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蛋白芯片法快速测定食品中氯霉素和磺胺二甲嘧啶残留 被引量:26
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作者 左鹏 叶邦策 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期254-258,共5页
人们对食品中药物残留检测方法提出了快速检测、准确定量的要求。本文研究了蛋白芯片法快速定量检测食品中氯霉素和磺胺二甲嘧啶残留。芯片上固定氯霉素和磺胺二甲嘧啶人工抗原,芯片反应区内加入氯霉素和磺胺二甲嘧啶单克隆抗体和其标... 人们对食品中药物残留检测方法提出了快速检测、准确定量的要求。本文研究了蛋白芯片法快速定量检测食品中氯霉素和磺胺二甲嘧啶残留。芯片上固定氯霉素和磺胺二甲嘧啶人工抗原,芯片反应区内加入氯霉素和磺胺二甲嘧啶单克隆抗体和其标准品或待测样品混合物,待抗原抗体完全反应后加入荧光标记二抗示踪。不同浓度的竞争标准品与检测荧光强度作标准曲线,然后通过标准曲线对待检试样中氯霉素和磺胺二甲嘧啶残留量进行定量分析,并同现行的免疫学测定方法进行了比较。 展开更多
关键词 蛋白芯片 兽药残留 氯霉素 磺胺二甲嘧啶
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应用蛋白质芯片对汉防己甲素单用及与屈洛昔芬伍用逆转白血病细胞耐药机理的研究 被引量:13
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作者 陈宝安 杜鹃 +3 位作者 张春秀 程坚 高峰 陆祖宏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期999-1003,共5页
本研究的目的是应用蛋白质芯片检测汉防己甲素(Tet)单独及与屈洛昔芬(Drol)伍用对作用的白血病细胞表面的耐药蛋白,包括P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达的作用,为逆转剂的临床应用提供理论依据。选择... 本研究的目的是应用蛋白质芯片检测汉防己甲素(Tet)单独及与屈洛昔芬(Drol)伍用对作用的白血病细胞表面的耐药蛋白,包括P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达的作用,为逆转剂的临床应用提供理论依据。选择位于膜表面Pgp、MRP1、BCRP耐药蛋白及其相应的抗体为研究体系,制备蛋白芯片,直接对逆转剂作用12、24和48小时的K562/A02细胞进行检测。结果表明:Tet和Drol联合作用24小时时检测到Pgp表达下调(Tet+Drol组:85.27±3.095,对照组:93.67±2.748,P<0.05)。经逆转剂单独及联合作用K562/A02细胞48小时时均检测到Pgp表达下调,且联合应用两药对Pgp表达下调作用明显(Tet+Drol:82.62±3.227,Tet:86.44±2.906,Drol:87.23±2.049,对照组:93.67±2.748,P<0.05)。检测结果与流式细胞仪检测结果一致。结论:逆转剂Tet和Drol对K562/A02细胞的Pgp下调呈时间依赖性。联合作用24小时时出现下调Pgp表达,单独作用48小时均下调Pgp表达,联合用药时下调作用明显。不同检测时间均未见下调MRP1和BCRP的表达。 展开更多
关键词 多药耐药 汉防己甲素 屈洛昔芬 蛋白质芯片 K562/A02
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制备蛋白质芯片的玻璃表面修饰方法比较 被引量:10
3
作者 张春秀 梅茜 +3 位作者 顾莹 唐祖明 何农跃 陆祖宏 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期219-221,共3页
目的 探讨用于制备蛋白质芯片的 4种玻璃表面修饰方法对蛋白质的固定能力。方法 从蛋白质固定效率和固定蛋白质的反应性 2个方面 ,对戊二醛修饰法、琼脂糖修饰法、巯基修饰法和聚赖氨酸修饰法进行比较。结果  4种修饰方法中聚赖氨酸... 目的 探讨用于制备蛋白质芯片的 4种玻璃表面修饰方法对蛋白质的固定能力。方法 从蛋白质固定效率和固定蛋白质的反应性 2个方面 ,对戊二醛修饰法、琼脂糖修饰法、巯基修饰法和聚赖氨酸修饰法进行比较。结果  4种修饰方法中聚赖氨酸修饰玻片对蛋白质的固定量较大 ,比醛基修饰的玻片约高 31 5 % ;与醛基修饰相比 ,其反应性约高 2 6 6 %。结论 聚赖氨酸修饰的玻片较适合于制备蛋白质芯片。 展开更多
关键词 制备 蛋白质芯片 玻璃表面修饰方法 比较 戊二醛修饰法 琼脂糖修饰法 巯基修饰法
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蛋白芯片联合检测多种结核抗体在结核病诊断中的应用价值 被引量:12
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作者 陈红兵 吴丽霞 +6 位作者 张娟 李静 王卉 蒋俊 张小刚 尹文东 于庭 《中国实验诊断学》 北大核心 2011年第2期259-262,共4页
目的设计并建立一种基于结核分支杆菌表面抗原表位的蛋白芯片检测方法,用来进行临床分离样本的检测,探讨其在临床诊断中的应用价值。方法利用生物信息学方法,分析结核分枝杆菌抗原Ag85A,38 kD,CFP10,MPT51,16 kD,TB10.4和ESAT-6的表位,... 目的设计并建立一种基于结核分支杆菌表面抗原表位的蛋白芯片检测方法,用来进行临床分离样本的检测,探讨其在临床诊断中的应用价值。方法利用生物信息学方法,分析结核分枝杆菌抗原Ag85A,38 kD,CFP10,MPT51,16 kD,TB10.4和ESAT-6的表位,并克隆表达这些优势肽段,用于制备多靶点的蛋白芯片;使用该芯片对300株临床分析样本进行检测,与商品化蛋白芯片结果进行比较,分析其敏感性与特异性。结果在200例临床确诊结核病人中,商品化芯片检测敏感性为35.5%。而本文建立的蛋白芯片检测敏感性为98.5%;在100例临床检测非结核病人中,商品化芯片特异性92%,而本文建立的蛋白芯片特异性97%。结论基于优势表位的蛋白芯片敏感性及特异性均显著高于商品化试剂盒,具有较高的临床诊断价值,可提高检测阳性率。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 蛋白芯片 临床应用
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Herb-partitioned moxibustion alleviates colon injuries in ulcerative colitis rats 被引量:11
5
作者 Dan Zhang Yan-Bo Ren +7 位作者 Kai Wei Jue Hong Yan-Ting Yang Li-Jie Wu Ji Zhang Zheng Shi Huan-Gan Wu Xiao-Peng Ma 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2018年第30期3384-3397,共14页
AIM To observe the effect of herb-partitioned moxibustion(HPM) on expression of colonic cytokines in ulcerative colitis(UC) rats.METHODS A UC rat model was established by protein immunization in combination with topic... AIM To observe the effect of herb-partitioned moxibustion(HPM) on expression of colonic cytokines in ulcerative colitis(UC) rats.METHODS A UC rat model was established by protein immunization in combination with topical chemical stimulation.Rats in the HPM group(n = 8) received HPM at bilateral Tianshu(ST25) points.The gross injury and pathological scores of the colon were recorded.The expression profile of colonic cytokines was assayed using the protein microarray technique.Specific differential cytokines were selected and verified by ELISA.The corresponding Uni Prot Accessions of the differentially expressed cytokines were retrieved in the Uni Prot database.The pathways involved were analyzed with the help of the KEGG PATHWAY database.The DAVID database was used for functional cluster and pathway analysis.RESULTS HPM improved colon injuries in UC rats,manifested by accelerated repair of ulcers and alleviation of inflammation,and the gross injury and pathological scores both significantly decreased(P < 0.01).Fold change > 1.3 or < 0.77 was taken as the screening standard.There were 77 down-regulated and 9 up-regulated differentially expressed colonic cytokines in the HPM group compared with the model group,and expression of 20 differed significantly(P < 0.05).Twelve of the 20 significantly differentially expressed cytokines [β-catenin,interleukin-1 receptor 6(IL-1 R6),IL-1β,B7-1,nerve growth factor receptor,AMP-activated protein kinase-α1,neuropilin-2,orexin A,adipocyte differentiation-related protein,IL-2,Fas and Fas L] were up-regulated in the model group(n = 3,compared with the normal group) but downregulated in the HPM group(n = 3,compared with the model group).Functional cluster analysis showed that the differentially expressed colonic cytokines in the HPM group regulated apoptosis and protein phosphorylation.KEGG pathway analysis showed that 52 down-regulated and 7 up-regulated differentially expressed colonic cytokines in the HPM group had pathways.The pathways that interacted between the cytokines and 展开更多
关键词 Cytokine expression profile ULCERATIVE COLITIS protein microarray RATS Herb-partitioned MOXIBUSTION
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免疫金银染色法在蛋白质微阵列检测TORCH感染的实验研究 被引量:6
6
作者 余章斌 蒋犁 +3 位作者 张春秀 唐祖明 陆祖宏 蒋涛 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期125-127,共3页
目的研制基于免疫金银染色法的TORCH检测蛋白质微阵列。方法将TORCH抗原点样于已经被琼脂糖膜修饰的玻片表面,与待测血清和胶体金标记的抗人IgM(μ链)孵育,用银增强微阵列信号,肉眼观察或普通的平板扫描仪记录结果。以不同浓度的纯化人... 目的研制基于免疫金银染色法的TORCH检测蛋白质微阵列。方法将TORCH抗原点样于已经被琼脂糖膜修饰的玻片表面,与待测血清和胶体金标记的抗人IgM(μ链)孵育,用银增强微阵列信号,肉眼观察或普通的平板扫描仪记录结果。以不同浓度的纯化人IgM制备标准曲线。结果蛋白质微阵列的灰度质和IgM的浓度呈线性关系。60份待测血清与ELISA法同时检测,诊断符合率为93.3%。结论该法具有高信息通量、低成本、制备与检测快速简单的优点。 展开更多
关键词 免疫金银染色法 蛋白质 微阵列 TORCH感染
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生物芯片进展 被引量:10
7
作者 肖守军 陈凌 许宁 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2397-2410,共14页
生物芯片是近20年来生物技术领域发展迅速和获得重大突破的高新技术,本综述介绍了经典的平铺生物芯片(DNA和蛋白质芯片)之后,重点介绍了近十年来发展的新的生物芯片的概念和质谱为读出机制的表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI)... 生物芯片是近20年来生物技术领域发展迅速和获得重大突破的高新技术,本综述介绍了经典的平铺生物芯片(DNA和蛋白质芯片)之后,重点介绍了近十年来发展的新的生物芯片的概念和质谱为读出机制的表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI)芯片、高通量DNA测序技术、基于胶体光子晶体的微球高通量生物检测技术、三维阵列生物芯片技术和微流控等生物芯片技术。同时描述了各种生物芯片技术的优点、应用范围和有待解决的问题,最后展望了生物芯片技术的未来。 展开更多
关键词 生物芯片 读出机制 蛋白质芯片 三维阵列芯片 微球高通量检测 高通量DNA测序 微流控生物芯片
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金标记银增强方法检测HIV抗体的蛋白质微阵列 被引量:4
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作者 逄键涛 张敏丽 +1 位作者 文思远 王升启 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2005年第3期223-226,共4页
目的:采用金标记银增强技术制备检测抗HIV病毒P24、gp41、gp36、gp120蛋白抗体的蛋白质微阵列。方法:将上述抗原片段固定在醛基化玻片上,制成了能够检测多种抗体的蛋白质微阵列,同时研究了金标记银增强技术用于蛋白质微阵列检测的方法... 目的:采用金标记银增强技术制备检测抗HIV病毒P24、gp41、gp36、gp120蛋白抗体的蛋白质微阵列。方法:将上述抗原片段固定在醛基化玻片上,制成了能够检测多种抗体的蛋白质微阵列,同时研究了金标记银增强技术用于蛋白质微阵列检测的方法学基础。结果:采用金银染色方法的蛋白质微阵列能够准确而灵敏地检测抗HIV不同抗原的抗体。该方法被引入应用到蛋白质微阵列检测中,可以通过光学显微镜或凭肉眼观察定性结果,仅使用普通的CCD数字照像机或CCD扫描仪就可以对信号进行采集。结论:与传统的荧光标记方法相比,金标记银增强方法的灵敏度相当,而且成本低、信号稳定、操作简便,将是前者的一种通用替代方法。 展开更多
关键词 金标记银增强 蛋白质微阵列 HIV抗体
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骨髓基质细胞条件培养液调节神经干细胞分化有效成分的蛋白质微阵列分析 被引量:8
9
作者 顾平 马芹颖 +5 位作者 王彦永 温雅 王铭维 崔冬生 刘力 耿媛 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期845-849,共5页
目的检测骨髓基质细胞条件培养液(N-CM)中诱导神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的细胞因子,探讨骨髓基质细胞(BMSCs)调节NSCs分化的机制。方法将收集到的N-CM混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,用这两部分培养液分别培养NSCs... 目的检测骨髓基质细胞条件培养液(N-CM)中诱导神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的细胞因子,探讨骨髓基质细胞(BMSCs)调节NSCs分化的机制。方法将收集到的N-CM混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,用这两部分培养液分别培养NSCs,确定其中能促进NSCs分化为高比例神经元的部分并进行大鼠蛋白质微阵列检测。结果N-CM分子量大于5kD的部分可以促进NSCs分化为高比例神经元,并通过蛋白质微阵列检测,与单纯骨髓基质培养液相比,有7种细胞因子的表达量上调了1.5倍,分别是CINC-3、CNTF、IFN-γ、IL-1α、MCP-1、TIMP-1和VEGF。结论BMSCs分泌的可溶性分子对NSCs分化为神经元有促进作用,其中某些分子量大于5KD的细胞因子可能在这一调节作用中发挥效应。 展开更多
关键词 神经干细胞 骨髓基质细胞 条件培养液 蛋白质微阵列 细胞因子 超滤浓缩 免疫组织化学
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蛋白质芯片与ELISA在人IgG定量分析中的比较 被引量:5
10
作者 向征 马文丽 +2 位作者 费嘉 郑文岭 周烨 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期312-316,共5页
建立定量检测人血清IgG(immunoglobulin,IgG)蛋白质芯片,并与酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测的结果进行比较.将纯化的羊抗人IgG 0.5 mg/mL 30%甘油/PBS,点样在经硝酸纤维素修饰的片基上,以人血清白蛋... 建立定量检测人血清IgG(immunoglobulin,IgG)蛋白质芯片,并与酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测的结果进行比较.将纯化的羊抗人IgG 0.5 mg/mL 30%甘油/PBS,点样在经硝酸纤维素修饰的片基上,以人血清白蛋白为阴性对照,用1%BSA封闭,制备定量检测人血清IgG的蛋白质芯片;同时用ELISA检测人血清IgG.SPSS 10.0软件分析蛋白质芯片和ELISA的试验结果,采用单因素方差分析两组间相关性.结果显示蛋白质芯片和ELISA校准曲线的R2值分别是0.996和0.994.两种方法检测的10例人血清IgG含量,其检测限均在1.56μg/100μL.用单因素方差分析结果显示f=0.188,P=0.670>0.05,表明两组间差异无显著性意义,具有很好的一致性. 展开更多
关键词 蛋白质芯片 抗体芯片 免疫球蛋白G 酶联免疫吸附测定
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应用蛋白芯片筛选高血压脑梗死血浆标志物的初步研究 被引量:8
11
作者 葛菁 宋莉 +6 位作者 张禅那 张银辉 张涵 王鑫 宋燕 惠汝太 陈敬洲 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2019年第2期2844-2847,共4页
目的利用蛋白芯片筛选高血压脑梗死患者血浆中可能用于脑梗死早期诊断、预后判断的血浆标志物:方法采用生物素标记抗体芯片技术,对12名高血压患者及12名由高血压引起的脑梗死(高血压脑梗死)患者进行血浆蛋白质组学的检测。采用芯片分析... 目的利用蛋白芯片筛选高血压脑梗死患者血浆中可能用于脑梗死早期诊断、预后判断的血浆标志物:方法采用生物素标记抗体芯片技术,对12名高血压患者及12名由高血压引起的脑梗死(高血压脑梗死)患者进行血浆蛋白质组学的检测。采用芯片分析软件提取数据,获得的数据采用AAH-BLG-1000的数据分析软件作统计分析:结果高血压脑梗死组和高血压对照组相比,生长因子M-CSF、Progranulin、PD-ECGF、VEGF-C,细胞因子TRANCE、TWEAK,具有抗氧化活性的结合珠蛋白Haptoglobin(HP)、过氧化物酶PRDX6,具有信号转导作用的TNF受体超家族成员10C(TNFRSF10C)、DKK类似蛋白1(Soggy-1)、Tool样受体3(TLR3)、Fibrinogen、IL-17RD,趋化因子系统的CCR4、CXCL16、白细胞衍生趋化因子(LECT2).簇集蛋白Clusterin,基质金属蛋白酶MMP-19、MMP-20,以及巢蛋白(Nidogen-1)共20个血浆蛋白差异表达(P<0.05,Foldchange绝对值>1.5)。结论蛋白质芯片共检测出20个潜在的高血压脑梗死血浆标志物,这些血浆蛋白参与了脑梗死发生发展过程中的多条路径,如细胞趋化、黏附、迁移、增殖,血栓形成和血管再生,以及介导炎症和免疫反应。蛋白芯片有助于早期鉴别脑卒中类型,诊断脑梗死及判断患者的预后,指导更有效更准确的临床治疗。 展开更多
关键词 高血压脑梗死 蛋白质芯片 标志物
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蛋白芯片检测高原红细胞增多症患者血清炎症细胞因子表达的探索研究 被引量:8
12
作者 于前进 孔佩艳 +4 位作者 曾东风 沈照华 朱丽丹 胥全宏 宋虎 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期251-255,共5页
目的利用蛋白芯片技术检测高原红细胞增多症(HAPC)患者与高原正常人血清炎症细胞因子的表达,探讨血清炎症细胞因子在HAPC发病中的作用及可能的机制。方法选择与慢性高原病密切相关的40种炎症细胞因子作为可能影响HAPC发病的检测指标,应... 目的利用蛋白芯片技术检测高原红细胞增多症(HAPC)患者与高原正常人血清炎症细胞因子的表达,探讨血清炎症细胞因子在HAPC发病中的作用及可能的机制。方法选择与慢性高原病密切相关的40种炎症细胞因子作为可能影响HAPC发病的检测指标,应用低密度蛋白质芯片检测8名HAPC患者及9名高原正常人的血清标本,并利用SRING9.1数据库做蛋白质相互作用分析。结果 HAPC患者与高原正常人的血清炎症细胞因子蛋白表达水平:IL-1β为488.92±91.78 vs 226.65±127.62、IL-2为590.64(707.02-460.88)vs 280.79(294.70-205.27)、IL-3为711.38±197.51 vs 271.64±135.69、IL-15为534.50±143.04 vs 367.98±108.10、IL-16为655.55±150.86 vs394.75±110.74、MCP-1为2304.70(3 901.71-1 928.07)vs 1421.61(2 099.36-1241.21)、TNF-α为591.43±103.03 vs 433.18±141.12(P<0.05);其余33种炎症细胞因子变化甚小(P>0.05)。结论 IL-1β、IL-2、IL-3、IL-15、IL-16、MCP-1、TNF-α可能均参与了HAPC的发病过程,且与EPO、HIF-1α、雄激素受体(AR)有内在的相互关联作用;蛋白芯片技术对于探讨HAPC发病机制及开发快速准确临床检验是技术1种具有实用性和有效性的工具。 展开更多
关键词 高原红细胞增多症 血清炎症细胞因子 蛋白质芯片 蛋白质相互作用网络 发病机制
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表面等离子体共振成像法用于糖蛋白分析 被引量:8
13
作者 刘巍 陈义 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1744-1746,共3页
建立了一套表面等离子体共振成像方法,用于筛选糖蛋白和非糖蛋白,并可以区分不同糖蛋白与伴刀豆凝集素的识别强度.波长调制的表面等离子体共振与成像法所得结果一致.伴刀豆凝集素的洗脱成像实验为识别强度提供了补充验证方案.
关键词 糖蛋白 蛋白质微阵列 表面等离子体共振成像
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基于SPR相位检测的蛋白质芯片信号获取与处理研究 被引量:3
14
作者 余兴龙 刘俊锋 定翔 《生命科学仪器》 2005年第3期20-24,共5页
表面等离子体共振传感器有可能发展成为一种灵敏的高通量检测的蛋白质组学研究工具,而信号获取和数据处理是其关键之一。本文利用数值模拟全面研究了微阵列相位检测的分辨率与空间采样频率、采样周期数以及ADC位数等关系,详细分析了相... 表面等离子体共振传感器有可能发展成为一种灵敏的高通量检测的蛋白质组学研究工具,而信号获取和数据处理是其关键之一。本文利用数值模拟全面研究了微阵列相位检测的分辨率与空间采样频率、采样周期数以及ADC位数等关系,详细分析了相关、正弦拟合和傅立叶变换(FTP)等算法对相位检测的精度和误差等影响。研究结果表明,在理想状况下,4个CCD像素就能满足分辨率对光电转换的要求,而在有噪音的情况下,分辨率随着空间采样频率的增加而提高;信号周期数对分辨率影响不大,但有利于克服噪声影响,提高精度;ADC对分辨率影响最大,高分辨率需要选择多位ADC,8位ADC时分辨率约为0.15°,10位时约为0.05°,而12位时约为0.01°。 展开更多
关键词 SPR 相位检测 蛋白质芯片 信号获取
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无细胞系统原位制备蛋白质芯片及其应用 被引量:7
15
作者 章杰 刘琼明 +1 位作者 许丹科 贺福初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第4期391-397,共7页
主要介绍了目前在生物芯片表面进行蛋白质无细胞表达与定向制备蛋白质芯片的研究进展,包括各种基因植入芯片的方法、蛋白质体外不同表达的途径、蛋白质固定的策略以及可能的应用发展前景等.蛋白质芯片以其高通量、高灵敏和检测迅速等优... 主要介绍了目前在生物芯片表面进行蛋白质无细胞表达与定向制备蛋白质芯片的研究进展,包括各种基因植入芯片的方法、蛋白质体外不同表达的途径、蛋白质固定的策略以及可能的应用发展前景等.蛋白质芯片以其高通量、高灵敏和检测迅速等优点正成为蛋白质组学研究中的重要工具之一.蛋白质的高效表达与纯化、蛋白质在芯片表面的有效固定与蛋白质活性的保持等内容是蛋白质芯片技术发展的关键.采用纳米生物技术与无细胞表达系统,已经可以在生物芯片表面通过植入基因的方式制备相关的蛋白质芯片,从而为蛋白质芯片的原位制备开辟了新的方向. 展开更多
关键词 蛋白质芯片 无细胞蛋白质表达 体外蛋白质表达 原位制备蛋白质阵列 无细胞系统
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蛋白质微阵列检测抗原抗体相互作用 被引量:3
16
作者 谢文章 王东 +1 位作者 杜宏武 程京 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期311-315,共5页
为了制备蛋白质微阵列和研究芯片表面抗原 抗体的相互作用 ,研究了如何在玻片表面固化蛋白质和用荧光染料 (Cy3,Cy5 )对蛋白质进行标记 .结果表明 ,在醛基修饰的玻璃表面 ,通过共价偶联的方法将抗原或抗体固定到芯片表面 ,能使二者保... 为了制备蛋白质微阵列和研究芯片表面抗原 抗体的相互作用 ,研究了如何在玻片表面固化蛋白质和用荧光染料 (Cy3,Cy5 )对蛋白质进行标记 .结果表明 ,在醛基修饰的玻璃表面 ,通过共价偶联的方法将抗原或抗体固定到芯片表面 ,能使二者保持其特异性结合能力 .同时 ,荧光标记后的抗原或抗体仍然具有特异性结合能力 .蛋白质微阵列是通过机械手在玻片表面排阵制作的 .芯片上的荧光信号获取采用了激光共焦荧光扫描系统 .用不同浓度的抗原探针阵列 ,对其相应的抗体靶分子的特异性结合进行了分析和研究 .此外 ,还通过在玻片表面固定兔IgG和固定鼠IgG ,对羊抗兔和羊抗鼠抗体与其相应抗原的特异性相互作用进行了检测 . 展开更多
关键词 蛋白质微阵列 检测 抗原-抗体相互作用 固定化 荧光标记 蛋白质芯片
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细胞膜表面标志CD系列抗体蛋白芯片制备及应用的研究 被引量:2
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作者 王燕 刘昕 +2 位作者 缪金明 申大忠 杨梦苏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期43-46,共4页
目的 本研究利用抗原抗体免疫反应的原理 ,研制一种可同时快速检测多种蛋白的蛋白芯片 ,用于细胞膜表面抗原的检测。方法 将抗细胞表面标志CD抗原的CD系列抗体蛋白固定在醛基玻片上形成微阵列 ,从样品细胞中抽提膜蛋白抗原并用FSE标... 目的 本研究利用抗原抗体免疫反应的原理 ,研制一种可同时快速检测多种蛋白的蛋白芯片 ,用于细胞膜表面抗原的检测。方法 将抗细胞表面标志CD抗原的CD系列抗体蛋白固定在醛基玻片上形成微阵列 ,从样品细胞中抽提膜蛋白抗原并用FSE标记 ,然后与固定在芯片上的CD抗体阵列反应 ,扫描仪检测反应结果。结果 本研究选用HL 60 ,K562 ,NB4,Jurkat细胞株为代表 ,测定到细胞膜表面蛋白质CD抗原HL 60、K562、NB4、Jurkat细胞CD1 3均为阳性 ,HL 60、NB4、Jurkat细胞CD4阳性 ,NB4细胞CD3 8阳性 ,K562细胞CD7阳性。所得结果与免疫印迹及免疫组织化学验证等方法一致。结论 HL 60 ,K562 ,NB4,Jurkat细胞膜表面蛋白质CD抗原有差异。蛋白芯片方法具有的高信息通量、低成本、制备、测定快速简单的优点 。 展开更多
关键词 CD抗体 膜蛋白 蛋白芯片 细胞膜表面标志
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纳米荧光小球标记在蛋白质微阵列检测中的应用研究 被引量:4
18
作者 刘海波 庄峙厦 +4 位作者 陈成祥 黄荣夫 谭芳 鄢庆枇 王小如 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1227-1230,共4页
研究了不经分离、一次性制备氨基化联吡啶钌掺杂的双层二氧化硅纳米小球的方法。实验证明该纳米小球尺寸均匀,光稳定性、水溶性好,分散稳定。通过简单的偶联反应后,它能有效的和蛋白质结合,结合后的蛋白能保持其生物活性。以此纳米荧光... 研究了不经分离、一次性制备氨基化联吡啶钌掺杂的双层二氧化硅纳米小球的方法。实验证明该纳米小球尺寸均匀,光稳定性、水溶性好,分散稳定。通过简单的偶联反应后,它能有效的和蛋白质结合,结合后的蛋白能保持其生物活性。以此纳米荧光小球为标记物,应用于蛋白质微阵列的定量检测,结果发现其效果明显优于相同条件下以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物的定量结果,检出限可以达到3.5 mg/L。 展开更多
关键词 纳米荧光小球 蛋白质微阵列 蛋白检测
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孕妇TORCH感染4种病原体的检测 被引量:4
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作者 张茜 张春秀 蒋犁 《国外医学(妇幼保健分册)》 2004年第5期290-291,i004,共3页
TORCH是对优生危害最大的病原微生物 ,尤其是孕妇的原发性和活动性感染会导致胎儿的先天性感染 ,并引起严重后果 ,因此TORCH的检测尤为重要 ,该文论述了目前TORCH检测的主要方法以及各种方法的特点。TORCH检测的方法主要有病原学、核酸... TORCH是对优生危害最大的病原微生物 ,尤其是孕妇的原发性和活动性感染会导致胎儿的先天性感染 ,并引起严重后果 ,因此TORCH的检测尤为重要 ,该文论述了目前TORCH检测的主要方法以及各种方法的特点。TORCH检测的方法主要有病原学、核酸、血清学检查 ,其中PCR、ELISA是目前最常用的两种方法 ,近年发展了一些改良方式。蛋白质芯片检测技术作为一门新型技术因其特有的优势 。 展开更多
关键词 TORCH 病原学检测 核酸检测 血清学捡测 蛋白质芯片
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量子点银增强可视化检测方法的研究与应用 被引量:6
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作者 许国峰 李慧 +4 位作者 张翠 孙子因 钟文英 许丹科 陈洪渊 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1383-1387,共5页
通过制备链霉亲和素修饰的CdTe量子点探针,建立了基于量子点探针的银增强显色可视化检测方法,并结合蛋白质芯片分析技术,将此方法应用于反相蛋白芯片的分析检测。以人IgG测定为模式,在醛基片上固定人IgG,加入10ngBio-羊抗人IgG及CdTe-S... 通过制备链霉亲和素修饰的CdTe量子点探针,建立了基于量子点探针的银增强显色可视化检测方法,并结合蛋白质芯片分析技术,将此方法应用于反相蛋白芯片的分析检测。以人IgG测定为模式,在醛基片上固定人IgG,加入10ngBio-羊抗人IgG及CdTe-SA探针,银增强显色15min。结果显示,人IgG样品量在100pg~1.6ng范围内,其对数值与信号灰度值呈良好的线性关系(r=0.997),检出限为50pg。本方法可实现微量蛋白的灵敏检测,具有操作简单,对仪器要求低,结果可视化等特点。 展开更多
关键词 量子点探针 银增强显色 可视化 蛋白芯片
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