生物农药多杀菌素的研究进展 被引量：46

1

作者 杜顺堂 朱明军 梁世中 《农药》 CAS 北大核心 2005年第10期441-444,451,共5页

多杀菌素(spinosad)是天然生成的大环内酯类抗生素,具有作用模式独特、自然分解快、对动物和昆虫天敌安全等优点,是一种应用前景广阔的新型生物农药。阐述了多杀菌素刺糖多孢菌诱变及理性筛选的常用方法,发酵培养以及培养条件优化,多杀... 多杀菌素(spinosad)是天然生成的大环内酯类抗生素,具有作用模式独特、自然分解快、对动物和昆虫天敌安全等优点,是一种应用前景广阔的新型生物农药。阐述了多杀菌素刺糖多孢菌诱变及理性筛选的常用方法,发酵培养以及培养条件优化,多杀菌素的分离提纯工艺等,并采用高效液相色谱仪(HPLC)分析检测多杀菌素有效成分,获得良好验证结果。 展开更多

关键词 多杀菌素 刺糖多孢菌 生物农药

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农用抗生素刺糖菌素(Spinosads)的研究进展 被引量：15

2

作者 陈小龙 郑裕国 沈寅初 《农药》 CAS 北大核心 2002年第1期4-7,共4页

本文综述了农用抗生素刺糖菌素的研究进展，主要论述了它的理化性质、生理 特性、发酵生产、分离提取、分析检测、活性谱和ＬＤ５０，旨在为刺糖菌素的研究开发提 供参考。

关键词 刺糖菌素 多孢菌 农用抗生素 杀虫剂

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新型生物杀虫剂——刺糖菌素 被引量：12

3

作者 李荣贵 王普 +1 位作者 梅建凤 沈寅初 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期77-81,共5页

刺糖菌素是由土壤放线菌多刺糖多孢菌 (Saccharopolysporaspinosa)产生的次级代谢产物 ,是一种具有触杀及摄食毒性的广谱杀虫剂。对鳞翅目害虫而言 ,刺糖菌素是目前已发现的杀虫剂中选择性最高的化合物之一。文中就刺糖菌素的结构、生... 刺糖菌素是由土壤放线菌多刺糖多孢菌 (Saccharopolysporaspinosa)产生的次级代谢产物 ,是一种具有触杀及摄食毒性的广谱杀虫剂。对鳞翅目害虫而言 ,刺糖菌素是目前已发现的杀虫剂中选择性最高的化合物之一。文中就刺糖菌素的结构、生物合成。 展开更多

关键词 刺糖菌素 多刺糖多孢菌 生物杀虫剂

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96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的研究 被引量：16

4

作者 罗莉斯 李能威 +3 位作者 李丽 郭伟群 郁建平 张晓琳 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第2期133-137,共5页

考察了刺糖多孢菌在96孔板固体培养基和液体培养基中的生长情况,建立了96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的方法。结果表明:96孔板三明治盖能同时满足过滤杂菌和刺糖多孢菌生长耗氧所需,刺糖多孢菌在96孔板固体培养基中的生长情况与传... 考察了刺糖多孢菌在96孔板固体培养基和液体培养基中的生长情况,建立了96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的方法。结果表明:96孔板三明治盖能同时满足过滤杂菌和刺糖多孢菌生长耗氧所需,刺糖多孢菌在96孔板固体培养基中的生长情况与传统斜面培养相当,种子培养最适种龄为60h,每孔发酵培养基装液量为0.4mL。与传统摇瓶发酵筛选平台相比,该方法能显著提高多杀菌素高产菌株的筛选效率。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 96孔板 高通量筛选

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多杀菌素产生菌株航天育种效果研究 被引量：16

5

作者 陈继红 张利平 +1 位作者 郭立格 石楠 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第12期4951-4952,4957,共3页

[目的]探索多杀菌素诱变育种的有效途径。[方法]对多杀菌素经"实践八号"育种卫星搭载后的菌株进行稀释涂布分离并对分离后的菌株进行筛选和发酵测定,计算多杀菌素总效价。[结果]搭载后的刺糖多孢菌SP1,经大量筛选得到2株高产... [目的]探索多杀菌素诱变育种的有效途径。[方法]对多杀菌素经"实践八号"育种卫星搭载后的菌株进行稀释涂布分离并对分离后的菌株进行筛选和发酵测定,计算多杀菌素总效价。[结果]搭载后的刺糖多孢菌SP1,经大量筛选得到2株高产且遗传性状相对稳定的菌株HY463和HY466,多杀菌素总效价分别达到147.51μg/ml和95.33μg/ml,产量分别比出发菌株SP1提高288%和151%。对搭载后的菌株进行稀释涂布分离发现,菌落形态各异,有草帽状、中间凹状、放射线状和宝塔状,并且以草帽状的菌落居多,且不同形态的突变菌株发酵水平也参差不齐。[结论]与UV6、0Co等其他诱变方法相比,空间搭载诱变更能使刺糖多孢菌的产素能力得到较大的提高,是选育多杀菌素高产菌株的有效方法。 展开更多

关键词 多杀菌素 刺糖多孢菌 空间诱变 育种

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多杀菌素产生菌的高通量诱变选育 被引量：13

6

作者 陈园 熊犍 +3 位作者 郭伟群 刘国丽 邹球龙 张晓琳 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期339-343,347,共6页

目的利用高通量筛选方法进行刺糖多孢菌诱变选育获得多杀菌素高产菌株。方法以ASAGF73为出发菌株,通过亚硝基胍(NTG)诱变,并利用96孔板发酵培养结合快速生物测定进行高通量筛选。结果诱变剂量为2mg/mL,诱变时间50min时突变株多杀菌素产... 目的利用高通量筛选方法进行刺糖多孢菌诱变选育获得多杀菌素高产菌株。方法以ASAGF73为出发菌株,通过亚硝基胍(NTG)诱变,并利用96孔板发酵培养结合快速生物测定进行高通量筛选。结果诱变剂量为2mg/mL,诱变时间50min时突变株多杀菌素产量有较大幅度提高。通过3轮复筛验证最终获得8株产量分别比出发菌株提高了43.94%、33.76%、29.41%、28.61%、27.40%、26.42%、25.59%和20.40%的突变株。结论利用高通量筛选方法可以快速获得多杀菌素高产菌株。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 诱变 高通量筛选

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新型生物农药-丁烯基多杀菌素 被引量：10

7

作者 寿佳丽 裘娟萍 《农药》 CAS 北大核心 2011年第4期239-243,272,共6页

丁烯基多杀菌素是由须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)产生的一类大环内酯类抗生素,对多杀菌素难于控制的世界性检疫性害虫苹果蠹蛾和重要农业害虫烟青虫具有良好的生物防治作用。丁烯基多杀菌素与多杀菌素生物合成的主要区别在于b... 丁烯基多杀菌素是由须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)产生的一类大环内酯类抗生素,对多杀菌素难于控制的世界性检疫性害虫苹果蠹蛾和重要农业害虫烟青虫具有良好的生物防治作用。丁烯基多杀菌素与多杀菌素生物合成的主要区别在于busA比spnA多5 244 bp,该序列编码5个功能结构域,负责在C21上合成丁烯基替代多杀菌素相应位置上的乙基。综述了丁烯基多杀菌素的结构和理化性质、产生菌的生物学特性、生物合成过程及相关基因和酶、杀虫谱、提取等有关研究进展。 展开更多

关键词 丁烯基多杀菌素 须糖多孢菌 多杀菌素 刺糖多孢菌

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多杀菌素生物合成途径及改造策略 被引量：9

8

作者 李月 常城 杨克迁 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1431-1439,共9页

多杀菌素是一类由刺糖多孢菌产生的新型大环内酯类化合物,是绿色农用抗生素的杰出代表。本文简要总结了多杀菌素生物合成过程,并对其生物合成调控的关键位点进行了分析,提出用合成生物学手段组装多杀菌素细胞工厂的策略。

关键词 多杀菌素 刺糖多孢菌 合成途径 代谢调控 合成生物学

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多杀菌素生物合成的研究进展 被引量：8

9

作者 盛志 陈凯 李旭 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期397-405,共9页

多杀菌素是在刺糖多胞菌发酵液中提取的一种大环内酯类生物杀虫剂,它对靶标昆虫具有独特的快速触杀和摄食毒性,兼具化学农药的速效性和生物农药的安全性,具有低残留、快速降解等优点。本文介绍了多杀菌素的生物合成途径和体外合成方法,... 多杀菌素是在刺糖多胞菌发酵液中提取的一种大环内酯类生物杀虫剂,它对靶标昆虫具有独特的快速触杀和摄食毒性,兼具化学农药的速效性和生物农药的安全性,具有低残留、快速降解等优点。本文介绍了多杀菌素的生物合成途径和体外合成方法,对随机诱变、代谢工程定向改造等刺糖多孢菌工业菌株育种方法进行了介绍,对多杀菌素在异源宿主中的合成进行了讨论。 展开更多

关键词 多杀菌素 刺糖多孢菌 生物农药 生物合成

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MNNG对多杀菌素产生菌的诱变效应 被引量：8

10

作者 宋炜 熊犍 +2 位作者 郭伟群 张晓琳 宋渊 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2009年第2期176-180,共5页

多杀菌素(spinosad)是刺糖多孢菌Saccharopolyspora sptnosa发酵产生的次级代谢产物,有显著杀虫活性。采用N-甲基-N'硝基-N-亚硝基胍(MNNG)作为诱变因子对刺糖多孢菌的孢子进行诱变处理,以高效液相色谱方法检测多杀菌素的发酵产量... 多杀菌素(spinosad)是刺糖多孢菌Saccharopolyspora sptnosa发酵产生的次级代谢产物,有显著杀虫活性。采用N-甲基-N'硝基-N-亚硝基胍(MNNG)作为诱变因子对刺糖多孢菌的孢子进行诱变处理,以高效液相色谱方法检测多杀菌素的发酵产量。研究结果表明:诱变剂量为2mg/ml,诱变40min时多杀菌素产量有较大幅度提高。通过诱变最终得到5株产量分别比出发菌株提高61.1%、80.3%、128.1%、69.9%和77.8%的突变株。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 N-甲基-N'硝基-N-亚硝基胍(MNNG) 诱变

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多杀菌素的发酵工艺研究 被引量：5

11

作者 胡旭晔 张琴 +1 位作者 胡海峰 朱宝泉 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期90-93,共4页

用均匀设计法优化了多杀菌素发酵培养基的配方,同时探讨了前体物质对发酵效价的影响。结果得到优化培养基组成(g/L):葡萄糖37.8,糊精42.0,棉籽粉22.3,脱脂奶粉9.0,CaCO33.0。发酵30h后添加10mmol/L的正丁醇效果最佳,优化后多杀菌素的效... 用均匀设计法优化了多杀菌素发酵培养基的配方,同时探讨了前体物质对发酵效价的影响。结果得到优化培养基组成(g/L):葡萄糖37.8,糊精42.0,棉籽粉22.3,脱脂奶粉9.0,CaCO33.0。发酵30h后添加10mmol/L的正丁醇效果最佳,优化后多杀菌素的效价为394.1μg/ml,比优化前提高了56%。 展开更多

关键词 多杀菌素 刺糖多孢菌 前体 均匀设计

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MPMS诱变结合抗生素抗性选育多杀菌素高产菌株 被引量：7

12

作者 王海霞 陈园 +3 位作者 王超 黎琪 陈新 张晓琳 《粮油食品科技》 2017年第3期82-86,共5页

采用多功能等离子体诱变系统(MPMS)对菌株ASAGF 13-8-1进行诱变,并通过链霉素、庆大霉素、利福平、氯霉素四种抗生素抗性筛选多杀菌素高产菌株。利用96孔板发酵培养结合生物检测的快速方法进行高产菌株高通量初筛,摇瓶发酵进行复筛。通... 采用多功能等离子体诱变系统(MPMS)对菌株ASAGF 13-8-1进行诱变,并通过链霉素、庆大霉素、利福平、氯霉素四种抗生素抗性筛选多杀菌素高产菌株。利用96孔板发酵培养结合生物检测的快速方法进行高产菌株高通量初筛,摇瓶发酵进行复筛。通过5轮复筛验证,获得1株产量较出发菌株提高28.68%且遗传稳定的突变菌14-2。比较MPMS诱变和MPMS诱变结合0.9μg/mL链霉素、14μg/mL庆大霉素、400μg/mL利福平、2μg/mL氯霉素的四重抗性筛选对出发菌株ASAGF 13-8-1的作用效果,结果显示MPMS诱变结合抗生素抗性筛选更有利于多杀菌素高产菌株的选育。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 诱变 抗生素 抗性筛选

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响应面法优化多杀菌素发酵培养基的研究 被引量：7

13

作者 裘晓华 裘娟萍 +1 位作者 张正波 寿佳丽 《工业微生物》 CAS CSCD 2009年第3期21-25,共5页

采用响应面分析方法,对刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)H-2产多杀菌素的发酵培养基进行优化研究。运用单因子试验筛选出葡萄糖和棉籽粉为最适碳源和氮源,通过Plack-ett-Burman设计试验,对影响发酵培养基的8个相关因子进行评估并... 采用响应面分析方法,对刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)H-2产多杀菌素的发酵培养基进行优化研究。运用单因子试验筛选出葡萄糖和棉籽粉为最适碳源和氮源,通过Plack-ett-Burman设计试验,对影响发酵培养基的8个相关因子进行评估并筛选出具有显著效应的4个因子:葡萄糖、棉籽粉、黄豆饼粉及玉米浆。通过最陡爬坡实验逼近以上4个因子的最大响应区域后,采用Box-Behnken响应面分析法,确定发酵产多杀茵素最佳培养基为葡萄糖64.5g,麦芽糖20g,玉米浆2g,大豆油40g,棉籽粉25g,黄豆饼粉2.4g,蛋白胨25g,CaCO35g,定容至1L,pH7.0。培养基优化后多杀菌素产量由278.1mg/L提高到508.7mg/L,比初始多杀茵素产量提高了1.83倍。 展开更多

关键词 多杀菌素 刺糖多孢菌 响应面法 优化

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多杀菌素发酵培养基的研究 被引量：7

14

作者 李能威 张晓琳 +3 位作者 郭伟群 熊犍 宋炜 宋渊 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第1期216-224,共9页

【目的】以刺糖多孢菌C4-10-8B为试验菌株,对多杀菌素发酵培养基进行优化,以提高刺糖多孢菌的多杀菌素发酵产量。【方法】采用单因素和多因素试验,分别考察了不同碳源、氮源、前体、无机盐和微量元素对多杀菌素生物合成的影响,最后通过... 【目的】以刺糖多孢菌C4-10-8B为试验菌株,对多杀菌素发酵培养基进行优化,以提高刺糖多孢菌的多杀菌素发酵产量。【方法】采用单因素和多因素试验,分别考察了不同碳源、氮源、前体、无机盐和微量元素对多杀菌素生物合成的影响,最后通过正交试验综合考察发酵培养基中各组分对多杀菌素产量的影响。【结果】葡萄糖是较优碳源,最佳质量浓度为40.0 g/L,当葡萄糖与糊精(质量比5∶2)复配时,多杀菌素产量较对照培养基提高18.35%;棉籽蛋白为最优氮源,25.0 g/L棉籽蛋白与15.0 g/L玉米蛋白胨或0.6 g/L硫酸铵复配时,多杀菌素产量分别较对照提高40.0%和45.3%;乙酸钠和谷氨酰胺质量浓度为1.0 g/L时,均能使多杀菌素产量较对照提高21.5%;K2HPO4对多杀菌素合成有明显的促进作用,在其质量浓度为2.5 g/L时,多杀菌素产量较对照提高24.5%;ZnCl2对多杀菌素合成也有促进作用,而MgSO4和CoCl2则显著抑制多杀菌素合成;通过2次正交试验获得最优发酵培养基,利用该培养基时多杀菌素产量可达395.54μg/mL,比对照提高了62.5%。【结论】多杀菌素生物合成的最优发酵培养基为:葡萄糖50.0 g/L,棉籽蛋白25.0 g/L,玉米蛋白胨20.0 g/L,(NH4)2SO40.8 g/L,谷氨酰胺1.25 g/L,乙酸钠0.8 g/L,NaCl 3.0 g/L,K2HPO42.5 g/L,FeSO450.0 mg/L,ZnCl225.0 mg/L,CaCO31.0 g/L。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 发酵培养基

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多杀菌素高产菌株的诱变选育及代谢曲线初步研究 被引量：7

15

作者 郭伟群 邹球龙 +2 位作者 陈园 李能威 张晓琳 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期245-248,共4页

目的研究60Co-γ射线对刺糖多孢菌的诱变效应,期望获得性状稳定的多杀菌素高产菌株。方法以N-19为出发菌株,通过60Co-γ射线诱变,利用摇瓶发酵结合HPLC法测定进行筛选,通过摇瓶定期取样方法研究了突变株的代谢曲线。结果辐照剂量90Gy、1... 目的研究60Co-γ射线对刺糖多孢菌的诱变效应,期望获得性状稳定的多杀菌素高产菌株。方法以N-19为出发菌株,通过60Co-γ射线诱变,利用摇瓶发酵结合HPLC法测定进行筛选,通过摇瓶定期取样方法研究了突变株的代谢曲线。结果辐照剂量90Gy、120Gy刺糖多孢菌的正突变率较高;通过5轮复筛及传代验证最终获得4株产量提高、性状稳定的突变株;高产突变株在摇瓶中延滞期较短且产素与生物量的增长成正相关。结论利用60Co-γ射线辐照诱变选育是获得多杀菌素高产菌株的有效手段。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 60Co-γ 射线诱变 代谢曲线

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高效液相色谱法测定刺糖多胞菌发酵液多杀菌素含量 被引量：6

16

作者 易勇 夏立秋 +3 位作者 丁学知 杨尉 王海龙 罗玉双 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第4期81-85,共5页

为了建立刺糖多胞菌（Saccharopolyspora spinosa）发酵液中多杀菌素不同组分的分离与定量分析的高效液相色谱检测方法.以AQ12S05-1546WT（150×4.6 mmL.D.S-5μm,12 nm）为分析柱,以甲醇-乙腈-2%醋酸铵溶液（45∶45∶10,v/v/v）为... 为了建立刺糖多胞菌（Saccharopolyspora spinosa）发酵液中多杀菌素不同组分的分离与定量分析的高效液相色谱检测方法.以AQ12S05-1546WT（150×4.6 mmL.D.S-5μm,12 nm）为分析柱,以甲醇-乙腈-2%醋酸铵溶液（45∶45∶10,v/v/v）为流动相,流速1.5 mL/min,检测波长250 nm.结果表明多杀菌素在25-1000 mg/L范围内线性关系良好,本方法标准偏差为1.486 9,变异系数为0.79%,相关系数为0.9992,平均回收率为99.58%.多杀菌素化合物A,B,C,D,E,F的保留时间分别为7.01,3.59,3.21,8.33,5.72,4.81 min.本方法能准确测定刺糖多胞菌发酵液中多杀菌素含量,有效分离多杀菌素不同组分. 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 高效液相色谱法 多杀菌素 定量分析

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多杀菌素生产菌原生质体的制备条件及其再生菌株生理特性 被引量：5

17

作者 罗玉双 丁学知 +3 位作者 夏立秋 王海龙 黄璠 唐滢 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期360-367,共8页

为了改良多杀菌素生产菌种,提高多杀菌素产量,研究了甘氨酸添加浓度、溶菌酶作用时间、温度和浓度对多杀菌素生产菌刺糖多胞菌Saccharopolyspora spinosaSP06081菌株原生质体制备和再生的影响,并考察了不同再生培养基和渗透压稳定剂对... 为了改良多杀菌素生产菌种,提高多杀菌素产量,研究了甘氨酸添加浓度、溶菌酶作用时间、温度和浓度对多杀菌素生产菌刺糖多胞菌Saccharopolyspora spinosaSP06081菌株原生质体制备和再生的影响,并考察了不同再生培养基和渗透压稳定剂对其再生的影响,确定了该菌株原生质体制备和再生的最佳条件。同时,对原生质体再生菌株的形态与多杀菌素产量变化进行了比较研究。结果表明:菌体在添加0.2%的甘氨酸的TSB培养基中培养48h收集,0.1mg/mL溶菌酶,28oC作用20min制备原生质体,将原生质体涂布于以蔗糖为渗透压稳定剂的R2YE培养基中,原生质体再生数目最多,达108个/mL以上;原生质体再生菌株在形态和抗生素产量上产生分化,29.3%的再生菌株形态上保持与亲本菌株一致,具有菌丝松散,断裂分枝多的特点,其中53.2%的再生菌株多杀菌素产量变异向正方向移动,最高产量达到582.0mg/L,比亲本菌株提高85.6%。原生质体再生菌株的形态分化与多杀菌素产量具有重要相关性。 展开更多

关键词 刺糖多胞菌 多杀菌素 原生质体 再生菌株 形态分化

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多杀菌素的提取和萃取条件研究 被引量：4

18

作者 秦为辉 陈新 +3 位作者 张晓琳 郭伟群 李丽 李能威 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第4期151-156,共6页

【目的】研究多杀菌素的最佳提取和萃取条件。【方法】采用单因素试验，分别研究发酵液不同pH（6，7，8，9，10，11）、放置时间（2，4，8，16，24，32，48，72h）和温度（20，30，40，50，60，70℃）对发酵液中多杀菌素提取效果及稳定... 【目的】研究多杀菌素的最佳提取和萃取条件。【方法】采用单因素试验，分别研究发酵液不同pH（6，7，8，9，10，11）、放置时间（2，4，8，16，24，32，48，72h）和温度（20，30，40，50，60，70℃）对发酵液中多杀菌素提取效果及稳定性的影响，同时，从乙酸乙酯、石油醚、二氯甲烷和乙醚中筛选最适萃取试剂，并在此基础上研究萃取次数（1。2，3次）和萃取试剂体积对多杀菌素萃取效果的影响。【结果】单因素试验结果显示，在发酵液pH为10时，多杀菌素提取效果较好；放置2～72h，多杀菌素质量浓度不会发生显著变化；在20～70℃多杀菌素能稳定存在；乙酸乙酯为最适萃取试剂，最佳萃取次数为3次，其与多杀菌素提取液的最适体积比为1：1。【结论】得到了多杀菌素提取和萃取的最佳条件，在该条件下多杀菌素的质量浓度和萃取率分别为74．50μg／mL和98．18％。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 发酵液 稳定性 提取条件

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刺糖多孢菌生长特性及培养条件的优化 被引量：4

19

作者 李丽 罗莉斯 +4 位作者 王艳萍 李能威 郭伟群 王洁颖 张晓琳 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第11期89-93,共5页

研究了多杀菌素生产菌株的生长特性及种子培养条件对其发酵产量的影响。采用单因素试验确定刺糖多孢菌C3-10-4的最优种子培养基和最佳培养温度,同时采用正交设计对刺糖多孢菌C3-10-4培养基装量、摇床转速和添加玻璃珠个数进行了优化,并... 研究了多杀菌素生产菌株的生长特性及种子培养条件对其发酵产量的影响。采用单因素试验确定刺糖多孢菌C3-10-4的最优种子培养基和最佳培养温度,同时采用正交设计对刺糖多孢菌C3-10-4培养基装量、摇床转速和添加玻璃珠个数进行了优化,并运用Gompertz模型拟合其生长曲线。结果表明:最佳种子培养基为:胰蛋白酶大豆肉汤30 g、酵母提取物3 g、硫酸镁2 g、葡萄糖10 g、去离子水1 L;最优种子培养条件为:培养温度为29℃,摇床转速240 r/min、玻璃珠6个、培养基装量30 mL/250 mL,在该培养条件下,可获得最大生物量。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 正交实验 生长曲线

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GlnA基因对刺糖多孢菌生长发育及多杀菌素合成的影响 被引量：5

20

作者 肖洁 刘朱东 +5 位作者 彭胜男 何昊城 穰杰 刘熊 丁学知 夏立秋 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期625-638,共14页

谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Sacch... 谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Saccharopolyspora spinosa的生长发育及次级代谢产物合成的影响,从刺糖多孢菌基因组中克隆了gln A基因的部分片段,将其与穿梭载体p OJ260连接,构建敲除载体p OJ260-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌野生菌中,获得刺糖多孢菌敲除菌株S.spinosa-△gln A;同时,利用重叠延伸PCR将gln A基因置于红霉素强启动子Perm E下,并将融合片段Perm E-gln A与穿梭载体p OJ260进行酶切酶连,构建过量表达载体p OJ260-Perm E-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌中,获得了刺糖多孢菌过量表达菌株S.spinosa-gln A。表型分析发现,gln A基因的敲除对刺糖多孢菌的菌丝形态、孢子萌发等方面都有显著的抑制作用。HPLC检测分析发现,过量表达菌株中多杀菌素产量相比原始菌株提高到170%;该研究表明gln A基因对刺糖多孢菌的生长发育与多杀菌素的合成有一定的影响,为研究其在链霉菌次级代谢过程中的作用奠定了重要基础。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 谷氨酰胺合成酶 阻断 过量表达

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