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Core promoter: A critical region where the hepatitis B virus makes decisions 被引量:14
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作者 Jorge Quarleri 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第2期425-435,共11页
The core promoter(CP) of the viral genome plays an important role for hepatitis B virus(HBV) replication as it directs initiation of transcription for the synthesis of both the precore and pregenomic(pg) RNAs. The CP ... The core promoter(CP) of the viral genome plays an important role for hepatitis B virus(HBV) replication as it directs initiation of transcription for the synthesis of both the precore and pregenomic(pg) RNAs. The CP consists of the upper regulatory region and the basa core promoter(BCP). The CP overlaps with the 3'-end of the X open reading frames and the 5'-end of the precore region,and contains cis-acting elements that can independently direct transcription of the precore mRNA and pgRNA. Its transcription regulation is under strict control of viral and cellular factors. Even though this regulatory region exhibits high sequence conservation,when variations appear,they may contribute to the persistence of HBV within the host,leading to chronic infection and cirrhosis,and eventually,hepatocellular carcinoma. Among CP sequence variations,those occurring at BCP may dysregulate viral gene expression with emphasis in the hepatitis B e antigen,and contribute to disease progression. In this review these molecular aspects and pathologic topics of core promoter are deeply evaluated. 展开更多
关键词 Hepatitis B virus Core promoter VARIANTS Basal core promoter Transcription regulation
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人NPCEDRG基因启动子的克隆及CCAAT/NFY结合位点初步分析 被引量:12
2
作者 侯德富 关勇军 +3 位作者 关瑞 欧阳咏梅 余艳辉 陈主初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第8期713-723,共11页
NPCEDRG基因是采用基因定位候选克隆策略获得的一个鼻咽癌候选抑瘤基因.NPCEDRG在鼻咽癌细胞和组织中表达下调,重新恢复NPCEDRG基因在CNE2细胞系的表达,可部分逆转CNE2的恶性表型.为揭示NPCEDRG基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调的分子... NPCEDRG基因是采用基因定位候选克隆策略获得的一个鼻咽癌候选抑瘤基因.NPCEDRG在鼻咽癌细胞和组织中表达下调,重新恢复NPCEDRG基因在CNE2细胞系的表达,可部分逆转CNE2的恶性表型.为揭示NPCEDRG基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调的分子机制,联合应用生物信息学和报告基因载体系统分析方法对NPCEDRG基因启动子区进行克隆及功能分析,系统发育进化足迹分析结果表明,NPCEDRG基因5′端调控区-180~+235 bp区间在脊椎动物中高度保守,该保守区域中存在包括CCAAT/NFY、STAT1和SP1等转录因子结合位点.构建Luc和/或EGFP报告基因表达载体并检测其启动子活性,-146~-8 bp区域有较强的启动子活性,电泳迁移阻滞分析实验(EMSA)提示,CCAAT/NFY转录因子结合位点是NPCEDRG基因的转录调控元件.因此,研究确定-146~-8 bp区域是NPCEDRG基因核心启动子区域且启动子核心元件CCAAT/NFY可能参与NPCEDRG基因的转录调控. 展开更多
关键词 NPCEDRG基因 核心启动子 转录调控 CCAAT/NFY结合位点
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人NFBD1启动子的鉴定与初步分析 被引量:9
3
作者 卜友泉 宋方洲 +1 位作者 易发平 马永平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期631-637,共7页
NFBD1,也称MDC1,是一个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为了进一步深入研究其转录调控机制,本研究克隆鉴定了NFBD1的启动子.首先应用5′RACE技术鉴定了NFBD1的转录起始位点,首次发现NFBD1至少存在3种丰度和转录起始位点不... NFBD1,也称MDC1,是一个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为了进一步深入研究其转录调控机制,本研究克隆鉴定了NFBD1的启动子.首先应用5′RACE技术鉴定了NFBD1的转录起始位点,首次发现NFBD1至少存在3种丰度和转录起始位点不同的转录变异体.然后,通过PCR定向克隆和酶切亚克隆策略,构建了覆盖NFBD1基因5′侧翼区起始密码子ATG上游5kb区域的一系列NFBD1启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,NFBD1启动子区域定位于主要转录起始位点区域附近1.5kb的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,NFBD1启动子缺乏TATA盒,但含有典型的CCAAT盒和GC盒以及其它潜在的转录因子结合位点,提示Sp1和NF-Y等转录因子可能参与NFBD1的转录调控. 展开更多
关键词 NFBDl RACE 启动子 转录调控
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合成生物学研究中的微生物启动子工程策略 被引量:9
4
作者 于慧敏 郑煜堃 +2 位作者 杜岩 王苗苗 梁有向 《合成生物学》 CSCD 2021年第4期598-611,共14页
合成生物学研究对于我国绿色生物制造产业和可持续发展战略至关重要。启动子是合成生物学核心元件,是在转录水平上实现基因高效、精准表达调控的最关键因素之一。本文重点对原核微生物启动子工程研究的基本内容、研究进展及发展趋势进... 合成生物学研究对于我国绿色生物制造产业和可持续发展战略至关重要。启动子是合成生物学核心元件,是在转录水平上实现基因高效、精准表达调控的最关键因素之一。本文重点对原核微生物启动子工程研究的基本内容、研究进展及发展趋势进行了综述。首先概述了启动子序列基本特征及其受RNA聚合酶σ因子识别调控的一般规律;并以大肠杆菌乳糖操纵子为例简要介绍了诱导型启动子的负调控与正调控诱导机制。其次,分别从对靶基因自身内源启动子进行突变改造以及采用高效外源启动子进行替换改造这两个方面入手,阐述了启动子改造的常用策略。进一步对近年来公开报道的不同类型诱导型启动子进行了梳理,小结了代表性化学分子诱导剂以及物理信号诱导方式的种类及基本特征。简述了非模式和模式微生物组成型启动子的研究进展及研究侧重点。结合动态代谢调控技术及人工智能工具的突破性发展,提出具有动态调控功能的特殊启动子的发现与改造、全新性能启动子元件的人工智能设计与改造等将成为启动子工程研究的新方向与新前沿。最后分析了启动子工程领域存在的挑战性问题,展望了今后的研究重点,并结合合成生物学的发展,进一步强调了微生物启动子工程的重要作用。 展开更多
关键词 合成生物学 启动子工程 调控机制 改造策略 诱导信号 动态代谢调控 人工智能从头设计
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霍乱毒素B亚基基因具有自己的启动子 被引量:5
5
作者 曹诚 石成华 +1 位作者 李平 马清钧 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1997年第1期78-86,共9页
本研究发现并证实霍乱毒素B亚基基因上游XbaI~ClaI限制性片段内存在具有启动子活性的序列;在该启动子作用下,霍乱毒素B亚基表达水平可达200mg/L,氯霉素乙酰基转移酶基因表达水平随培养条件不同在0.3~10mg... 本研究发现并证实霍乱毒素B亚基基因上游XbaI~ClaI限制性片段内存在具有启动子活性的序列;在该启动子作用下,霍乱毒素B亚基表达水平可达200mg/L,氯霉素乙酰基转移酶基因表达水平随培养条件不同在0.3~10mg/L之间,大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因的表达量达4100单位/ml。在该启动子的控制下霍乱毒素B亚基基因可以高效表达,该启动子的存在可能是霍乱毒素操纵子中霍乱毒素B亚基表达量是A亚基的6倍的原因。 展开更多
关键词 细菌毒素 霍乱毒素 启动子 B亚基 基因
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细菌整合子中整合酶基因调控的研究进展 被引量:9
6
作者 欧阳润泽 贺艳艳 徐海 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1231-1237,共7页
本文基于细菌I型整合子中整合酶与细菌耐药性的密切关系,对影响整合酶基因表达调控的因素,如抗生素、c AMP-CRP途径、Pc-P2结合体、att C位点、一些拟核蛋白以及可变区的长度等,进行了总结分析。为缓解当今社会环境面临的细菌耐药性趋... 本文基于细菌I型整合子中整合酶与细菌耐药性的密切关系,对影响整合酶基因表达调控的因素,如抗生素、c AMP-CRP途径、Pc-P2结合体、att C位点、一些拟核蛋白以及可变区的长度等,进行了总结分析。为缓解当今社会环境面临的细菌耐药性趋势逐渐加剧的问题提供了新的思路和参考。 展开更多
关键词 整合子 启动子 I型整合酶 调控
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人PRR11启动子的结构与功能初步分析 被引量:9
7
作者 艾青 卜友泉 +6 位作者 刘竹 兰欢 吉颖 杜刚 杨正梅 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期356-363,共8页
PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启... PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启动子进行了克隆鉴定和初步分析.首先,应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了PRR11基因的转录起始位点,发现了其具有多个转录起始位点.通过PCR定向克隆和DNA blunting技术,构建了6个相互重叠并覆盖PRR11基因转录起始位点附近约2.0 kb区域的PRR 11基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,PRR 11基因启动子主要定位于转录起始位点附近-563 bp~+341 bp的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,PRR 11基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒、CCAAT盒以及潜在的经典转录因子E2F1和MYB的结合位点,提示Sp1、NF-Y、E2F1和MYB等经典转录因子可能参与PRR 11基因的转录调控. 展开更多
关键词 PRR11(proline-rich PROTEIN 11) 启动子 转录调控 肿瘤相关基因
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Trichome-Specific Expression of Amorpha-4,11-Diene Synthase, a Key Enzyme of Artemisinin Biosynthesis in <i>Artemisia annua</i>L., as Reported by a Promoter-GUS Fusion 被引量:7
8
作者 Hongzhen Wang Linda Olofsson +1 位作者 Anneli Lundgren Peter E. Brodelius 《American Journal of Plant Sciences》 2011年第4期619-628,共10页
Artemisia annua L. produces small amounts of the sesquiterpenoid artemisinin, which is used for treatment of malaria. A worldwide shortage of the drug has led to intense research to increase the yield of artemisinin i... Artemisia annua L. produces small amounts of the sesquiterpenoid artemisinin, which is used for treatment of malaria. A worldwide shortage of the drug has led to intense research to increase the yield of artemisinin in the plant. In order to study the regulation of expression of a key enzyme of artemisinin biosynthesis, the promoter region of the key enzyme amorpha-4,11-diene synthase (ADS) was cloned and fused with the β-glucuronidase (GUS) reporter gene. Transgenic plants of A. annua expressing this fusion were generated and studied. Transgenic plants expressing the GUS gene were used to establish the activity of the cloned promoter by a GUS activity staining procedure. GUS under the control of the ADS promoter showed specific expression in glandular trichomes. The activity of the ADS promoter varies temporally and in old tissues essentially no GUS staining could be observed. The expression pattern of GUS and ADS in aerial parts of the transgenic plant was essentially the same indicating that the cis-elements controlling glandular trichome specific expression are included in the cloned promoter. However, some cis-element(s) that control expression in root and old leaf appears to be missing in the cloned promoter. Furthermore, qPCR was used to compare the activity of the wild-type ADS promoter with that of the cloned ADS promoter. The latter promoter showed a considerably lower activity than the wild-type promoter as judged from the levels of GUS and ADS transcripts, respectively, which may be due to the removal of an enhancing cis-element from the ADS promoter. The ADS gene is specifically expressed in stalk and secretory cells of glandular trichomes of A. annua. 展开更多
关键词 Agrobacterium Tumefaciens Amorpha-4 11-Diene SYNTHASE Artemisia annua ARTEMISININ BIOSYNTHESIS β-Glucuronidase Gene regulation promoter Activity Stable Transformation
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茶树己糖激酶基因CsHXK2的启动子克隆及表达特性分析 被引量:8
9
作者 李娜娜 刘莹 +7 位作者 张豪杰 王璐 郝心愿 张伟富 王玉春 熊飞 杨亚军 王新超 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1628-1638,共11页
植物己糖激酶是双功能蛋白,具有磷酸化己糖和介导糖信号的关键性作用。前期研究中,我们从茶树中克隆获得4个己糖激酶基因,其中CsHXK2基因编码492个氨基酸残基,与拟南芥AtHXK3、番茄LeHXK4归为Type A类HXKs。利用RT-PCR技术,克隆获得长度... 植物己糖激酶是双功能蛋白,具有磷酸化己糖和介导糖信号的关键性作用。前期研究中,我们从茶树中克隆获得4个己糖激酶基因,其中CsHXK2基因编码492个氨基酸残基,与拟南芥AtHXK3、番茄LeHXK4归为Type A类HXKs。利用RT-PCR技术,克隆获得长度为2029 bp的CsHXK2基因启动子。CsHXK2基因可能受到光照、低温、病原菌、糖和多种激素等信号的调控,且可能特异性表达于叶、花、种子、根系、腋芽等组织。CsHXK2蛋白定位于叶绿体内。酵母突变体功能互补试验表明,去除叶绿体转运信号肽的CsHXK2成熟蛋白具有葡萄糖和果糖磷酸化活性。茶树组织特异性表达分析显示,CsHXK2基因在根和茎中表达量最高,而在老叶中表达量最低。CsHXK2基因的表达受低温胁迫而显著下调,经炭疽菌侵染的茶树叶片内CsHXK2基因的表达也受到显著抑制,而外源赤霉素(GA3)处理的茶树叶片内CsHXK2基因表达显著上调。本研究结果表明,CsHXK2基因在茶树的生长发育过程和逆境胁迫响应中发挥重要的调控作用。 展开更多
关键词 茶树 己糖激酶 启动子 亚细胞定位 表达调控
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植物果实成熟相关基因的转录调控 被引量:5
10
作者 王新力 索桂英 彭学贤 《生物技术通报》 CAS CSCD 2001年第4期33-37,共5页
本文综述了番茄和苹果的一些果实成熟相关基因启动子的结构和作用特点 ,以及植物果实相关基因转录调控机制的研究现状。
关键词 果实成熟 相关基因 启动子 转录调控
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真核生物双向启动子的结构与功能 被引量:7
11
作者 刘石娟 郑成超 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期894-900,共7页
双向启动子(bidirectional promoter)是指位于两个相邻且转录方向相反的基因之间的一段DNA序列.双向启动子的双向转录机制可能是两个RNA聚合酶同时聚集在无核小体区的边界,然后在两个方向上起始转录.双向启动子在真核生物基因组中广泛分... 双向启动子(bidirectional promoter)是指位于两个相邻且转录方向相反的基因之间的一段DNA序列.双向启动子的双向转录机制可能是两个RNA聚合酶同时聚集在无核小体区的边界,然后在两个方向上起始转录.双向启动子在真核生物基因组中广泛分布,大多数的双向启动子缺少TATA盒,而具有较高的GC含量和丰富的CpG岛.本文概述了双向启动子双向起始转录的最新研究,并对其在双向转录基因对共表达和稳定性表达调控中的作用及其应用做了详细阐述. 展开更多
关键词 双向启动子 转录调控 RNA聚合酶 基因共表达
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人FAM33A基因启动子的克隆与鉴定 被引量:6
12
作者 杜刚 卜友泉 +5 位作者 杨正梅 兰欢 崔涛 镇磊 刘革力 宋方洲 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期219-224,共6页
目的鉴定人FAM33A基因的启动子,为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法采用5’RACE技术(5’端cDNA快速扩增)鉴定FAM33A的转录起始位点。采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略,构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因。采用Lipofeetamin... 目的鉴定人FAM33A基因的启动子,为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法采用5’RACE技术(5’端cDNA快速扩增)鉴定FAM33A的转录起始位点。采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略,构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因。采用Lipofeetamine^TM2000转染H1299细胞,并通过Dual-Lu-ciferase@ Reporter Assay System进行荧光素酶报告基因活性检测。结果确定了FAM33A的转录起始位点,构建了覆盖FAM33A 5’端ATG附近约2kb区域的一系列FAM33A启动子荧光素酶报告基因。启动子活性分析表明,这些重组体均具有较高的启动子活性,同时含有典型的GC盒以及Sp1、E2F和GATA-1等潜在的转录因子结合位点。结论FAM33A启动子区域主要定位于转录起始位点附近约590bp的区域内。 展开更多
关键词 FAM33A基因 启动子 转录调控 细胞周期
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人工合成启动子文库研究进展 被引量:6
13
作者 余君涵 马雯雯 +2 位作者 王智文 陈涛 赵学明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期198-204,共7页
随着合成生物学的发展,人工合成功能元件在代谢工程领域显示出巨大应用潜力。启动子是调控基因转录水平的重要元件,可以利用人工合成启动子文库对代谢途径进行精细调控,使基因适量表达,实现代谢途径的组合优化。文章综述了人工合成启动... 随着合成生物学的发展,人工合成功能元件在代谢工程领域显示出巨大应用潜力。启动子是调控基因转录水平的重要元件,可以利用人工合成启动子文库对代谢途径进行精细调控,使基因适量表达,实现代谢途径的组合优化。文章综述了人工合成启动子文库的研究进展,评述了不同文库的构建策略,讨论了人工合成启动子文库在代谢工程领域的应用,并展望了人工合成启动子文库的发展方向。 展开更多
关键词 代谢工程 合成生物学 启动子文库 转录调控 组合优化
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AtNCED3及AtAAO3基因启动子功能分析及其驱动CHS基因表达 被引量:5
14
作者 魏开发 《湖北民族学院学报(自然科学版)》 CAS 2009年第2期121-125,共5页
NCED3及AAO3系ABA信号积累的关键基因,其转录调控研究是细胞ABA信号精细调节及植物抗逆分子机制阐明的关键.通过NCED3及AAO3启动子结构与功能的分析,建立了NCED3及AAO3启动子驱动CHS基因表达受干旱诱导致烟草花色变化的体系.
关键词 启动子 GUS基因 CHS基因 转录调节
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Low-affinity SPL binding sites contribute to subgenome expression divergence in allohexaploid wheat 被引量:4
15
作者 Hongcui Pei Wan Teng +7 位作者 Lifeng Gao Hengbin Gao Xueni Ren Yanhong Liu Jizeng Jia Yiping Tong Yonghong Wang Zefu Lu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期819-834,共16页
Expression divergence caused by genetic variation and crosstalks among subgenomes of the allohexaploid bread wheat(Triticum aestivum.L.,BBAADD)is hypothesized to increase its adaptability and/or plasticity.However,the... Expression divergence caused by genetic variation and crosstalks among subgenomes of the allohexaploid bread wheat(Triticum aestivum.L.,BBAADD)is hypothesized to increase its adaptability and/or plasticity.However,the molecular basis of expression divergence remains unclear.Squamosa promoter-binding protein-like(SPL)transcription factors are critical for a wide array of biological processes.In this study,we constructed expression regulatory networks by combining DAP-seq for 40 SPLs,ATACseq,and RNA-seq.Our findings indicate that a group of low-affinity SPL binding regions(SBRs)were targeted by diverse SPLs and caused different sequence preferences around the core GTAC motif.The SBRs including the low-affinity ones are evolutionarily conserved,enriched GWAS signals related to important agricultural traits.However,those SBRs are highly diversified among the cis-regulatory regions(CREs)of syntenic genes,with less than 8%SBRs coexisting in triad genes,suggesting that CRE variations are critical for subgenome differentiations.Knocking out of Ta SPL7A/B/D and Ta SPL15A/B/D subfamily further proved that both high-and low-affinity SBRs played critical roles in the differential expression of genes regulating tiller number and spike sizes.Our results have provided baseline data for downstream networks of SPLs and wheat improvements and revealed that CRE variations are critical sources for subgenome divergence in the allohexaploid wheat. 展开更多
关键词 wheat(Triticum aestivum L.) squamosa promoter-binding protein-like(SPL) transcriptional regulation cis-regulatory regions POLYPLOIDIZATION low-affinity binding sites
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Ki-67启动子转录调控结构与功能研究 被引量:5
16
作者 李中林 钱国伟 +7 位作者 徐为 李望 张宝福 刘俊杰 陈菲菲 田卉 章龙珍 郑骏年 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1296-1298,共3页
目的 观察Ki-67核心启动子调控元件对转录调控的影响.方法 根据Ki-67启动子结构软件分析结果,对Ki-67核心启动子(-223~+30)内的5个调控区域,包括(+13~+30)及4个潜在Sp1结合位点(-198~-172)、(-170~-144)、(-63~-37)和... 目的 观察Ki-67核心启动子调控元件对转录调控的影响.方法 根据Ki-67启动子结构软件分析结果,对Ki-67核心启动子(-223~+30)内的5个调控区域,包括(+13~+30)及4个潜在Sp1结合位点(-198~-172)、(-170~-144)、(-63~-37)和(-14~+12)进行内部缺失,目的片段缺失的Ki-67核心启动子插入pGL3-Basic载体,构建报告基因重组体质粒.将重组体分别转染肿瘤Hela、SW1990、SGC-7901、A549细胞株,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,并与Ki-67核心启动子质粒pGLBK2+转录活性比较.结果 缺失(+13~+30)的启动子重组体质粒在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著提高,分别达到缺失前的1.2、2.0、1.7、1.4倍.缺失潜在Sp1结合位点的4个启动子重组体在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著降低,其中缺失(-170~-144)后转录活性最小,在4种肿瘤细胞中分别降至未缺失前的16.2%、10.4%、6.7%、12.2%.结论 Ki-67启动子(+13~+30)区包含负性调控元件,对其缺失后形成的新的Ki-67核心启动子(-223~+12)是更好的调控肿瘤基因治疗的启动子.(-198~-172)、(-170~-144)、(-63~-37)和(-14~+12)可能存在潜在的Sp1顺式作用元件,其中-170~-144区域的顺式作用元件最为重要. 展开更多
关键词 KI-67基因 启动子 转录调控
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Distinct regulatory mechanism of immunoglobulin gene transcription in epithelial cancer cells 被引量:5
17
作者 Xiaohui Zhu Lina Wu +11 位作者 Li Zhang Peng Hao Shuai Zhang Jing Huang Jie Zheng Yinan Liu Wenjun Li Yingmei Zhang Chunyan Zhou Youhui Zhang C Cameron Yin Xiaoyan Qiu 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2010年第4期279-287,共9页
The restriction of immunoglobulin(Ig)expression to B lymphocytes is well established.However,several reports have confirmed that the Ig gene can be expressed in many non-B cancer cells and/or some normal cells.Our aim... The restriction of immunoglobulin(Ig)expression to B lymphocytes is well established.However,several reports have confirmed that the Ig gene can be expressed in many non-B cancer cells and/or some normal cells.Our aim is to determine whether the Ig gene promoter can be activated in non-B cancer cells and to identify the regulatory mechanism for Ig gene expression.Our results show that the Ig promoter of VH4-59 was activated in several non-B cancer cell lines.Moreover,two novel positive regulatory elements,an enhancer-like element at 2800 to 2610 bp and a copromoter-like element at 2610 to 2300 bp,were identified in two epithelial cancer cell lines,HeLa S3 and HT-29.The octamer element(59-ATGCAAAT-39)located in the Ig promoter,a crucial element for B-cell-derived Ig gene transcription,was also very important for non-B-cell-derived Ig gene transcription.More importantly,we confirmed that octamer-related protein-1(Oct-1),but not Oct-2,was a crucial transcriptional factor for Ig gene transcription due to its ability to bind to the octamer element of the Ig promoter in epithelial cancer cells.These results suggested the presence of a distinct regulatory mechanism for Ig gene expression in non-B cancer cells. 展开更多
关键词 Ig gene transcription Oct-1 promoter transcription regulation VH4-59
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RORγt基因启动子的鉴定和特征分析 被引量:5
18
作者 杨丽霞 黄朝峰 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期28-32,共5页
目的以RORγt转录起始位点5’上游4.8 kb基因序列为研究对象,初步鉴定分析是否存在RORγt单独的启动子,并且探讨β-Catenin/Tcf1信号途经对RORγt启动子转录活性的影响。方法用带有不同长度的5’上游基因的5个报告质粒,与pSV-40-renilla... 目的以RORγt转录起始位点5’上游4.8 kb基因序列为研究对象,初步鉴定分析是否存在RORγt单独的启动子,并且探讨β-Catenin/Tcf1信号途经对RORγt启动子转录活性的影响。方法用带有不同长度的5’上游基因的5个报告质粒,与pSV-40-renilla Luc共转染Jurkat、EL-4、NIH 3T3和293T细胞系,与报告质粒的空载相比较,根据荧光强度的相对值的大小确定启动子存在的可能性和所在的位置;利用野生型β-Catenin、激活突变型β-Catenin和Tcf1表达质粒及RORγt启动子报告载体共转染,观察β-Catenin/Tcf1信号途径对RORγt启动子活性的影响。结果不同长度的启动子报告质粒在Jurkat、EL-4、NIH 3T3和293T细胞中均呈现启动子活性,其中所有报告质粒在Juakat和EL-4等T细胞系中的活性均高于其他2个上皮细胞系,而RORγt上游0.5 kb的报告质粒启动子活性在所有的细胞系中均呈最高活性。野生型β-Catenin、激活突变型β-Catenin和Tcf1对RORγt启动子报告有强激活作用。结论 RORγt转录表达由独立启动子控制,β-Catenin/Tcf1信号途径能够增强该启动子的转录活性。 展开更多
关键词 RORΓT 启动子分析 转录调控 Β-CATENIN Tcf1信号途径
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家蚕蜕皮激素受体基因EcR-B1的启动子调控区域活性检测 被引量:5
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作者 黄明霞 杜杰 +3 位作者 刘云垒 赵国栋 卫正国 沈卫德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期389-395,共7页
昆虫蜕皮激素通过与蜕皮激素受体(EcR)和超气门蛋白(USP)形成的异源二聚体相互作用,起始包括转录因子表达在内的蜕皮级联反应,引起昆虫蜕皮。为了探究家蚕蜕皮激素受体基因EcR-B1(BmEcR-B1)表达的调控机制,利用双荧光素酶报告系统和Bac-... 昆虫蜕皮激素通过与蜕皮激素受体(EcR)和超气门蛋白(USP)形成的异源二聚体相互作用,起始包括转录因子表达在内的蜕皮级联反应,引起昆虫蜕皮。为了探究家蚕蜕皮激素受体基因EcR-B1(BmEcR-B1)表达的调控机制,利用双荧光素酶报告系统和Bac-to-Bac表达系统检测家蚕幼虫经蜕皮激素诱导后,脂肪体、马氏管、中肠组织内不同缺失片段的BmEcR-B1启动子活性。对各组织样品的检测结果均证明:BmEcR-B1启动子-138^-11 bp之间存在正调控元件,并且其活性能被蜕皮激素诱导。在细胞水平上进一步分析BmEcR-B1启动子调控区域,结果显示在-138^-108 bp区域包含的调控元件对于BmEcR-B1启动子的转录调控是必需的,序列分析显示这一区域包含有畸形基因编码蛋白Dfd和热休克转录因子(HSF)2个转录调控元件的结合位点。研究结果为探索BmEcR-B1在家蚕变态发育中的转录调控机制提供了有益线索。 展开更多
关键词 家蚕 蜕皮激素受体 启动子 双荧光素酶报告系统 转录调控
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小鼠TLE4基因启动子克隆及分析 被引量:4
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作者 赵黎黎 牟玉莲 +6 位作者 崔文涛 杨述林 唐中林 李勇 赵为民 刘娣 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期274-278,共5页
本研究旨在初步对小鼠TLE4基因的转录调控机制进行探讨。利用PCR方法扩增TLE4基因5′上游启动区2 849 bp(-2 521 bp^+327 bp)的片段,然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒中。通过... 本研究旨在初步对小鼠TLE4基因的转录调控机制进行探讨。利用PCR方法扩增TLE4基因5′上游启动区2 849 bp(-2 521 bp^+327 bp)的片段,然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒中。通过双荧光素酶报告活性分析检测TLE4基因启动子区不同长度片段在小鼠畸胎瘤细胞(F9)及小鼠胚胎干细胞(ES)中瞬时转染后的活性。2种细胞的检测结果显示,在TLE4基因启动子区(-2 521 bp^-2 137 bp)存在负性调控元件,而在启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)活性最强。对TLE4基因启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)进一步缺失分析发现在该基因启动区(-2 027 bp^-1 927 bp)活性较强,分析预测该序列含有一个功能性的(HSF)的结合位点。结果推测HSF对TLE4基因的表达调控及功能行使具有重要作用。 展开更多
关键词 TLE4基因 启动子 HSF 调控序列
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