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肺动脉平滑肌细胞与低氧性肺血管重塑形成机制 被引量:14
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作者 张凌云 高宝安 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期177-181,共5页
低氧条件下肺血管收缩、重塑,继而导致肺血管的持续对抗,其中以中膜增厚为主的肺血管重塑是导致低氧性肺动脉高压持续不可逆性病理改变的重要因素。肺动脉平滑肌细胞是肺动脉中膜的主要构成部分,慢性缺氧条件下由于各种活性介质及细胞... 低氧条件下肺血管收缩、重塑,继而导致肺血管的持续对抗,其中以中膜增厚为主的肺血管重塑是导致低氧性肺动脉高压持续不可逆性病理改变的重要因素。肺动脉平滑肌细胞是肺动脉中膜的主要构成部分,慢性缺氧条件下由于各种活性介质及细胞生长因子稳态的失衡,肺动脉平滑肌细胞聚集、增殖、肥大及分泌胞外基质;另外,肺动脉平滑肌细胞通过各种信号通路与内膜的内皮细胞及外膜的成纤维细胞相互作用,在低氧性肺血管重塑过程中起着至关重要的作用,本文将对肺动脉平滑肌细胞与低氧性肺血管重塑形成机制的最新研究概况作一综述。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 低氧性肺动脉高压 肺血管重塑
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异钩藤碱抑制PDGF-BB诱导肺动脉平滑肌细胞增殖的实验研究 被引量:10
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作者 张欣 郭海鹏 +3 位作者 王振红 唐琳娜 杨洁 吴大玮 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第12期35-40,共6页
目的探讨异钩藤碱对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其机制。方法建立PDGF-BB诱导的PASMCs增殖模型,通过MTT比色法和台盼蓝拒染法检测异钩藤碱对PASMCs增殖的影响及细胞毒性,流式细胞术检测... 目的探讨异钩藤碱对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其机制。方法建立PDGF-BB诱导的PASMCs增殖模型,通过MTT比色法和台盼蓝拒染法检测异钩藤碱对PASMCs增殖的影响及细胞毒性,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting检测细胞周期相关蛋白的表达及血小板源性生长因子受体β(PDGF-Rβ)信号通路蛋白表达及磷酸化的影响。结果与正常对照相比,加入PDGF-BB(20 ng/m L)培养24 h,可促进PASM Cs增殖约2.5倍;异钩藤碱剂量依赖性地抑制PDGF-BB诱导的PASM Cs增殖;异钩藤碱(25μmol/L)明显抑制PDGF-BB诱导的S期细胞比例升高;Western blotting结果显示,异钩藤碱可抑制PDGF-BB诱导的cyclin D1、CDK6的表达和p27kip1的降解,下调PDGF-Rβ及其下游信号分子AKT、糖原合成激酶(GSK)3β的磷酸化。结论异钩藤碱通过将细胞周期阻滞于G0/G1期来抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增殖,其机制可能为通过抑制PDGF-Rβ及其下游信号通路的磷酸化、进而调节细胞周期相关蛋白的合成和降解来实现。 展开更多
关键词 异钩藤碱 肺动脉平滑肌细胞 血小板源性生长因子 增殖 糖原合成激酶3β
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大鼠高迁移率族蛋白B1表达水平与COPD肺动脉平滑肌细胞合成分泌干扰素-γ的关系 被引量:9
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作者 王昌明 蒋明 +4 位作者 廖运学 褚淑媛 林云 林武洲 吕倩 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第12期1240-1244,共5页
目的肺动脉高压与慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)密切相关。研究COPD继发肺动脉高压的机制,探讨COPD模型大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)高迁移率族蛋白B1(hi... 目的肺动脉高压与慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)密切相关。研究COPD继发肺动脉高压的机制,探讨COPD模型大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达水平与其合成分泌干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的相关性及临床意义。方法建立COPD大鼠模型,原代培养PASMCs并鉴定,检测香烟烟雾提取物(CSE)及脂多糖(LPS)诱导下PASMCs合成分泌细胞因子的功能,实验分组:对照组、CSE组、LPS组、CSE+LPS组,同时4组另设瓶并分别加入1∶1000抗HMGB1抗体0.2 m L培养作为干预组;分别于培养12、24、48、72 h后,采用Western blot检测各组PASMCs中HMGB1蛋白表达变化,ELISA检测细胞培养上清液HMGB1、IFN-γ浓度,并进行相关分析。结果光镜下见细胞呈长梭形或"峰、谷"状生长,α-actin免疫组化染色及细胞免疫荧光鉴定为PASMCs;Western blot及ELISA法检测结果显示,4实验组组间培养12 h后HMGB1表达水平及细胞上清液HMGB1、IFN-γ,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);HMGB1蛋白表达水平与IFN-γ浓度变化呈正相关(r=0.91);加入抗HMGB1抗体干预培养12 h后,干预组IFN-γ浓度均较对应实验组减弱(P<0.05);同组内,于细胞培养12、24、48、72 h,Western blot及ELISA法检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HMGB1表达水平与COPD模型大鼠远端PASMCs合成分泌IFN-γ呈正相关,抗HMGB1抗体为临床治疗COPD、抑制其全身炎症反应提供了新的干预靶点。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 慢性阻塞性肺疾病 肺动脉平滑肌细胞 干扰素-Γ
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三七总皂苷通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路调控低氧高二氧化碳环境下大鼠PASMCs的自噬和增殖 被引量:8
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作者 陈玲珑 武垣伶 +2 位作者 张赛 黄丹娜 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1246-1251,共6页
目的:探讨三七总皂苷(PNS)在低氧高二氧化碳(HH)环境下对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)自噬和增殖的作用及其机制。方法:将大鼠PASMCs随机分为5组:对照(CON)组、HH组、HH+PNS组、PI3K抑制剂LY294002组(HH+LY组)及HH+PNS+LY组。CON组置... 目的:探讨三七总皂苷(PNS)在低氧高二氧化碳(HH)环境下对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)自噬和增殖的作用及其机制。方法:将大鼠PASMCs随机分为5组:对照(CON)组、HH组、HH+PNS组、PI3K抑制剂LY294002组(HH+LY组)及HH+PNS+LY组。CON组置于常氧细胞培养箱(21%O_(2)、5%CO_(2))培养24 h,其余4组置于造模培养箱(5%O_(2)、6%CO_(2))并加入各组对应的药物培养24 h。CCK-8法检测细胞活力;RT-qPCR和Western blot法检测自噬相关指标AKT、mTOR、LC3和P62的mRNA和蛋白水平;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平;通过透射电镜观察细胞内部自噬小体形成情况。结果:与CON组比,HH组PASMCs的活力减弱,AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR和P62的蛋白水平降低,而LC3的mRNA和蛋白水平升高,PCNA表达上调,自噬小体数量增多(P<0.05);与HH组比,HH+PNS组PASMCs的活力减弱,AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR和P62的蛋白水平升高,LC3的mRNA和蛋白水平降低,自噬小体数量减少,PCNA表达下调(P<0.05);与HH组相比,HH+LY组PASMCs的活力减弱,AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR和P62的蛋白水平降低,而LC3的mRNA和蛋白水平升高,自噬小体数量增多,PCNA表达上调(P<0.05);与HH+PNS组相比,HH+PNS+LY组AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR和P62的蛋白水平降低,LC3的mRNA和蛋白水平升高,自噬小体数量增加,PCNA表达上调(P<0.05)。结论:在HH环境下,PNS可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制大鼠PASMCs的自噬和增殖。 展开更多
关键词 低氧高二氧化碳性肺动脉高压 肺动脉平滑肌细胞 三七总皂苷 自噬 细胞增殖 PI3K/AKT/mTOR信号通路
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高迁移率族蛋白B1在肺动脉高压中的作用 被引量:7
5
作者 陈阳 何庆 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期625-631,共7页
肺动脉高压(PAH)是一种以肺血管阻力和肺动脉压力进行性升高为特征,并最终导致右心衰竭的致死性心血管疾病。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种主要表达于细胞核内的DNA结合蛋白,因其多种细胞定位而具有多种相应功能。近年来研究显示,HMGB1... 肺动脉高压(PAH)是一种以肺血管阻力和肺动脉压力进行性升高为特征,并最终导致右心衰竭的致死性心血管疾病。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种主要表达于细胞核内的DNA结合蛋白,因其多种细胞定位而具有多种相应功能。近年来研究显示,HMGB1在PAH患者肺部表达明显上调,其受体信号转导通路能够促发炎症反应及肺血管重构,从而诱导PAH发生,并且HMGB1及其受体信号转导通路中的多位点有望成为PAH治疗的新靶点。本文就PAH的炎症免疫机制、HMGB1的生物学特性及其在PAH发生发展中的主要作用进行综述,以期发现PAH治疗新途径。 展开更多
关键词 肺动脉高压 高迁移率族蛋白B1 损伤相关分子模式 Toll样受体 模式识别受体 晚期糖基化终末产物受体 炎症反应 肺动脉平滑肌细胞 肺血管重构
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慢病毒介导环状RNA mmu-circ-0001033过表达抑制低氧性小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的实验研究 被引量:7
6
作者 王坚 胡明冬 +4 位作者 唐晓丹 葛海燕 彭正羽 宋元林 夏世金 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2018年第1期39-43,共5页
目的探讨慢病毒介导环状RNA mmu-circ-0001033过表达对低氧性小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响,为环状RNA防治低氧性肺动脉高压(HPH)提供实验依据。方法体外原代培养小鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC),并随机分为4组:常氧组、低氧组、mmu-circ... 目的探讨慢病毒介导环状RNA mmu-circ-0001033过表达对低氧性小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响,为环状RNA防治低氧性肺动脉高压(HPH)提供实验依据。方法体外原代培养小鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC),并随机分为4组:常氧组、低氧组、mmu-circ-0001033过表达慢病毒转染+低氧组、空白载体慢病毒转染+低氧组。体外构建环状RNA mmu-circ-0001033过表达慢病毒载体,转染PASMC。运用qRT-PCR技术检测各组PASMC中mmu-circ-0001033的表达水平,采用CCK-8法检测各组PASMC增殖,对各组的指标值进行统计学比较和分析。结果低氧处理导致PASMC中mmu-circ-0001033的表达明显下调,且呈时间依赖性;与对照组比较,慢病毒转染组中mmu-circ-0001033表达显著上调(P<0.05),提示mmu-circ-0001033过表达慢病毒成功转染入PASMC,且并高效表达;与常氧组比较,低氧组和空白载体慢病毒转染+低氧组PASMC增殖明显增多(P<0.05),而mmu-circ-0001033过表达抑制了低氧对PASMC的促增殖作用。结论过表达的mmu-circ-0001033显著抑制低氧所诱导的PASMC的增殖,为明确mmu-circ-0001033作为HPH防治靶标奠定了实验基础。 展开更多
关键词 环状RNA 低氧性肺动脉高压 肺动脉 平滑肌细胞 增殖 慢病毒
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PI3K/Akt/FoxO1信号通路对人源肺动脉平滑肌细胞及肺动脉高压大鼠细胞凋亡的影响 被引量:1
7
作者 高璐阳 金旗 +7 位作者 张毅 李欣 黄志华 章思铖 段安琪 赵智慧 赵青 罗勤 《心血管病学进展》 CAS 2024年第1期79-83,共5页
目的探究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路对人源肺动脉平滑肌细胞(hPASMC)及肺动脉高压大鼠细胞凋亡的影响。方法细胞实验部分,将hPASMC分为4组:(1)空白对照组;(2)血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)组... 目的探究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路对人源肺动脉平滑肌细胞(hPASMC)及肺动脉高压大鼠细胞凋亡的影响。方法细胞实验部分,将hPASMC分为4组:(1)空白对照组;(2)血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)组;(3)PDGF-BB+LY294002组;(4)PDGF-BB+紫杉醇(paclitaxel)组。采用TUNEL检测细胞凋亡,采用蛋白质印迹法检测Bcl-2、裂解的胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)和PI3K/Akt/FoxO1信号通路相关蛋白表达水平。动物实验部分,将12只SD大鼠随机分为4组:(1)空白对照组;(2)野百合碱(MCT)组;(3)MCT+LY294002组;(4)MCT+paclitaxel组。采用Western blot检测Bcl-2、cleaved caspase-3和PI3K/Akt/FoxO1信号通路相关蛋白表达水平。结果细胞实验部分:相比于PDGF-BB组,PDGF-BB+LY294002组与PDGF-BB+paclitaxel组的Bcl-2表达水平下降(P<0.01),cleaved caspase-3表达水平上升(P<0.01);相比于空白对照组,PDGF-BB+LY294002组与PDGF-BB+paclitaxel组的凋亡率增加(P<0.01)。动物实验部分:相比于MCT组,MCT+LY294002组与MCT+paclitaxel组Bcl-2、磷酸化Akt与磷酸化FoxO1表达水平下降(P<0.01),cleaved caspase-3与FoxO1表达水平上升(P<0.01)。各组之间PI3K表达水平无显著差异。结论PI3K/Akt/FoxO1信号通路抑制hPASMC与肺动脉高压大鼠肺组织的细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺动脉高压 PI3K/Akt/FoxO1信号通路 肺动脉平滑肌细胞 细胞凋亡
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Rho激酶在缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用 被引量:7
8
作者 张齐 李志超 +5 位作者 罗颖 彭利静 张博 刘毅 闫志强 李志斌 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期452-455,共4页
目的研究低氧条件下Rho激酶是否参与低氧引起的血管平滑肌细胞增生。方法组织块法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)。应用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法观察细胞增生情况;流式细胞仪观察细胞周期的变化;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检... 目的研究低氧条件下Rho激酶是否参与低氧引起的血管平滑肌细胞增生。方法组织块法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)。应用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法观察细胞增生情况;流式细胞仪观察细胞周期的变化;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测Rho激酶的表达。结果缺氧组MTT比色吸光度(A)值显著高于常氧组,缺氧24h+Rho激酶抑制剂Y27632组A值显著低于缺氧24h组;缺氧组细胞周期G2/M期细胞比例显著高于常氧24h组,缺氧24h+Y27632组细胞比例显著低于缺氧24h组。Westernblot结果表明各缺氧组Rho激酶表达均明显高于常氧组,其中以缺氧24h组表达增高最明显;Rho激酶在缺氧24h+Y27632组明显低于缺氧24h组。结论缺氧可诱导PASMCs增殖,缺氧诱导的增生PASMCs中Rho激酶活性水平增加,提示缺氧致PASMCs增殖过程中Rho激酶可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 缺氧 肺动脉 平滑肌细胞 细胞增殖 RHO激酶
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血府逐瘀汤含药血清对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响 被引量:7
9
作者 李敏静 郭莉 +3 位作者 陈晔 严洁萍 董雷 蔡宛如 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期836-841,共6页
目的研究血府逐瘀汤含药血清对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其机制。方法低氧诱导大鼠PASMCs增殖,设置正常对照组、低氧模型组、血府逐瘀低剂量组、血府逐瘀高剂量组和NVP-BEZ235组,血府逐瘀低、高剂量组含药血... 目的研究血府逐瘀汤含药血清对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其机制。方法低氧诱导大鼠PASMCs增殖,设置正常对照组、低氧模型组、血府逐瘀低剂量组、血府逐瘀高剂量组和NVP-BEZ235组,血府逐瘀低、高剂量组含药血清浓度分别为5%和20%。运用CCK-8法检测不同低氧时间和药物干预对于PASMCs增殖的影响,Western Blot检测细胞p-Akt、p-mTOR和PCNA表达。结果低氧培养36 h时PASMCs OD值最高,且高于常氧培养(P<0.01);与正常对照组比较,低氧模型组OD值明显升高(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、PCNA表达增加(P<0.05);与低氧模型组比较,血府逐瘀高剂量组和NVP-BEZ235组OD值不同程度降低(P<0.01),各药物组p-AKT、p-mTOR、PCNA表达减少(P<0.05);与血府逐瘀低剂量组比较,NVP-BEZ235组p-AKT、p-mTOR、PCNA表达减少(P<0.05)。结论血府逐瘀汤含药血清可以抑制低氧诱导的大鼠PASMCs增殖,可能通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路活化并下调PCNA表达而发挥作用。 展开更多
关键词 血府逐瘀汤含药血清 肺动脉平滑肌细胞 增殖 PI3K/Akt/mTOR信号通路 增殖细胞核抗原
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虎杖苷调节YAP1/TAZ信号通路对缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响
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作者 刘文光 刘思佟 +5 位作者 张薇薇 庄桂银 谢思雨 田雪 李晓珊 谷强 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期68-74,共7页
目的 探究虎杖苷(PD)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 将新生大鼠随机分为6组:对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂(PD高剂量+... 目的 探究虎杖苷(PD)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 将新生大鼠随机分为6组:对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂(PD高剂量+XMU-MP-1)组,每组10只。缺氧2周后,检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化,并计算肺动脉管壁厚度占总厚度的百分比(WT%)和管壁面积占总面积的百分比(WA%)。分离各组新生大鼠PASMCs,分为NC组、低氧(Hypoxia)组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+XMU-MP-1组。CCK-8和EdU检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹(Western blot)检测肺组织和PASMCs中Yes相关蛋白1(YAP1)、PDZ结合域的转录共刺激因子信号通路(TAZ)、哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠肺动脉管壁明显增厚,管腔变窄,RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著升高(均P<0.05);与模型组相比,PD低、中、高剂量组大鼠肺动脉增厚减少,管腔变大,RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著降低,且PD各组间差异存在剂量依赖性(均P<0.05);XMU-MP-1可逆转这一结果。与NC组相比,Hypoxia组细胞A_(450nm)值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著升高,凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(均P<0.05);与Hypoxia组相比,PD低、中、高剂量组细胞A_(450nm)值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax表达显著升高,且PD各组间有剂量依赖性(均P<0.05);XMU-MP-1可逆转这一结果。结论 PD可能通过抑制YAP1/TAZ信号通路抑制HPH新生大鼠PASMCs增殖,促进凋亡。 展开更多
关键词 缺氧性肺动脉高压 虎杖苷 肺动脉平滑肌细胞 增殖 凋亡 YAP1/TAZ信号通路
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大鼠肺动脉平滑肌细胞的分离及电压门控性钾电流的记录方法 被引量:4
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作者 骆红艳 唐明 +5 位作者 杜以梅 刘长金 唐碧 席姣娅 洪志刚 Jurgen Hescheler 《微循环学杂志》 2005年第4期9-11,F0002,共4页
目的介绍一种大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的急性分离方法并观察电压门控性钾电流电生理特性。方法应用胶原酶和木瓜蛋白酶联合消化法获得大鼠PASMCs,利用全细胞膜片钳技术记录PASMCs膜上的电压门控性钾通道(Kv)电流。结果在相差显微... 目的介绍一种大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的急性分离方法并观察电压门控性钾电流电生理特性。方法应用胶原酶和木瓜蛋白酶联合消化法获得大鼠PASMCs,利用全细胞膜片钳技术记录PASMCs膜上的电压门控性钾通道(Kv)电流。结果在相差显微镜下观察大鼠PASMCs呈舒展梭形,边界清晰,有完整的细胞膜,胞浆均匀,数量多,活性好。结论用酶急性分离的大鼠PASMCs,容易进行全细胞膜片钳记录,方法简单、稳定、可靠。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 电压门控性 缺氧性肺血管收缩反应 记录方法 电压门控钾通道 钾电流 pulmonary Potassium Arterial 钾离子通道
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POSTN通过ERK1/2信号通路诱导肺动脉平滑肌细胞增殖
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作者 方学升 胡志玲 +1 位作者 陈洁 包明威 《医学研究杂志》 2024年第6期44-48,53,共6页
目的探索骨膜蛋白(periostin,POSTN)诱导肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PASMC)增殖在缺氧诱导肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH)发病中的作用及其机制。方法取自雄性大鼠的原代PASMC暴... 目的探索骨膜蛋白(periostin,POSTN)诱导肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PASMC)增殖在缺氧诱导肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH)发病中的作用及其机制。方法取自雄性大鼠的原代PASMC暴露于缺氧环境模拟HPH,将细胞分为常氧组、缺氧组、缺氧+对照腺病毒转染组(Ad-shNC组)、缺氧+POSTN沉默腺病毒转染组(Ad-shPOSTN组)、POSTN组、POSTN+U0126组。采用α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)评估PASMC的纯度,CCK-8法检测细胞活力,Western blot法检测PASMC中POSTN、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、骨形态发生蛋白Ⅱ型受体(bone morphogenetic protein typeⅡreceptor,BMPR2)、磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)及细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)的蛋白表达水平。结果与常氧组比较,缺氧促进PASMC增殖和POSTN蛋白表达,抑制BMPR2蛋白表达。下调POSTN表达可抑制缺氧诱导的PASMC增殖,恢复BMPR2蛋白表达水平。此外,POSTN明显增加p-ERK1/2或ERK1/2的蛋白表达水平,增加PASMC增殖,而这些效应可被U0126阻断。结论在HPH病理机制中,POSTN促进PASMC增殖,其潜在的机制可能与调节BMPR2表达和活化ERK1/2信号通路有关。 展开更多
关键词 骨膜蛋白 肺动脉平滑肌细胞 缺氧诱导肺动脉高压 ERK1/2信号通路
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HIF-2α调控FoxM1对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 被引量:6
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作者 朱昊 朱黎明 +2 位作者 蒋永亮 胡瑞成 戴爱国 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期129-134,共6页
目的探讨低氧诱导因子2α(HIF-2α)基因调控叉头框M1蛋白质(FoxM1)蛋白表达对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响。方法构建HIF-2α过表达慢病毒载体(LV-HIF-2α)和沉默RNA(siRNA),并分别在常氧和低氧条件下转染大鼠PASMC,其中... 目的探讨低氧诱导因子2α(HIF-2α)基因调控叉头框M1蛋白质(FoxM1)蛋白表达对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响。方法构建HIF-2α过表达慢病毒载体(LV-HIF-2α)和沉默RNA(siRNA),并分别在常氧和低氧条件下转染大鼠PASMC,其中常氧组分成常氧对照组、常氧+LV-HIF-2α空载组、常氧+LV-HIF-2α组;低氧组分成低氧对照组、低氧+siRNA-HIF-2α空载组、低氧+siRNA-HIF-2α组,采用Western印迹检测HIF-2α及其对下游FoxM1蛋白、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)及细胞增殖相关AuroraA蛋白表达影响。5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)细胞增殖检测过表达和抑制HIF-2α表达对大鼠PASMC增殖能力的影响。结果常氧+LV-HIF-2α组HIF-2α表达均显著高于常氧对照组和常氧+LV-HIF-2α空载组(0.17±0.02比0.09±0.01和0.07±0.00),而低氧+siRNA-HIF-2α组PASMC中HIF-2α表达均显著低于低氧对照组和低氧+siRNA-HIF-2α空载组(0.28±0.01比0.35±0.02和0.30±0.01)(均P<0.05);常氧+LV-HIF-2α组FoxM1蛋白、cyclinD1及细胞增殖相关AuroraA蛋白表达均显著高于常氧对照组和常氧+LV-HIF-2α空载组(分别为0.40±0.03比0.24±0.01和0.30±0.01,0.22±0.02比0.09±0.01和0.08±0.02,0.29±0.02比0.04±0.01和0.07±0.01)(均P<0.05);低氧+siRNA-HIF-2α组FoxM1蛋白、cyclinD1及AuroraA蛋白表达均显著低于低氧对照组和低氧+siRNA-HIF-2α空载组(分别为0.23±0.01比0.36±0.02和0.32±0.01,0.15±0.01比0.31±0.01和0.28±0.03,0.14±0.02比0.33±0.03和0.27±0.02)(均P<0.05);常氧对照组PASMC的EdU阳性表达率显著低于常氧+LV-HIF-2α组[(30.77±2.43)%比(55.56±3.01)%],而低氧对照组显著高于低氧+siRNA-HIF-2α组[(65.28±3.21)%比(44.64±2.78)%](均P<0.05)。结论HIF-2α调控FoxM1表达明显增加而促进低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。 展开更多
关键词 低氧诱导因子2α 叉头框M1蛋白质 肺动脉平滑肌细胞 细胞低氧 细胞增殖
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Nrf2调控的氧化应激在Adropin抑制低氧肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用研究
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作者 陈昌贵 易春峰 +2 位作者 王栋 余志华 贺立群 《中南药学》 CAS 2024年第1期48-55,共8页
目的 观察Adropin对低氧诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖及氧化应激的影响,并探讨其可能机制。方法 以1%的O_(2)作为诱导剂,建立PASMCs增殖及氧化应激的细胞模型,通过活性氧(ROS)激活剂H_(2)O_(2),抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC... 目的 观察Adropin对低氧诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖及氧化应激的影响,并探讨其可能机制。方法 以1%的O_(2)作为诱导剂,建立PASMCs增殖及氧化应激的细胞模型,通过活性氧(ROS)激活剂H_(2)O_(2),抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)及不同浓度Adropin(100、300、1000 nmol·L^(-1))干预24 h后,检测细胞增殖及ROS,筛选Adropin抑制增殖及氧化应激的最适浓度。选择1000 nmol·L^(-1) Adropin和/或核因子E2相关因子2(Nfr2)抑制剂ML385在低氧条件下孵育PASMCs 24 h,并设置Nrf2激活剂富马酸二甲酯(DMF)作为阳性对照组,通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖;DCFH-DA探针联合荧光酶标仪测定细胞内ROS的水平;试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)的水平;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测Nrf2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、Cyclin E的表达。结果 与对照组相比较,H_(2)O_(2)及低氧均能够诱导PASMCs增殖及ROS生成,而不同浓度的Adropin(100、300、1000nmol·L^(-1))和NAC均可抑制低氧诱导的PASMCs增殖及ROS产生,且Adropin抑制增殖及ROS产生具有浓度依赖性。与低氧组相比较,DMF或Adropin(1000 nmol·L^(-1))干预后,PASMCs增殖及细胞内ROS水平下降,SOD、GPx、CAT活性增加,MDA水平下降,Nrf2表达上调(P<0.05),而ML385能够逆转Adropin的上述作用(P<0.05);DMF或Adropin能够通过抑制Cyclin D1与Cyclin E的表达,阻滞细胞周期于G_(0)/G_(1)期,从而抑制PASMCs增殖(P<0.05),而ML385能够逆转Adropin上述作用(P<0.05)。结论 Adropin可通过抑制氧化应激抑制低氧诱导的PASMCs增殖,其机制可能与激活Nrf2有关。 展开更多
关键词 Adropin 低氧 肺动脉平滑肌细胞 增殖 氧化应激 核因子E2相关因子2
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低氧预处理脐带间充质干细胞源外泌体抑制肺动脉平滑肌细胞的增殖 被引量:2
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作者 张雨薇 刘川川 +4 位作者 毛稼琦 张晴晴 刘红 陈英 马兰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第19期2986-2992,共7页
背景:已有研究表明外泌体可以改善低氧性肺动脉高压,而且不同来源、不同环境的外泌体功能存在显著差别。低氧预处理脐带间充质干细胞来源外泌体对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响尚不清楚。目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞来源... 背景:已有研究表明外泌体可以改善低氧性肺动脉高压,而且不同来源、不同环境的外泌体功能存在显著差别。低氧预处理脐带间充质干细胞来源外泌体对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响尚不清楚。目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞来源外泌体对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法:采用组织贴壁法分离培养原代人脐带间充质干细胞,用超滤法提取人脐带间充质干细胞来源外泌体;采用组织消化法分离大鼠肺动脉平滑肌细胞,用CCK-8法测定不同质量浓度外泌体干预肺动脉平滑肌细胞不同时间后的细胞增殖抑制率,确定外泌体作用的适宜质量浓度和干预时间。将第3代肺动脉平滑肌细胞分为常氧对照组、低氧对照组、低氧+常氧外泌体处理组和低氧+低氧外泌体处理组,EdU法检测各组细胞增殖情况,Western blot检测各组细胞核增殖抗原蛋白表达水平。结果与结论:①与常氧对照组相比,低氧对照组肺动脉平滑肌细胞增殖能力明显增加;与低氧对照组相比,低氧+常氧外泌体组细胞增殖能力下降,且低氧+低氧外泌体组增殖能力下降更明显;②与常氧对照组相比,低氧对照组细胞的细胞核增殖抗原蛋白表达升高;与低氧对照组相比,低氧+常氧外泌体组细胞核增殖抗原蛋白表达水平稍微降低,低氧+低氧外泌体组细胞核增殖抗原蛋白表达水平明显降低;③结果表明,低氧预处理人脐带间充质干细胞来源外泌体具有抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的能力。 展开更多
关键词 低氧预处理 肺动脉平滑肌细胞 人脐带间充质干细胞 细胞增殖 外泌体
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牛磺酸抗缺氧及防治肺动脉高压的研究及其细胞机制初探 被引量:5
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作者 许蜀闽 郑绿珍 +2 位作者 刘福玉 陈莉 王培勇 《局解手术学杂志》 2006年第5期295-297,共3页
目的通过动物模型观察牛磺酸对缺氧性肺动脉高压的治疗作用,同时观察其对体外培养牛肺动脉平滑肌细胞(PASMC)和内皮细胞(PAEC)增殖的影响。方法采用模拟高原5 000 m制作缺氧大鼠模型,缺氧2周。设平原(C组)及缺氧对照组(H组),观察牛磺酸... 目的通过动物模型观察牛磺酸对缺氧性肺动脉高压的治疗作用,同时观察其对体外培养牛肺动脉平滑肌细胞(PASMC)和内皮细胞(PAEC)增殖的影响。方法采用模拟高原5 000 m制作缺氧大鼠模型,缺氧2周。设平原(C组)及缺氧对照组(H组),观察牛磺酸治疗后(T组)的肺动脉压(mPAP)、血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、肺匀浆一氧化氮(NO)含量、右心室肥大指数的变化。体外培养PASMC和PAEC用3H-TdR掺入法比较牛磺酸对缺氧PASMC和PAEC增殖的影响。结果H组大鼠LDH活性升高为C的10.1倍(P<0.01);肺匀浆NO含量降低为C组的32%(P<0.01);血浆MDA含量显著升高为C组的1.64倍(P<0.01);mPAP显著增高,约为C组的2.74倍(P<0.01);右心室肥大指数是C组的1.56倍(P<0.01)。T组与H组相比较:LDH活性、血浆MDA、右心室肥大指数均显著降低(P<0.01);mPAP显著降低(P<0.05)。高浓度(10~20 mmol/L)的牛磺酸抑制缺氧内皮及平滑肌细胞的3H-TdR掺入,而低浓度的牛磺酸促进缺氧时PAEC的3H-TdR掺入(P<0.05),抑制缺氧时PASMC的3H-TdR掺入(P<0.05)。结论牛磺酸有抗缺氧及防治肺动脉高压的作用。缺氧抑制内皮细胞的增殖而促进平滑肌细胞的增殖,适当剂量的牛磺酸可以对抗缺氧对PAEC和PASMs的作用:减弱缺氧对PAEC的增殖抑制作用,抑制缺氧的促PASMC增殖作用,使之接近常氧水平。这可能是牛磺酸防治肺动脉高压的细胞机制。提示牛横酸对于高山病缺氧性肺血管收缩和血管结构改建的预防和治疗,可能具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 牛磺酸 肺动脉 平滑肌细胞 内皮细胞 缺氧
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活血化瘀祛痰法对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响 被引量:1
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作者 郭晓燕 毕蓉蓉 +1 位作者 张晔敏 陆城华 《陕西中医》 CAS 2023年第1期3-6,共4页
目的:观察活血化瘀祛痰法对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠的影响,探讨其作用机制。方法:SD大鼠60只随机分为假手术组、模型组、中药复方组、法舒地尔组。采用MCT腹腔注射诱导肺动脉高压大鼠模型。观察大鼠一般状态,采用生物信号采... 目的:观察活血化瘀祛痰法对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠的影响,探讨其作用机制。方法:SD大鼠60只随机分为假手术组、模型组、中药复方组、法舒地尔组。采用MCT腹腔注射诱导肺动脉高压大鼠模型。观察大鼠一般状态,采用生物信号采集系统测定肺动脉压力,HE染色观察肺血管病理形态变化,Western blot法检测肺动脉组织ROCKⅠ、ROCKⅡ蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组右心肥大指数(RVHI)、肺动脉压力、肺血管增殖程度高于假手术组(P<0.05或P<0.01),中药复方组、法舒地尔组大鼠RVHI、肺动脉压力、肺血管壁厚度均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。模型组ROCKⅠ、ROCKⅡ水平均较假手术组升高(P<0.05或P<0.01);中药复方组、法舒地尔组ROCKⅠ、ROCKⅡ水平低于模型组(P<0.05或P<0.01);中药复方组与法舒地尔组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:活血化瘀祛痰法对MCT诱导的肺动脉高压具有一定疗效,可降低肺动脉压力、改善肺血管重构,其机制与调节Rho激酶信号通路有关。 展开更多
关键词 肺动脉高压 肺血管重构 活血化瘀祛痰法 野百合碱 肺动脉平滑肌细胞 Rho信号通路
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RNA干扰沉默低氧诱导因子-1α对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 张伟 曹越 +3 位作者 张昱 马祁生 马兰 格日力 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期71-76,共6页
本研究应用基因克隆技术,将合成的发卡样特异性低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α)干扰寡核苷酸(siRNA)序列插入真核表达载体中,构建出特异性HIF-1α基因RNA干扰(RNAi)真核表达载体。采用组织块种植法,原代培... 本研究应用基因克隆技术,将合成的发卡样特异性低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α)干扰寡核苷酸(siRNA)序列插入真核表达载体中,构建出特异性HIF-1α基因RNA干扰(RNAi)真核表达载体。采用组织块种植法,原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs),将构建出的特异性HIF-1α RNAi真核表达载体转染到PASMCs;分别在常氧和低氧下进行细胞培养,采用RT-PCR检测PASMCs HIF-1α mRNA表达水平, 用MTT和流式细胞仪检测细胞增殖水平,探讨低氧条件下HIF-1α RNAi真核表达载体对PASMCs增殖的影响。结果表明,低氧培养48 h后,正常PASMCs和转染了HIF-1α siRNA阴性表达载体的细胞增殖显著,HIF-1α mRNA表达水平也显著升高;而转染了HIF-1α siRNA阳性表达质粒的细胞增殖不显著,HIF-1α mRNA表达水平较低。结果提示:HIF- 1α RNAi真核表达载体能显著干扰培养的PASMCs HIF-1α mRNA表达,同时抑制低氧环境下PASMCs的增殖。 展开更多
关键词 肺动脉 平滑肌细胞 低氧诱导因子-1Α RNA干扰 细胞增殖
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血管钠肽抑制肺动脉平滑肌细胞增殖及调控钠尿肽B受体表达的研究 被引量:5
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作者 于军 朱妙章 +4 位作者 董明清 高瞻 吕顺艳 郭海涛 冯华松 《心脏杂志》 CAS 2002年第4期277-280,共4页
目的 :探讨血管钠肽 (VNP)对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖及钠尿肽 B受体 (NPR-B)基因表达的影响。方法 :体外培养大鼠 PASMC,分别用噻唑蓝 (MTT)比色法、总蛋白含量测定、放免分析及打点杂交的方法 ,观察了VNP作用下 PASMC的 MTT吸光... 目的 :探讨血管钠肽 (VNP)对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖及钠尿肽 B受体 (NPR-B)基因表达的影响。方法 :体外培养大鼠 PASMC,分别用噻唑蓝 (MTT)比色法、总蛋白含量测定、放免分析及打点杂交的方法 ,观察了VNP作用下 PASMC的 MTT吸光值、总蛋白含量、细胞内 c GMP、c AMP浓度和 NPR-B的 m RNA水平。结果 :VNP可以显著抑制血清刺激的 PASMC增殖 ,升高细胞内 c GMP浓度及 NPR-B m RNA水平 ,但对细胞内 c AMP浓度无明显影响。结论 :VNP对 PASMC增殖及 NPR-B基因表达具有调控作用 ,并且可能通过 c 展开更多
关键词 血管钠肽 钠尿肽受体 肺动脉平滑肌细胞 细胞增殖 B受体 基因表达
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MitoK_(ATP)-PKC通路对人体肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道的影响 被引量:4
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作者 汪涛 张珍祥 徐永健 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期565-570,F0002,共7页
目的以人体肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)为研究对象,研究线粒体膜上ATP敏感的钾通道(MitoKATP)对HPASMCs膜电位及电压门控钾通道(KV1.5)表达的影响,以及蛋白激酶C(PKC)在其信号转导中的可能作用。方法从人正常肺组织分离出HPASMCs进行培... 目的以人体肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)为研究对象,研究线粒体膜上ATP敏感的钾通道(MitoKATP)对HPASMCs膜电位及电压门控钾通道(KV1.5)表达的影响,以及蛋白激酶C(PKC)在其信号转导中的可能作用。方法从人正常肺组织分离出HPASMCs进行培养。利用激光共聚焦显微镜技术检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm),全细胞膜片钳技术记录细胞膜电流变化,Western blot检测KV1.5蛋白和PKC-α的表达情况。结果①Diazoxide组肺动脉平滑肌细胞PKC-α的表达比正常对照组明显增强(P<0.05);这种作用可被5-羟基癸酸盐(5-HD)的作用所逆转;单独应用5-HD,平滑肌细胞PKC-α的表达与对照组比较差异无显著性意义。②Diazoxide作用24h可明显抑制Kv电流以及下调Kv1.5蛋白的表达(P<0.05);佛波酯(PMA)作用24h也可明显抑制Kv电流以及下调Kv1.5蛋白的表达(P<0.05),而加入R0-31-8220可以逆转PMA的这一作用;Diazoxide和PMA同时应用较其中之一单独应用对人肺动脉平滑肌细胞Kv电流和Kv1.5表达有更加明显的抑制作用(均P<0.05);Diazoxide与R0-31-8220同时应用则部分逆转了Diazoxide对肺动脉平滑肌细胞Kv电流和Kv1.5表达的抑制(均P<0.05)。结论MitoKATP的开放和ΔΨm的增加可抑制Kv通道的活性和表达,可能参与并影响了肺动脉高压的发生发展,PKC在其中可能起介导作用。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 蛋白激酶C 电压门控钾通道 线粒体膜上ATP敏感的钾通道
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