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Smad7基因转染拮抗TGF-β_1对培养肾小管细胞的影响 被引量:7
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作者 黄云剑 梅煜明 +1 位作者 王沂芹 杨唐俊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1049-1052,共4页
目的 探讨Smad7基因转染对TGF β1 诱导的小管细胞生长阻滞 ,细胞凋亡和FN分泌的影响。方法 采用Tfx 5 0脂质体将小鼠Smad7转染入原代培养的肾小管细胞 ,用MTT法观测小管细胞的增殖、流式细胞仪观测其细胞周期的变化 ;ELISA法测定小... 目的 探讨Smad7基因转染对TGF β1 诱导的小管细胞生长阻滞 ,细胞凋亡和FN分泌的影响。方法 采用Tfx 5 0脂质体将小鼠Smad7转染入原代培养的肾小管细胞 ,用MTT法观测小管细胞的增殖、流式细胞仪观测其细胞周期的变化 ;ELISA法测定小管细胞FN的分泌。结果 培养基添加TGF β1 ( 10ng ml) 48h后 ,小管细胞增殖能力明显下降 ,停滞于G1 期的细胞数增多 ,细胞分泌的FN量也明显增高 ,相反 ,Smad7基因转染后可明显拮抗TGF β1 对小管细胞的上述作用。结论 Smad7基因转染可明显拮抗TGF β1 对小管细胞的影响 。 展开更多
关键词 SMAD7 转化生长因子-Β1 基因转染 肾小管细胞 细胞周期
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慢性压力负荷性心衰大鼠肾脏细胞凋亡 被引量:7
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作者 周泉 李志梁 +2 位作者 胡高频 王素华 陆青 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第7期586-588,共3页
目的 了解慢性心脏后负荷增加导致慢性心力衰竭时肾脏细胞凋亡的情况 ,探讨慢性心脏后负荷增加及引起慢性心力衰竭时影响肾脏功能不全的机制 .方法 复制慢性后负荷增加引起心力衰竭大鼠 (n=2 4)模型 ,检测血液动力学(BP,L VSP)变化 ,... 目的 了解慢性心脏后负荷增加导致慢性心力衰竭时肾脏细胞凋亡的情况 ,探讨慢性心脏后负荷增加及引起慢性心力衰竭时影响肾脏功能不全的机制 .方法 复制慢性后负荷增加引起心力衰竭大鼠 (n=2 4)模型 ,检测血液动力学(BP,L VSP)变化 ,应用末端转移酶介导的缺口末端标记法(TU NEL )检测肾脏细胞凋亡 .结果 对照组大鼠肾脏及慢性后负荷增加早期肾脏均未出现细胞凋亡 ,心力衰竭时肾脏出现细胞凋亡 ,细胞凋亡程度肾髓质 (36 - ND) >肾近曲小管(17- ND) >肾小球 (6 - ND) ,肾血管平滑肌细胞及致密斑亦出现细胞凋亡 .结论 慢性后负荷增加引起心力衰竭时肾脏出现细胞凋亡 ,它与慢性心力衰竭密切相关 ,是肾功能不全的重要原因 . 展开更多
关键词 慢性压力负荷性心衰 大鼠 缺口末端标记术 肾脏细胞 凋亡
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氧化应激对Vero细胞的损伤及EGCG的保护作用 被引量:3
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作者 胡秀芳 柴立红 +1 位作者 陈集双 杨贤强 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期105-109,共5页
研究了氧化应激对肾细胞-Vero细胞的损伤及EGCG的保护作用.用MTT、吖啶橙染色和DNA凝胶电泳等方法研究了H2O2和Cr6+应激对Vero细胞的损伤,及EGCG对凋亡细胞的保护作用及其机理.结果表明,H2O2和Cr6+剂量效应地抑制Vero细胞活性,IC50分别... 研究了氧化应激对肾细胞-Vero细胞的损伤及EGCG的保护作用.用MTT、吖啶橙染色和DNA凝胶电泳等方法研究了H2O2和Cr6+应激对Vero细胞的损伤,及EGCG对凋亡细胞的保护作用及其机理.结果表明,H2O2和Cr6+剂量效应地抑制Vero细胞活性,IC50分别为175.6和9.8mg·L-1;其中50 mg·L-1 H2O2和400 mg·L-1/2h Cr6+可诱导Vero细胞凋亡.0~60 mg·L-1 EGCG有效抑制H2O2和Cr6+应激引起的细胞活性下降,且40 mg·L-1 EGCG显著抑制细胞凋亡.对于Cr6+所诱导的细胞凋亡,EGCG的保护作用与EDTA和Vc的协同作用效果相当,表明清除活性氧和络合金属离子都有助于减轻Cr6+应激损伤.可见,EGCG通过清除活性氧和络合离子有效地保护了肾细胞免受应激损伤,这对易遭受活性氧损伤的肾脏无疑具有一定的临床价值. 展开更多
关键词 氧化应激 VERO细胞 损伤 EGCG 保护作用 肾细胞 细胞活性 机理 活性氧 络合金属离子
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可溶性铀的内吞外排及对HK-2细胞的损伤研究 被引量:2
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作者 黄立群 周文华 +4 位作者 李曙芳 王志鹏 秦秀军 李建国 王仲文 《中国辐射卫生》 2022年第1期39-46,共8页
目的研究人肾近曲小管细胞(HK-2)对可溶性铀的内吞和外排情况,了解铀暴露后的细胞毒性效应。方法采用CCK-8法测定不同浓度铀染毒后细胞活性,分别在光镜和透射电子显微镜下观察细胞铀染毒后的变化;采用ICP-MS法测定细胞在不同时间对铀的... 目的研究人肾近曲小管细胞(HK-2)对可溶性铀的内吞和外排情况,了解铀暴露后的细胞毒性效应。方法采用CCK-8法测定不同浓度铀染毒后细胞活性,分别在光镜和透射电子显微镜下观察细胞铀染毒后的变化;采用ICP-MS法测定细胞在不同时间对铀的内吞、外排情况;采用流式细胞仪检测铀染毒后细胞周期和细胞凋亡的变化。结果 HK-2细胞在铀暴露后出现剂量依赖性损伤,细胞周期阻滞在G1期,细胞发生凋亡和坏死,细胞增殖受到了抑制;细胞内吞的铀含量在24 h内逐渐增加,同时铀的内吞量存在阈值,细胞表面结合的铀含量分数较低(<0.2%),细胞内吞的铀1 h内40%以上都会排出胞外;铀在细胞内和细胞外均会形成针样状沉淀(300μM);结论细胞在铀染毒后出现周期阻滞、凋亡和细胞活性下降,可溶性铀的内吞、外排过程非常迅速,细胞可将可溶性铀转化为无毒性的沉淀。 展开更多
关键词 可溶性铀 肾细胞 内吞 外排 损伤
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Suppression of renal cell proliferation, induction of apoptosis and cell cycle arrest: Cytotoxicity of vanadium in broilers 被引量:1
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作者 Xiaodong Liu Hengmin Cui +3 位作者 Xi Peng Jing Fang Wei Cui Bangyuan Wu 《Health》 2012年第2期101-107,共7页
The aims of this study were to clarify the effects of high vanadium on the renal cell cycle and apoptosis in broilers. 420 one-day-old avian broilers were divided into six groups and fed on a control diet (vanadium 0.... The aims of this study were to clarify the effects of high vanadium on the renal cell cycle and apoptosis in broilers. 420 one-day-old avian broilers were divided into six groups and fed on a control diet (vanadium 0.073 mg/kg), and five high vanadium diets (vanadium 5 mg/kg, high vanadium group I;15 mg/kg, high vanadium group II;30 mg/kg, high vanadium group III;45 mg/kg, high vanadium group IV;60 mg/kg, high vanadium group V) throughout the experimental period of 42 days. As tested by flow cytometry, the percentage of apoptotic renal cells was increased in high vanadium group II, III, IV and V when compared with that of control group. The Proliferating index (PI) of renal cell and the ratio of S, G2 + M phase cells were markedly decreased and population of G0/G1 cells was increased in high vanadium group II, III, IV and V. The results showed that dietary vanadium in excess of 15 mg/kg was toxic to kidney by the renal cells cycle arrest and increased apoptosis, which caused the growth depression of the kidney in broilers. 展开更多
关键词 Dietary High VANADIUM renal cells APOPTOSIS cell Cycle Flow CYTOMETRY (FCM) BROILER
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后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞向肾系细胞分化的实验研究 被引量:1
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作者 汪泱 张立行 +5 位作者 王共先 谢安 娄远蕾 阮琼芳 崔苏萍 杨阳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期129-133,共5页
目的:探讨胚胎后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为肾系细胞的作用。方法:小鼠D3系胚胎干细胞通过悬滴法制备拟胚体(EBs),将EBs细胞与取自孕12.5 d小鼠胚胎的后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化,即为共培养诱导组,设EBs细胞自然... 目的:探讨胚胎后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为肾系细胞的作用。方法:小鼠D3系胚胎干细胞通过悬滴法制备拟胚体(EBs),将EBs细胞与取自孕12.5 d小鼠胚胎的后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化,即为共培养诱导组,设EBs细胞自然分化为对照组;采用免疫荧光染色法检测共培养第3、5、7 d后的EBs细胞Pax2、WT-1蛋白表达情况,通过逆转录PCR法检测诱导3 d后的EBs细胞Pax2、WT-1、Lim1、Sall1、Emx2、GDNF、Wnt4、BMP7、Nephl、Nephrin、KSP和CD24 mRNA的表达情况。结果:EBs细胞在诱导的第3 d即出现了全部肾发育相关基因的表达,其中共培养组Pax2、WT-1、Emx2、GDNF、Nephl、Nephrin、KSP和CD24的表达强于对照组;免疫荧光结果显示在诱导3 d后的EBs细胞中可观察到Pax2阳性细胞,阳性细胞数在共培养第5、7 d增多;诱导5 d后可观察到WT-1阳性细胞,对照组未见Pax2或WT-1蛋白阳性细胞出现。结论:后肾细胞微环境可促进ESCs分化为肾系细胞。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 后肾细胞 肾系细胞
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慢病毒载体介导短发夹RNA沉默Ppif基因对大鼠肾细胞的影响 被引量:2
7
作者 胡威 刘修恒 +4 位作者 祝恒成 吕胜启 陈晖 刘廷 陈志强 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期356-358,共3页
目的 构建干扰Ppif基因的重组U6慢病毒质粒,观察内源性小干扰RNA(siRNA)的效果.方法 根据siRNA设计原则,设计合成短发卡RNA(shRNA),用于体内转录合成干扰Ppif编码序列的发夹RNA.连接、筛选、酶切,鉴定Pgcl-GFP/U6 Ppif shRNA;以含... 目的 构建干扰Ppif基因的重组U6慢病毒质粒,观察内源性小干扰RNA(siRNA)的效果.方法 根据siRNA设计原则,设计合成短发卡RNA(shRNA),用于体内转录合成干扰Ppif编码序列的发夹RNA.连接、筛选、酶切,鉴定Pgcl-GFP/U6 Ppif shRNA;以含无关序列发夹结构的质粒载体为对照,感染大鼠肾细胞株,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测mRNA和蛋白表达水平与对照组的差异.结果 测序证实重组质粒构建成功,体外试验表明,Ppif基因的mRNA和蛋白表达均一致降低[(0.582 ±0.014)%],与阴性对照组[(0.946±0.018)%]和空白对照组[(0.893±0.021)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 慢病毒介导的Ppif-shRNA成功在体外敲减了大鼠肾细胞的目的蛋白表达,影响了肾缺血再灌注的发生与发展. 展开更多
关键词 肾细胞 慢病毒载体 Ppif基因 短发卡RNA 基因沉默
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肾脏细胞CD36在炎症因子诱导的脂肪酸摄取及脂质沉积中的作用 被引量:2
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作者 韦莉 吴婷婷 +1 位作者 陈压西 杨萍 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第10期1892-1900,共9页
慢性炎症和脂质代谢紊乱是慢性肾病的重要特征,炎症因子影响肾脏细胞脂质代谢的作用机制尚不清楚,该研究旨在探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运酶CD36的表达促进肾脏细胞脂肪酸摄取及脂质沉积。通过给予HMCs及HK2细胞肿瘤坏死因子(tum... 慢性炎症和脂质代谢紊乱是慢性肾病的重要特征,炎症因子影响肾脏细胞脂质代谢的作用机制尚不清楚,该研究旨在探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运酶CD36的表达促进肾脏细胞脂肪酸摄取及脂质沉积。通过给予HMCs及HK2细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素6(interleukin-6,IL-6)刺激处理24 h,应用qRT-PCR检测CD36的表达量,酶法检测HK2细胞内的甘油三酯(triglycercide,TG)水平。构建CD36过表达的细胞模型,使用荧光标记脂肪酸,观测细胞对外源性脂肪酸的摄取速率。然后利用小RNA干扰技术,构建CD36低表达的细胞模型,检测CD36低表达时细胞脂肪酸摄取速率及胞内甘油三酯、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量,葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及内质网跨膜激酶(IRE1)的m RNA表达量。结果显示,炎性因子TNF-α和IL-6促进HMCs及HK2细胞TG的累积增加,并刺激细胞CD36的表达;CD36过表达促进HMCs及HK2细胞对FFA的摄取。当CD36表达被干扰后,炎性因子诱导的肾脏细胞TG及FFA的累积增加、FFA的摄取速率、细胞内GRP78、IRE-1的m RNA表达量及ROS含量均受到了抑制。该项研究表明,在HMCs及HK2细胞中,炎症因子可能通过促进CD36表达,导致细胞对FFA摄取增多,进而引起细胞脂质积聚;干预CD36能够改善炎性因子引起的脂质积聚、内质网应激以及细胞损伤,提示CD36可作为慢性肾脏疾病的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 炎症 脂肪酸转运酶CD36 肾脏细胞 脂质沉积
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芦丁与花青素对肾细胞高尿酸损伤的修复效果探究 被引量:2
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作者 刘剑 周瑜桥 +2 位作者 徐梦姣 杨昱祺 曲道峰 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第10期1732-1737,共6页
为研究芦丁联合花青素对肾细胞氧化损伤的修复效果,该文以HEK293细胞株建立尿酸诱导的肾细胞氧化损伤模型。用CCK-8法测定受损细胞的活性,并利用Hochest33342(10 μg/mL)与PI(10 μg/mL)对细胞进行染色,观察其凋亡情况。最后借助氧化应... 为研究芦丁联合花青素对肾细胞氧化损伤的修复效果,该文以HEK293细胞株建立尿酸诱导的肾细胞氧化损伤模型。用CCK-8法测定受损细胞的活性,并利用Hochest33342(10 μg/mL)与PI(10 μg/mL)对细胞进行染色,观察其凋亡情况。最后借助氧化应激试剂盒检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的变化。实验结果分析表明,尿酸可诱导HEK293细胞产生氧化损伤,且以含1.4 g/L尿酸的培养基孵育细胞24 h可建立最佳的HEK293细胞损伤模型。芦丁与花青素对损伤细胞均有一定修复效果,且在两者联用时(芦丁40 μg/mL、花青素40 μg/mL)可得到最佳修复效果(60%修复率)。该研究证明了芦丁和花青素联合作用能够对氧化损伤的肾细胞起到较好的修复作用。 展开更多
关键词 肾细胞 氧化损伤 修复 芦丁 花青素
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外泌体在糖尿病肾脏疾病发病机制中的作用研究进展 被引量:1
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作者 白雨 刁宗礼 刘文虎 《当代医学》 2022年第10期190-194,共5页
糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病最常见的慢性并发症之一,可发展为终末期肾病(ESRD),需进行肾替代治疗,DKD严重降低患者的生活质量及生存率。目前,其发病机制尚未完全明确。外泌体(exosomes)是由各种细胞分泌的内含RNA、DNA、蛋白及脂类等... 糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病最常见的慢性并发症之一,可发展为终末期肾病(ESRD),需进行肾替代治疗,DKD严重降低患者的生活质量及生存率。目前,其发病机制尚未完全明确。外泌体(exosomes)是由各种细胞分泌的内含RNA、DNA、蛋白及脂类等多种生物活性物质的囊泡。外泌体参与DKD的发生发展。本文旨在对外泌体在DKD发病机制中的作用的相关研究进行综述。 展开更多
关键词 外泌体 糖尿病肾病 肾脏细胞 发病机制 研究进展
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核移植胚胎干细胞的鉴定及诱导分化研究 被引量:1
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作者 覃敏 黄林 +2 位作者 何敏 李慕军 莫曾南 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1037-1039,共3页
目的观察胚胎后肾细胞微环境诱导核移植胚胎干细胞(ntESCs)分化为肾系细胞的作用。方法分离小鼠ntESCs样集落,对ntESCs进行鉴定。将核移植拟胚体(ntEBs)与胚胎后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的观察胚胎后肾细胞微环境诱导核移植胚胎干细胞(ntESCs)分化为肾系细胞的作用。方法分离小鼠ntESCs样集落,对ntESCs进行鉴定。将核移植拟胚体(ntEBs)与胚胎后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测诱导后ntEBs与对照组中肾组织Wilms瘤抑癌因子1(WT-1)、Wnt-4、同源盒基因2(pax-2)、c—Ret、足细胞标记蛋白(podocalyxin)和Nephnn的mRNA表达;免疫荧光染色法检测诱导后ntEBs与对照组的Pax-2、wT-1蛋白表达。结果ntESCs集落性生长,符合小鼠胚胎干细胞的一系列特性。ntEBs共培养组wT-1、Wnt-4、pax-2、c—Ret、podocalyxin和Nephnn均有表达,而对照组则为阴性;免疫荧光结果显示ntEBs细胞诱导分化后Pax-2荧光强度为(++);而实验组wT-1荧光强度(+)也优于对照组的(±)。结论后肾细胞微环境可促进核移植胚胎来源ntESCs分化为肾系细胞。 展开更多
关键词 核移植 胚胎干细胞 肾系细胞
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常用分离培养肾细胞方法的比较 被引量:1
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作者 王庆华 王富民 +4 位作者 李前勇 张德志 桂小燕 潘耀宗 汤继顺 《安徽农业科学》 CAS 2012年第15期8536-8538,共3页
[目的]采用常用的分离培养肾细胞方法比较分离培养肾细胞,并提出优化方案。[方法]A法:组织块培养法;B法:1%胶原酶消化分离法;C法:5%胰蛋白酶消化法;D法:0.5%胰蛋白酶-0.02%EDTA连续分离法。[结果]A法初期细胞生长不好,1周后生长良好;B法... [目的]采用常用的分离培养肾细胞方法比较分离培养肾细胞,并提出优化方案。[方法]A法:组织块培养法;B法:1%胶原酶消化分离法;C法:5%胰蛋白酶消化法;D法:0.5%胰蛋白酶-0.02%EDTA连续分离法。[结果]A法初期细胞生长不好,1周后生长良好;B法、C法细胞贴壁状况较好,但细胞生长不均一,呈丘陵状生长,细胞产量较少;采用D法消化肾组织块,能够快速获得大量细胞,并且细胞生长整齐、均一,能够满足后续实验的需要。[结论]使用D法分离培养肾细胞优于其他3种方法,试验效果最佳。 展开更多
关键词 肾细胞 分离培养 生长
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铅和(或)镉对体外培养肾细胞的毒性损伤 被引量:1
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作者 王庆华 胥清芳 +1 位作者 顾建红 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1030-1034,共5页
在培养液中加入不同浓度的Cd(10、20、40μmol/L)、Pb(10、20、40μmol/L)和Pb-Cd联合(分别为5、10、20μmol/L),来探讨铅镉对肾细胞的作用及可能机制。在显微镜下观察细胞形态、测定细胞凋亡率和细胞周期及上清液脂质过氧化指标。结果... 在培养液中加入不同浓度的Cd(10、20、40μmol/L)、Pb(10、20、40μmol/L)和Pb-Cd联合(分别为5、10、20μmol/L),来探讨铅镉对肾细胞的作用及可能机制。在显微镜下观察细胞形态、测定细胞凋亡率和细胞周期及上清液脂质过氧化指标。结果表明:20μmol/L以上染毒组细胞皱缩、体积变小,表面有细胞碎片,甚至呈泡沫状或树枝状;铅、镉单独和联合染毒组GSH-Px、SOD活性随染毒剂量的增加,呈逐渐下降趋势(P<0.05),而MDA含量和凋亡率则呈升高趋势(P<0.05),并存在剂量和时间效应。镉和铅也能使细胞周期停滞。Pb、Cd联合可加剧细胞损伤。 展开更多
关键词 肾细胞 凋亡率 脂质过氧化
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LRP-1抑制缺氧/复氧诱导的肾细胞损伤 被引量:1
14
作者 段斌 职瑾 +2 位作者 杜鹏 高妍婷 李振江 《现代医学》 2017年第12期1697-1704,共8页
目的:探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)在肾小管上皮细胞(HK2)缺氧/复氧损伤中的作用及其可能机制。方法:建立HK-2缺氧/复氧模型;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LRP-1 mRNA表达量;Western blotting检测LRP-1、JNK蛋白表达量和JNK磷... 目的:探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)在肾小管上皮细胞(HK2)缺氧/复氧损伤中的作用及其可能机制。方法:建立HK-2缺氧/复氧模型;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LRP-1 mRNA表达量;Western blotting检测LRP-1、JNK蛋白表达量和JNK磷酸化水平;构建重组载体pcDNA.3.1-LRP-1并转染细胞过表达LRP-1;转染LRP-1 siRNA抑制LRP-1表达;试剂盒方法检测caspase-3活性;Annexin-Ⅴfluorescein isothiocyanate conjugate and propidium iodide(Annexin-ⅤFITC/PI)方法检测细胞凋亡;MTT法检测细胞生长活力;试剂盒方法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;JNK抑制剂SP600125孵育HK-2。结果:HK-2缺氧/复氧诱导LRP-1表达量上调;过表达LRP-1显著下调JNK磷酸化水平,降低缺氧/复氧诱导的HK-2凋亡,降低caspase-3活性和LDH漏出量,且提高细胞生长活力。抑制LRP-1则作用相反。另外,SP600125抑制JNK磷酸化水平,且提高细胞生长活力,降低caspase-3活性。结论:LRP-1可通过调控JNK降低肾细胞的缺氧/复氧损伤,为肾脏缺血再灌注的防治提供新的靶点。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白受体相关蛋白1 缺氧/复氧 肾细胞 JNK
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吸入七氟醚全身麻醉对早期糖尿病肾病大鼠肾足细胞的影响
15
作者 陈彧 林信武 郑智祥 《糖尿病新世界》 2022年第20期1-4,12,共5页
目的观察分析早期糖尿病肾病大鼠吸入七氟醚全身麻醉后对肾足细胞的影响。方法福建省老年医院于2020年9月—2021年9月选取66只成年糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠作为研究对象,随机分为两组,即模型组(33只)、七氟醚组(33只),... 目的观察分析早期糖尿病肾病大鼠吸入七氟醚全身麻醉后对肾足细胞的影响。方法福建省老年医院于2020年9月—2021年9月选取66只成年糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠作为研究对象,随机分为两组,即模型组(33只)、七氟醚组(33只),另选33只正常大鼠记为空白对照组。七氟醚麻醉处理后采集标本,通过苏木精和伊红染色(H&E)进行肾脏病理变化检查,并对肾足突细胞m-RNA的表达水平进行评估。结果模型组UAL、GLU、BUN、CR、AST、ALT水平低于七氟醚组,差异有统计学意义(P<0.05)。肾组织经H&E染色后,通过光学显微镜观察肾组织病理变化,其中空白对照组肾脏组织未出现变化;模型组出现管变形及不完整的肾小球,同时肾小球体积增加。RT-PCR法检测下,七氟醚组大鼠的α-SMA和desmin增多,而nephrin和podocin显著减少,而七氟醚组与模型组相比,nephrin和podocin明显减少,而α-SMA和desmin明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting法检测下,七氟醚组与模型组对比,nephrin和podocin明显增多,而α-SMA和desmin明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。研究过程中仍观察出七氟醚组的协同效应,同时结果与mRNA表达均一致。结论七氟醚麻醉能够改善糖尿病肾足细胞细胞结构和功能,对于患者围术期的治疗具有一定应用价值。 展开更多
关键词 七氟醚 糖尿病肾病 肾细胞 足细胞
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补充L-赖氨酸对急性力竭运动大鼠肾细胞凋亡及凋亡调控基因蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 刘君雯 刘文锋 +3 位作者 汤长发 罗荣保 张勇 刘慧敏 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期723-726,718,共5页
目的:探讨补充L-赖氨酸对急性力竭运动大鼠肾细胞凋亡及凋亡调控基因蛋白表达的影响。方法:成年雄性SD大鼠24只,随机分成3组:安静对照组、运动组和运动给药组。安静对照组不运动,运动组和运动给药组进行一次力竭运动。安静对照组和运动... 目的:探讨补充L-赖氨酸对急性力竭运动大鼠肾细胞凋亡及凋亡调控基因蛋白表达的影响。方法:成年雄性SD大鼠24只,随机分成3组:安静对照组、运动组和运动给药组。安静对照组不运动,运动组和运动给药组进行一次力竭运动。安静对照组和运动组在力竭运动前均灌胃一次生理盐水,而运动给药组灌胃L-赖氨酸一次。运动后即刻处死大鼠,取肾组织,HE常规染色观察细胞形态,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组织化学法检测bax、bcl-2和p53蛋白表达。结果:与安静对照组相比,运动组和运动给药组大鼠细胞凋亡发生率和凋亡指数显著增加(P<0.01);与运动组相比,运动给药组凋亡指数显著下降(P<0.05)。与安静对照组相比,运动组和运动给药组bax、bcl-2和p53蛋白表达的阳性细胞平均光密度值(MOD)、阳性物质表达面积和阳性指数PI差异显著增高(P<0.01,P<0.05);与运动组相比,运动给药组bax和p53显著降低,bcl-2显著增高(P<0.05)。与安静对照组相比,运动组bcl-2/bax显著降低(P<0.05),运动给药组显著增加(P<0.05);且运动给药组显著高于运动组(P<0.05)。结论:(1)一次力竭运动前补充L-赖氨酸使力竭运动诱导的肾细胞凋亡显著减少;(2)一次力竭运动前补充L-赖氨酸可使p53蛋白表达显著降低,使bcl-2蛋白表达显著增高,并使bcl-2/bax比值增高,从而起到抑制细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 肾细胞 凋亡 大强度急性力竭运动 L-赖氨酸 bax bcl-2 p53
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体外诱导人iPS细胞向肾脏细胞定向分化的实验研究
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作者 黄佳卉 牛鑫 +4 位作者 胡斌 周树敏 李青 郭尚春 汪泱 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期957-961,共5页
目的探讨人诱导性多能干细胞(iPS)体外定向分化为肾脏细胞的方法,为应用干细胞进行肾脏再生治疗奠定实验基础。方法以正常人iPS细胞为实验对象,运用生肾因子活化素A(Activin-A)、骨形成蛋白7(BMP7)、人血管内皮生长因子(hVEGF)、碱性成... 目的探讨人诱导性多能干细胞(iPS)体外定向分化为肾脏细胞的方法,为应用干细胞进行肾脏再生治疗奠定实验基础。方法以正常人iPS细胞为实验对象,运用生肾因子活化素A(Activin-A)、骨形成蛋白7(BMP7)、人血管内皮生长因子(hVEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、锂盐、维甲酸(RA)等细胞因子联合肾脏上皮细胞培养液对iPS进行定向诱导肾脏细胞分化,分别于诱导后第14、21和28日,细胞免疫荧光染色及Real-Time PCR检测肾脏发育相关蛋白Brachyury(Bry)、Paired box gene 2(Pax2)、水通道蛋白1(AQP1)和E-钙粘素(E-cad)蛋白及mRNA的表达水平,RT-PCR检测分化各阶段多能性基因Nanog和OCT4的表达水平。结果诱导培养液分别诱导14、21和28 d后,细胞免疫荧光染色观察发现;分化后的细胞分别表达Bry、Pax2、AQP1和E-cad蛋白,而在未分化的iPS细胞中未见表达。Real-Time PCR结果显示:诱导后细胞中Bry、Pax2、AQP1、E-cad mRNA的表达分别较未分化的iPS细胞上调了4、30、37和25倍(P<0.05),分化各阶段多能性基因OCT4和Nanog的表达水平逐渐下调(P<0.05)。结论细胞因子联合肾脏上皮细胞培养液可有效诱导人iPS细胞定向分化为肾脏细胞。 展开更多
关键词 细胞因子 分化 诱导性多能干细胞 肾脏细胞
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EHEC:O157感染后小鼠肾细胞凋亡的检测
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作者 苏玉虹 张洋 +2 位作者 朱弘焱 赵微 巴彩凤 《辽宁医学院学报》 CAS 2008年第4期289-291,共3页
目的检测C3H/HeJ和C3H/SW小鼠感染肠出血性大肠杆菌(EHEC:O157)后肾细胞凋亡,并探讨thl4基因突变对肾细胞凋亡的影响。方法流式细胞术(FCM)检测C3H/HeJ和C3H/SW小鼠感染EHEC:O157后肾细胞凋亡率,采用SPSS11.0统计软件分析结果。结果C3H/... 目的检测C3H/HeJ和C3H/SW小鼠感染肠出血性大肠杆菌(EHEC:O157)后肾细胞凋亡,并探讨thl4基因突变对肾细胞凋亡的影响。方法流式细胞术(FCM)检测C3H/HeJ和C3H/SW小鼠感染EHEC:O157后肾细胞凋亡率,采用SPSS11.0统计软件分析结果。结果C3H/HeJ小鼠肾细胞凋亡率明显高于C3H/SW小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠感染EHEC:O157后肾细胞凋亡与thl4基因突变相关。 展开更多
关键词 小鼠 EHEC O157 肾细胞 凋亡 流式细胞术
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不同剂量郑氏三七散动物肾细胞毒理学研究
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作者 曹雪 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2015年第4期118-121,共4页
目的:通过对大鼠服用不同剂量的郑氏三七散进行干预实验,以此了解郑氏三七散的毒理学性质。方法:实验选取SD雄性大鼠48只,随机分为四组:空白对照组、常规剂量组,中等剂量组和大剂量组,每组12只。干预实验持续3周。实验后抽取各组大鼠的... 目的:通过对大鼠服用不同剂量的郑氏三七散进行干预实验,以此了解郑氏三七散的毒理学性质。方法:实验选取SD雄性大鼠48只,随机分为四组:空白对照组、常规剂量组,中等剂量组和大剂量组,每组12只。干预实验持续3周。实验后抽取各组大鼠的血液检测,称取肾脏重量,留取肾组织标本观察。结果:(1)大鼠给药三周后,不同剂量组以及对照组的大鼠外观特征和行为活动表现正常,各组大鼠体重变化正常;(2)肾脏病理切片显示服用不同剂量郑氏三七散各组大鼠与对照组肾脏被膜完整,肾细胞结构完整,肾组织细胞未见坏死等异常现象出现;(3)各组大鼠肾脏重量及系数均无显著差异;(4)各组大鼠血液中尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)无显著差异。结论:本实验条件下,三组不同剂量郑氏三七散使用时均比较安全,没有副作用,适合临床使用。 展开更多
关键词 郑氏三七散 肾细胞 毒理学
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胎肾细胞移植对维甲酸所致大鼠骨质疏松症的实验研究 被引量:10
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作者 彭宁 李锐 +1 位作者 张维 郑清莲 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2001年第4期300-304,共5页
目的 探讨胎肾细胞悬液对维甲酸所致大鼠骨质疏松症的作用 ,为防治骨质疏松症寻找理想的药物。方法 通过静脉输注胎肾细胞悬液 ,观察胎肾对维甲酸所致骨质疏松大鼠血钙、磷、尿钙、磷、尿羟脯氨酸等生化指标和骨形态结构的影响 ,并与... 目的 探讨胎肾细胞悬液对维甲酸所致大鼠骨质疏松症的作用 ,为防治骨质疏松症寻找理想的药物。方法 通过静脉输注胎肾细胞悬液 ,观察胎肾对维甲酸所致骨质疏松大鼠血钙、磷、尿钙、磷、尿羟脯氨酸等生化指标和骨形态结构的影响 ,并与防治骨质疏松药物尼尔雌醇及生理盐水进行对照 ,观察其对上述生化指标及骨质疏松模型大鼠骨质的改善。结果 与尼尔雌醇组及生理盐水组相比 ,胎肾组大鼠血钙明显升高 ,尿羟脯氨酸水平降低 (P <0 0 5 ) ,而尿钙、尿磷无显著性差异 (P >0 0 5 )。在骨显微结构的病理变化中 ,胎肾组大鼠的骨小梁厚度、面积及密度均高于尼尔雌醇组及生理盐水组 ,而骨小梁间隙和骨髓腔明显缩小 (P <0 0 5 )。 展开更多
关键词 胎肾细胞 细胞移植 骨质疏松 维甲酸 OP
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