鼠肺细胞的分离纯化及原代培养 被引量：16

1

作者 严玉兰 刘洋 +2 位作者 步雪峰 张志坚 郑金旭 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2008年第1期11-14,I0002,共5页

目的:建立一套可靠的鼠肺细胞分离、纯化和培养技术,用于体外研究间质性肺病的发病机制及治疗方法。方法:采用胰酶消化出生后2 d SD大鼠肺组织块及SD大鼠肺泡灌洗液,经差时贴壁法,分离、纯化红皮鼠肺成纤维细胞(lung fibroblast,LF)和S... 目的:建立一套可靠的鼠肺细胞分离、纯化和培养技术,用于体外研究间质性肺病的发病机制及治疗方法。方法:采用胰酶消化出生后2 d SD大鼠肺组织块及SD大鼠肺泡灌洗液,经差时贴壁法,分离、纯化红皮鼠肺成纤维细胞(lung fibroblast,LF)和SD大鼠肺泡巨噬细胞(pulmonary alveolar macrophage,AM),并进行原代培养。用波形蛋白(Vimentin)、CD14细胞免疫荧光染色、蛋白质印迹和电镜对所分离的细胞进行鉴定。结果:所得细胞产量大、纯度高。细胞免疫荧光染色LF细胞波形蛋白染色阳性而CD14染色阴性;AM细胞则相反。扫描电镜观察可见肺成纤维细胞有微绒毛,细胞间连接成网状,蛋白质印迹结果显示波形蛋白表达。结论:该方法是一种可靠的红皮鼠肺成纤维细胞及大鼠肺巨噬细胞的分离纯化培养技术,可用于间质性肺病(interstitial lung disease,ILD)的发病机制及治疗方法的体外研究。 展开更多

关键词 大鼠 肺成纤维细胞 巨噬细胞 原代细胞培养

下载PDF 职称材料

未修饰纳米SiO_2和表面修饰型纳米SiO_2对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性研究 被引量：5

2

作者 田晓雷 陈敏 +4 位作者 杨敏 王胜军 姜旭淦 李华明 谢吉民 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2007年第1期53-56,共4页

目的:比较未修饰纳米SiO2和表面修饰型纳米SiO2对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性。方法:通过支气管肺泡灌洗分离雄性SD大鼠肺泡巨噬细胞。未修饰纳米SiO2(M-5型)及两种表面修饰型纳米SiO2(TS-610型,TS-720型)剂量分别为0,8,40,100,200μg/cm2,... 目的:比较未修饰纳米SiO2和表面修饰型纳米SiO2对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性。方法:通过支气管肺泡灌洗分离雄性SD大鼠肺泡巨噬细胞。未修饰纳米SiO2(M-5型)及两种表面修饰型纳米SiO2(TS-610型,TS-720型)剂量分别为0,8,40,100,200μg/cm2,用MTT实验测定对细胞活性的影响,LDH实验测定对细胞膜的损伤,TBA法测定脂质过氧化作用的程度。结果:M-5型纳米SiO2在剂量大于100μg/cm2时,各指标与对照组相比有统计学意义(P<0.05),而两种表面修饰型纳米SiO2与对照组相比均无统计学意义。结论:未修饰纳米SiO2对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性较强,颗粒表面被修饰后其毒性明显降低,表明颗粒表面反应性在毒性机制中发挥重要作用。 展开更多

关键词 纳米SIO 表面修饰 大鼠 肺泡巨噬细胞 毒性

下载PDF 职称材料

甘露消毒丹及其拆方对肺炎支原体干预的NR8383细胞炎症因子表达的影响 被引量：1

3

作者 郑豪 张葆青 周旭 《中国医药导报》 CAS 2023年第18期4-9,共6页

目的研究甘露消毒丹及其拆方对肺炎支原体(MP)感染的大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)炎症因子表达的影响。方法选取35只8周龄SPF级雌性Wistar大鼠,体重(200±10)g,按随机数字表法将其分为空白血清组(生理盐水2 ml/d)、甘露消毒丹血清组[33... 目的研究甘露消毒丹及其拆方对肺炎支原体(MP)感染的大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)炎症因子表达的影响。方法选取35只8周龄SPF级雌性Wistar大鼠,体重(200±10)g,按随机数字表法将其分为空白血清组(生理盐水2 ml/d)、甘露消毒丹血清组[33 g/(kg·d)]、阿奇霉素血清组[0.063 g/(kg·d)]及拆方1血清组[12.3g/(kg·d)]、拆方2血清组[20.8 g/(kg·d)],每组7只。每组按剂量给药,1次/d,连续给药1周制备含药血清。将NR8383细胞分别使用空白血清和含药血清进行处理,使用CCK-8法检测并比较不同血清处理的NR8383细胞与未处理细胞活力的差异。将NR8383细胞分为对照组、模型组、甘露消毒丹组、阿奇霉素组及拆方1、2组,除对照组外,各组均用10^(6)~10^(7) CCU/ml浓度的MP菌液干预4 h以建立MP感染模型,随后加入相应含药血清孵育24 h。收集各组细胞及上清液,采用qPCR和蛋白质印迹法检测各组Toll样受体4(TLR4)、MyD88、核因子κB(NF-κB)mRNA和相应蛋白的表达情况,酶联免疫吸附试验检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10的表达水平。结果各血清处理的细胞存活率均低于无处理的细胞(P<0.05)。各血清处理细胞存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组TLR4、MyD88、NF-κB-p50 mRNA表达及蛋白水平均高于对照组,甘露消毒丹组、拆方2组TLR4、MyD88、NF-κB-p50 mRNA表达及蛋白水平均低于模型组,拆方1组MyD88 mRNA表达及TLR4蛋白水平低于模型组(P<0.05)。甘露消毒丹组TLR4、MyD88 mRNA表达及TLR4、MyD88、NF-κB-p50蛋白水平低于拆方1组,NF-κB-p50 mRNA表达及TLR4蛋白水平高于拆方2组(P<0.05)。甘露消毒丹组、拆方2组TNF-α、IL-1β水平低于模型组,拆方1组IL-1β水平低于模型组,拆方2组IL-10低于模型组(P<0.05)。甘露消毒丹组TNF-α、IL-1β、IL-10水平均低于拆方1组,TNF-α、IL-1β水平高于拆方2组(P<0.05)。结论MP感染可促进NR8383细胞的TNF- 展开更多

关键词 甘露消毒丹 肺炎支原体 大鼠肺泡巨噬细胞 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1β 白细胞介素-10

下载PDF 职称材料

MicroRNA-19b对强毒力结核分枝杆菌诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响及其机制 被引量：5

4

作者 刘红艳 《现代医学》 2016年第7期952-957,共6页

目的:探讨微小RNA-19b(miR-19b)对强毒力结核分枝杆菌(H37Rv)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法:以强毒力H37Rv感染miR-19b模拟物或其抑制剂转染的大鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率;RT-PCR检测Toll样受体蛋... 目的:探讨微小RNA-19b(miR-19b)对强毒力结核分枝杆菌(H37Rv)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法:以强毒力H37Rv感染miR-19b模拟物或其抑制剂转染的大鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率;RT-PCR检测Toll样受体蛋白(TLRs)的mRNA或miR-19b水平;Western blot检测Cleaved caspase 3、Bcl-2及TLRs蛋白的表达,应用Gel-pro4.0软件分析Western blots条带;所有数据采用独立样本t检验。结果:大鼠肺泡巨噬细胞经H37Rv感染后,miR-19b抑制剂组细胞总凋亡率[12 h为(13.55±0.45)%,24 h为(17.16±0.42)%]显著高于对照组[12 h为(9.42±0.47)%,24 h为(12.29±0.37)%];转染24 h后,细胞Cleaved caspase 3相对表达(0.59±0.07)显著高于对照组(0.45±0.05),Bcl-2相对表达(0.34±0.03)显著低于对照组(0.54±0.05),且细胞Toll样受体2(TLR2)相对水平(mRNA为0.283±0.03,蛋白为0.25±0.02)显著高于对照组(mRNA为0.20±0.02,蛋白为0.18±0.01),各组间TLR4、TLR7、TLR9表达无差异;以上变化在miR-19b模拟物组中则相反。此外,高表达的TLR2经其抗体中和后,miR-19b沉默使H37Rv感染大鼠肺泡巨噬细胞的促凋亡作用受到抑制。结论:大鼠肺泡巨噬细胞中,miR-19b沉默能够通过上调TLR2水平促进强毒力结核分枝杆菌诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡。 展开更多

关键词 微小RNA-19b 结核分枝杆菌 大鼠肺泡巨噬细胞 TOLL样受体2 细胞凋亡

原文传递

慢病毒介导siRNA干扰MyD88表达对大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响 被引量：3

5

作者 唐光亮 范慧敏 刘中民 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2010年第3期9-14,共6页

目的采用RNA干扰技术，通过构建表达大鼠髓样分化因子88（MyD88）siRNA慢病毒干扰大鼠肺泡巨噬细胞MyD88g／表达，检测其对细胞功能的影响。方法针对MyD88基因，设计并构建3对siRNA表达质粒，分别与预先构建好表达MyD88N质粒共转染HEK-2... 目的采用RNA干扰技术，通过构建表达大鼠髓样分化因子88（MyD88）siRNA慢病毒干扰大鼠肺泡巨噬细胞MyD88g／表达，检测其对细胞功能的影响。方法针对MyD88基因，设计并构建3对siRNA表达质粒，分别与预先构建好表达MyD88N质粒共转染HEK-293T细胞，Westernblot检测MyD88的表达情况，筛选出其中1对干扰效率最高的siRNA，用Gateways方法构建慢病毒干扰载体包装成慢病毒，将慢病毒转染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383胞并加入内毒素（LPS）诱导，未转染慢病毒的细胞作为空白对照组和LPS激活组：空白对照组加入与LPS等体积的PBS；LPS激活组加入LPS刺激。ELISA测定各组细胞因子（IL-18、IL-6）释放情况。结果成功筛选出了1对干扰效率最高的siRNA并包装成慢病毒，病毒滴度为2．0×10^6TU／ml。LPS诱导后，与对照组相比．感染慢病毒的NR8383细胞MyD88表达明显受到抑制，IL-1β、IL-6的释放均显著减少，差异有统计学意义。结论慢病毒介导RNA干扰能够有效抑制NR8383细胞MyD88基因的表达，显著减少胞因子的释放，为以抗原提呈细胞（APC）为靶向的体内实验治疗大鼠肺移植相关闭塞性细支气管炎（obliterative bronchitis，OB）的研究提供了手段。 展开更多

关键词 MYD88 大鼠肺泡巨噬细胞 RNAI 慢病毒 IL-1β IL-6

下载PDF 职称材料

纳米氧化铈对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的增殖影响 被引量：3

6

作者 吕丽萍 杨静 +4 位作者 杨通旺 吴涛 张博闻 张志强 吴刚 《包头医学院学报》 CAS 2014年第5期1-4,共4页

目的：研究纳米氧化铈对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的毒性作用和对细胞的增殖影响;考察纳米氧化铈作用于细胞的生物效应是否存在剂量和粒径效应。方法：不同终浓度200、100、50、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/m L的20.8 nm Ce O2-NPs体... 目的：研究纳米氧化铈对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的毒性作用和对细胞的增殖影响;考察纳米氧化铈作用于细胞的生物效应是否存在剂量和粒径效应。方法：不同终浓度200、100、50、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/m L的20.8 nm Ce O2-NPs体外作用于96孔板中NR8383细胞24 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;四种粒径20nm、50-100 nm、300-500 nm、1-5μm Ce O2分别以四种终浓度100、50、20、10μg/m L作用于NR8383细胞24 h,采用CCK-8试剂盒检测检测细胞活力。结果：不同浓度20.8 nm Ce O2-NPs作用于NR8383细胞,与对照组相比,除1.25、2.5、5μg/m L外,其他浓度下细胞存活率随浓度增大而升高,100、200μg/m L最明显;有剂量效应。四种粒径四种浓度的纳米氧化铈作用于NR8383细胞,50-100 nm的20μg/m L浓度和1-5μm的50、10μg/m L浓度Ce O2-NPs抑制细胞增殖,但不明显;其他各组均促进细胞增殖,其中20 nm的20μg/m L,50-100 nm的50μg/m L、100μg/m L最明显。剂量尺寸效应不明显。结论：小粒径纳米氧化铈对NR8383细胞增殖有促进作用,无明显毒性;微米级氧化铈有些浓度下细胞存活率降低,可能对细胞造成毒性。 展开更多

关键词 纳米氧化铈 大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383 增殖 毒性

下载PDF 职称材料

庆大霉素雾化吸入对重型颅脑损伤大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响 被引量：1

7

作者 沈世琴 朱京慈 曾兢 《解放军护理杂志》 2006年第8期1-3,共3页

目的探讨庆大霉素雾化吸入对重型颅脑损伤大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响。方法采用大鼠颅脑局部气压冲击伤模型,将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、对照组和实验组。对照组将动物创伤后给予生理盐水雾化吸入,实验组将动物创伤后给予生理盐... 目的探讨庆大霉素雾化吸入对重型颅脑损伤大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响。方法采用大鼠颅脑局部气压冲击伤模型,将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、对照组和实验组。对照组将动物创伤后给予生理盐水雾化吸入,实验组将动物创伤后给予生理盐水+庆大霉素雾化吸入。用白色念珠菌法观察肺泡巨噬细胞的吞噬率,放射免疫法检测支气管肺泡灌洗液中细胞因子肿瘤坏死因子-α和白介素-6的水平。结果实验组第7天的肺泡巨噬细胞吞噬率为(0.415±0.089),明显低于对照组的(0.560±0.075),P<0.01;实验组第7天的支气管肺泡灌洗液中白介素-6水平为(317.335±53.319),明显低于对照组的(554.604±17.833),P<0.01。结论庆大霉素雾化吸入第7天时可降低肺泡巨噬细胞吞噬率,下调支气管肺泡灌洗液中白介素-6水平。 展开更多

关键词 庆大霉素 雾化吸入 重型颅脑损伤 大鼠 肺泡巨噬细胞

下载PDF 职称材料

硒镁联合作用对SiO2致肺泡巨噬细胞NO、NOS水平变化的影响

8

作者 谈伟君 李伯灵 +1 位作者 何整 陈国银 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第2期235-237,共3页

[目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)与硫酸镁(MgSO4)单独及联合作用对二氧化硅(SiO2)致肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合。[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109个/... [目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)与硫酸镁(MgSO4)单独及联合作用对二氧化硅(SiO2)致肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合。[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109个/L),同时加入SiO2及不同浓度的MgSO4溶液、Na2SeO3溶液、Na2SeO3+MgSO4溶液,37℃,5%CO2条件下培养18h后,检测NO含量与NOS活性。[结果]与SiO2组比较,Na2SeO3与MgSO4单独及联合使用在体外均可以降低巨噬细胞NO水平及NOS活性(P﹤0.05),Na2SeO3与MgSO4的交互作用具有统计学意义,且以1.0μmol/LNa2SeO3与1.0μmol/LMgSO4联合作用效果最好。[结论]Na2SeO3与MgSO4二者联合应用在体外可明显降低SiO2粉尘所致AM的NO水平和NOS的活性。 展开更多

关键词 二氧化硅 硫酸钱 亚硒酸钠 大鼠肺泡巨噬细胞 一氧化氪 一氧化氮合酶

下载PDF 职称材料

不同剂量射线对大鼠肺泡巨噬细胞增殖能力的影响

9

作者 王家伟 王雪凯 侯炜 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第6期911-914,共4页

目的:观察不同剂量射线对大鼠肺泡巨噬细胞增殖能力的影响,为放射性肺损伤细胞模型建立奠定前期基础。方法:使用高能直线加速器X射线以不同剂量射线(0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy)照射大鼠肺泡巨噬细胞,分别于照射后24 h、48 h、72 h后观察... 目的:观察不同剂量射线对大鼠肺泡巨噬细胞增殖能力的影响,为放射性肺损伤细胞模型建立奠定前期基础。方法:使用高能直线加速器X射线以不同剂量射线(0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy)照射大鼠肺泡巨噬细胞,分别于照射后24 h、48 h、72 h后观察细胞镜下形态,并用MTT法检测细胞增殖能力。结果:在不同时间节点,一个视野内,照射组细胞数量均少于正常组(0 Gy组),从细胞形态来看,0 Gy组细胞表现为大鼠肺泡巨噬细胞呈串样生长的特点,而照射组细胞则呈单个分散样生长;经MTT法检测,照射后各时间节点测定OD值分别为:0 Gy组,0.139、0.165、0.205; 2 Gy组,0.112、0.127、0.151; 4 Gy组,0.109、0.121、0.138; 6 Gy组,0.088、0.094、0.099。其中不同剂量射线照射组与正常组相比,吸光度值均有差异,P=0.000 <0.05;不同时间点,24 h,48 h,72 h,各组吸光度之间均有差异,P=0.000 <0.05;不同剂量照射组之间两两相比,2 Gy组与4 Gy组差异不明显,P=0.052> 0.05,6 Gy组与其他两组之间差异显著。结论:射线会对大鼠肺泡巨噬细胞的生长特性和增殖能力产生影响,使其串样生长特性消失,其中6 Gy剂量射线对细胞所产生的影响最大。 展开更多

关键词 放射性肺损伤 大鼠肺泡巨噬细胞 增殖能力

下载PDF 职称材料

氯胺酮对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响 被引量：19

10

作者 顾达民 陈宇 +1 位作者 张小宝 付诚章 《实用临床医药杂志》 CAS 2008年第8期1-2,7,共3页

目的研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响。方法体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383经氯胺酮(10、100和1000μmol/L)预处理,LPS刺激24 h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)及超氧化物岐化酶(SOD)... 目的研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响。方法体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383经氯胺酮(10、100和1000μmol/L)预处理,LPS刺激24 h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)及超氧化物岐化酶(SOD)的水平。结果与PBS组比较,LPS组培养上清液中MDA水平均明显增加,而SOD水平显著下降,而氯胺酮预处理组(100和1000μmol/L)对此具有抑制作用。结论氯胺酮对LPS所致的NR8383细胞的氧化应激损伤具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 氯胺酮 LPS 大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383 丙二醛 超氧化物岐化酶

下载PDF 职称材料

艾拉莫德对脂多糖激活大鼠肺泡巨噬细胞系TNFα产生及NF-κB活性的抑制作用 被引量：17

11

作者 蒋叶 吕伟 +3 位作者 余书勤 姚琳 绪广林 张锡然 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期401-405,共5页

目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用。方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4μmol.L-1)处理,LPS刺... 目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用。方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4μmol.L-1)处理,LPS刺激后应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TNFα的水平,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TNFαmRNA水平,ELISA法检测NF-κB的活性。结果T-614对LPS诱导的NR8383细胞TNFαmRNA水平和蛋白水平的上调有显著抑制作用,对NF-κB的转录活性也有抑制作用。结论T-614可能通过抑制LPS诱导的NR8383的NF-κB活性而降低TNFα的产生。 展开更多

关键词 艾拉莫德 大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383 肿瘤坏死因子Α 核因子ΚB

下载PDF 职称材料

前列腺素E_2对大鼠巨噬细胞株NR8383合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响 被引量：10

12

作者 刘勉 龚艺 +4 位作者 韦锦燕 谢多 王京 余艳红 全松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期936-940,共5页

目的探究前列腺素E_2(PGE_2)对大鼠巨噬细胞株NR8383细胞合成血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用以及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)趋化成管的影响。方法分别采用0.1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2+10 nmol/L EP2受体抑制剂... 目的探究前列腺素E_2(PGE_2)对大鼠巨噬细胞株NR8383细胞合成血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用以及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)趋化成管的影响。方法分别采用0.1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2+10 nmol/L EP2受体抑制剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑制剂AH23848处理的NR8383细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑制剂处理的NR8383细胞作为对照组,采用Western blot和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及m RNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激HUVECs,运用TRANSWELL小室、Matrigel胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE_2调控巨噬细胞对HUVEC迁移效应和成管能力的影响。结果随着NR8383细胞培养液中加入PGE_2浓度增高,其VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE_2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE_2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE_2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);研究发现PGE_2特异性的EP2/EP4受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE_2增强NR8383细胞内VEGF mRNAs表达的作用并且也显著抑制PGE2增强NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。结论 PGE2可以通过作用NR8383细胞表面对应的EP2/EP4受体调控VEGF的合成,促进HUVEC趋化和成管效应。 展开更多

关键词 前列腺素E2 大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383 人脐静脉血管内皮细胞 血管内皮生长因子

下载PDF 职称材料

氯胺酮对脂多糖诱发的大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮及氧自由基生成的影响 被引量：3

13

作者 张小宝 朱敏敏 +1 位作者 黄海慧 傅诚章 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1115-1117,共3页

目的:研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮(NO)、羟自由基(.OH)及超氧阴离子(O2.-)生成的影响。方法:体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为对照组(C组),LPS组(L组)及不同浓度氯胺酮预处理组(K1、K2和K3组)。检测... 目的:研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮(NO)、羟自由基(.OH)及超氧阴离子(O2.-)生成的影响。方法:体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为对照组(C组),LPS组(L组)及不同浓度氯胺酮预处理组(K1、K2和K3组)。检测细胞培养上清液中NO、.OH及O2.-水平。结果:L组NO、.OH及O2.-水平显著高于C组,K2和K3组的NO、.OH及O2.-水平显著低于L组,K2和K3组间无统计学差异。结论:氯胺酮对LPS所致的NR8383的NO、.OH及O2.-的升高有抑制作用。 展开更多

关键词 氯胺酮 LPS 大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383 一氧化氮 羟自由基 超氧阴离子

下载PDF 职称材料

通过NF-κB调控蛋白激酶SPAK通路促进NR8383细胞炎症介质释放及氧化应激发生 被引量：1

14

作者 陈妍 薄丽艳 李聪聪 《中华肺部疾病杂志（电子版）》 2022年第2期146-150,共5页

目的分析SPAK在高渗透压应激所致大鼠肺泡世噬细胞系(NR8383)细胞炎症介质释放及氧化应激发生中的作用。方法在细胞培养液中加入核因子κB(nuclear factorκappa-B,NF-κB)的抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(1-Pyrrolidinecarbodithioic a... 目的分析SPAK在高渗透压应激所致大鼠肺泡世噬细胞系(NR8383)细胞炎症介质释放及氧化应激发生中的作用。方法在细胞培养液中加入核因子κB(nuclear factorκappa-B,NF-κB)的抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(1-Pyrrolidinecarbodithioic acid,PDTC)阻断其磷酸化,检测其对高渗刺激引起的SPAK表达升高的抑制作用。通过siRNA干扰技术下调SPAK的表达,检测NR8383细胞炎症介质TNF-α和IL-1的分泌以及MPO活性和LDH释放,阐明SPAK在细胞应对高渗透压刺激时的调控作用。结果高渗透压刺激可以导致NR8383细胞中的NF-κB的磷酸化并上调SPAK蛋白表达,而通过对NR8383细胞进行PDTC预处理,NF-κB的磷酸化及SPAK蛋白表达水平可以显著受到抑制。而SPAK表达下调可以减轻高渗刺激所致的炎症因子释放增加,降低MPO活性以及H_(2)O_(2)浓度。结论磷酸化NF-κB可以调控SPAK转录及翻译,而SPAK可以通过促进炎性介质释放、诱导氧化应激参与到高渗透压刺激的调控中。 展开更多

关键词 大鼠肺泡世噬细胞 核因子-ΚB 高渗透压刺激 蛋白激酶SPAK 氧化应激

原文传递

S100A8对大鼠肺泡巨噬细胞炎性因子释放水平的影响 被引量：1

15

作者 刘琴 杨陈武 +2 位作者 刘小燕 欧国春 陈小菊 《川北医学院学报》 CAS 2021年第10期1271-1274,共4页

目的:探讨S100A8 siRNA对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383炎症介质释放水平的影响。方法:构建S100A8 siRNA载体,利用脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染NR8383细胞,荧光定量PCR检测S100A8基因的沉默效率。不同浓度(0.1~10μg/mL)的... 目的:探讨S100A8 siRNA对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383炎症介质释放水平的影响。方法:构建S100A8 siRNA载体,利用脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染NR8383细胞,荧光定量PCR检测S100A8基因的沉默效率。不同浓度(0.1~10μg/mL)的脂多糖刺激S100A8沉默组和阴性对照组细胞2 h,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度。结果:S100A8 siRNA转染至NR8383细胞后,S100A8 mRNA的表达降低(P<0.05)。随着脂多糖刺激浓度增加,S100A8沉默组和阴性对照组细胞上清液中IL-6、IL-8和TNF-α浓度均逐渐增加,各浓度组与0μg/mL组比较,差异有统计学意义(P<0.05);各浓度组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。以相同浓度脂多糖刺激S100A8沉默组和阴性对照组细胞,阴性对照组细胞上清液中IL-6、IL-8和TNF-α浓度均高于S100A8沉默组(P<0.05)。结论:S100A8 siRNA通过下调NR8383细胞中S100A8基因的表达,减轻了脂多糖诱导的炎症介质的释放,有望作为炎症疾病治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 大鼠肺泡巨噬细胞 S100A8 脂多糖 SIRNA 炎症介质

下载PDF 职称材料

氯胺酮对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞抗氧化能力的影响

16

作者 尤克强 张小宝 傅诚章 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2121-2122,共2页

目的研究氯胺酮对脂多糖（LPS）刺激的大鼠肺泡巨噬细胞（AM）抗氧化能力的影响。方法体外培养大鼠肺泡AM株NR8383经氯胺酮（10、100、1000μmol/L）预处理,LPS刺激24h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中总抗氧化能力（T-AOC）及谷胱甘... 目的研究氯胺酮对脂多糖（LPS）刺激的大鼠肺泡巨噬细胞（AM）抗氧化能力的影响。方法体外培养大鼠肺泡AM株NR8383经氯胺酮（10、100、1000μmol/L）预处理,LPS刺激24h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中总抗氧化能力（T-AOC）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。结果与磷酸盐缓冲液（PBS）组比较,LPS组培养上清液中T-AOC和GSH-Px水平均明显下降。低浓度氯胺酮预处理组（10μmol/L）与LPS组比较,差异无统计学意义。而较高浓度氯胺酮预处理组（100、1000μmol/L）与LPS组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论一定浓度氯胺酮对LPS刺激的NR8383细胞T-AOC和GSH-Px水平降低具有明显改善作用。 展开更多

关键词 氯胺酮 脂多糖 大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383 总抗氧化能力 谷胱甘肽过氧化物酶

下载PDF 职称材料

赤芍、白芍凉血作用比较研究(Ⅰ)-LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞的作用研究 被引量：4

17

作者 宋玉超 连超杰 +2 位作者 崔秀荣 李强 雷海民 《中国医药指南》 2012年第15期4-6,共3页

目的观察赤芍、白芍各醇提物对脂多糖(LPS)致大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)不同时间段活性的影响,比较赤芍、白芍各醇提物的凉血作用的异同。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测LPS(1μg/mL)对NR8383细胞不同时间点的抑制率及赤芍、白芍... 目的观察赤芍、白芍各醇提物对脂多糖(LPS)致大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)不同时间段活性的影响,比较赤芍、白芍各醇提物的凉血作用的异同。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测LPS(1μg/mL)对NR8383细胞不同时间点的抑制率及赤芍、白芍(10μg/mL)对LPS诱导NR8383活性的调节作用。结果 1μg/mLLPS刺激NR8383 6h之前抑制率为负值之后逐渐转为正值,即先诱导其过度激活后促进其凋亡;观察到川赤芍、赤芍、白芍给药组能够在3h时显著抑制NR8383的过度活化,与LPS对照组比较具有显著差异(P<0.05);24h时各药物组均能够显著抑制NR8383的异常凋亡,与LPS对照组比较具有显著差异(P<0.05);24h时川赤芍、赤芍组与白芍组之间有显著差异(P<0.05)。结论赤芍、白芍是在共同具有凉血功效的前提下有所偏重。 展开更多

关键词 赤芍 白芍 脂多糖 大鼠肺泡巨噬细胞 细胞抑制率

下载PDF 职称材料

纳米氧化铈对过氧化氢所致大鼠肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响 被引量：3

18

作者 吴涛 张志强 +3 位作者 纪乐 杨通旺 张博闻 吴刚 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期9-12,共4页

目的研究纳米氧化铈对过氧化氢致大鼠肺泡巨噬细胞NR8383氧化损伤的影响。方法将对数生长期的NR8383细胞分别暴露于终浓度为5、10、20、50、100μg/ml纳米氧化铈(20 nm)悬液孵育24 h,再加入新鲜配制的终浓度为100μmol/L的过氧化氢刺激... 目的研究纳米氧化铈对过氧化氢致大鼠肺泡巨噬细胞NR8383氧化损伤的影响。方法将对数生长期的NR8383细胞分别暴露于终浓度为5、10、20、50、100μg/ml纳米氧化铈(20 nm)悬液孵育24 h,再加入新鲜配制的终浓度为100μmol/L的过氧化氢刺激细胞2 h,另设对照(PBS)组及过氧化氢(100μmol/L)组。采用CCK-8法检测NR8383细胞的细胞活性,采用酶标法检测培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,并测定细胞内谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)的水平。结果与对照组相比,过氧化氢对NR8383细胞造成氧化损伤,细胞的存活率下降25.25%。与过氧化氢组相比,5μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的存活率较高,而100μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的存活率较低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);且随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞的存活率呈下降的趋势。与过氧化氢组相比,对照组NR8383细胞的LDH释放量较低,50μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的LDH释放量较高,差异有统计学意义(P<0.05);而5、10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的LDH释放量有所降低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。且随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞的LDH释放量呈上下波动。与过氧化氢组相比,对照组NR8383细胞内GSH的水平升高,而ROS的水平上升;5、10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞内的ROS水平均下降,而10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞内的GSH水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞内的SOD、GSH呈上下波动,ROS的水平呈逐渐升高的趋势。结论低浓度(5、10μg/ml)的纳米氧化铈颗粒可以缓解过氧化氢对NR8383细胞造成的氧化损伤,对细胞起到保护作用。 展开更多

关键词 纳米氧化铈 大鼠肺泡巨噬细胞 活性氧

原文传递

TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞钙调素基因表达的影响 被引量：1

19

作者 王旭东 毛伟 +2 位作者 关红 李培锋 周蕾 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2015年第5期1-4,共4页

目的:观察TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)细胞钙调素(CaM)mRNA表达的影响,探讨TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞的作用机制。方法:采用荧光定量PCR技术检测TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞CaMmRNA表达的影响。结果:与空白对照组相比较,高剂量(1×... 目的:观察TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)细胞钙调素(CaM)mRNA表达的影响,探讨TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞的作用机制。方法:采用荧光定量PCR技术检测TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞CaMmRNA表达的影响。结果:与空白对照组相比较,高剂量(1×10^(-4)mol/L)、中剂量(1×10^(-5)mol/L)及低剂量(1×10^(-6)mol/L)的TCDCA作用组均能够极显著(P<0.01)的促进大鼠肺泡巨噬细胞CaMmRNA的表达量。结论:TCDCA能够促进大鼠肺泡巨噬细胞CaMmRNA的表达。 展开更多

关键词 牛磺鹅去氧胆酸 大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383) 钙调素

原文传递

桦木尘和柞木尘对大鼠肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响

20

作者 杨海贤 白景文 +1 位作者 赵钢 曾嘉 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 1997年第4期207-210,共4页

为研究体外桦木尘（ＢＤ）和柞木尘（ＯＤ）对大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）分泌细胞因子的影响，从支气管肺泡灌洗液中分离３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠的ＡＭ，进行体外培养，分别以不同剂量的ＢＤ或ＯＤ（１００、１５０、２００、２５０μｇ... 为研究体外桦木尘（ＢＤ）和柞木尘（ＯＤ）对大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）分泌细胞因子的影响，从支气管肺泡灌洗液中分离３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠的ＡＭ，进行体外培养，分别以不同剂量的ＢＤ或ＯＤ（１００、１５０、２００、２５０μｇ／ｍｌ）诱导ＡＭ，于不同时间（４、２４、４８、７２小时），检测ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα的活性。结果显示：ＢＤ和ＯＤ诱导ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα，其活性均高于或明显高于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），而ＢＤ组与ＯＤ组相比，也有不同或明显不同（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。在２００μｇ／ｍｌ的时间曲线中也显示ＢＤ组高于或明显高于ＯＤ组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示：ＢＤ和ＯＤ均能刺激ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα的活性增加，而ＢＤ较ＯＤ更为明显。 展开更多

关键词 肺泡 巨噬细胞 桦木尘 细胞因子 粉尘

原文传递