为雌激素合理应用于临床提供有力的实验依据.关键词:高血压;雌激素;人体肠系膜动脉;平滑肌细胞;自发性瞬时外向电流; 展开更多
关键词 高血压 雌激素 人体肠系膜动脉 平滑肌细胞 自发性瞬时外向电流 大电导钙激活钾通道
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UTP经PLC-IP_3信号通路调控猪冠状动脉平滑肌细胞自发性瞬时外向电流 被引量:2
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作者 李鹏云 曾晓荣 +5 位作者 杨艳 蔡芳 李妙龄 刘智飞 裴洁 周文 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期65-73,共9页
本文采用全细胞穿孔膜片钳技术研究UTP对急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞(coronary artery smooth muscle cells,CASMCs)自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents, STOCs)的作用,探讨细胞内Ca2+释放在UTP产物三磷... 本文采用全细胞穿孔膜片钳技术研究UTP对急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞(coronary artery smooth muscle cells,CASMCs)自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents, STOCs)的作用,探讨细胞内Ca2+释放在UTP产物三磷酸肌醇(inositol 1,4,5-trisphosphate, IP3)调控STOCs过程中的作用机制。结果显示:(1)UTP(40 μmol/L)可明显激活CASMCs的STOCs,使其幅度和频率分别增加(57.54±5.34)% 和(77.46±8.42)% (P<0.01, n=38)。(2)磷脂酶C(phospholipase C, PLC)阻断剂U73122(5 μmol/L)可明显抑制STOCs的活性,使其幅度和频率分别降低(31.04±7.46)%和(41.65±16.59)%(P<0.05, n=10);细胞外再加入UTP 不能再次激活STOCs (n=7)。(3)L型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent Ca2+ channels, L-VDCCs)阻断剂verapamil (20 μmol/L)和CdCl2(200 μmol/L)几乎不影响UTP对STOCs活性的调节(n=8)。 (4)1 μmol/L 的bisindolylmaleimide I [BisI,蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)的特异性阻断剂]可明显激活 STOCs,使其幅度和频率分别增加(65.44±24.66)%和(61.35±21.47)%(P<0.01,n=12),细胞外再加入UTP (40 μmol/L)可使STOCs的幅度及频率进一步明显增加(P<0.05,P<0.01,n=12),细胞外继续加入ryanodine (50 μmol/L)则可完全阻断STOCs。(5)UTP(40μmol/L)预处理细胞后,IP3受体(IP3 receptors, IP3Rs)阻断剂2-aminoethoxydiphenyl borate(2-APB,40μmol/L)可使STOCs的幅度降低(24.08±3.97)%(P<0.05, n=8),对其频率的影响较小(n=8) ;而80 μmol/L的2-APB则可明显抑制STOCs的活性,使其幅度和频率分别降低(31.43±6.34)%和(40.59±19.01)%(P<0.05, P<0.01, n=6),细胞外继续加入高浓度的ryanodine(50 μmol/L)可完全抑制STOCs(n=6)。用2-APB (40 μmol/L)或ryanodine(50 μmol/L)预处理细胞后,UTP(40 μmol/L)不能再次激活 STOCs。以上结果提示:UTP主要通过PLC-IP3信号通路激活急性酶分离的猪CASMCs的STOCs,IP3Rs和ryanodine受体(ryanodine receptors,RyRs)介导的细胞内Ca2+释放在此过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 大电导钙激活钾通道 三磷酸肌醇 自发性瞬时外向电流 猪冠状动脉平滑肌细胞 膜片钳技术
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有氧运动对衰老大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞自发瞬时外向流的影响
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作者 张寒梦 刘雨佳 石丽君 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1625-1628,共4页
目的探讨有氧运动对衰老大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞自发瞬时外向流(STOCs)的影响及可能机制。方法 19~21月龄雄性Wistar大鼠,随机分为安静组(O-SED)和有氧训练组(O-EX);另选2月龄大鼠作为青年对照组(Young)。采用穿孔膜片钳技术对细胞ST... 目的探讨有氧运动对衰老大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞自发瞬时外向流(STOCs)的影响及可能机制。方法 19~21月龄雄性Wistar大鼠,随机分为安静组(O-SED)和有氧训练组(O-EX);另选2月龄大鼠作为青年对照组(Young)。采用穿孔膜片钳技术对细胞STOCs进行记录。结果 STOCs具有明显的电压依赖性;在相同钳制电位下,STOCs的幅值和频率均Young组>O-EX组>O-SED组。蛋白免疫印迹分析显示衰老细胞BKCa的α和β1亚基表达均下降,而有氧运动显著抑制此变化。结论衰老可诱发大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa的亚基下调,从而使STOCs减弱、膜去极化和外周阻力增加;而规律性有氧运动可显著抑制此变化,这可能是运动诱导衰老血管逆重构、缓解血管张力增高的重要机制。 展开更多
关键词 有氧运动 自发瞬时外向流 肠系膜动脉 平滑肌细胞
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穿孔膜片钳记录肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道方法初探
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作者 文静 程俊 杨艳 《西南军医》 2014年第3期254-256,共3页
目的利用穿孔全细胞膜片钳技术以提高记录到稳定的大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large conductance Ca2+-activated K+channels,BKCa)电流的成功率。方法在两性霉素B穿孔全细胞膜片钳下记录大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKC... 目的利用穿孔全细胞膜片钳技术以提高记录到稳定的大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large conductance Ca2+-activated K+channels,BKCa)电流的成功率。方法在两性霉素B穿孔全细胞膜片钳下记录大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa宏观电流和自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)。结果采用两性霉素B穿孔全细胞膜片钳技术,记录到BKCa和STOCs概率明显增加,且可以维持3小时。结论通过穿孔全细胞膜片钳可以记录到稳定的且维持时间长的大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa电流。 展开更多
关键词 穿孔全细胞膜片钳 大电导钙激活钾通道 自发性瞬时外向电流 血管平滑肌细胞
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P_2嘌呤受体激动剂对血管平滑肌BK_(Ca)通道作用机制的研究
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作者 潘雪 汪晓凯 +3 位作者 曾晓容 杨艳 蔡芳 李向楠 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期1969-1972,共4页
目的探讨P2嘌呤受体激动剂对血管平滑肌大电导钙激活钾通道(BKCa)作用机制。方法应用全细胞穿孔膜片钳记录技术,观察UTP对猪冠状动脉平滑肌细胞膜上BKCa介导的自发性瞬时外向钾电流(STOCs)的作用,并比较ATP与UTP对STOCs作用的强弱;以及... 目的探讨P2嘌呤受体激动剂对血管平滑肌大电导钙激活钾通道(BKCa)作用机制。方法应用全细胞穿孔膜片钳记录技术,观察UTP对猪冠状动脉平滑肌细胞膜上BKCa介导的自发性瞬时外向钾电流(STOCs)的作用,并比较ATP与UTP对STOCs作用的强弱;以及磷脂酶C(PLC)的特异性阻断剂U-73122预处理细胞后,UTP和ATP对STOCs的作用。结果①5~100μmol/L的UTP可浓度依赖性的增加STOCs的幅度与频率,比较50μmol/L的UTP和ATP对STOCs作用,二者无明显差异;②5μmol/L的U-73122处理细胞后50μmol/LUTP和ATP无法激活STOCs,〔(22.76±6.43)pA,(0.2227±0.0977)Hzvs(23.28±8.43)pA,(0.1953±0.061)Hz,n=7,P>0.05;(23.21±7.87)pA,(0.243±0.0876)Hzvs(24.38±9.21)pA,(0.2162±0.075)Hz,n=6,P>0.05〕。结论 ATP和UTP可通过PLC途径激活猪冠状动脉平滑肌上的STOCs,UTP对其激活作用具有浓度依赖性,二者的激活效应无明显差异。 展开更多
关键词 大电导钙激活钾通道 自发性瞬时外向钾电流 磷脂酶C 三磷酸腺苷 三磷酸尿苷 穿孔膜片钳技术
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