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湿润烧伤膏对脂多糖致大鼠皮肤成纤维细胞损伤的改善作用及其机制研究 被引量:20
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作者 姜艳 巩奇明 +3 位作者 韦骋 陆飞燕 卓臣义 唐乾利 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第6期702-708,共7页
目的:研究湿润烧伤膏对脂多糖致大鼠皮肤成纤维细胞损伤的改善作用及其机制。方法:将大鼠皮肤成纤维细胞分为对照组、脂多糖组(5μg/mL)、康复新液组(阳性对照,5μg/mL脂多糖+1.25%康复新液)和湿润烧伤膏组(5μg/mL脂多糖+0.6 mg/mL湿... 目的:研究湿润烧伤膏对脂多糖致大鼠皮肤成纤维细胞损伤的改善作用及其机制。方法:将大鼠皮肤成纤维细胞分为对照组、脂多糖组(5μg/mL)、康复新液组(阳性对照,5μg/mL脂多糖+1.25%康复新液)和湿润烧伤膏组(5μg/mL脂多糖+0.6 mg/mL湿润烧伤膏),每组设置6个复孔。以脂多糖诱导建立炎性损伤细胞模型(对照组除外)。培养一定时间后,检测各组细胞存活率和细胞迁移率,测定细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量,检测细胞内IL-6蛋白定位和荧光强度,检测细胞中同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)、磷酸化p65(p-p65)、TNF-α、IL-6、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达情况。结果:与对照组比较,脂多糖组细胞存活率显著升高、迁移率显著降低,细胞上清液中TNF-α、IL-6含量和PTEN、p-p65、TNF-α、IL-6和PI3K蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.01),IL-6蛋白主要在细胞质中表达且荧光强度增强。与脂多糖组比较,康复新液组和湿润烧伤膏组细胞存活率均显著降低、迁移率均显著升高;TNF-α、IL-6含量和PTEN、p-p65、TNF-α、IL-6(除康复新液组外)、PI3K、Akt(除康复新液组外)蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-6蛋白荧光强度减弱,且湿润烧伤膏组细胞中TNF-α、IL-6、PI3K、Akt蛋白的相对表达量均显著低于康复新液组(P<0.05或P<0.01)。结论:湿润烧伤膏可抑制脂多糖诱导的大鼠皮肤成纤维细胞增殖,降低炎性因子水平和炎症反应强度,其机制可能与下调PTEN/核因子κB、PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 湿润烧伤膏 皮肤成纤维细胞 炎症反应 同源性磷酸酶张力蛋白/核因子κB 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B
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机械应力刺激对培养的人成纤维细胞分泌生长因子的影响 被引量:9
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作者 舒茂国 易成刚 +5 位作者 韩岩 杨力 张琳西 夏文森 刘丹 郭树忠 《中国美容医学》 CAS 2008年第5期689-691,共3页
目的:研究单次持续40%幅度的牵拉作用于人皮肤成纤维细胞后bFGF、TGFβ1的表达,初步探讨机械应力作用下细胞增殖的机理。方法:体外培养人正常皮肤成纤维细胞,将细胞转移至牵拉细胞培养模型中的弹性膜上,待细胞贴壁生长至75%~80%融合时... 目的:研究单次持续40%幅度的牵拉作用于人皮肤成纤维细胞后bFGF、TGFβ1的表达,初步探讨机械应力作用下细胞增殖的机理。方法:体外培养人正常皮肤成纤维细胞,将细胞转移至牵拉细胞培养模型中的弹性膜上,待细胞贴壁生长至75%~80%融合时,实施40%单次持续牵拉,用WESTERN-BLOT对非牵拉组与牵拉组24h、36h、48h、72h的细胞bFGF、TGFβ1进行检测。结果:牵拉各组及对照组均呈阳性表达,但牵拉48h后两者的表达较未牵拉时明显增加。结论:单次40%持续的牵拉方式可以促进bFGF、TGFβ1表达,可能是导致细胞的增殖。 展开更多
关键词 成纤维细胞 机械牵拉 碱性成纤维细胞生长因子 转化生长因子Β1
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人体皮肤成纤维细胞的快速分离及多向分化能力鉴定 被引量:9
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作者 魏传飞 王伟 +9 位作者 刘延明 段婧 芦现杰 王琰 张男 李孟鹏 陈超 章阳 佟加贝 韩发彬 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2019年第5期267-275,共9页
目的 建立快速分离人皮肤成纤维细胞的方法,并探讨成纤维细胞在成脂、成骨、 成软骨和成神经的多向分化潜能。方法 利用组织块培养法分离人体皮肤成纤维细胞,通过形 态学观察、流式分析、Vimentin 蛋白染色鉴定成纤维细胞;再利用生长曲... 目的 建立快速分离人皮肤成纤维细胞的方法,并探讨成纤维细胞在成脂、成骨、 成软骨和成神经的多向分化潜能。方法 利用组织块培养法分离人体皮肤成纤维细胞,通过形 态学观察、流式分析、Vimentin 蛋白染色鉴定成纤维细胞;再利用生长曲线、核型分析、线粒体 染色分析不同传代细胞的增殖速度,线粒体及染色体形态的改变;最后进行成纤维细胞成脂、成 骨、成软骨和成神经的诱导分化实验,鉴定其多向分化潜能。两代细胞增殖速度及线料体相对 量的比较采用 t 检验统计分析。结 果 分离的皮肤成纤维细胞呈典型梭状及多角形;高表达细 胞表面标记物 CD90(NCF1,NCF2占比分别为 99.9,98.7)和 CD73(NCF1,NCF2占比分 别为98.2,85.6),但极少表达造血干细胞标记物 CD34(NCF1,NCF2占比分别为 1.8,2.6);细胞 Vimentin 蛋白表达呈阳性,阳性率为100;对细胞生长曲线进行分析,表明分离 后不同代次细胞增殖差异无统计学意义(t=1.586,P =0.1567);线粒体相对含量统计分析,同一株细胞系第5代(相对荧光强度值: 6876±577.8)与第 10 代(相对荧光强度值:7371±471.9)之 间的差异无统计学意义(t = 0.664,P = 0.543);核型分析分别显示传代后保持染色体数目为正常 46 条且形态无明显异常;经诱导后成纤维细胞可向成脂、成骨、成软骨和类神经分化。结论 利 用组织块培养法分离出的人体皮肤成纤维细胞状态稳定,增殖能力强,具有成脂、成骨、成软骨 和成神经多向分化诱导潜能,为细胞移植修复骨损伤、软骨损伤和神经损伤性疾病的临床研究 提供细胞来源及实验依据。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 组织块培养法 流式分析 多向分化
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机械应力作用皮肤成纤维细胞增殖的相关研究 被引量:8
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作者 舒茂国 郭树忠 +4 位作者 韩岩 杨力 张琳西 贾平 夏文森 《中国实用美容整形外科杂志》 2004年第1期47-50,共4页
目的 研究机械应力作用皮肤成纤维细胞增殖效应。方法 自行设计一种新的机械牵拉细胞培养模型 ,原代培养皮肤成纤维细胞 ,取 3~ 5代的成纤维细胞种植在模型的弹性膜上 ,待细胞达到 75 %~ 80 %融合度时 ,实施 4 0 %延长度的机械牵拉 ... 目的 研究机械应力作用皮肤成纤维细胞增殖效应。方法 自行设计一种新的机械牵拉细胞培养模型 ,原代培养皮肤成纤维细胞 ,取 3~ 5代的成纤维细胞种植在模型的弹性膜上 ,待细胞达到 75 %~ 80 %融合度时 ,实施 4 0 %延长度的机械牵拉 ,检测实验组及对照组 12、2 4、36、4 8、72h时间点的细胞数 ,利用MTT法检测不同时间点细胞的增殖变化 ,同时利用流式细胞仪检测不同时间点的细胞增殖周期。结果 采用 4 0 %延长度的机械牵拉可以明显导致细胞增殖 ,同时 ,代表细胞增殖特性的S期也随机械牵拉发生改变。结论  4 0 %延长度的机械牵拉可以改变细胞的增殖周期 。 展开更多
关键词 机械应力 皮肤成纤维细胞增殖 机械牵拉 细胞培养
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无机砷诱导体外培养人皮肤细胞的增殖作用 被引量:8
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作者 吴顺华 王国荃 +1 位作者 刘开泰 杨晓燕 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期385-386,共2页
目的 观察亚砷酸钠诱导体外培养的人皮肤细胞的作用 ,探讨砷性皮肤损伤的分子机制。方法 原代培养皮肤成纤维细胞和表皮细胞 ,通过直接细胞计数法和噻唑蓝 (MTT)还原法检测亚砷酸钠诱导对 2种细胞系生长的影响。结果 成纤维细胞较表... 目的 观察亚砷酸钠诱导体外培养的人皮肤细胞的作用 ,探讨砷性皮肤损伤的分子机制。方法 原代培养皮肤成纤维细胞和表皮细胞 ,通过直接细胞计数法和噻唑蓝 (MTT)还原法检测亚砷酸钠诱导对 2种细胞系生长的影响。结果 成纤维细胞较表皮细胞易于培养 ,与对照组比较 ,不同剂量的亚砷酸钠诱导后 ,吸光度值均有升高 ,有剂量 -效应关系 (P <0 .0 1)。 0 .5~ 8.0 μmol/ L 浓度的亚砷酸钠对成纤维细胞有明显的增殖作用 ;低浓度 (0 .8,1.6 μm ol/ L)对表皮细胞有明显的增殖作用 ,浓度高于 3.2 μm ol/ L 时 ,表皮细胞生长受抑制。 10 μmol/ L亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞有明显的毒性作用。结论 无机砷对人皮肤细胞有双向调节的促增殖作用 ,可能是无机砷引起慢性砷中毒皮肤损伤不同表现的一个重要原因 。 展开更多
关键词 体外培养 细胞增殖 亚砷酸钠 人皮肤成纤维细胞 表皮细胞 皮肤损害 无机砷
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地骨皮提取物对热损伤大鼠皮肤成纤维细胞的保护作用 被引量:8
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作者 叶田园 李志勇 +1 位作者 李彦文 周凤琴 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2641-2643,共3页
目的研究地骨皮对热损伤皮肤成纤维细胞的保护作用及其有效部位。方法 MTT法测定地骨皮石油醚提取部位、水提取部位、正丁醇提取部位对正常乳大鼠皮肤成纤维细胞的影响,对获得的有效部位在经50℃的恒温水浴损伤30 min的皮肤成纤维细胞... 目的研究地骨皮对热损伤皮肤成纤维细胞的保护作用及其有效部位。方法 MTT法测定地骨皮石油醚提取部位、水提取部位、正丁醇提取部位对正常乳大鼠皮肤成纤维细胞的影响,对获得的有效部位在经50℃的恒温水浴损伤30 min的皮肤成纤维细胞上进行药效验证,流式细胞仪检测热损伤皮肤成纤维细胞的凋亡变化。结果地骨皮正丁醇提取部位(0.8,0.2 mg/ml),水提取部位(0.8,0.2 mg/ml)会显著抑制大鼠皮肤成纤维细胞的增殖(P<0.05),石油醚提取部位(0.6,0.4,0.2 mg/ml)能显著促进其增殖(P<0.05);流式结果显示,地骨皮石油醚提取部位对已损伤的皮肤成纤维细胞有促进凋亡的作用。结论三种提取部位中,地骨皮石油醚提取部位可以促进已损伤皮肤成纤维细胞的凋亡,促进正常细胞的新生。 展开更多
关键词 地骨皮 热损伤 皮肤成纤维细胞 细胞凋亡
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氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响 被引量:7
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作者 卫俊霞 冯光珍 +3 位作者 孙红 于大山 汪培铭 李冬梅 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第19期1785-1787,共3页
目的 :研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响 ,初步探讨其治疗瘢痕的作用机制 .方法 :采用MTT比色法和3 H 脯氨酸掺入法 ,观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响 .结果 :氢化可的松 (0 .1g/L)... 目的 :研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响 ,初步探讨其治疗瘢痕的作用机制 .方法 :采用MTT比色法和3 H 脯氨酸掺入法 ,观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响 .结果 :氢化可的松 (0 .1g/L)能够抑制体外培养成纤维细胞增殖 (MTT值0 .5 2 3± 0 .0 5 1vs0 .347± 0 .0 36 ,P <0 .0 5 )及分泌胶原的功能 [3 H 脯氨酸掺入量 (2 4 8± 6 )Bqvs (181± 6 )Bq ,P <0 .0 5 ],并呈剂量依赖性 (r=- 0 .82 0 8) .结论 :氢化可的松可通过抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成 ,从而达到治疗瘢痕的作用 . 展开更多
关键词 氢化可的松 皮肤成纤维细胞 细胞增殖 胶原 瘢痕
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广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的分离培养体系优化 被引量:7
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作者 张大鹏 李跃民 +3 位作者 栗楠 邱小燕 杨波 肖雄 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第2期99-103,共5页
通过比较6种方法和5个部位分离成纤维细胞的效率,旨在优化广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的分离培养体系。结果表明:1)采用酶消化法Ⅰ所得成纤维细胞的密度显著高于其他处理组(P<0.05),其死亡率与方法Ⅳ处理组之间差异不显著(P>0.0... 通过比较6种方法和5个部位分离成纤维细胞的效率,旨在优化广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的分离培养体系。结果表明:1)采用酶消化法Ⅰ所得成纤维细胞的密度显著高于其他处理组(P<0.05),其死亡率与方法Ⅳ处理组之间差异不显著(P>0.05),但显著低于其余处理组(P<0.05);2)冷冻保存10 d后复苏的耳部皮肤组织,经方法Ⅰ酶消化后所得成纤维细胞的密度和存活率均分别极显著低于新鲜组织方法Ⅰ处理组(P<0.01);3)组织块培养4 d后即可从其边缘长出成纤维细胞,再经过8 d培养,细胞汇合率可达100%;4)耳部皮肤组织所获成纤维细胞的密度显著高于其他部位处理组(P<0.05),而且贴壁生长效果良好;5)所得耳部皮肤成纤维细胞可传至10代以上,其中第3代和第4代生长最为迅速;6)生长曲线显示第3代耳部皮肤成纤维细胞呈典型的"S形"生长。因此,宜选用先加0.25%胰蛋白酶+0.04%EDTA消化30 min,再用0.2%胶原蛋白酶消化30 min的方法分离广西巴马小型猪的耳部皮肤成纤维细胞。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 皮肤成纤维细胞 酶消化法 组织块培养法
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静态磁场通过激活FGFR1/JAK2/STAT3信号通路促进皮肤成纤维细胞的增殖活性和迁移表型
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作者 张智慧 马娟 +2 位作者 于扬 余扬 董祥林 《河北医学》 CAS 2024年第5期750-756,共7页
目的:通过体外实验探讨静态磁场(SMF)对皮肤成纤维细胞增殖活性和迁移表型的调控作用与潜在机制。方法:将人皮肤成纤维细胞(HSFs)分为5组,包括对照组、SMF组、SMF+阿魏酸组、SMF+芦可替尼组、SMF+Stattic组。对照组为正常培养的HSFs;SM... 目的:通过体外实验探讨静态磁场(SMF)对皮肤成纤维细胞增殖活性和迁移表型的调控作用与潜在机制。方法:将人皮肤成纤维细胞(HSFs)分为5组,包括对照组、SMF组、SMF+阿魏酸组、SMF+芦可替尼组、SMF+Stattic组。对照组为正常培养的HSFs;SMF组的HSFs细胞暴露于1mT的SMF中。其余三组分别将FGFR1、JAK2、STAT3的抑制剂(3μmoL/L阿魏酸、3nmoL/L芦可替尼、20μmoL/L的Stattic)与HSFs一起预培养,并暴露于1mT的SMF中,所有组均处理24h。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析细胞的增殖活性。用ELISA试剂盒法检测人类B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(BAX)的水平。用Western blot检测凋亡标志蛋白cleaved-caspase3及FGFR1、JAK2、STAT3、磷酸化的(p)-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3的表达以及细胞迁移相关表型高迁移率组蛋白1(HMGB1)、波形蛋白(vimentin)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2的表达。结果:与对照组比,SMF组的细胞增殖活性增加,BAX的水平减少,cleaved-caspase3的蛋白表达水平下调,p-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著上调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+阿魏酸组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,而p-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达均显著下调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+芦可替尼组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,JAK2、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著下调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+Stattic组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,STAT3、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著下调(均P<0.05)。结论:SMF通过激活FGFR1/JAK2/STAT3信号通路促进皮肤成纤维细胞的增殖活性和迁移表型。 展开更多
关键词 静态磁场 皮肤成纤维细胞 FGFR1/JAK2/STAT3信号通路 增殖 迁移
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皮肤成纤维细胞构建组织工程化猪角膜基质样组织 被引量:5
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作者 张艳青 张文杰 +4 位作者 胡晓洁 周广东 崔磊 刘伟 曹谊林 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期156-160,共5页
目的探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞,在猪角膜微环境中构建组织工程化角膜基质组织的可行性。方法分离获取胎猪皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增。通过转染绿色荧光蛋白(GFP)基因标记细胞,示踪细胞的转归。选取第3代的细胞接种于可吸收... 目的探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞,在猪角膜微环境中构建组织工程化角膜基质组织的可行性。方法分离获取胎猪皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增。通过转染绿色荧光蛋白(GFP)基因标记细胞,示踪细胞的转归。选取第3代的细胞接种于可吸收生物材料聚羟基乙酸(PGA),形成细胞-生物材料复合物,体外培养1周后,移植于猪的角膜基质层内,于第8周取材进行大体、组织学检查及超微结构观察。以角膜基质细胞为种子细胞构建的组织工程化角膜基质组织作为对照。结果术后8周,实验组角膜逐渐恢复透明,与对照组角膜无明显差别。组织学检查显示形成新生的角膜基质样组织,呈板层状,排列较规则,与对照组角膜组织相似。超微结构观察及胶原纤维直径检测显示,实验组与对照组角膜组织差异无统计学意义。荧光显微镜观察到GFP阳性细胞存在。结论皮肤成纤维细胞可能替代角膜基质细胞,在猪角膜内构建角膜基质样组织。 展开更多
关键词 组织工程 角膜基质 皮肤成纤维细胞
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METTL3调节皮肤成纤维细胞衰老的机制
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作者 黎婧 黎静 +6 位作者 蒙怡 郭蓁 孙赛男 晏庆 翟雨芩 石婷玉 冉又尹 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期2143-2147,共5页
目的探讨甲基转移酶(METTL)3调节皮肤成纤维细胞衰老的机制。方法酶消化法提取小鼠原代皮肤成纤维细胞,对照(Control)组、D-半乳糖(D-gal)组、转染阴性对照siRNA(NC)组、转染METTL3 siRNA(si-METTL3)组、转染核苷二磷酸连接部分X型基元(... 目的探讨甲基转移酶(METTL)3调节皮肤成纤维细胞衰老的机制。方法酶消化法提取小鼠原代皮肤成纤维细胞,对照(Control)组、D-半乳糖(D-gal)组、转染阴性对照siRNA(NC)组、转染METTL3 siRNA(si-METTL3)组、转染核苷二磷酸连接部分X型基元(NUDT)18 siRNA(si-NUDT18)组,D-gal(20 g/L)建立皮肤成纤维细胞衰老模型。采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测细胞衰老,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测METTL3 mRNA表达。SA-β-gal染色法、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测si-METTL3组细胞衰老与增殖。蛋白质质谱分析D-gal组与si-METTL3组中的差异蛋白,qRT-PCR验证差异基因成熟与前体的表达水平。SA-β-gal染色法、EdU染色法、JC-1线粒体膜电位检测法和共聚焦显微镜检测线粒体自噬法分别检测si-NUDT18组细胞衰老、增殖、线粒体膜电位和线粒体自噬的表达变化。结果METTL3 mRNA在衰老皮肤成纤维细胞中表达明显降低,低表达METTL3后细胞衰老水平明显增加,增殖能力明显降低(均P<0.01)。D-gal组与si-METTL3组中NUDT18 mRNA表达明显低于Control组及NC组(P<0.01),pre-NUDT18 mRNA表达无统计学差异(P>0.05)。与NC组相比,si-NUDT18组皮肤成纤维细胞衰老水平明显增加,细胞增殖能力、线粒体膜电位和线粒体自噬水平明显降低(均P<0.01)。结论METTL3下调可能通过影响NUDT18 mRNA的剪接过程促进皮肤成纤维细胞衰老,抑制增殖及线粒体功能。 展开更多
关键词 甲基转移酶(METTL)3 皮肤成纤维细胞 衰老 核苷二磷酸连接部分X型基元(NUDT)18
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玫瑰精油对皮肤成纤维细胞生物学功能的影响
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作者 孙赛男 《工业微生物》 CAS 2024年第1期131-133,共3页
文章旨在探究不同浓度玫瑰精油对D-gal诱导的皮肤成纤维细胞衰老的影响。设立空白对照组、D-gal组、D-gal+玫瑰精油组。用β-gal染色检测阳性细胞数目、EdU-594染色检测细胞增殖能力和划痕实验检测细胞迁移能力。β-gal染色结果显示,D-g... 文章旨在探究不同浓度玫瑰精油对D-gal诱导的皮肤成纤维细胞衰老的影响。设立空白对照组、D-gal组、D-gal+玫瑰精油组。用β-gal染色检测阳性细胞数目、EdU-594染色检测细胞增殖能力和划痕实验检测细胞迁移能力。β-gal染色结果显示,D-gal+玫瑰精油组与对照组(D-gal组)比较,衰老染色阳性细胞数减少(p<0.001);EdU-594染色结果显示,与对照组相比,D-gal+玫瑰精油组增殖细胞数增多(p<0.01);细胞迁移实验结果显示,D-gal+玫瑰精油组细胞迁移率增加(p<0.001)。可见,玫瑰精油可以减少D-gal模型中细胞衰老数目,提高皮肤成纤维细胞的增殖能力,增加皮肤成纤维细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 玫瑰精油 皮肤成纤维细胞 衰老 增殖 迁移
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无机砷对人皮肤成纤维细胞增殖毒性的实验观察 被引量:5
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作者 江兴林 刘立亚 +1 位作者 黄雪梅 胡昌军 《实用预防医学》 CAS 2008年第1期25-26,共2页
目的观察亚砷酸钠诱导体外培养的人皮肤成纤维细胞的作用,探讨砷性皮肤损伤的分子机制。方法通过直接细胞计数法和噻唑蓝(MTT)还原法检测亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞生长的影响。结果与对照组比较,皮肤成纤维细胞经不同剂量的亚砷酸钠诱导... 目的观察亚砷酸钠诱导体外培养的人皮肤成纤维细胞的作用,探讨砷性皮肤损伤的分子机制。方法通过直接细胞计数法和噻唑蓝(MTT)还原法检测亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞生长的影响。结果与对照组比较,皮肤成纤维细胞经不同剂量的亚砷酸钠诱导后,吸光度值均有改变,存在剂量-效应关系(P<0.01)。0.5~5.0μmol/L浓度的亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞有明显的增殖作用,而10μmol/L浓度的亚砷酸钠产生明显的毒性作用。结论低浓度NaAsO2、NaAsO2刺激人皮肤成纤维细胞增殖,高浓度具有细胞毒性。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 皮肤成纤维细胞 增殖
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脂肪间充质干细胞条件培养液和二甲双胍对衰老皮肤成纤维细胞的作用 被引量:5
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作者 郑桂纯 黄丽贞 +6 位作者 赵姝灿 黄敏玲 洪鸿荣 张宇煊 王丙云 陈胜锋 陈志胜 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期504-511,共8页
目的探讨脂肪间充质干细胞条件培养液、二甲双胍对衰老皮肤成纤维细胞的作用效果,并研究两者的作用机制。方法制备ADSC-CM、含2 mmol/L二甲双胍无血清培养基(Met)、ADSC-CM+2 mmol/L二甲双胍(ADSC-CM+Met),添加到衰老皮肤成纤维细胞中,... 目的探讨脂肪间充质干细胞条件培养液、二甲双胍对衰老皮肤成纤维细胞的作用效果,并研究两者的作用机制。方法制备ADSC-CM、含2 mmol/L二甲双胍无血清培养基(Met)、ADSC-CM+2 mmol/L二甲双胍(ADSC-CM+Met),添加到衰老皮肤成纤维细胞中,在培养72 h后,使用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老率,超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞SOD活性以及qPCR检测COL1、ELASTIN、MMP-1、KLOTHO、NF-κB、GSH-PX基因表达量。结果①ADSC-CM组的细胞形态呈长梭形,轮廓清晰,折光性好,其他两组的细胞形态折光性较差;②ADSC-CM、Met、ADSC-CM+Met三组均能提高皮肤成纤维细胞活力,降低SA-β-gal染色率,且ADSC-CM组的作用最好;③三组实验组均能提高COL1基因表达,抑制MMP-1表达,但Met组的ELASTIN基因表达与对照组无差异性,其他两组均显著高于对照组;④KLOTHO基因表达,ADSC-CM和Met组均高于对照组,三组实验组的SOD活性也显著高于对照组,但谷胱甘肽氧化酶GSH-PX基因表达,只有ADSC-CM组显著高于对照组,其他两组显著低于对照组,Met组NF-κB基因表达与对照组差异无显著性,其他两组均显著性降低。结论脂肪间充质干细胞条件培养液、二甲双胍能提高皮肤成纤维细胞活性,延缓其衰老,且两者的作用效果有差异,这可能与作用机制相关,但可以确定的是,两者共同添加会产生拮抗作用。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞条件培养液 二甲双胍 无血清 皮肤成纤维细胞 皮肤衰老
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨温阳化浊通络方干预系统性硬化病纤维化的作用机制 被引量:5
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作者 王倩 丁生晨 +2 位作者 张超云 叶松山 卞华 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第2期234-237,共4页
目的:实验通过温阳化浊通络方含药血清处理皮肤成纤维细胞研究其抗纤维化机制,进而探讨其在治疗系统性硬化病纤维化的作用机制。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的温阳化浊通络方含药血清与人系统性硬化病皮肤成纤维细胞共同孵育,并... 目的:实验通过温阳化浊通络方含药血清处理皮肤成纤维细胞研究其抗纤维化机制,进而探讨其在治疗系统性硬化病纤维化的作用机制。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的温阳化浊通络方含药血清与人系统性硬化病皮肤成纤维细胞共同孵育,并与空白血清对照。研究温阳化浊通络方含药血清对体外皮肤成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路及纤维化相关标志物的影响。结果:与空白血清组相比,温阳化浊通络方含药血清能够显著抑制β-catenin、c-myc、Fn1、Collagen I和CTGF的mRNA和蛋白表达水平,以及TOP/FOP flash双荧光素酶报告基因活性,并且随着温阳化浊通络方含药血清浓度的提高,其抑制作用增强。更加重要的是,温阳化浊通络方含药血清能够抑制β-catenin/TCF4转录调控复合物的形成,其抑制作用与温阳化浊通络方含药血清浓度呈正相关。结论:温阳化浊通络方含药血清对体外皮肤成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路及纤维化相关标志物有明显的抑制作用,为温阳化浊通络方抗系统性硬化病纤维化提供了科学依据。 展开更多
关键词 温阳化浊通络方 皮肤成纤维细胞 系统性硬化病 WNT/Β-CATENIN信号通路
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Modulation of a Specific Pattern of microRNAs, Including miR-29a, miR-30a and miR-34a, in Cultured Human Skin Fibroblasts, in Response to the Application of a Biofunctional Ingredient that Protects against Cellular Senescence <i>in Vitro</i> 被引量:1
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作者 Xianghong Yan Catherine Serre +4 位作者 Laurine Bergeron Ludivine Mur Valère Busuttil Jean-Marie Botto Nouha Domloge 《Journal of Cosmetics, Dermatological Sciences and Applications》 2015年第4期332-342,共11页
Skin aging is a process of structural and compositional remodeling that can be manifested by wrinkling and sagging. Remarkably, the dermis plays a dominant role in the aging process. Recent studies suggest that microR... Skin aging is a process of structural and compositional remodeling that can be manifested by wrinkling and sagging. Remarkably, the dermis plays a dominant role in the aging process. Recent studies suggest that microRNAs are implicated in the regulation of gene expression during aging. However, studies about age-related microRNAs and how they modulate skin aging remain limited. In the present work, a complex of hydrolyzed natural yeast proteins (Saccharomyces cerevisiae) and hydrolyzed natural soya bean was developed and showed the ability to modulate the expression of telomere-binding protein TRF2, which is a key factor for telomere protection and to prevent cellular senescence in vitro and DNA damage. The aim of the study was to identify microRNAs specifically modulated after application of the ingredient complex to cultured fibroblasts, and their possible involvement in remodeling of the human extracellular matrix and fibroblast senescence. Consequently, human skin fibroblasts were cultured and treated with 1% of the ingredient complex for 48 h before analyzing microRNA modulation by RT-qPCR. The use of bioinformatics allowed us to predict the target genes for modulated microRNAs. Results show that the ingredient complex modulated a pattern of microRNAs including the down-regulation of miR-29a-3p, miR-30a-5p and miR-34a-5p, which are associated with fibroblast senescence and remodeling of the human dermal extracellular matrix. In conclusion, our results indicate that miR-29a-3p, miR-30a-5p and miR-34a-5p possibly represent key microRNAs that impact human fibroblast senescence and remodeling of the dermal extracellular matrix. 展开更多
关键词 MICRORNAS qPCR Array skin fibroblasts skin Senescence TELOMERE Extracellular Matrix SIRTUIN 1 Collagen
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不同牵拉方式对成纤维细胞增殖影响的研究 被引量:4
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作者 付思祺 范金财 +5 位作者 焦虎 刘立强 甘承 田佳 钱波 梁锦华 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2013年第7期414-418,共5页
目的建立一种模拟临床扩张术的细胞牵拉培养装置,比较不同牵拉方式对成纤维细胞增殖情况的影响,寻找能充分模拟临床扩张术的体外细胞牵拉培养方式。方法自行设计一种可置入普通培养皿的细胞牵拉培养装置,将正常皮肤的成纤维细胞种植... 目的建立一种模拟临床扩张术的细胞牵拉培养装置,比较不同牵拉方式对成纤维细胞增殖情况的影响,寻找能充分模拟临床扩张术的体外细胞牵拉培养方式。方法自行设计一种可置入普通培养皿的细胞牵拉培养装置,将正常皮肤的成纤维细胞种植在弹性硅胶膜上,设计单次最大牵拉组(共牵拉延长率达30%)、渐进式牵拉组(牵拉10%→停留→牵拉10%→停留→牵拉10%→停留,共牵拉延长率达30%)、非牵拉组,MTT法和Western Blot显示细胞增殖情况。结果细胞在牵拉模型上生长良好,细胞被拉长,并与牵拉方向平行排列,30%延长度的牵拉能刺激细胞增殖,渐进式牵拉组对细胞的促增殖作用强于单次最大牵拉组。结论细胞在牵拉模型上生长良好,牵拉能刺激细胞增殖,模型可以用于模拟体外应力刺激细胞效应的实验研究。渐进式牵拉作用方式是模拟临床皮肤软组织扩张术较好的作用方式。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 细胞培养 机械应力 渐进式牵拉
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过表达YAP对过氧化氢诱导皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响 被引量:4
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作者 王露 张政 +2 位作者 高丽 陈华全 周发忠 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期501-506,共6页
目的研究过表达Yes相关蛋白(YAP)对过氧化氢(H_2O_2)诱导皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响。方法皮肤成纤维细胞中转染pcDNA3.1-YAP质粒、对照pcDNA3.1质粒,经过H_2O_2处理后记为pcDNA3.1-YAP+H_2O_2、pcDNA3.1+H_2O_2,同时设置不转染的皮... 目的研究过表达Yes相关蛋白(YAP)对过氧化氢(H_2O_2)诱导皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响。方法皮肤成纤维细胞中转染pcDNA3.1-YAP质粒、对照pcDNA3.1质粒,经过H_2O_2处理后记为pcDNA3.1-YAP+H_2O_2、pcDNA3.1+H_2O_2,同时设置不转染的皮肤成纤维细胞经H_2O_2处理后记为H_2O_2,以不做任何处理的皮肤成纤维细胞作为对照。Real-time PCR和Western blot方法检测细胞中YAP表达变化,MTT检测细胞增殖,2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平,钼酸铵比色法检测过氧化氢酶(CAT)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,二硫对二硝基苯甲酸比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,羟脯氨酸法检测胶原合成水平。结果 pcDNA3.1-YAP+H_2O_2细胞中YAP水平高于pcDNA3.1+H_2O_2和对照(P<0.05)。H_2O_2细胞增殖能力降低,LDH漏出率升高,细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,CAT活性、SOD活性、GSH-PX活性降低,细胞中MDA含量升高,胶原含量降低,与对照比较,差异有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3.1-YAP+H_2O_2细胞增殖能力升高,LDH漏出率降低,细胞凋亡率降低,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,CAT活性、SOD活性、GSH-PX活性升高,细胞中MDA含量降低,胶原含量升高,与pcDNA3.1+H_2O_2和H_2O_2比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达YAP可以减轻H_2O_2诱导的皮肤成纤维细胞氧化损伤,减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 凋亡 氧化损伤 YAP
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裸鼹鼠皮肤成纤维细胞外泌体的分离及鉴定 被引量:4
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作者 冯延 武文卿 +4 位作者 张静远 李煜 李壘辰 袁征 崔淑芳 《实验动物与比较医学》 CAS 2020年第6期506-512,共7页
目的分离培养裸鼹鼠皮肤成纤维细胞并对其进行鉴定,探讨裸鼹鼠皮肤成纤维细胞是否具有分泌外泌体的能力。方法无菌取新生裸鼹鼠背部皮肤,剪碎成1~2 mm2大小,将组织块平铺于细胞培养皿中,待贴壁后以低糖DMEM(含20%胎牛血清)培养液进行培... 目的分离培养裸鼹鼠皮肤成纤维细胞并对其进行鉴定,探讨裸鼹鼠皮肤成纤维细胞是否具有分泌外泌体的能力。方法无菌取新生裸鼹鼠背部皮肤,剪碎成1~2 mm2大小,将组织块平铺于细胞培养皿中,待贴壁后以低糖DMEM(含20%胎牛血清)培养液进行培养,胰酶消化法对传代培养细胞进行纯化;通过细胞免疫荧光、蛋白质印迹法检测波形蛋白表达情况,对成纤维细胞进行鉴定;待细胞生长至融合度约80%时,改换低糖DMEM(含20%去除外泌体的胎牛血清)培养48 h后收集上清液,超高速离心法分离外泌体,透射电镜观察形态,纳米流式分析颗粒直径,蛋白质印迹法检测外泌体相关特异性蛋白表达情况,进行外泌体鉴定。结果新生裸鼹鼠背部皮肤组织块培养30 h后可见少量细胞自组织块游离出,培养5 d后可见大量细胞自组织块游离生长,细胞呈细长梭形或不规则多角形,放射状生长。细胞免疫荧光及蛋白质印迹法检测均证实分离细胞表达波形蛋白。超高速离心法离心细胞上清液,透射电镜下可观察到膜状杯托样外泌体,纳米流式分析粒径在46.75~206.75 nm,蛋白质印迹法检测显示其对外泌体特异性蛋白CD63、肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene,TSG101)和热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)具有特异性。结论分离培养的细胞具有成纤维细胞的形态学特征,并表达成纤维细胞的特征分子波形蛋白。裸鼹鼠皮肤成纤维细胞具有分泌外泌体的能力,为研究裸鼹鼠外泌体所携带的生物活性分子及其生物学功能提供了基础。 展开更多
关键词 裸鼹鼠 皮肤成纤维细胞 外泌体
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1,2-辛二醇经皮毒性、抑菌性及对细胞合成胶原蛋白功能的影响
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作者 贺抒 张聪聪 《毒理学杂志》 CAS 2023年第6期494-498,513,共6页
目的旨在对1,2-辛二醇的毒性与抑菌性进行考察,探讨1,2-辛二醇单独使用作为日用化妆品防腐剂的安全性与合理性。方法本研究采用长期经皮毒性试验、细胞毒性试验、胶原蛋白浓度测定试验以及抑菌效力试验在不同剂量下对受试物进行了综合... 目的旨在对1,2-辛二醇的毒性与抑菌性进行考察,探讨1,2-辛二醇单独使用作为日用化妆品防腐剂的安全性与合理性。方法本研究采用长期经皮毒性试验、细胞毒性试验、胶原蛋白浓度测定试验以及抑菌效力试验在不同剂量下对受试物进行了综合考察。结果1,2-辛二醇在日均1 mg/g的剂量下长期经皮接触吸收,未见明显毒性;其对大肠埃希菌和白色念珠菌的抑菌作用浓度8 mg/ml,以及对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和黑曲霉抑菌作用浓度16 mg/ml;受试物1,2-辛二醇在培养基中的添加浓度为2.5 mg/ml时(该剂量组与溶剂对照组比较,采用单因素方差分析;假定等方差,F=7.4,P<0.05;非假定等方差:T=6.6,P<0.001),对皮肤成纤维(HSF)细胞合成人I型胶原蛋白(Col-I)的能力具有轻微抑制作用。结论1,2-辛二醇具有较高的安全性,与较好的抑菌性,但进入真皮层中的浓度若达到2.5 mg/ml时或具有局部干扰细胞功能性蛋白合成代谢的作用。 展开更多
关键词 1 2-辛二醇 防腐剂 长期毒性 皮肤成纤维细胞 抑菌性
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