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束缚应激大鼠AMPA受体和相关蛋白变化及逍遥散对其影响 被引量:3
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作者 岳广欣 王竹风 +4 位作者 张巧丽 赵歆 岳利峰 丁杰 陈家旭 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期603-607,I0002,共6页
目的观察慢性束缚应激状态下海马及杏仁体AMPA受体和相关蛋白的变化及逍遥散的作用。方法使用捆绑的方法制作慢性束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7 d后和21d后检测模型大鼠海马CA1区、基底外侧杏仁核(BLA)谷氨酸受体2/3(Glu... 目的观察慢性束缚应激状态下海马及杏仁体AMPA受体和相关蛋白的变化及逍遥散的作用。方法使用捆绑的方法制作慢性束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7 d后和21d后检测模型大鼠海马CA1区、基底外侧杏仁核(BLA)谷氨酸受体2/3(GluR2/3)、N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感性的融合蛋白(NSF)、PKC作用蛋白1(PICK1)的积分吸光度(IOD)和阳性神经元数。结果7 d模型组大鼠海马CA1区和BLAGluR2/3 IOD较7 d正常组显著增高(P<0.01,P<0.05);7 d模型组海马CA1区GluR2/3阳性神经元数及PICK1 IOD较7 d正常组增高(P<0.05,P<0.01),7 d治疗组(逍遥散)上述指标与7 d模型组相比有显著差异(P<0.01,P<0.05),与7 d正常组比较无差异;21 d模型组与21 d正常组比较,海马CA1区GluR2/3 IOD显著降低(P<0.05)、NSF IOD升高(P=0.06),BLA GluR2/3阳性神经元数增多(P=0.090)、PICK1阳性神经元数减少(P=0.075),21 d治疗组上述指标与正常组比较无显著性差异。结论7 d和21 d束缚应激对AMPA受体影响的变化趋势不同,海马CA1区与BLA的变化趋势也不一致,逍遥散对21 d束缚应激状态下AMPA受体的变化调节较强。 展开更多
关键词 束缚应激 突触可塑性 AMPA受体 融合蛋白 PKc作用蛋白1 逍遥散
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PICK1经TGF-β/Nodal信号通路介导RSV感染小鼠的免疫抑制及气道高反应 被引量:2
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作者 袁文杏 王晶晶 +2 位作者 张向民 郭陶陶 刘敏 《中国热带医学》 CAS 2020年第6期500-504,共5页
目的探究蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(protein interacting with Cαkinase 1,PICK1)通过TGF-β/Nodal信号通路干预呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠支气管哮喘(bronchial asthma,BA)模型中免疫抑制及气道高反应... 目的探究蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(protein interacting with Cαkinase 1,PICK1)通过TGF-β/Nodal信号通路干预呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠支气管哮喘(bronchial asthma,BA)模型中免疫抑制及气道高反应的机制研究。方法30只小鼠随机分为3组(n=10),分别为对照组、BA组和FSC231组。BA组和FSC231组通过RSV建立BA模型,FSC231组小鼠同时腹腔注射PICK1抑制剂FSC231干预。通过HE染色观察各组小鼠肺组织病理学变化。通过肺功能仪检测气道阻力,计数肺泡灌洗液中EOS数目。通过酶联免疫吸附法检测IL-17、IL-10和IgE水平。流式细胞术检测血液中Th17和Tregs水平。结果BA组肺泡结构紊乱,支气管狭窄,管壁增厚,出现炎性浸润。FSC231组支气管和肺泡结构严重损坏,并且支气管壁充血、增厚,支气管内阻塞,出现严重的炎性浸润现象。BA组的BALF中EOS计数、血清IgE水平、气道阻力、肺组织Nodal水平、Th17细胞比例和血清IL-17均高于对照组(P<0.05),而FSC231组的BALF中EOS计数、血清IgE水平、气道阻力、肺组织Nodal水平、Th17细胞比例和血清IL-17则高于BA组(P<0.05)。相反,BA组的Treg细胞和IL-10低于对照组(P<0.05),而FSC231组的Treg细胞和IL-10则低于BA组(P<0.05)。结论抑制PICK1可能通过促进TGF-β/Nodal信号通路引起Th17细胞升高和Treg的降低,从而加重免疫抑制,进一步提高BA小鼠气道高反应。 展开更多
关键词 蛋白激酶cα相互作用蛋白1 转化生长因子β 支气管哮喘 气道高反应 免疫抑制 辅助性T细胞17 调节性T细胞
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PICK1蛋白C端酸性区域对其功能的调节 被引量:1
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作者 贾原 黄玉民 +1 位作者 刘俊林 石亚伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期224-230,共7页
蛋白激酶C相互作用蛋白1(protein interacting with Ckinase1,PICK1)是调节AMPA(alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid)受体在细胞膜上的数量与分布,引起LTP与LTD现象的重要蛋白.本文利用基因克隆、荧光光谱以及... 蛋白激酶C相互作用蛋白1(protein interacting with Ckinase1,PICK1)是调节AMPA(alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid)受体在细胞膜上的数量与分布,引起LTP与LTD现象的重要蛋白.本文利用基因克隆、荧光光谱以及免疫分析等方法,分析了PICK1蛋白C末端酸性区对BAR结构域与膜脂结合能力以及PICK1分子内BAR(Bin/amphiphysin/RVS)结构域与PDZ结构域相互作用的影响,研究了钙离子结合C末端酸性区后对上述相互作用的调节.结果显示,C末端酸性区的存在使BAR结构域与膜脂的结合能力减弱大约10倍,但PICK1分子内的BAR与PDZ结构域的相互作用与不含C末端的酸性区相比增强了大约4倍.另一方面,C末端酸性区的存在,伴随钙离子浓度的提高,有助于增强BAR与膜脂的结合,却削弱了PDZ和BAR结构域的作用.当钙离子浓度增加到500μmol/L时,BARC的脂质结合能力以及和PDZ的亲和力与不含酸性区相当. 展开更多
关键词 蛋白激酶c相互作用蛋白1 BAR结构域 c末端酸性区 脂质体 钙离子
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无精症患者睾丸组织中蛋白激酶C相互作用蛋白1的表达
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作者 郝梦梦 王国贺 郭艺红 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第5期631-633,共3页
目的:研究蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK1)在无精症患者睾丸组织中的表达情况,探讨PICK1与男性生育力的关系。方法:无精症患者50例,其中生精功能基本正常(OA)15例,生精功能低下(HS)9例,生精功能阻滞(MA)12例,唯支持细胞综合征(SCOS)14例... 目的:研究蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK1)在无精症患者睾丸组织中的表达情况,探讨PICK1与男性生育力的关系。方法:无精症患者50例,其中生精功能基本正常(OA)15例,生精功能低下(HS)9例,生精功能阻滞(MA)12例,唯支持细胞综合征(SCOS)14例。用免疫组化SP法检测患者睾丸组织中PICK1的表达。采用卵泡浆内单精子注射(ICSI)技术对OA组和HS组患者行助孕治疗,比较两组的妊娠结局。结果:OA、HS、MA和SCOS组患者睾丸组织中PICK1蛋白表达水平分别为(147.67±7.48)、(127.79±4.94)、(106.73±8.70)和(1.91±1.01),差异有统计学意义(F=1 464.268,P<0.001),4组PICK1蛋白表达水平依次下降(P<0.05)。OA组受精率高于HS组(82.8%vs 69.1%,χ2=6.282,P<0.05);但两组卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:睾丸组织中PICK1的表达与男性生育力有关,其表达降低可能是男性生精障碍的原因之一。 展开更多
关键词 蛋白激酶c相互作用蛋白1 男性生育力 无精症
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重组PICK1蛋白的多聚形式及其与Ca^(2+)和Mg^(2+)的结合 被引量:3
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作者 石亚伟 张蕾 +1 位作者 肖虹 王丽丽 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1012-1018,共7页
蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)是从线虫到人的所有生物中非常保守的一类存在于细胞质中的膜结合蛋白,在蛋白质转运,以及细胞内信号转导过程中发挥重要作用.通过基因重组技术获得PICK1及其截短的N-PDZ(1~110残基)和BAR-C(128~416残基... 蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)是从线虫到人的所有生物中非常保守的一类存在于细胞质中的膜结合蛋白,在蛋白质转运,以及细胞内信号转导过程中发挥重要作用.通过基因重组技术获得PICK1及其截短的N-PDZ(1~110残基)和BAR-C(128~416残基)重组蛋白,结合变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,以及分子排阻层析,表明溶液中的PICK1主要以二聚体形式存在.利用荧光光谱分析PICK1与金属离子Ca2+和Mg2+的结合情况.结果表明,在0.02 mol/L Hepes,pH 7.2,随着2种金属离子的不断滴加,PICK1在338 nm处的最大荧光强度逐渐降低,PICK1与Ca2+结合常数为Ka1=(2.34±0.20)×106L.mol-1,Ka2=(7.75±0.62)×105L.mol-1,而Mg2+结合常数为Ka=(5.00±0.40)×106L.mol-1.另外,对PICK1的N端区域N-PDZ和C端区域BAR-C的重组片段与金属离子Ca2+和Mg2+结合情况进一步分析表明,Ca2+既能与PICK1的N端N-PDZ结合,又可与C端BAR-C结合,而Mg2+只结合在PICK1的N-PDZ区域.比较Ca2+或Mg2+对PICK1结合脂质的影响,显示Ca2+能明显增强蛋白和脂质的结合. 展开更多
关键词 蛋白激酶cα相互作用蛋白1 二聚体 钙离子 镁离子 荧光光谱
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蛋白激酶Cα相互作用蛋白1在结直肠腺癌中的表达及其意义 被引量:2
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作者 高红变 李宁 +4 位作者 郑绘霞 梁建芳 梁钢 万惠丽 肖虹 《肿瘤研究与临床》 CAS 2014年第6期373-376,380,共5页
目的 探讨蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)在结直肠腺癌中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学及Western blot方法检测PICK1在结直肠腺癌、腺瘤、增生性息肉及癌旁组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果 免疫组织化学结... 目的 探讨蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)在结直肠腺癌中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学及Western blot方法检测PICK1在结直肠腺癌、腺瘤、增生性息肉及癌旁组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果 免疫组织化学结果显示,102例结直肠腺癌组织中PICK1的阳性表达率为72.5%(74/102),其中高表达率为30.4%(31/102),腺瘤组织中的PICK1高表达率为22.2%(8/36),较癌旁组织中的高表达率0(0/40)增高(P<0.05);36例增生性息肉组织PICK1的高表达率为5.6%(2/36),与癌旁组织比较差异无统计学意义(P>0.05).Western blot结果显示,PICK1在结直肠腺癌组织中的表达(1.10±0.04)明显高于癌旁组织(0.75±0.07)(P<0.05).在结直肠腺癌组织中,PICK1的高表达与肿瘤的发生部位、分化程度、浸润深度、TNM分期及淋巴结转移有关(均P<0.05),与年龄及性别无关(均P>0.05).结论 PICK1与结直肠腺癌的发生、发展和侵袭转移有关,并有助于患者预后的判断. 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 蛋白激酶cα相互作用蛋白1 免疫组织化学 WESTERN BLOT
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PICK1:一个功能多样的药靶蛋白 被引量:2
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作者 宋婀莉 高友鹤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期697-705,共9页
蛋白质是生命功能的执行者.生命体中某些关键蛋白的功能异常往往是导致疾病发生的根本原因.这些疾病相关蛋白极有可能成为药物靶点,为新药研发和疾病治疗提供重要线索.PICK1蛋白(protein interacting with Cαkinase1)结合能力广泛、功... 蛋白质是生命功能的执行者.生命体中某些关键蛋白的功能异常往往是导致疾病发生的根本原因.这些疾病相关蛋白极有可能成为药物靶点,为新药研发和疾病治疗提供重要线索.PICK1蛋白(protein interacting with Cαkinase1)结合能力广泛、功能多样以及在多种重要疾病(如:癌症、精神分裂症、疼痛、帕金森综合症等)的发生发展过程中发挥潜在的作用,使其成为一个可能的药靶蛋白.PICK1与绝大多数配体蛋白的相互作用是通过其PDZ结构域与配体C末端区域的结合介导的,使PICK1的PDZ结构域成为一个潜在的药物靶点.因此,可以利用生物小分子物质特异性地结合PICK1的PDZ结构域,干扰或阻断PICK1与配体蛋白的天然相互作用,最终达到治疗相关疾病的目的. 展开更多
关键词 PIcK1(protein interacting with cαkinase 1) PDZ结构域 药物靶点 阻断性多肽
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小鼠PICK1基因真核表达载体myc-PICK1的构建
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作者 杨冬梅 王婷 +1 位作者 程丽佳 蔡佩玲 《解剖学研究》 CAS 2015年第4期241-244,共4页
目的构建小鼠PICK1基因的真核表达载体myc-PICK1。方法从小鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增PICK1序列,所得片段及真核表达载体p RK5-myc用Sal I和Not I双酶切,后连入p RK5-myc载体中。重组质粒经Sal I和Not I双酶切鉴定后送公司测序。结... 目的构建小鼠PICK1基因的真核表达载体myc-PICK1。方法从小鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增PICK1序列,所得片段及真核表达载体p RK5-myc用Sal I和Not I双酶切,后连入p RK5-myc载体中。重组质粒经Sal I和Not I双酶切鉴定后送公司测序。结果 PCR扩增得到预期1.2 kb大小的目的片段,经Sal I和Not I双酶切鉴定正确重组质粒送公司测序,结果与预期一致。myc-PICK1重组质粒转染Hela细胞,进行免疫染色能看到定位于胞浆的蛋白表达。结论成功构建了myc-PICK1载体,为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 PIcK1 真核表达载体 小鼠
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